本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體涉及一種七葉皂苷凝膠及其制備方法。
背景技術(shù)：
：七葉皂苷又稱七葉皂苷酸，為從七葉樹科七葉樹屬植物種子提取得到的總皂苷、β-七葉皂苷或異七葉皂苷等的總稱，屬于三萜皂苷類。七葉皂苷的水溶解度較差，為增加其溶解度，常將其制成鈉鹽，研究證明，七葉皂苷鈉中含量較高的成分為七葉皂苷a、b、c、d。七葉皂苷鈉能降低病理性毛細(xì)血管通透性增高，增加靜脈張力，減少炎性物質(zhì)滲出，具有抗炎、消腫、止痛、改善血液循環(huán)、促進(jìn)急性閉合性軟組織損傷恢復(fù)等作用。七葉皂苷鈉口服生物利用度不高，注射對血管刺激性較大，而外部用藥使藥物通過皮膚的滲透作用到達(dá)機(jī)體內(nèi)部，具有如下優(yōu)點：①經(jīng)皮給藥可避免肝臟的首過效應(yīng)和藥物在胃腸道內(nèi)的降解，藥物吸收不受胃腸道因素的影響，減少用藥的個體差異；②一次給藥可以長時間使藥物以恒定的速率進(jìn)入體內(nèi)，減少給藥次數(shù)，延長給藥間隔；③避免了口服給藥等引起的血藥濃度峰谷現(xiàn)象，降低了毒副反應(yīng)。目前已有七葉皂苷鈉軟膏、氣霧劑、搽劑等外用劑型問世，但是，現(xiàn)有七葉皂苷鈉外用制劑具有以下缺點：1.七葉皂苷鈉鹽水溶性很好，油水分配系數(shù)很低，透皮吸收效果差；2.七葉皂苷鈉成分復(fù)雜，性質(zhì)不穩(wěn)定，制成的外用劑型穩(wěn)定性較差；3.七葉皂苷鈉外用制劑對皮膚刺激性較大。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對上述缺陷，提供一種以七葉皂苷a和七葉皂苷b為活性成分的七葉皂苷凝膠，由于七葉皂苷a和七葉皂苷b比七葉皂苷鈉具有更高的油水分配系數(shù)，因此透皮吸收效果更好。本發(fā)明提供的七葉皂苷凝膠質(zhì)量更加可控，皮膚刺激性更小。本發(fā)明提供的七葉皂苷凝膠劑，其活性成分是七葉皂苷a和七葉皂苷b，所述七葉皂苷a占凝膠總重量的0.3-1.5％，所述七葉皂苷b占凝膠總重量的0.1-0.8％，其余為凝膠基質(zhì)。優(yōu)選地，所述七葉皂苷a占凝膠總重量的0.6％，所述七葉皂苷b占凝膠總重量的0.4％。優(yōu)選地，所述基質(zhì)由以下成分組成，各成分占凝膠總重量的百分比分別為：進(jìn)一步優(yōu)選地，各成分占凝膠總重量的百分比分別為：本發(fā)明進(jìn)一步提供七葉皂苷凝膠劑的制備方法：取卡波姆，海藻酸鈉加20-40％乙醇溶液攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a、七葉皂苷b、異丙醇、吐溫80、氮酮、丙二醇，超聲溶解后，加入上述溶脹后的溶液中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至5-7，攪拌均勻，即得。優(yōu)選地，所述ph為5.5-6.5，該ph范圍內(nèi)七葉皂苷a、b更加穩(wěn)定。本發(fā)明的有益效果是：1)由于七葉皂苷a、七葉皂苷b比七葉皂苷鈉具有更好的油水分配系數(shù)，因此透皮吸收更加充分，速度更快，起效時間更短，療效更好。2)本發(fā)明由兩種活性成分組成，與七葉皂苷鈉相比，質(zhì)量更加可控，穩(wěn)定性更好，對皮膚的刺激性更小。3)藥效試驗結(jié)果表明，本發(fā)明具有很好的抗腫脹、抗?jié)B出效果，且與單味藥相比活性更強(qiáng)。附圖說明圖1是七葉皂苷a的累積透過率-時間曲線。圖2是七葉皂苷b的累積透過率-時間曲線。具體實施方式以下通過實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地說明。實施例1制備方法：取卡波姆0.8g，海藻酸鈉0.3g，加30％(重量濃度)乙醇溶液86.2g，攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a0.6g、七葉皂苷b0.4g，異丙醇10g、吐溫800.2g、氮酮1g、丙二醇0.5g，超聲溶解后，加入上述溶脹后的卡波姆中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至6.2，攪拌均勻，即得。實施例2制備方法：取卡波姆0.5g，海藻酸鈉0.5g，加20％(重量濃度)乙醇溶液89.6g，攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a0.5g、七葉皂苷b0.8g，異丙醇5g、吐溫800.1g、氮酮2g、丙二醇1g，超聲溶解后，加入上述溶脹后的卡波姆中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至6，攪拌均勻，即得。實施例3制備方法：取卡波姆1g，海藻酸鈉0.2g，加40％乙醇溶液80.3g，攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a1.2g、七葉皂苷b0.2g，異丙醇15g、吐溫800.4g、氮酮1.5g、丙二醇0.2g，超聲溶解后，加入上述溶脹后的卡波姆中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至5.5，攪拌均勻，即得。實施例4制備方法：取卡波姆1g，海藻酸鈉0.3g，加30％乙醇溶液85.3g，攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a1.5g、七葉皂苷b0.5g，異丙醇8g、吐溫800.4g、氮酮2.5g、丙二醇0.5g，超聲溶解后，加入上述溶脹后的卡波姆中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至5，攪拌均勻，即得。實施例5制備方法：取卡波姆1.2g，海藻酸鈉0.2g，加30％乙醇溶液75.6g，攪拌充分溶脹，再取七葉皂苷a1g、七葉皂苷b0.4g，異丙醇20g、吐溫800.3g、氮酮0.5g、丙二醇0.8g，超聲溶解后，加入上述溶脹后的卡波姆中，攪拌均勻后滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph至7，攪拌均勻，即得。試驗例1.透皮吸收實驗取sd大鼠，采用10％na2s水溶液褪除背部毛，次日斷頸處死，立即剪下背部皮膚，剔除皮下組織和脂肪，生理鹽水反復(fù)沖洗干凈后，剪成適當(dāng)大小，檢查皮膚完整性。采用改良franz立式雙室擴(kuò)散池(有效面積為2.92cm2)，將處理好的大鼠皮膚固定于擴(kuò)散池的兩室之間，角質(zhì)層面向供給室。將實施例1～5制備的凝膠精密取0.5ml置于供給室，向接收室中加入7ml接收液，接收液為pbs緩沖液(0.01m，ph7.4)。設(shè)定恒溫水浴為32℃，以150r/min磁力攪拌。分別于0.5、1、2、4、6、8、12、24h取0.5ml接收液，同時補(bǔ)充0.5mlpbs緩沖液，經(jīng)0.45μm濾膜過濾后，取20μl進(jìn)樣測定七葉皂苷a、b峰面積，計算藥物濃度。hplc色譜條件如下：固定相為ultimatec18(5μm，4.6×250mm)，流動相為乙腈：0.55％磷酸水溶液(38：62)，檢測波長220nm，流速1.0ml/min，柱溫35℃，進(jìn)樣量20μl。累積透過率-時間曲線結(jié)果見圖1和圖2，體外透皮實驗顯示：實施例1七葉皂苷a能在4h左右達(dá)到31％的累積透過率，七葉皂苷b能在6h左右達(dá)到30％的累積透過率；實施例2七葉皂苷a能在4h左右達(dá)到25％的累積透過率，七葉皂苷b能在6h左右達(dá)到24％的累積透過率；實施例3七葉皂苷a能在4h左右達(dá)到18％的累積透過率，七葉皂苷b能在6h左右達(dá)到22％的累積透過率；實施例4七葉皂苷a能在4h左右達(dá)到28％的累積透過率，七葉皂苷b能在6h左右達(dá)到22％的累積透過率；實施例5七葉皂苷a能在4h左右達(dá)到33％的累積透過率，七葉皂苷b能在6h左右達(dá)到28％的累積透過率。以上結(jié)果證明，本發(fā)明藥物能經(jīng)皮膚快速滲透到體內(nèi)，與現(xiàn)有的七葉皂苷鈉軟膏、氣霧劑、搽劑相比，透皮吸收更加充分、速度更快，從而保證了藥效的迅速發(fā)揮。2.穩(wěn)定性試驗按照原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則的要求，開展了本品的高溫、高濕和強(qiáng)光的穩(wěn)定性試驗研究，以下為具體的實驗結(jié)果。(1)高溫試驗取供試品，去除外包裝，在60℃條件下放置10天，于0、5、10天取樣檢測。結(jié)果見表1。表1高溫試驗測定結(jié)果(2)高濕試驗取供試品，去除外包裝，于25℃、rh92.5％±5％條件下放置10天，在0、5、10天取樣檢測。結(jié)果見表2。表2高濕試驗測定結(jié)果(3)強(qiáng)光照射試驗取供試品，去除外包裝，于照度為4500lx±500lx條件下放置10天，在0、5、10天取樣檢測。結(jié)果見表3。表3強(qiáng)光試驗測定結(jié)果實驗結(jié)果表明，本發(fā)明對強(qiáng)光、高溫及高濕均較穩(wěn)定。3.皮膚刺激性實驗取健康家兔(2.0±0.2kg)20只，隨機(jī)分為5組，每組雌雄各半，考察實施例1～5制備的凝膠的皮膚刺激性。于給藥前24h，用10％硫化鈉溶液將動物脊柱兩側(cè)毛脫掉，每側(cè)去毛范圍約3cm×3cm，不可損傷表皮。試驗采用同體左右側(cè)自身對照法。左、右側(cè)去毛區(qū)分別給予凝膠和水。每天2次，連續(xù)給藥一周，于第8天用溫水洗去殘留受試藥物。分別于去除藥物后1、6、12、24h觀察給藥部位有無紅斑及水腫情況，無紅斑或水腫定為0級，有紅斑或水腫則按由輕到重定為1-4級。表4家兔皮膚刺激性實驗結(jié)果(n＝5)從以上試驗可以看出，本發(fā)明皮膚刺激反應(yīng)發(fā)生率較低，僅有輕度紅斑或水腫出現(xiàn)，且停藥后能在24小時內(nèi)完全消除，不影響治療，不良反應(yīng)發(fā)生率和消除速度均明顯優(yōu)于現(xiàn)有的七葉皂苷鈉軟膏、氣霧劑、搽劑，說明本發(fā)明的安全性很好。4.抗腫脹/抗?jié)B出試驗采用小鼠耳腫脹模型，設(shè)空白組、七葉皂苷a組、七葉皂苷b組、七葉皂苷a+b組(按實施例1的配比)，每組10只動物，將原料藥用少量乙醇溶解后涂藥并測定腫脹度，結(jié)果見表5。表5抗腫脹作用試驗結(jié)果結(jié)果表明，七葉皂苷a、七葉皂苷b、七葉皂苷a+b均能降低小鼠耳腫脹模型的腫脹度，其中只有七葉皂苷a+b組與陰性組相比具有極顯著性差異(p<0.01)。采用對大鼠急性巴豆油肉芽腫的影響的動物模型，設(shè)陰性對照組、七葉皂苷a組、七葉皂苷b組、七葉皂苷a+b組(按實施例1的配比)，每組10只動物，將原料藥用少量乙醇溶解后涂藥并測定滲出量，結(jié)果見表6。表6抗?jié)B出作用試驗結(jié)果組別劑量急性滲出量(ml)陰性組/5.36±2.90七葉皂苷a凝膠5mg/kg4.78±2.02七葉皂苷b凝膠5mg/kg4.32±1.90七葉皂苷a+b凝膠5mg/kg2.36±2.07結(jié)果表明，七葉皂苷a、七葉皂苷b、七葉皂苷a+b均能降低小鼠耳腫脹模型的滲出量，其中只有七葉皂苷a+b組與陰性組相比具有極顯著性差異(p<0.01)。當(dāng)前第1頁12