本發(fā)明涉及中藥組合物領(lǐng)域，具體涉及一種防治鏈球菌病的組合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

羅非魚是世界范圍內(nèi)廣泛引種養(yǎng)殖的魚類，目前，全世界有85個國家和地區(qū)養(yǎng)殖羅非魚。我國大陸羅非魚的養(yǎng)殖經(jīng)過長達(dá)半個世紀(jì)的發(fā)展，產(chǎn)量的增長速度在淡水魚中最高。近十年來，產(chǎn)量以每年14.75％左右的速度遞增，穩(wěn)居世界首位。廣東羅非魚年產(chǎn)量約60萬噸，約占全國總產(chǎn)量的50％，廣州市有4萬多畝淡水魚養(yǎng)殖，其中羅非魚養(yǎng)殖占70～80％。

羅非魚的引種和養(yǎng)殖給人類帶來了較大利益，但是近年來爆發(fā)的鏈球菌病給整個養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展造成嚴(yán)重的威脅，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重，甚至不少養(yǎng)殖場破產(chǎn)倒閉，已引起全社會關(guān)注。每年4～10月期間，揮之不去的鏈球菌重創(chuàng)了整個羅非魚養(yǎng)殖行業(yè)；而11月份后，又開始出現(xiàn)寄生蟲和細(xì)菌感染，同時伴隨出現(xiàn)赤皮、爛腮等癥狀。受病害的影響，羅非魚的價格起伏不定，漁民收成不盡人意。

目前市場上的魚藥有南方、北方的魚蝦藥五百多種，包括消毒劑、環(huán)境改良劑、抗微生物藥品、殺蟲劑、驅(qū)蟲劑等，但沒有一種藥物可徹底根治魚病。漁民甚至違規(guī)使用抗生素，也沒達(dá)到預(yù)期的效果。而長期濫用抗生素，引發(fā)一系列水域生態(tài)環(huán)境和水產(chǎn)食品安全問題，隨著抗藥性的產(chǎn)生，魚病不斷惡性循環(huán)。農(nóng)業(yè)部研究發(fā)現(xiàn)中草藥在水產(chǎn)行業(yè)有相應(yīng)的作用與前景，提倡大量發(fā)掘能對抗水產(chǎn)病害的中草藥。因此，為了使水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康、可持續(xù)地發(fā)展，研究開發(fā)出一種毒副作用小、無殘留、病原體不易產(chǎn)生耐藥性的中草藥成為當(dāng)前抗羅非魚感染性疾病藥物研究刻不容緩的任務(wù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，有必要針對上述的問題，提供一種防治鏈球菌病的組合物及其制備方法和應(yīng)用。

本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)予以實(shí)現(xiàn)：

一種防治鏈球菌病的組合物，其有效成分包含下述重量份的下述組分：黃藥子200～300重量份、大黃200～300重量份和x200～600重量份，其中x為黃芪、博落回花、蛇莓、烏桕中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述組合物還包含輔料100～700重量份，輔料為魚粉、粗蛋白、豆粕、面粉、糊精、葡萄糖、礦物質(zhì)中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述組合物包含下述重量份的下述組分：黃藥子240～260重量份、大黃240～260重量份、x400～700重量份和輔料200～500重量份。

本發(fā)明所述組合物的制備方法，包括如下步驟：

s1、將黃藥子、大黃混合，以8～18倍藥材原料重量的弱酸性水提取1～3次，每次1～2小時，濾過；合并濾液，50～80℃減壓濃縮成第一稠膏，，加入生石灰，調(diào)ph至8.5～9.5，靜置過夜，取上清液濾過，50～80℃減壓濃縮成第二稠膏；快速攪拌下向第二稠膏內(nèi)加入乙醇使其體積含量為60～80％，靜置過夜，取上清液濾過，濾液在50～80℃減壓回收乙醇、濃縮成第三稠膏；

s2、將x混合后以8～10倍藥材原料重量的85～95％乙醇、50～70％乙醇各提取1～2次，每次1～2小時，濾過；合并濾液，50～80℃減壓回收乙醇、濃縮成第四稠膏；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；

s3、將稠膏混合物與輔料配制成防治鏈球菌病的組合物。

優(yōu)選地，步驟s3中稠膏混合物與輔料采用如下之一方法配制成防治鏈球菌病的組合物：

方法a、取水加熱至80～90℃，加入葡萄糖、礦物質(zhì)，快速攪拌至完全溶解，加入稠膏混合物，45～60℃保溫?cái)噭?，得到防治鏈球菌病組合物液體劑；

方法b：取魚粉、粗蛋白、豆粕、面粉混勻，加入稠膏混合物，攪勻制粒烘干得到防治鏈球菌病組合物顆粒劑；

方法c：取水加熱至80～90℃，加入糊精、葡萄糖、礦物質(zhì)，快速攪拌至完全溶解，加入稠膏混合物，45～60℃保溫?cái)噭?，得到防治鏈球菌病組合物膏劑。

優(yōu)選地，方法a和方法c中水的用量為稠膏混合物重量的15～30％。

優(yōu)選地，方法a和方法c中在50℃保溫?cái)噭颉?/p>

優(yōu)選地，方法a、方法b和方法c中添加防腐劑攪拌均勻。防腐劑用量優(yōu)選為組合物重量的0.01～0.05％，防腐劑可以抑制微生物生長，防止組合物腐敗變質(zhì)，延長組合物的保質(zhì)期。

優(yōu)選地，稠膏混合物與總藥材原料的重量比為1.2～1.6:5。

優(yōu)選地，稠膏混合物與總藥材原料的重量比為1.5:5。

更優(yōu)選地，第一稠膏與其藥材原料的重量比為1～2:1，第二稠膏與其藥材原料的重量比為0.5～1:2，第三稠膏與其藥材原料的重量比為0.5～1:3，第四稠膏與其藥材原料的重量比為0.5～1:4。

優(yōu)選地，弱酸性的水的ph值為6.0～6.5。優(yōu)選用鹽酸調(diào)節(jié)水的ph至弱酸性。

上述組合物在制備用于防治球菌病的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述鏈球菌病為羅非魚鏈球菌病。

本發(fā)明處方配伍既有中醫(yī)的清熱解毒、驅(qū)蟲之功，又有現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的抗菌抗病毒、殺蟲、調(diào)節(jié)免疫功能之效，又有現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的抗菌抗病毒、殺蟲、調(diào)節(jié)免疫功能之效，是防治羅非魚感染性疾病的良方。其中黃藥子味苦、性寒，消痰散結(jié)、清熱解毒；大黃味苦、性寒，瀉火解毒；博落回味辛苦、性溫，解毒、殺蟲；黃芪性甘，微溫，能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，具有保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用；蛇莓性微寒，味甘，清熱解毒，涼血消腫，可增強(qiáng)免疫功能，具有抗菌作用；烏桕性微溫，味苦，解毒，殺蟲。大黃中蒽醌類化合物既可以抑制細(xì)菌及真菌，又可以抗病毒；佐以黃芪抗菌、提高機(jī)體免疫力功能。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：本發(fā)明組合物采用黃藥子、大黃等中草藥作為有效成分，對鏈球菌病的防治效果好，還具有抗原蟲、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用。本發(fā)明組合物毒副作用小，無殘留，病原體不易產(chǎn)生耐藥性。本發(fā)明組合物的原料來源廣泛，成本低，可以制成多種劑型，應(yīng)用更靈活。

本發(fā)明的制備方法是發(fā)明人根據(jù)不同組分的特點(diǎn)而設(shè)計(jì)的，使各組分的有效成分被提取出來。黃藥子、大黃先用水提再用醇提，充分提取藥物中溶于水和醇的有效成分，使用生石灰不僅可以調(diào)節(jié)稠膏的ph值，使雜質(zhì)在堿性環(huán)境中沉淀，ca⁺還可以促進(jìn)雜質(zhì)絮凝沉淀。本發(fā)明中x組分使用不同濃度的乙醇進(jìn)行醇提，85～95％乙醇可以提取藥材中的非極性、弱極性的有效成分，50～70％乙醇可以提取藥物中的中極性的有效成分，不同濃度乙醇分別提取，保證x組分中的有效成分被完全提取出來。

具體實(shí)施方式

為了更好的說明本發(fā)明，下面結(jié)合具體實(shí)施方式做進(jìn)一步說明。本發(fā)明中所用試劑或儀器均可由市場購得，使用的檢測方法等都是本領(lǐng)域所熟知的，在此不再贅述。本發(fā)明中水提、醇提等操作及條件，除特別說明外，采用現(xiàn)有技術(shù)。

實(shí)施例1

一種防治鏈球菌病的組合物，其是由黃藥子、博落回花、黃芪、蛇莓、大黃、葡萄糖、礦物質(zhì)按下述重量份配比制備而成的藥劑：

以下詳細(xì)說明上述組合物的制備方法：

s1、將黃藥子、大黃混合，以12倍藥材原料重量的ph6.5的弱酸性水提取2次，每次1.5小時，濾過；合并濾液，65℃減壓濃縮成第一稠膏，第一稠膏與藥材原料的重量比為1:1；向第一稠膏內(nèi)加入生石灰，調(diào)ph至9.0，靜置過夜，取上清液濾過，65℃減壓濃縮成第二稠膏，第二稠膏與藥材原料的重量比為0.7:1；快速攪拌下向第二稠膏內(nèi)加入乙醇，使乙醇含量為70％，靜置過夜，取上清液濾過，濾液在65℃減壓回收乙醇、濃縮成第三稠膏，第三稠膏與藥材原料的重量比為1:3；

s2、將黃芪、蛇莓、博落回花混合后以10倍量90％乙醇、60％乙醇各提取1次，每次1.5小時，濾過；合并濾液，65℃減壓回收乙醇、濃縮成第四稠膏，第四稠膏與藥材原料的重量比為1:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；

s3、取稠膏混合物重量20％的水加熱至80～90℃，加入葡萄糖、礦物質(zhì)，快速攪拌至完全溶解，再加入稠膏混合物，50℃保溫?cái)噭?，加入防腐劑，防腐劑用量為組合物重量的0.05％，攪勻得到混合藥液放冷后置于灌裝機(jī)中灌裝、封口，即得防治鏈球菌病組合物液體劑。

實(shí)施例2

一種防治鏈球菌病的組合物，其是由黃藥子、黃芪、大黃、烏桕、魚粉、粗蛋白、豆粕、面粉按下述重量份配比制備而成的藥劑：

以下詳細(xì)說明上述組合物的制備方法：

s1、將黃藥子、大黃混合，以8倍藥材原料重量的ph6.0的弱酸性水提取2次，每次2小時，濾過；合并濾液，50℃減壓濃縮成第一稠膏，第一稠膏與藥材原料的重量比為0.8:1；向第一稠膏內(nèi)加入生石灰，調(diào)ph至9.5，靜置過夜，取上清液濾過，50℃減壓濃縮成第二稠膏，第二稠膏與藥材原料的重量比為0.5:2；快速攪拌下向第二稠膏內(nèi)加入乙醇，使乙醇含量為80％，靜置過夜，取上清液濾過，濾液在50℃減壓回收乙醇、濃縮成第三稠膏，第三稠膏與藥材原料的重量比為0.75:3；

s2、將黃芪、烏桕混合后以8～10倍量85％乙醇、50％乙醇各提取1次，每次2小時，濾過；合并濾液，50℃減壓回收乙醇、濃縮成第四稠膏，第四稠膏與藥材原料的重量比為1:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；

s3、取魚粉、粗蛋白、豆粕、面粉混勻，加入稠膏混合物攪勻，加入防腐劑，防腐劑用量為組合物重量的0.01％，攪勻，制成顆粒，70℃烘干，分裝，封口，即得防治鏈球菌病組合物顆粒劑。

實(shí)施例3

一種防治鏈球菌病的組合物，其是由黃藥子、博落回花、蛇莓、大黃、糊精、葡萄糖、礦物質(zhì)按下述重量份配比制備而成的藥劑：

以下詳細(xì)說明上述組合物的制備方法：

s1、將黃藥子、大黃混合，以18倍藥材原料重量的ph6.0的弱酸性水提取2次，每次1小時，濾過；合并濾液，80℃減壓濃縮成第一稠膏，第一稠膏與藥材原料的重量比為1.2:1；向第一稠膏內(nèi)加入生石灰，調(diào)ph至8.5，靜置過夜，取上清液濾過，80℃減壓濃縮成第二稠膏，第二稠膏與藥材原料的重量比為1:2；快速攪拌下向第二稠膏加入乙醇，使乙醇含量為60％，靜置過夜，取上清液濾過，濾液在80℃減壓回收乙醇、濃縮成第三稠膏，第三稠膏與藥材原料的重量比為0.5:3；

s2、將博落回花、蛇莓混合后以10倍量95％乙醇、70％乙醇各提取1次，每次1小時，濾過；合并濾液，80℃減壓回收乙醇、濃縮成第四稠膏，第四稠膏與藥材原料的重量比為0.75:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；

s3、取稠膏混合物重量20％的水加熱至80～90℃，加入糊精、葡萄糖、礦物質(zhì)，快速攪拌至完全溶解，加入稠膏混合物50℃保溫?cái)噭?，加入防腐劑，防腐劑用量為組合物重量的0.03％，攪勻，放冷置灌裝機(jī)中，灌裝，封口，即得防治鏈球菌病組合物膏劑。

實(shí)施例4

為了驗(yàn)證本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物的效果，發(fā)明人對不同地域的不同羅非魚養(yǎng)殖場進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。

(1)珠海羅非魚養(yǎng)殖場

在2016年7月15日～30日，珠海某羅非魚養(yǎng)殖場有5個塘羅非魚同程度鏈球菌發(fā)病。對其中3個塘的羅非魚常規(guī)用藥作為對照組，另外2個塘的羅非魚用本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物進(jìn)行治療作為實(shí)驗(yàn)組。治療期間，每餐投料量減半，2餐/天，早上、下午各一餐。按10公斤飼料拌2公斤常規(guī)用藥或本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物，連用15天。對照組每日死魚達(dá)80多條，多者過100條；實(shí)驗(yàn)組用藥第1天死魚70多條，第2天死魚18條，第3天死魚8條，第4天開始，偶見1條死魚，鏈球菌病情得到很好控制。

(2)湛江羅非魚養(yǎng)殖場

在2016年6月10日～20日，湛江某羅非魚養(yǎng)殖場羅非魚養(yǎng)殖塘不同程度鏈球菌發(fā)病。未發(fā)病的2個塘(每天偶見2～5條死魚)用本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物進(jìn)行治療作為預(yù)防組。發(fā)病較嚴(yán)重2個塘(每天死魚數(shù)達(dá)200條以上)用本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物進(jìn)行治療作為實(shí)驗(yàn)組。發(fā)病程度較輕的2個塘(每天死魚數(shù)100條左右)常規(guī)用藥作為對照組。治療期間，每餐投料量減半，2餐/天，早上、下午各一餐。按10公斤飼料拌2公斤常規(guī)用藥或本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物，連用11天。治療期間，對照組每日死魚達(dá)90多條，多者過100條；實(shí)驗(yàn)組用藥第1天死魚80多條，第2天死魚28條，第3天死魚7條，第4天開始，偶見1條死魚，鏈球菌病情得到很好控制；預(yù)防組自用藥第3天起，無死魚現(xiàn)象。本發(fā)明防治鏈球菌病的組合物不僅對鏈球菌病具有良好的治療效果，還具有良好的防治效果。

(3)廣東省羅非魚良種場

在2016年9月初廣東省羅非魚良種場16號塘和14號塘每天死魚分別有100多斤和50多斤。死魚均有凸眼、出血等癥狀，鏡檢無寄生蟲，結(jié)合中山大學(xué)菌檢結(jié)果，判斷為鏈球菌病。2016年9月6日開始每餐投料量減半，2餐/天，早上、下午各一餐。16號塘按10公斤飼料拌2公斤種防治魚病組合物，連用3天。14號塘按10公斤飼料拌3公斤種防治魚病組合物，連用2天。

16號塘給藥第3天，死魚明顯減少，減至30斤；停藥后，每天死魚逐漸減少，第5天降至2～3斤。14號塘給藥第2天，死魚已有減少，第3天減至30斤；停藥后，每天死魚逐漸減少，第3天降至1斤左右。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。