本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種氣霧劑型的止咳祛痰平喘中藥。
背景技術(shù)：
咳嗽、多痰、喘息、上呼吸道感染、支氣管炎及之支氣管哮喘等都是臨床上一種比較常見的病癥，現(xiàn)有止咳化痰的中藥多為注射劑、片劑、膠囊劑、口服液等，中國專利CN 101480437B一種麻杏石甘湯制劑的制備方法；CN 103800478 A麻杏止咳糖丸的制備方法；CN 1634476A一種麻杏止咳滴丸及其制備方法，國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-11363(ZD-1363)-2002-2012Z公開了麻杏止咳片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以上均以麻杏、苦杏仁、石膏及炙甘草為主要成分的口服制劑，而口服制劑服用后存在著崩解時間長、溶出度低、吸收較差、肝腸首過效應(yīng)和生物利用度低等問題，達(dá)不到理想的治療效果。中藥注射劑不良反應(yīng)多，安全性差，制備工藝復(fù)雜，而且給藥不便。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種給藥方便的止咳祛痰平喘的中藥氣霧劑及制備方法，用于咳嗽、多痰、喘息、上呼吸道感染、支氣管炎及之支氣管哮喘等疾病治療，克服現(xiàn)有的治療此類疾病藥物存在的上述不足。
本發(fā)明的止咳祛痰平喘的中藥氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物20～60重量份，潛溶劑10～30重量份，拋射劑30～50重量份，表面活性劑0～2重量份。
所述提取物是20～40重量份麻黃、20～30重量份苦杏仁、40～80重量份石膏、10～30重量份炙甘草經(jīng)水提得到的提取物。
所述氣霧劑為溶液型氣霧劑或混懸型氣霧劑。
所述潛溶劑為水、乙醇、丙二醇按任意比例組合；所述表面活性劑為油酸、司盤或吐溫；所述拋射劑為氫氟烷烴或壓縮空氣。
本發(fā)明的止咳祛痰平喘的中藥氣霧劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)取20～40重量份麻黃、20～30重量份苦杏仁、40～80重量份石膏、10～30重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量6～10倍量的水，煎煮1～2小時，第二次加入藥材質(zhì)量6～8倍量的水煎煮0.5～2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至60～80℃時密度為1.05～1.2的清膏，或者將清膏噴霧干燥，粉碎至粒徑1～10μm藥粉；
(2)取步驟(1)所得提取物20～60重量份，潛溶劑10～30重量份，拋射劑30～50重量份，表面活性劑0～2重量份混合均勻，灌裝，壓入拋射劑，制得中藥氣霧劑。
所述清膏噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度150～180℃，出風(fēng)溫度75～95℃,霧化壓力0.2～0.6MPa，噴霧速度為1～10ml/s。
本發(fā)明的積極效果是：能夠使藥物成分直接作用于呼吸系統(tǒng)病灶，用于治療咳嗽、哮喘、多痰等疾病，具有靶向性強(qiáng)、療效高、使用方便等特點(diǎn)。藥效試驗研究結(jié)果表明對上呼吸道感染、支氣管炎及支氣管哮喘等疾病有較好的治療效果。本發(fā)明以呼吸道直接給藥，避免口服胃腸首過效應(yīng)，保證藥效的同時可避免注射給藥的不良反應(yīng)。氣霧劑吸入方法由于能直接作用于支氣管粘膜，局部藥物濃度高，同時霧化吸入能濕化呼吸道，有利于分泌物排出，具有用量少，見效快，攜帶容易，使用方便等優(yōu)點(diǎn)，值得臨床推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一種止咳祛痰平喘的中藥溶液型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物40重量份，潛溶劑20重量份，拋射劑40重量份。
制備方法如下：
取30重量份麻黃、20重量份苦杏仁、60重量份石膏、10重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量6倍量的水，煎煮2小時，第二次加入藥材質(zhì)量6倍量的水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.15的清膏；加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶4∶5，混勻，灌裝，壓入，七氟乙烷。
實(shí)施例2
一種止咳祛痰平喘的中藥溶液型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物60重量份，潛溶劑10重量份，拋射劑30重量份。
制備方法如下：
取40重量份麻黃、15重量份苦杏仁、50重量份石膏、20重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量10倍量的水，煎煮1小時，第二次加入藥材質(zhì)量10倍量的水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.05的清膏，加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶3∶6，混勻，灌裝，壓入四氟乙烷。
實(shí)施例3
一種止咳祛痰平喘的中藥溶液型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物20重量份，潛溶劑30重量份，拋射劑50重量份。
制備方法如下：
取25重量份麻黃、20重量份苦杏仁、80重量份石膏、20重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量8倍量的水，煎煮2小時，第二次加入藥材質(zhì)量8倍量的水煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.2的清膏，加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶2∶7，混勻，灌裝，壓入壓縮空氣。
實(shí)施例4
一種止咳祛痰平喘的中藥混懸型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物40重量份，潛溶劑18重量份，表面活性劑2重量份，拋射劑40重量份。
制備方法如下：
取30重量份麻黃、20重量份苦杏仁、60重量份石膏、10重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量6倍量的水，煎煮2小時，第二次加入藥材質(zhì)量6倍量的水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.15的清膏，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度150℃，出風(fēng)溫度75℃，霧化壓力0.3MPa，噴霧速度為5ml/s,粉碎至粒徑5μm，加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶4∶5，司盤2重量份，混勻，灌裝，壓入，四氟乙烷。
實(shí)施例5
一種止咳祛痰平喘的中藥混懸型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物59重量份，潛溶劑10重量份，表面活性劑1重量份，拋射劑30重量份。
制備方法如下：
取40重量份麻黃、15重量份苦杏仁、50重量份石膏、20重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量10倍量的水，煎煮1小時，第二次加入藥材質(zhì)量10倍量的水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.05的清膏，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度160℃，出風(fēng)溫度80℃，霧化壓力0.4MPa，噴霧速度為6ml/s,粉碎至粒徑8μm，加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶3∶6，油酸1重量份混勻，灌裝，壓入四氟乙烷。
實(shí)施例6
一種止咳祛痰平喘的中藥混懸型氣霧劑，由以下重量百分比原料組成：麻黃、苦杏仁、石膏、炙甘草水提取得到的提取物20重量份，潛溶劑30重量份，表面活性劑2重量份，拋射劑48重量份。
制備方法如下：
取25重量份麻黃、20重量份苦杏仁、80重量份石膏、20重量份炙甘草，加水煎煮兩次，第一次加入藥材質(zhì)量8倍量的水，煎煮2小時，第二次加入藥材質(zhì)量8倍量的水煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，濃縮至80℃密度為1.2的清膏，噴霧干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度170℃，出風(fēng)溫度85℃，霧化壓力0.5MPa，噴霧速度為8ml/s,粉碎至粒徑4μm，加入乙醇和丙二醇，使丙二醇∶乙醇∶水達(dá)到1∶2∶7，吐溫2重量份，混勻，灌裝，壓入四氟乙烷。藥效學(xué)研究
1實(shí)驗材料：
1.1試驗藥品：本發(fā)明藥物按照實(shí)施例1方法制備；麻杏止咳片：撫松縣中藥有限責(zé)任公司；鹽酸賽羅唑啉鼻用噴霧劑：湖北遠(yuǎn)大天天明制藥有限公司，；急支糖漿：太極集團(tuán)重慶涪陵制藥廠有限公司；布地奈德氣霧劑：魯南貝特制藥有限公司。
1.2菌種：肺炎球菌
1.3培養(yǎng)基：血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基、GAM肉湯培養(yǎng)基。
2試驗動物
Wistar大鼠130只，180-220g，雌雄各半，購買于吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗中心；ICR小鼠70只，18-22g，雌雄各半，購買于吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗中心。
3儀器：
倒置顯微鏡CDS-1型：重慶光學(xué)儀器廠；潔凈工作臺SW-CJ-IF型：蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；精密電子天平ESJ60-4：沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司。蒸汽滅菌器(YXQ-LS-50SII型，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療器械廠)，熱空氣消毒箱(GR-246型，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療器械廠)；酶標(biāo)儀(SMP-500-18272-LSI0型，Manufactured in China Designed in California USA)；
4實(shí)驗方法
4.1對上呼吸道感染的影響
4.1.1動物分組與造模
將70只ICR小鼠隨機(jī)均分為7組，分別為空白對照組，模型對照組，陽性對照組及麻杏止咳片組，本發(fā)明高、中、低劑量組，每組10只。用滅菌0.9％生理鹽水對培養(yǎng)獲得的肺炎球菌調(diào)配成濃度為1.2×109CFU/mL菌液。75％乙醇消毒小鼠外鼻孔、口腔和頭部，待乙醇揮干后，乙醚輕度麻醉狀態(tài)仰臥位滴鼻，空白對照組小鼠用滅菌0.9％生理鹽水滴鼻，其余各組菌液滴鼻造模，每鼠20μl。
4.1.2給藥
從造模當(dāng)天開始，按以下方式給藥：陽性對照組(鹽酸賽羅唑啉鼻用噴霧劑)每鼠10μl，一天兩次，連續(xù)兩天；本發(fā)明高、中、低劑量組(14.6、8.8、2.9g生藥/kg)，噴霧給藥，每鼠10μl，連續(xù)兩天；麻杏止咳片(2.9g生藥/kg)灌胃給藥，一天兩次，連續(xù)兩天。分別于給藥兩次后及給藥完成后1、4、7、14天脫頸椎處死各組小鼠共7只。
4.1.3鼻咽部灌洗液培養(yǎng)
小鼠處死前先用乙醇消毒外鼻孔、口腔和頭部，待乙醇揮干后處死小鼠，以滅菌0.9％生理鹽水做鼻咽部灌洗,每次50μl，灌洗兩次。取灌洗液5μl涂布于瓊脂平板上，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h后計數(shù)菌落數(shù)并以CFU/小鼠統(tǒng)計。
4.1.4結(jié)果
與模型組比較，本發(fā)明高劑量組在給藥兩次后，第1、4、7天肺炎球菌菌落數(shù)明顯減少(P<0.05)；中劑量組在給藥兩次后，第1、4、7天肺炎球菌菌落數(shù)明顯減少(P<0.05)；低劑量組在給藥兩次后，第1天肺炎球菌菌落數(shù)明顯減少(P<0.05)，麻杏止咳片組給藥兩次后，第1天菌落數(shù)減少(P<0.05)。見表3
表3麻杏止咳噴劑耐肺炎鏈球菌菌落計數(shù)(Mean±SD.n＝10)
與空白組比較，#P<0.05；與模型組比較，*P<0.05.
4.2對大鼠急性支氣管炎的作用
4.2.1造模方法
將空白對照組(n＝10)以外的60只大鼠置于特制的80cm×80cm×40cm的煙室中,每次用20支香煙加鋸末面10g，每次混合煙熏30min，2次/日，持續(xù)15日?？瞻讓φ战M則置于正常無煙環(huán)境中飼養(yǎng)。
4.2.2分組與給藥
第15日時取模型大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只。組別設(shè)置分別為：模型對照組(蒸餾水)、急支糖漿組(20ml/kg)、麻杏止咳片組(2.0g生藥/kg)、本發(fā)明高劑量組(8.1g生藥/kg)、中劑量組(4.0g生藥/kg)，低劑量組(2.0g生藥/kg)，原藥組灌胃給藥，急支糖漿組按20ml/kg給藥容積灌胃給藥，其余各組大鼠均采取氣霧劑給藥方式，1次/日，連續(xù)5日。
4.2.3指標(biāo)檢測
末次給藥后1h，股動脈取血，2500rpm室溫離心20分鐘，分離血清，采用Elisa法測定各指標(biāo)。對大鼠血清IL-6，IL-8，TNF-ɑ，NF-kB，sICAM-1的影響
4.2.4結(jié)果
由表5、6可見，與空白對照組比較，模型對照組能顯著升高大鼠血清中IL-6、IL-8、TNF-ɑ、NF-kB、sICAM-1的含量；與模型對照組比較，陽性對照組、本發(fā)明高、中、低劑量組均能降低IL-6、IL-8、TNF-ɑ、NF-kB、sICAM-1的含量。
表5對大鼠血清IL-6，IL-8的影響
與空白組比較，#P<0.05；與模型組比較，*P<0.05
表6對大鼠血清TNF-ɑ，NF-kB，sICAM-1的影響
與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
4.3對支氣管哮喘的影響
4.3.1分組及造模
健康雄性Wistar大鼠70只，隨機(jī)均分為正常對照組、哮喘模型組、陽性對照組(布地奈德氣霧劑)及麻杏止咳片組(2.0g生藥/kg)、本發(fā)明高、中、低劑量組(8.1、4.05、2.0g生藥/kg)，每組10只。除空白組外，其余大鼠均腹腔注射含氫氧化鋁200mg及卵蛋白100mg的1mL混合液致敏，之后兩周給予卵蛋白超聲霧化激發(fā)，每天1次；給藥組大鼠在每次激發(fā)前30min，分別給予陽性藥及麻杏止咳氣霧劑、麻杏止咳片，連續(xù)2周；對照組大鼠腹腔注射及霧化吸入生理鹽水。于給藥后第14天處死各組大鼠，并檢測相應(yīng)指標(biāo)。
4.3.2獲取大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)用9％水合氯醛以3ml/kg腹腔注射麻醉大鼠，打開胸腔后首先結(jié)扎右主支氣管并于大鼠氣管下部做橫切口，經(jīng)切口注入4mL滅菌生理鹽水灌洗左肺15s后回吸得到BALF。將獲取的BALF離心，用生理鹽水重懸加入血細(xì)胞計數(shù)器，在顯微鏡下計數(shù)白細(xì)胞總數(shù)WBC，按照各類細(xì)胞百分比計算嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(EOS)。
4.3.3氣管壁及壁旁肺組織EOS浸潤密度取各組大鼠右肺中葉組織于多聚甲醛中固定后脫水、包埋、切片，行HE染色，400倍光鏡下觀察支氣管壁及其壁旁肺組織EOS的浸潤情況；隨機(jī)選取10個視野計數(shù)EOS，取各視野的平均值作為代表值。
4.3.4IL-5測定BALF離心后取其上清液，用ELISA測定IL-5水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。
4.3.5結(jié)果
4.3.5.1一般情況造模后，哮喘組大鼠均出現(xiàn)明顯煩躁、呼吸短促、腹肌快速抽搐、咳嗽等哮喘發(fā)作癥狀，本發(fā)明組大鼠發(fā)作程度明顯較哮喘組減輕，對照組大鼠無明顯哮喘發(fā)作癥狀。4.3.5.2BALF中WBC及EOS數(shù)量、IL-5水平，給藥組BALF中IL-5水平及WBC及EOS數(shù)量低于哮喘組，而高于正常對照組。見表7。
4.3.5.3氣管壁及壁旁肺組織EOS浸潤度對照組、哮喘組、麻杏止咳片組及本發(fā)明高、中、低劑量組大鼠氣管壁及壁旁肺組織EOS的浸潤度分別為400倍光鏡下每個視野(7±2)、(29±6)、(22±3)、(16±2)、(19±4)、(21±4)個細(xì)胞，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，給藥組低于哮喘組。
表7 BALF中WBC及EOS數(shù)量、IL-5水平
與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
5.結(jié)論
上述實(shí)驗結(jié)果表明，本發(fā)明對肺炎球菌引起的上呼吸道感染小鼠有明顯治療作用、對大鼠急性支氣管炎及支氣管哮喘有良好的治療效果，可有效降低炎性因子水平，且效果明顯優(yōu)于麻杏止咳片組。