本發(fā)明屬于中藥制劑技術領域，具體涉及一種用于HIV的免疫重建的藥物組合物，并進一步公開其制備方法。
背景技術：
艾滋病，全稱獲得性免疫缺陷綜合征(或稱后天免疫缺乏綜合征，Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，是一種由人類免疫缺乏病毒(簡稱HIV)的反轉錄病毒感染后，因免疫系統(tǒng)受到破壞，逐漸成為許多伺機性疾病的攻擊目標，并促成多種臨床癥狀。艾滋病是一種綜合征，而非單純的一種疾病，而這種綜合征可通過直接接觸黏膜組織(mucosa)的口腔、生殖器、肛門等或帶有病毒的血液、精液、陰道分泌液、乳汁而傳染。
高效抗逆轉錄病毒治療(highly active antiretroviral therapy，HAART)，俗稱雞尾酒療法，是通過三種或三種以上的抗病毒藥物聯(lián)合使用來治療艾滋病的方法，是艾滋病目前最有效的干預手段。隨著抗病毒藥物的普遍應用，艾滋病患者的發(fā)病率和病死率不斷下降。但是，隨著患者用藥時間的遞增，有關HAART不良反應的報道也日漸增多，艾滋病相關性疾病逐漸成為影響艾滋病患者生存質(zhì)量甚至死亡的重要原因。例如，臨床上有15％-20％的患者接受HAART治療后，血漿病毒載量雖然檢測不出，但其CD4細胞數(shù)未增長緩慢或者未增長，出現(xiàn)一種低載量、低CD4細胞狀態(tài)，影響了HAART的治療效果。在瑞士的一項隊列研究中，2235名開始接受HAART治療的病人中，只有39％的CD4+T淋巴細胞計數(shù)恢復到了500/mm3。研究者們將這類艾滋病患者定義為“免疫功能重建不全”或“免疫學無應答”，其機會性感染發(fā)生率、艾滋病相關疾病發(fā)病率及病死率等均高于“免疫學應答良好”的患者。
免疫功能重建是指HIV/AIDS患者經(jīng)抗病毒治療或其他治療后，HIV感染引起的免疫異常得以恢復到正常水平或接近正常水平，使得各種艾滋病相關的機會性感染和腫瘤的發(fā)生率下降，艾滋病病人的死亡率和發(fā)病率相應減少。由于HIV儲藏庫的存在，使得HAART實現(xiàn)免疫重建和徹底將HIV清除變得不太可能。此外，即使長期HAART治療也難以使免疫細胞數(shù)恢復到完全正常水平；且HAART治療過程中HIV-1病毒可能通過某種方式繼續(xù)損害NK細胞。目前，HAART后免疫重建不全狀態(tài)是艾滋病治療的熱點和難點問題，對此西醫(yī)尚無明確的治療方法。
中醫(yī)學認為人體得病不外乎正虛邪實兩端，疾病的發(fā)生發(fā)展取決于正、邪雙方的盛衰?！秲?nèi)經(jīng)》有云：“正氣存內(nèi)，邪不可干”、“邪之所湊，其氣必虛”，可見正氣虛弱才是人體染病的主要原因。中醫(yī)藥治療強調(diào)對機體的整體調(diào)節(jié)，調(diào)整陰陽虛實失衡的狀態(tài)。對機體免疫系統(tǒng)的抑制與激活的狀態(tài)進行適度調(diào)整，盡力使免疫病理性應答向生理性應答轉化，是中醫(yī)調(diào)和陰陽思想在機體免疫調(diào)節(jié)方面的重要體現(xiàn)。中醫(yī)以整體、動態(tài)和辨證的思維模式治療艾滋病，中藥復方通過多種有效成分對人體進行多環(huán)節(jié)、多層次、多靶點的整合調(diào)節(jié)，作用持久，副作用小。近年來經(jīng)過大量的臨床和動物實驗證明，中醫(yī)藥在艾滋病的免疫重建方面行之有效。
技術實現(xiàn)要素：
為此，本發(fā)明所要解決的技術問題在于提供一種用于HIV的免疫重建的藥物組合物，以解決現(xiàn)有技術中艾滋病治療中HAART后免疫重建不全的問題。
為解決上述技術問題，本發(fā)明所述的用于HIV的免疫重建的藥物組合物，所述藥物組合物的原料藥組成為：黃芪20-30重量份、黨參15-20重量份、靈芝15-20重量份、枸杞子15-20重量份、淫羊藿5-15重量份、巴戟天15-20重量份、莪術15-20重量份。
優(yōu)選的，所述藥物組合物的原料藥組成為：黃芪24重量份、黨參18重量份、靈芝18重量份、枸杞子18重量份、淫羊藿10重量份、巴戟天18重量份、莪術18重量份。
優(yōu)選的，所述藥物組合物添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成臨床上可接受的制劑。
本發(fā)明還公開了由所述的藥物組合物添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成的臨床上可接受的用于HIV的免疫重建的制劑。
所述制劑包括顆粒劑、片劑、合劑、滴丸劑、丸劑、膠囊劑。
本發(fā)明還公開了一種制備用于HIV的免疫重建制劑的方法，包括取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻的步驟，并添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成臨床上可接受的制劑。
優(yōu)選的，所述的制備用于HIV的免疫重建制劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，加入水進行煎煮提取，收集煎煮液，并濃縮至清膏，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成臨床上可接受的制劑。
更優(yōu)的，所述的制備用于HIV的免疫重建制劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，加入占藥物總量2-4重量倍量的水進行煎煮提取，收集煎煮液，并濃縮至清膏，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成臨床上可接受的制劑。
最優(yōu)的，所述步驟(1)中，所述煎煮步驟具體為每次加入藥物總量1-2重量倍量的水進行煎煮2次。
本發(fā)明還公開了所述藥物組合物用于制備用于HIV的免疫重建藥物的用途。
本發(fā)明通過研究探知，艾滋病治療HAART后免疫重建不全主要是由于中氣不足，氣屬陽，致其衛(wèi)外功能下降，致免疫功能低下。本發(fā)明所述用于HIV的免疫重建的藥物組合物，以黃芪、黨參為君藥，以靈芝、枸杞子為臣藥，以淫羊藿、巴戟天、莪術為佐使藥，利用藥物之間的君臣佐使的嚴格配伍關系，通過補中益氣，補腎填髓來提高機體免疫功能，具有增強人體免疫力的作用。
本發(fā)明所述藥物組合物中：
黃芪，味甘、性微溫，歸肺、脾、肝、腎經(jīng)，具有補中益氣、助運升陽之功效；
黨參，味甘、性平，歸脾、肺經(jīng)，具有補中益氣、和胃生津之功效，用于脾虛食少便溏、四肢無力、心悸、氣短、口干、自汗等癥；
靈芝，性平、味甘，入腎、肝、心、肺經(jīng)，具有補氣安神、止咳平喘、提高免疫力的功效，用于眩暈不眠、心悸氣短、神經(jīng)衰弱、虛勞咳喘等癥；
枸杞子，味甘、性平，歸肝經(jīng)、腎經(jīng)、肺經(jīng)，有增強非特異性免疫的作用；
淫羊藿，味辛、甘，性溫，入肝、腎二經(jīng)，具有能益精氣之功效；
巴戟天，味辛、甘，性溫，入肝、腎二經(jīng)，具有補腎壯陽、補益精氣之功效；
莪術，味辛、苦，性溫，歸肝、脾經(jīng)，具有行氣破血、消積止痛之功效。
本發(fā)明所述藥物組合物治療HIV/AIDS療程72周顯示，能增加CD4+淋巴細胞數(shù)量，提高CD4純真細胞亞群數(shù)量，提高免疫力，穩(wěn)定病情，阻止疾病進展，所述藥物組合物具有扶正固本、益氣養(yǎng)陰之功效，有助于身體機能的免疫重建，使得HIV感染引起的免疫異常得以恢復到正常水平或接近正常水平，有助于降低各種艾滋病相關的機會性感染和腫瘤的發(fā)生率，具有較好的效果。
具體實施方式
實施例1顆粒劑
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物顆粒劑的原料藥組成為：黃芪20g、黨參20g、靈芝15g、枸杞子20g、淫羊藿5g、巴戟天20g、莪術15g。
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物顆粒劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，加入占藥物總量2重量倍量的水進行煎煮提取1次，收集煎煮液，并濃縮至清膏(20℃，相對密度1.21-1.25)，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成顆粒劑。
實施例2片劑
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物片劑的原料藥組成為：黃芪30g、黨參15g、靈芝20g、枸杞子15g、淫羊藿15g、巴戟天15g、莪術20g。
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物片劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，加入占藥物總量4重量倍量的水進行煎煮提取，收集煎煮液，并濃縮至清膏(20℃，相對密度1.21-1.25)，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成片劑。
實施例3顆粒劑
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物顆粒劑的原料藥組成為：黃芪24g、黨參18g、靈芝18g、枸杞子18g、淫羊藿10g、巴戟天18g、莪術18g。
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物顆粒劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，每次加入占藥物總量2重量倍量的水進行煎煮提取2次，收集2次的煎煮液混勻，并濃縮至清膏(20℃，相對密度1.21-1.25)，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成顆粒劑。
實施例4丸劑
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物丸劑的原料藥組成為：黃芪22g、黨參19g、靈芝16g、枸杞子19g、淫羊藿8g、巴戟天19g、莪術16g。
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物丸劑的方法，包括如下步驟：取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，并添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成臨床上可接受的制劑。
實施例5合劑
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物合劑的原料藥組成為：黃芪27g、黨參16g、靈芝19g、枸杞子16g、淫羊藿12g、巴戟天16g、莪術19g。
本實施例所述用于HIV的免疫重建的藥物合劑的方法，包括如下步驟：
(1)取選定量的黃芪、黨參、靈芝、枸杞子、淫羊藿、巴戟天、莪術混勻，加入占藥物總量3重量倍量的水進行煎煮提取，收集煎煮液，并濃縮至清膏(20℃，相對密度1.21-1.25)，備用；
(2)取所得清膏添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成合劑。
實驗例
1、臨床資料
1.1納入標準
診斷標準按照衛(wèi)生部《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標準》(WS293-2008)《艾滋病診療指南(2011版)》的診斷標準。
接受HAART治療大于12個月且小于24個月的患者CD4+絕對計數(shù)＜200cells/ul，接受HAART治療大于24個月的患者CD4++絕對計數(shù)＜350cells/ul，HIV RNA低于檢測值；入組時CD4+絕對計數(shù)≥50cells/ul；年齡18歲-70歲。
自愿參加本研究，簽署知情同意書。
1.2排除標準
入組前嚴重的機會性感染未得到控制者；入組前1月內(nèi)或正在參加其他藥物臨床試驗的患者；入組前1個月內(nèi)接受免疫調(diào)節(jié)治療者；有自身免疫性疾病患者；妊娠或哺乳期婦女，或準備妊娠婦女；任何有腎功能不全癥狀患者；存在智力或語言障礙，不能充分理解試驗內(nèi)容或給予良好合作的患者。
1.3一般資料
病例來源于自2013年9月份開始到2016年1月份期間首都醫(yī)科大學附屬北京地壇醫(yī)院、廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院、廣州市第八人民醫(yī)院、云南省中醫(yī)中藥研究院、沈陽市第六人民醫(yī)院。
本研究篩選病例1156例，符合入組條件并簽署知情同意書的396例患者參加中心化隨機分組。其中治療組199例，對照組197例。治療組年齡(43.64±11.2)歲，身高(165.87±7.52)CM，體重(58.56±8.41)kg；對照組年齡(43.92±10.54)歲，身高(166.77±7.12)CM，體重(59.89±9.35)kg。免疫指標、體溫、心率、呼吸、血壓，癥狀體征等指標，兩組基線比較差異無統(tǒng)計學意義。
2、方法
2.1治療方法
采用多中心、隨機、雙盲、對照的研究方法，在中國臨床試驗注冊中心進行注冊，注冊號ChiCTR-TRC-13003716，聘請第三方監(jiān)理機構全程監(jiān)理。
隨機化方案：統(tǒng)計學專業(yè)人員采用SAS軟件產(chǎn)生隨機數(shù)字表，由中國中醫(yī)科學院臨床評價中心實現(xiàn)隨機過程，各研究者在確定受試者符合納入及排除標準后，通過中央隨機系統(tǒng)獲得“受試者編號”和“藥物編號”。治療組采用HAART+免疫顆粒(實施例3制得顆粒劑)，規(guī)格：5.5g/袋，由江陰天江制藥有限公司提供，批號：1311327(第一批)、1409358(第二批)。對照組采用HAART+免疫顆粒模擬劑，模擬劑由上述廠家自行設計生產(chǎn)最終由非試驗參與人員統(tǒng)一包裝，模擬劑在外形、包裝、顏色、氣味上與原藥一致。
本實驗遵照赫爾辛基宣言，經(jīng)中國中醫(yī)科學院倫理委員會批準，所有患者進入試驗前均簽署知情同意書，并全面了解參加本研究的目的、程序及可能的風險與受益。
2.2觀察指標及方法
觀察基線、12周、24周、36周、48周、60周、72周的CD4、CD8、CD45RA、CD45RO絕對數(shù)等指標。方法采用淋巴細胞采用流式細胞術進行檢測，具體方法及操作步驟嚴格按照說明書進行。
儀器：Calibur流式細胞儀及MultiTEST軟件自動分析數(shù)據(jù)(美國BD公司)。
主要試劑：CD3/CD8/CD45/CD4，CD45RA/CD45RO/CD3/CD4，CD8/CD38/CD3/四色熒光抗體(美國BD公司)。FACS Lysing Solution(溶血素)(美國BD公司)。
2.3療效判定標準
根據(jù)國家中醫(yī)藥管理局辦公室、國家衛(wèi)生計生委辦公廳印發(fā)的《艾滋病(成人)中醫(yī)診療方案》：外周血CD4計數(shù)在治療前后的變化，免疫功能重建的有效率。
有效：CD4計數(shù)上升≥50/μL；無效：CD4計數(shù)上升＜50/μL：其他免疫細胞的變化。
2.4統(tǒng)計學方法
采用SAS 9.1統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。所有的統(tǒng)計檢驗均采用雙側檢驗，P小于或等于0.05被認為所檢驗的差別有統(tǒng)計意義。計量資料采用x±s進行描述。與治療前基礎值進行比較，采用配對T檢驗比較組內(nèi)前后差異。
2組治療前后的變化采用t檢驗或非參數(shù)檢驗進行比較；對每次訪視時免疫重建有效率采用等級資料的CMH檢驗對2組進行比較；對癥狀體征總積分，采用成組T檢驗進行比較。
3、結果
3.1CD4細胞計數(shù)絕對值比較
治療72周后，兩組CD4計數(shù)均呈上升趨勢，但是試驗組上升更明顯，從基線193.07±71.4上升至288.04±131.32，對照組從200.26±75.19上升至263.78±124.15。72周時兩組之間比較有統(tǒng)計學差異(P＝0.045)。A、B兩組各時點與基線的差值逐漸增大，試驗組明顯好于對照組，具體結果見表1-2。
表1 兩組CD4絕對值情況
注：與對照組比較，*P<0.05
表2 CD4細胞計數(shù)與基線差值比較
注：與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01
2.2CD4細胞上升有效率比較
兩組各訪視點CD4細胞計數(shù)與基線比較上升大于50以上：試驗組上升的例數(shù)逐漸增多，對照組變化不明顯。訪視8試驗組上升47.4％，對照組上升31.3％，按照CD4細胞計數(shù)大于50以上為效的標準，試驗組有效率高于對照組16.1％，具體檢測結果見下表3。
表3 CD4上升>＝50或下降>＝50(與基線比較)
兩組各訪視點CD4細胞計數(shù)與基線比較上升大于100以上：試驗組上升的例數(shù)逐漸增多，特別是第6、7、8訪視上升明顯，而對照組變化不明顯。訪視8試驗組上升20.3％，對照組上升9.9％，按照CD4細胞計數(shù)大于100以上為效的標準，試驗組有效率高于對照組10.4％。具體實驗結果見下表4。
表4 CD4上升>＝100或下降>＝100(與基線比較)
治療72周后，兩組CD45RA計數(shù)均呈上升趨勢，但是試驗組上升更明顯，從基線33.87±32.15上升至50.73±60.73，對照組從36.75±32.94上升至48.27±36.91，A、B兩組各時點與基線的差值逐漸增大，試驗組明顯好于對照組。治療72周后，CD45RO絕對值的兩組均呈上升趨勢，比較沒有統(tǒng)計學意義，具體實驗數(shù)據(jù)見下表5、6。
表5 CD45RA絕對值的兩組比較
表6 CD45RO絕對值的兩組比較
從上述數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明所述免疫重建顆粒治療HIV/AIDS療程72周顯示，能增加CD4+淋巴細胞數(shù)量，提高免疫力，穩(wěn)定病情，阻止疾病進展。
顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發(fā)明創(chuàng)造的保護范圍之中。