本發(fā)明公開了一種新型MIL-88A載卵清蛋白制備疫苗佐劑的方法。特別涉及有機(jī)金屬骨架攜載模型蛋白的制備方法，屬于生物制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
在發(fā)展中國家，死亡總?cè)藬?shù)的30%~50%死于傳染病。在發(fā)達(dá)國家，傳染病死亡人數(shù)僅占死亡總?cè)藬?shù)的4%~8%，這主要得益于疫苗的廣泛應(yīng)用。MIL-88A是一種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)材料，由于具有比表面積大、孔徑可調(diào)、易功能化等特性。近年來，已在藥物傳輸領(lǐng)域取得了重要的應(yīng)用價(jià)值，擁有廣闊的應(yīng)用前景。MIL-88A表現(xiàn)出許多作為藥物載體的特點(diǎn)，包括有較高的比表面積和規(guī)則的孔道結(jié)構(gòu)，MIL-88A可以提高藥物的固載率，并且能夠達(dá)到良好的緩釋效果。因此采用MIL-88A作為疫苗載體，可以提高疫苗的裝載效率。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
在本發(fā)明提供了一種新型MIL-88A載卵清蛋白制備疫苗佐劑的方法，該疫苗裝載率高，穩(wěn)定性好，能夠攜帶大量抗原進(jìn)入體內(nèi)，且卵清蛋白易被人體吸收，能誘導(dǎo)更高、更長期的體液免疫。且制備方法簡單、原料易得、MIL-88A無毒。
本發(fā)明的上述目的通過以下技術(shù)方法實(shí)現(xiàn)：所述的疫苗佐劑是由無毒MOFs材料MIL-88A運(yùn)載卵清白蛋白，白蛋白溶解后，乙醇破乳制備卵清蛋白納米粒，再加入三氯化鐵和富馬酸，得到MIL-88A載卵清蛋白的疫苗佐劑。該疫苗穩(wěn)定性好，能夠攜帶大量抗原進(jìn)入體內(nèi)，且卵清蛋白易被人體吸收，能誘導(dǎo)更高、更長期的體液免疫，具體制備步驟如下：
（1）取卵清蛋白溶于適當(dāng)?shù)娜ルx子水中，在50℃下溶解一段時(shí)間；
（2）將卵清蛋白水溶液逐滴加入到乙醇溶液中，形成白蛋白納米粒；
（3）在轉(zhuǎn)速300~500rpm，50℃下攪拌時(shí)加入三氯化鐵；
（4）補(bǔ)加富馬酸，振蕩過夜；
（5）將所得樣品用去離子水抽濾后真空干燥。
所述MIL-88A無毒，對(duì)人體無害，載藥率高。
所述MIL-88A與卵清蛋白的摩爾比為1:10。
所述的反應(yīng)時(shí)間控制在在3~24h。
所述的加入富馬酸時(shí)的轉(zhuǎn)速應(yīng)該控制在100~300rpm。
本發(fā)明具有以下特點(diǎn)：（1）以MIL-88A為有機(jī)金屬骨架，裝載卵清蛋白，得到一種有機(jī)金屬骨架攜帶卵清蛋白疫苗佐劑。
（2）本發(fā)明的卵清蛋白納米粒鑲嵌在金屬骨架里，掃描電鏡下可以看到和MIL-88A純品形貌類似的結(jié)構(gòu)，見圖1。
（3）該疫苗佐劑裝載率高，穩(wěn)定性好，能夠攜帶大量抗原進(jìn)入體內(nèi)，且卵清蛋白易被人體吸收，能誘導(dǎo)更高、更長期的體液免疫。
（4）本發(fā)明不需要特殊的化學(xué)試劑，技術(shù)工藝簡單，反應(yīng)過程容易控制，并且綠色環(huán)保，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
附圖說明
圖1為本發(fā)明制備的新型MIL-88A載卵清蛋白疫苗佐劑的場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡形貌。
實(shí)施例一
（1）取卵清蛋白5mg溶于適當(dāng)?shù)娜ルx子水中，在50℃下溶解一段時(shí)間；
（2）將卵清蛋白水溶液逐滴加入到乙醇溶液中，形成白蛋白納米粒；
（3）在300~400rpm，50℃下攪拌時(shí)加入0.027g三氯化鐵，攪拌1h；
（4）保持溫度，在120rpm下，加入0.012g富馬酸，振蕩反應(yīng)3h后取出；
（5）將所得樣品用去離子水抽濾后真空干燥。
實(shí)施例二
（1）取卵清蛋白50mg溶于50ml去離子水中，在50℃下溶解一段時(shí)間；
（2）將卵清蛋白水溶液逐滴加入到乙醇溶液中，形成白蛋白納米粒；
（3）在300~400rpm，50℃下攪拌時(shí)加入0.135g三氯化鐵，攪拌1h；
（4）保持溫度，在120rpm下，加入0.06g富馬酸，振蕩反應(yīng)6h后取出；
（5）將所得樣品用去離子水抽濾后真空干燥。
實(shí)施例三
（1）取卵清蛋白50mg溶于50ml去離子水中，在50℃下溶解一段時(shí)間；
（2）將卵清蛋白水溶液逐滴加入到乙醇溶液中，形成白蛋白納米粒；
（3）在300~400rpm，50℃下攪拌時(shí)加入0.054g三氯化鐵，攪拌1h；
（4）保持溫度，在120rpm下，加入0.024g富馬酸，振蕩反應(yīng)8h后取出；
（5）將所得樣品用去離子水抽濾后真空干燥。