本發(fā)明涉及魚藤酮在制備藥物中的應(yīng)用，具體是魚藤酮在制備肥胖以及脂肪肝疾病藥物中的一種新應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，國(guó)人的生活水平大幅度提高，生活方式也發(fā)生了巨大的改變，與之相對(duì)應(yīng)的是代謝性疾病的發(fā)生率大大增高，這不但嚴(yán)重影響了患者的壽命及生活質(zhì)量，也給國(guó)家和患者家庭帶來極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。有效防治代謝性疾病已經(jīng)成為中國(guó)乃至世界性的一個(gè)難題。肥胖是一種由多種因素引起的慢性代謝性疾病，表現(xiàn)為脂肪細(xì)胞的體積和細(xì)胞數(shù)均增加致體脂占體重的百分比異常增高，并且在局部過多沉積脂肪。脂肪肝是由于多種原因引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪性肝病正嚴(yán)重威脅國(guó)人的健康，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病。脂肪肝的程度與體重成正比，30％～50％的肥胖合并脂肪肝，重度肥胖者脂肪肝病變率高達(dá)61％～94％。因此，開發(fā)新型治療肥胖以及脂肪肝藥物依然是治療代謝性疾病的關(guān)鍵。

魚藤酮(又稱毒魚藤，英文名tubatoxin)，存在于豆科魚藤屬植物的種子、莖部和根部，不溶于水，溶于醇、丙酮、氯仿、四氯化碳、乙醚等。主要用作農(nóng)用殺蟲劑，也可防治人畜體外寄生蟲和生化研究。防治對(duì)象有：蚜蟲、飛虱、黃條跳甲、薊馬、黃守瓜、猿葉蟲、菜青蟲、斜紋夜蛾、甜菜夜蛾、小菜蛾等。在毒理學(xué)上是一種專屬性很強(qiáng)的物質(zhì)，對(duì)昆蟲尤其是菜粉蝶幼蟲、小菜蛾和蚜蟲具有強(qiáng)烈的觸殺和胃毒兩種作用。早期的研究表明魚藤酮主要是與NADH脫氫酶與輔酶Q之間的某一成分發(fā)生作用，使害蟲細(xì)胞的電子傳遞鏈?zhǔn)艿揭种?，從而降低生物體內(nèi)的ATP水平最終使害蟲得不到能量供應(yīng)，然后行動(dòng)遲滯、麻痹而緩慢死亡。

目前，尚無關(guān)于魚藤酮用于治療肥胖以及脂肪肝的任何報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明目的在于提供魚藤酮在制備肥胖以及脂肪肝疾病藥物中的應(yīng)用，提供了一種新的治療候選藥物。補(bǔ)充了現(xiàn)有治療藥物的不足。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

魚藤酮在制備肥胖以及脂肪肝疾病藥物中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，所述魚藤酮的劑量是低劑量。

更進(jìn)一步地，所述魚藤酮的劑量是100ppm。

本發(fā)明在小鼠高脂喂養(yǎng)動(dòng)物模型中使用了魚藤酮，其為一種特異性線粒體復(fù)合體-1抑制劑，具有很強(qiáng)的脂溶性，可以直接通過細(xì)胞膜進(jìn)入胞質(zhì)，特異性地抑制線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，從而降低生物體內(nèi)ATP的水平，減少能量的供應(yīng)，減輕脂肪細(xì)胞的形成以及脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)而減輕肥胖以及脂肪肝的形成和進(jìn)展。

本發(fā)明的技術(shù)效果：

1、本發(fā)明在ApoE缺陷小鼠喂養(yǎng)高脂高膽固醇飼料誘發(fā)肥胖以及脂肪肝小鼠模型，應(yīng)用小劑量(100ppm)魚藤酮治療后，發(fā)現(xiàn)小鼠體重得到顯著減輕，體內(nèi)皮下脂肪，腎周脂肪，生殖腺脂肪以及肝臟脂肪得到顯著減少，顯示魚藤酮是一種治療脂肪肝及肥胖的有效手段，從而為后期研發(fā)相關(guān)制備脂肪肝及肥胖疾病藥物提供可能。

2、魚藤酮是一種線粒體活性抑制劑，該研究結(jié)果提示，通過適當(dāng)抑制線粒體活性，從而降低生物體內(nèi)ATP的水平，減少能量的供應(yīng)，具有一定的臨床應(yīng)用前景。

3、魚藤酮,目前主要用作農(nóng)用殺蟲劑，對(duì)昆蟲有強(qiáng)烈的毒殺作用，高劑量的魚藤酮對(duì)于細(xì)胞以及生命個(gè)體具有毒副作用，因此我們選擇的是一個(gè)相對(duì)安全的低劑量(100ppm)。

附圖說明

圖1:對(duì)照組/魚藤酮給藥組0～8周內(nèi)喂養(yǎng)小鼠體重變化曲線圖；

圖2：對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠皮下脂肪占體重的比例；

圖3：對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠腎周脂肪占體重的比例；

圖4：對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠生殖腺脂肪占體重的比例；

圖5：油紅O染色下對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠脂肪肝程度(鏡下圖)；

圖6：HE染色下對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠脂肪肝程度(鏡下圖)；

圖7：對(duì)照組/魚藤酮給藥組喂養(yǎng)小鼠肝臟內(nèi)總甘油三脂的比例。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合具體實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

本發(fā)明以下實(shí)施例中使用的魚藤酮購置于Sigma；ApoE敲除小鼠購置于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

實(shí)施例1魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠體重

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)過程中檢測(cè)小鼠體重，如圖1所示魚藤酮治療組小鼠的體重從喂養(yǎng)一周時(shí)就小于對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

實(shí)施例2魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠皮下脂肪比列

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠皮下脂肪，稱重，計(jì)算出皮下脂肪占體重的比例，統(tǒng)計(jì)對(duì)照組和魚藤酮治療組，如圖2結(jié)果表明魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠皮下脂肪比列，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)差異(p<0.0001)。

實(shí)施例3魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠腎周脂肪比列

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠腎周脂肪，稱重，計(jì)算出腎周脂肪占體重的比例，統(tǒng)計(jì)對(duì)照組和魚藤酮治療組，如圖3結(jié)果表明魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠腎周脂肪比列，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)差異(p＝0.0006)。

實(shí)施例4魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠生殖腺脂肪比列

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠生殖腺脂肪，稱重，計(jì)算出生殖腺脂肪占體重的比例，統(tǒng)計(jì)對(duì)照組和魚藤酮治療組，如圖4結(jié)果表明魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠生殖腺脂肪比列，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)差異(p<0.0001)。

實(shí)施例5魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠脂肪肝程度

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠肝臟，冰凍包埋，切片，油紅O染色，肝臟中的脂滴會(huì)染成紅色，如圖5結(jié)果顯示魚藤酮可以減少小鼠肝臟中脂肪的堆積。

實(shí)施例6魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠脂肪肝程度

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠肝臟，小鼠肝臟經(jīng)過多聚甲醛固定后，脫水，石蠟包埋，切片，然后HE染色，肝臟中的脂滴會(huì)顯示為空泡。，如圖6結(jié)果顯示魚藤酮可以減少小鼠肝臟中脂肪的堆積。

實(shí)施例7魚藤酮可以降低高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟內(nèi)總甘油三脂

將高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)的ApoE缺陷小鼠分為對(duì)照組和魚藤酮治療組，每組7只，治療組小鼠飼料中添加100ppm的魚藤酮，連續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠肝臟，使用試劑盒提取小鼠肝臟中的總甘油三脂，測(cè)出濃度，計(jì)算出小鼠肝臟中總甘油三脂的含量。如圖7結(jié)果顯示魚藤酮可以減少高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟內(nèi)總甘油三脂的含量。