本發(fā)明屬于藥物新用途領(lǐng)域，更具體地講，涉及右旋檸檬烯在制備治療非吸煙肺癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：肺癌目前是世界范圍內(nèi)發(fā)病率與死亡率最高的惡性腫瘤，與其他癌癥相比，其5年生存率只有15％。按照肺癌的流行病學(xué)特征分類，盡管以往研究表明，吸煙是公認的與肺癌相關(guān)的風(fēng)險因素，然而越來越多的研究表明，非吸煙肺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢。近年來，虢毅等人在“非吸煙型肺癌分子遺傳學(xué)研究”的文獻中表明，在全球癌癥致死原因中，非吸煙型肺癌(Lungcancerintheneversmokers,LCINS)占據(jù)前列。2007年，WakeleeHA等人在題目為“Lungcancerincidenceinneversmokers.”的文獻中綜合分析了6個對于非吸煙型肺癌的長期隊列研究，結(jié)果指出，女性非吸煙肺癌的發(fā)病率為14.4-20.8/10萬人年，男性發(fā)病率為4.8-13.7/10萬人年，并且非吸煙型肺癌是重要的公共衛(wèi)生問題，有待于發(fā)現(xiàn)其生物學(xué)與病因?qū)W特征。在中國，女性中吸煙率較低，僅有2.4％，但據(jù)2011年統(tǒng)計，女性肺癌的患病率卻已達164721人，其中非吸煙肺癌占女性總肺癌患病率的比例高達53％。LindseyA.Torre等人的研究表明，女性非吸煙肺癌可能與空氣污染有關(guān)。而PM2.5造成的空氣污染的現(xiàn)狀與肺癌發(fā)病的關(guān)系近幾年來備受關(guān)注。此外，本課題組也曾對1981-2005年城市400萬居民的肺癌發(fā)病死亡情況進行研究，不僅發(fā)現(xiàn)了男性、女性肺癌發(fā)病率隨時間呈顯著增長的趨勢，也發(fā)現(xiàn)了青年女性的非吸煙肺癌標化發(fā)病率顯著上升。近年來發(fā)現(xiàn)，非吸煙肺癌的發(fā)病年齡正趨于年輕化。如不能及時治療與控制，非吸煙肺癌將急速惡化，肺部細胞組織發(fā)生纖維化，導(dǎo)致吸功能障礙，呼吸困難，患者出現(xiàn)胸悶、氣短、胸痛、胸水、干咳不止、甚至咳血等癥狀，生活質(zhì)量明顯降低。盡管其病因尚不明確，但早期診斷、及時治療是減少其死亡率的希望所在。女性非吸煙肺癌多為非小細胞肺癌，目前已知應(yīng)用于非小細胞肺癌治療的分子靶向藥物主要有：表皮生長因子受體—酪氨酸激酶拮抗劑；抗表皮生長因子受體的單克隆抗體，如西妥昔單抗；抗腫瘤血管生成的藥物和抗體，如血管內(nèi)皮抑素、貝伐單抗；多種激酶抑制劑，如索拉非尼等。但因以上藥物價格昂貴、缺少統(tǒng)一規(guī)范的突變檢測等原因使之難以臨床推廣應(yīng)用。此外，一些新的治療方案會在治療早期出現(xiàn)耐藥。小細胞肺癌惡性程度高，預(yù)后不良，而術(shù)后胸腔內(nèi)復(fù)發(fā)是主要復(fù)發(fā)模式，嚴重降低了患者生存率。因此發(fā)現(xiàn)對于非吸煙肺癌有效的治療措施是主要的攻關(guān)難題，其中若能夠發(fā)現(xiàn)有助于改善非吸煙肺癌病情的輔助治療藥物，將有助于提高癌癥治療效果與癌癥生存率。選擇合適的輔助治療藥物也將有望提高主要治療方案的療效，增強患者的治療信心。右旋檸檬烯化學(xué)名稱縮寫:(R)-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)環(huán)己烯；化學(xué)物質(zhì)登錄號(CAS號):5989-27-5。右旋檸檬烯是為從中藥橘皮中提取的有效單體成分，是一種天然單萜類化合物，廣泛存在于柑橘、蔬菜及香料中，是柑橘精油的主要成分，具有消炎、減痛、抗氧化等作用。右旋檸檬烯被美國食品和藥物管理局(FDA)定義為一般公認安全級添加劑，被美國食用香料與提取物制造商協(xié)會(FEMA)批準食用。右旋檸檬烯的原料分布廣泛，成本相對低廉。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一個目的在于提供右旋檸檬烯在制備治療非吸煙肺癌藥物中的應(yīng)用。為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明公開以下技術(shù)方案：右旋檸檬烯在制備治療非吸煙肺癌藥物中的應(yīng)用。作為一個優(yōu)選方案，所述非吸煙肺癌為PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌。本研究中除闡明右旋檸檬烯對廣義非吸煙肺癌模型的改善作用以外，選擇近年來備受關(guān)注的空氣PM2.5污染所致的非吸煙肺癌。本發(fā)明的優(yōu)點在于：右旋檸檬烯可以降低裸鼠腫瘤的生長速度，減少非吸煙肺癌的成瘤個數(shù)，從而對非吸煙肺癌具有一定的改善作用。此外，右旋檸檬烯可有效抑制肺癌細胞的增殖，降低非吸煙肺癌細胞的轉(zhuǎn)移、侵襲能力，促進細胞凋亡，提示右旋檸檬烯對非吸煙肺癌病情具有較好的改善作用，為臨床輔助治療非吸煙肺癌提供了新選擇。對于PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌細胞侵襲、遷移增加，對此實施右旋檸檬烯干預(yù)，可顯著降低腫瘤細胞的細胞侵襲、遷移能量。此外，右旋檸檬烯干預(yù)可顯著降低PM2.5誘導(dǎo)的自噬相關(guān)基因(lc3)的表達水平，并降低癌癥發(fā)展相關(guān)的促癌lncRNAloc146880、rcc2-as的表達水平。此外，我們研究也發(fā)現(xiàn)，右旋檸檬烯對于PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌可能發(fā)揮了與NAC相似的抗氧化作用。附圖說明圖1右旋檸檬烯抑制肺癌細胞A549、H1299的增殖(**P＜0.001)。圖2右旋檸檬烯抑制肺癌細胞A549、H1299的遷移(200×)。圖3右旋檸檬烯促進肺癌細胞A549、H1299的凋亡。圖4不同右旋檸檬烯組裸鼠腫瘤生長曲線。圖5不同右旋檸檬烯組裸鼠取瘤時圖片。圖6不同右旋檸檬烯組裸鼠腫瘤圖片。圖7不同右旋檸烯組裸鼠腫瘤質(zhì)量。圖8小鼠肺部病理檢測圖片。圖9右旋檸檬烯各劑量干預(yù)組c57小鼠肺部腫瘤數(shù)目。圖10右旋檸檬烯各劑量干預(yù)組c57小鼠肺部直徑小于1毫米的腫瘤數(shù)目。圖11右旋檸檬烯各劑量干預(yù)組c57小鼠肺部直徑小于1毫米的腫瘤數(shù)目。圖12右旋檸檬烯對A549細胞活力的影響。使用不同濃度(0.1％、0.2％、1％、2％)右旋檸檬烯，單獨或者共處理100μg/mlPM2.5A549細胞48h。采用CCK-8方法檢測其對A549細胞活力的影響。*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001(與對照組比較)。圖13右旋檸檬烯對PM2.5誘導(dǎo)A549細胞遷移和侵襲水平的影響。使用0.1％右旋檸檬烯單獨或者共處理100μg/mlPM2.5A549細胞48h。采用細胞劃痕和Transwell方法檢測其對A549細胞遷移和侵襲水平的影響。*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001(與對照組比較)。圖14右旋檸檬烯對lc3b、loc146880、rcc2-as表達水平的影響。使用DMSO、100μg/mlPM2.5、0.1％右旋檸檬烯、100μg/mlPM2.5+0.1％右旋檸檬烯、5mMNAC、100μM3-MA、100μg/mlPM2.5+5mMNAC、100μg/mlPM2.5+5mMNAC，分別暴露處理A549細胞48小時。采用RT-PCR方法檢測其對A549細胞lc3b、loc146880、rcc2-as表達水平的影響。*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001(與對照組比較)。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。實施例1.體外研究MTT實驗：虢毅、SophieSun等人在文獻中指出：腺癌是非吸煙型肺癌中最常見的類型，因此本研究采用A549、H1299細胞系”用0.25％胰酶消化對數(shù)期生長細胞制成細胞懸浮液，將細胞接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔體積100μL，置于37℃5％CO2培養(yǎng)箱。待細胞貼壁后，加入0mM、0.5mM、1mM的右旋檸檬烯。每組設(shè)6個復(fù)孔。分別于24、48、72h后，向待測孔中加入50μL1×MTT溶液，孵育4h后，用酶標儀測定550nm波長處檢測光密度(OD)值。圖1顯示，利用MTT方法檢測右旋檸檬烯對A549和H1299肺癌細胞增殖的影響。結(jié)果顯示0.5mM、1mM的右旋檸檬烯處理細胞24h、48h、72h后，與對照組0mM相比，非吸煙肺癌細胞增殖明顯下降(P<0.001)。同時也觀察右旋檸檬烯處理48h、72h后，非吸煙肺癌細胞增殖明顯下降(P<0.001)，提示右旋檸檬烯抑制肺癌細胞增殖。實施例2.細胞劃痕實驗：取適量對數(shù)期細胞(2×105個/mL),待貼壁后，培養(yǎng)24h后細胞融合度達100％，用無菌的10μL槍頭劃出等寬的直線，PBS清洗脫落的細胞，加入含有不同濃度0mM、0.5mM、1mM右旋檸檬烯的培養(yǎng)基。置于37℃5％CO2的條件下進行培養(yǎng)，在200×顯微鏡下觀察細胞遷移情況，并拍攝0、24h的細胞遷移圖像。圖2為右旋檸檬烯抑制肺癌細胞A549、H1299的遷移，結(jié)果表明0.5mM、1mM的右旋檸檬烯處理后，非吸煙肺癌細胞A549和H1299的細胞遷移均受到抑制。實施例3.細胞凋亡：取適量對數(shù)期細胞(2×105個/mL),待貼壁24h后用0mM、1mM、1.5Mm的右旋檸檬烯處理細胞48h后，用凋亡試劑盒檢測細胞凋亡情況。圖3結(jié)果顯示1mM、1.5mM的右旋檸檬烯處理后，肺癌細胞A549和H1299的細胞凋亡增加。實施例4.右旋檸檬烯對BLAB/C裸鼠肺癌A549移植瘤的改善作用的動物研究：將24只雌性5周齡的BALB/C裸鼠飼養(yǎng)于SPF級動物房。將A549細胞復(fù)蘇傳代3代后制備成細胞懸液,皮下注射于裸鼠右后背部用于制造非吸煙肺癌的動物模型。造模14天后，將裸鼠分為：陰性對照組：0.1ml/10g/d牛奶灌胃。低劑量右旋檸檬烯干預(yù)組(400mg/kg)：0.1ml/10g/d4.749％右旋檸烯灌胃，右旋檸烯使用牛奶稀釋，最終濃度為400mg/kg。高劑量右旋檸檬烯干預(yù)組(600mg/kg)：0.1ml/10g/d7.124％右旋檸烯灌胃，右旋檸烯使用牛奶稀釋，最終濃度為600mg/kg。每周灌胃5天,每隔4天使用游標卡尺測量腫瘤體積，灌胃4周后摘取腫瘤，繪制腫瘤生長曲線，計算抑瘤率。移植瘤體積＝0.5×a×b2，抑瘤率＝(對照組瘤重-干預(yù)組瘤重)/對照組瘤重×100％。結(jié)果顯示，右旋檸烯對裸鼠非吸煙肺癌移植瘤具有顯著治療作用。圖4結(jié)果顯示，400，600mg/kg右旋檸烯組的腫瘤生長速度顯著慢于對照組。圖5、圖6結(jié)果顯示：400，600mg/kg右旋檸烯組的腫瘤體積顯著小于對照組。圖7、表1結(jié)果顯示，400，600mg/kg右旋檸烯組的腫瘤重量顯著低于對照組，400mg/kg右旋檸烯的抑瘤率為37.08％，600mg/kg右旋檸烯的抑瘤率為60.03％。表1不同右旋檸烯組裸鼠腫瘤質(zhì)量、抑瘤率實施例5.右旋檸檬烯對烏拉坦致C57小鼠非吸煙肺癌的改善作用實驗：將雌性，5周齡c57小鼠飼養(yǎng)于SPF級動物房，使用烏拉坦800mg/kg，2次/周，連續(xù)給藥5周造非吸煙肺癌動物模型。小鼠分為3組，每組10只。陰性對照組：烏拉坦800mg/kg，2次/周，連續(xù)給藥5周。低劑量右旋檸檬烯組(300mg/kg)：烏拉坦800mg/kg，2次/周，連續(xù)給藥5周。在開始造模時同時給予右旋檸烯300mg/kg灌胃，每周5天，持續(xù)灌胃至處死。高劑量右旋檸檬烯組(600mg/kg)：烏拉坦800mg/kg，2次/周，連續(xù)給藥5周。在開始造模時同時給予右旋檸烯600mg/kg灌胃，每周5天，持續(xù)灌胃至處死。結(jié)果判定：在開始造模第25周后每組各犧牲5只小鼠，摘取各臟器，進行肺部腫瘤數(shù)目和大小的觀測，如果各組已經(jīng)有腫瘤形成，在第30周后犧牲每組剩余的5只鼠，摘取各臟器，進行肺部腫瘤數(shù)目和大小的觀測。最終統(tǒng)計時，合并第25周和第30周的數(shù)據(jù)，使用秩和檢驗對各組腫瘤數(shù)目進行統(tǒng)計學(xué)檢驗。圖8結(jié)果顯示，造模25周時對小鼠肺部進行病理檢測，發(fā)現(xiàn)已有腫瘤形成，具體表現(xiàn)為腫瘤組織細胞核濃染，核畸形，細胞核大而清楚，核仁增大增多、細胞核與細胞質(zhì)比例失常，常見病理性核分裂現(xiàn)象，腺圈壁細胞逐步向內(nèi)呈浸潤性生長，腺圈壁增厚，空洞逐步變小，腺圈內(nèi)充滿癌細胞，空洞消失，這說明烏拉坦誘導(dǎo)非吸煙肺癌模型成功。圖9結(jié)果顯示，300mg/kg，600mg/kg右旋檸檬烯組的總體腫瘤數(shù)目少于對照組，藥效呈現(xiàn)劑量反應(yīng)關(guān)系，即600mg/kg組的腫瘤數(shù)目少于300mg/kg組，且對照組和600mg/kg組之間有統(tǒng)計學(xué)差異(p＝0.006)。除了統(tǒng)計總體腫瘤數(shù)目，我們還測量了腫瘤直徑，以評估右旋檸烯對腫瘤大小是否有影響。圖10顯示，直徑小于1毫米的腫瘤中，300mg/kg和600mg/kg組的腫瘤數(shù)目少于對照組，對照組和600mg/kg組間存在統(tǒng)計學(xué)差異(p＝0.009)。圖11顯示，直徑大于1毫米的腫瘤中，300mg/kg和600mg/kg組的腫瘤的數(shù)目少于對照組，對照組和600mg/kg組間存在統(tǒng)計學(xué)差異(p＝0.041)。綜上所述，右旋檸檬烯可以減少烏拉坦導(dǎo)致的非吸煙肺癌瘤個數(shù)和大小，對非吸煙肺癌具有一定的改善作用。實施例6.右旋檸檬烯顯著降低PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌細胞遷移和侵襲水平：實驗中右旋檸檬烯干預(yù)濃度選擇：A549細胞分別給予0.1％、0.2％、1％、2％右旋檸檬烯處理，此外，分別使用100μg/mlPM2.5暴露A549細胞48h。采用CCK-8法測定右旋檸檬烯、PM2.5對A549細胞活力的影響。如圖12所示，在DMSO處理組中：與DMSO單獨處理組相比，PM2.5暴露A549細胞48小時后，對細胞活力未產(chǎn)生明顯影響。但1％右旋檸檬烯與PM2.5共同作用，導(dǎo)致細胞活性顯著降低，并呈濃度依賴性關(guān)系。并且右旋檸檬烯的濃度越高，其對A549細胞的毒性越強。以上結(jié)果表明，不同濃度右旋檸檬烯處理A549細胞48小時后，高濃度右旋檸檬烯對A549細胞具有毒性，導(dǎo)致細胞存活率降低。因此，選取0.1％右旋檸檬烯(約6mM)進行后續(xù)實驗條件。細胞劃痕實驗方法：1)使用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5～1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2)收集對數(shù)期A549細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，種植于6孔板中。每孔中加入約5×105個細胞，培養(yǎng)過夜。3)第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。4)用PBS洗細胞3次，去處劃下的細胞，分別使用PBS、100μg/mlPM2.5、0.1％右旋檸檬烯、100μg/mlPM2.5+0.1％右旋檸檬烯分別暴露處理A549細胞48小時；5)放入37度5％CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按48小時后取樣，使用光學(xué)倒置顯微鏡拍照。細胞侵襲實驗方法：1)收集對數(shù)期A549細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，種植于6孔板中。每孔中加入約5×105個細胞，培養(yǎng)過夜。第二天，分別使用PBS、100μg/mlPM2.5、0.1％右旋檸檬烯、100μg/mlPM2.5+0.1％右旋檸檬烯分別暴露處理A549細胞48小時；2)使用50mg/LMatrigel1:4稀釋液包被Transwell小室底部膜的上室面，37℃放置1小時使Matrigel聚合成凝膠。每孔加入200μl無血清培養(yǎng)液,使基質(zhì)膠再水化。37℃，30min后，再吸去剩余培養(yǎng)液；3)胰酶消化細胞，終止消化后離心棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2遍，用無血清培養(yǎng)基重懸。調(diào)整細胞密度至5×105；4)取細胞懸液100-200μl加入Transwell小室。24孔板下室加入500μl含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基；5)培養(yǎng)細胞：常規(guī)培養(yǎng)12h后，使用棉簽擦去基質(zhì)膠和上室內(nèi)的細胞。使用DAPI染色，熒光倒置顯微鏡拍照。6)每個處理組隨機拍10張照片，分析每張照片上細胞的個數(shù)，進行統(tǒng)計分析。結(jié)果表明，DMSO處理組PM2.5促進A549細胞的遷移和侵襲水平。為了進一步驗證右旋檸檬烯是否降低細胞的遷移和侵襲水平，我們在PM2.5暴露A549細胞前，采用0.1％右旋檸檬烯同時處理細胞48小時，之后檢測細胞遷移和侵襲水平。具體實驗方法見上。圖13的結(jié)果表明，右旋檸檬烯能夠明顯降低PM2.5誘導(dǎo)的A549細胞遷移和侵襲。實施例7.右旋檸檬烯改善PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌的機制研究：本部分研究表明：右旋檸檬烯減低細胞自噬與促癌lncRNA的表達水平，發(fā)揮類似NAC的抗氧化作用。我們的前期實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PM2.5增加自噬、loc146880(促癌lncRNA)、rcc2-as(促癌lncRNA)的表達水平。此外，NAC能夠明顯降低PM2.5誘導(dǎo)的自噬和lncRNA的水平。為了進一步驗證:右旋檸檬烯是否發(fā)揮著NAC相似的作用，使用右旋檸檬烯處理細胞，檢測其是否影響相關(guān)基因及l(fā)ncRNA表達水平。實時定量熒光PCR檢測lc3b、loc146880、rcc2-as表達水平方法：1)收集對數(shù)期A549細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，種植于6孔板中。每孔中加入約5×105個細胞，培養(yǎng)過夜。第二天，分別使用DMSO、100μg/mlPM2.5、0.1％右旋檸檬烯、100μg/mlPM2.5+0.1％右旋檸檬烯、5mMNAC(N-乙酰半胱氨酸)、100μM3-MA、100μg/mlPM2.5+5mMNAC、100μg/mlPM2.5+5mMNAC，分別暴露處理A549細胞48小時；2)按照總RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄試劑盒操作提取細胞中總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。使用SYBRgreensupermix(AppliedBiosystems,USA)，檢測實時熒光定量。引物序列見下表2。擴增條件：95℃預(yù)變性5min1個循環(huán)后，每個循環(huán)變性94℃30s，退火60℃30s，延伸72℃30s，共進行40個循環(huán)，熒光信號于每循環(huán)退火后采集。3)結(jié)果分析：以β-actin為內(nèi)參，正常對照組的目的基因表達設(shè)為1，2-ΔΔCт進行相對定量分析，見表2。表2.引物序列基因名稱上游引物序列(5'to3')下游引物序列(5'to3')loc146880CTGTCGGAAGACTTCGGATGAAGCCTGGAAATTGCAGATGAlc3bAAGGCGCTTACAGCTCAATGCTGGGAGGCATAGACCATGTrcc2-asTACAGCACTAAACCAGGCACTCCAGCTCAGGAAAAAGAATactinCATGTACGTTGCTATCCAGGCCATGTACGTTGCTATCCAGGCA549細胞經(jīng)DMSO、PM2.5、0.1％右旋檸檬烯、PM2.5和右旋檸檬烯、NAC(抗氧化劑)、3-MA(自噬抑制劑)、PM2.5和NAC、3-MA和PM2.5共處理48h后,使用RT-PCR技術(shù)檢測lc3b、loc146880、rcc2-as表達水平。如圖14A所示，與PM2.5單獨處理組相比，3-MA、NAC、右旋檸檬烯共處理組細胞的lc3b水平顯著降低。并且，loc146880、rcc2-as表達水平亦明顯降低。結(jié)果表明，右旋檸檬烯可能發(fā)揮抗氧化的作用，并且減低PM2.5誘導(dǎo)A549細胞自噬及癌癥發(fā)展相關(guān)的促癌lncRNA的表達水平(圖14)。本發(fā)明通過多個實驗，詳細研究了右旋檸檬烯干預(yù)對非吸煙肺癌腫瘤的生長速度、瘤體積大小、以及腫瘤的侵襲與遷移能力的影響。其中，本發(fā)明通過細胞學(xué)研究觀察到右旋檸檬烯處理后，腫瘤細胞增殖明顯下降，提示右旋檸檬烯具有抑制肺癌細胞增殖的能力；細胞劃痕實驗中，右旋檸檬烯處理后的非吸煙肺癌細胞其細胞遷移效果受到了顯著抑制；細胞凋亡實驗顯示右旋檸檬烯處理后，非吸煙肺癌細胞的細胞凋亡顯著增加。由此可見本發(fā)明所示的右旋檸檬烯對抑制非吸煙肺癌細胞的增殖、遷移，促進細胞凋亡具有顯著功效。此外，接受右旋檸檬烯干預(yù)的實驗動物在腫瘤生長速度方面顯著降低，且腫瘤體積顯著小于對照組；肺部組織病理檢測結(jié)果顯示：右旋檸檬烯干預(yù)組的總體腫瘤數(shù)目顯著減少，且呈一定的劑量反應(yīng)關(guān)系。對于PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌細胞侵襲、遷移增加，對此實施右旋檸檬烯干預(yù)，可顯著降低腫瘤細胞的細胞侵襲、遷移能量。此外，右旋檸檬烯干預(yù)可顯著降低PM2.5誘導(dǎo)的自噬相關(guān)基因(lc3)的表達水平，并降低癌癥發(fā)展相關(guān)的促癌lncRNAloc146880、rcc2-as的表達水平。我們研究也發(fā)現(xiàn)，右旋檸檬烯對于PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌可能發(fā)揮了與NAC相似的抗氧化作用。綜上所述，本發(fā)明所示的右旋檸檬烯對非吸煙肺癌、PM2.5誘導(dǎo)的非吸煙肺癌病情具有較好的改善作用，為臨床輔助治療非吸煙肺癌提供了新選擇。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。SEQUENCELISTING<110>上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院<120>右旋檸檬烯在制備治療非吸煙肺癌藥物中的應(yīng)用<130>、<160>8<170>PatentInversion3.5<210>1<211>21<212>DNA<213>人工合成<400>1ctgtcggaagacttcggatga21<210>2<211>20<212>DNA<213>人工合成<400>2agcctggaaattgcagatga20<210>3<211>20<212>DNA<213>人工合成<400>3aaggcgcttacagctcaatg20<210>4<211>20<212>DNA<213>人工合成<400>4ctgggaggcatagaccatgt20<210>5<211>20<212>DNA<213>人工合成<400>5tacagcactaaaccaggcac20<210>6<211>20<212>DNA<213>人工合成<400>6tccagctcaggaaaaagaat20<210>7<211>21<212>DNA<213>人工合成<400>7catgtacgttgctatccaggc21<210>8<211>21<212>DNA<213>人工合成<400>8catgtacgttgctatccaggc21當(dāng)前第1頁1 2 3