本發(fā)明涉及一種組合物，具體涉及一種具有治療骨質疏松作用的組合物及其制備方法和其應用。
背景技術：
據(jù)統(tǒng)計，全球骨質疏松癥患者超過2億，在世界常見病的發(fā)病率排行中已位列第7名。我國是世界上骨質疏松癥患者最多的國家，目前患者人數(shù)高達9000萬。其中60歲以上女性骨質疏松癥發(fā)病率高達70％。隨著人口的日益老齡化，骨質疏松癥的發(fā)病率也在呈同步增長趨勢。據(jù)估計到2050年我國骨質疏松癥患者將激增至2億多，占人口的13.2％。隨著人類壽命的延長和老齡化社會的來臨，骨質疏松癥的發(fā)生越來越多，迫切需要研究和開發(fā)更為安全有效的防治骨質疏松的藥物。
目前國內外補鈣制劑繁多，但無機鈣鹽占主導地位，無機鈣鹽價格便宜但吸收率低易在腎臟停留，導致腎結石等疾病，如碳酸鈣長期服用可能產生大便干燥、食欲不振、胃疼等副作用。有機鈣鹽也存在不同的毒副作用，如乳酸鈣長期服用容易產生疲勞；葡萄糖酸鈣能引起糖尿病患者血糖升高；醋酸鈣能引起腹瀉等。氨基酸螯合鈣作為第三代補鈣產品具有穩(wěn)定性好，吸收率高，生物效價高，具有抗病抗應激作用且毒性小適口性好，使用少、減少污染利于環(huán)保等特點。本發(fā)明以廢棄貝殼和純的氨基酸作為鈣源和氨基酸來源，通過對螯合條件的篩選與優(yōu)化，制備氨基酸螯合鈣，且與中藥淫羊藿、枸杞子和黃精配伍，具有很好的防治骨質疏松的作用。
中醫(yī)理論認為：腎藏精、主骨、生髓，髓藏于骨腔內、滋養(yǎng)骨骼，骨的生長發(fā)育依賴腎臟精氣的滋養(yǎng)與推動，骨之強勁與脆弱是腎中精氣盛衰的重要標志。腎中精氣充盈則骨髓生化有源，骨才能得到骨髓的滋養(yǎng)，骨礦含量正常而骨強健有力。人體衰老則腎氣衰，腎精虛少，骨髓化源不足，不能營養(yǎng)骨骼而至骨髓空虛，骨礦含量下降，因而發(fā)生骨質疏松?！端貑枴ゐ粽摗吩唬骸澳I主身之骨髓……腎氣熱，則腰脊不舉，骨枯而髓減，發(fā)為骨痿?！薄端貑枴らL刺節(jié)論》中說：“病在骨，骨重不可舉，骨髓酸痛，寒氣至，名曰骨痹?！薄督饏T要略》在描述骨萎的發(fā)病機理時指出“味酸則傷筋，筋傷，……咸則傷骨，骨傷則萎，名曰枯”。
目前針對骨質疏松的西藥和中藥在治療骨質疏松方面效果不顯著，且西藥在某些程度上還會造成對身體的損害，中藥單方、驗方依據(jù)各有不同，治則不統(tǒng)一。因此。根據(jù)骨質疏松的發(fā)病機制，積極尋找和努力搜索治療本病高效無毒的藥物制劑具有重要的意義。
技術實現(xiàn)要素：
發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術的不足，提供一種配比科學合理，療效確切，臨床使用安全，不良反應低的治療骨質疏松的組合物，本發(fā)明的另一個目的是提供該組合物的制備方法及其在制備治療骨質疏松藥物中的應用。
技術方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術方案為：
一種具有治療骨質疏松作用的組合物，它由下列重量份數(shù)的原料制成：
天門冬氨酸螯合鈣1至10份，淫羊藿、枸杞子和黃精的提取物1至10份。
作為優(yōu)選方案，以上所述的具有治療骨質疏松作用的組合物，它由下列重量份數(shù)的原料制成：天門冬氨酸螯合鈣1至6份，淫羊藿、枸杞子和黃精的提取物1至6份。
作為優(yōu)選方案，以上所述的具有治療骨質疏松作用的組合物，它由下列重量份數(shù)的原料制成：天門冬氨酸螯合鈣1份，淫羊藿、枸杞子和黃精的提取物1份。
作為優(yōu)選方案，以上所述的具有治療骨質疏松作用的組合物，所述的天門冬氨酸螯合鈣通過以下方法制備得到：取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，600-1000℃馬弗爐中煅燒1-4h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO；
按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1～3:1～3，在pH值為4～6，溫度為60～70℃下反應1～3h后，離心，得上清液，濃縮，濃縮液加乙醇使乙醇終濃度為65％～85％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣。
作為優(yōu)選方案，以上所述的具有治療骨質疏松作用的組合物，所述的淫羊藿、枸杞子和黃精的提取物是通過以下方法制備得到：按1～20：1～20：1～20比例取淫羊藿、枸杞子和黃精，加入藥材5～10倍體積量的水，提取1～3次，每次1～5小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，減壓濃縮干燥得淫羊藿、枸杞子和黃精提取物。
本發(fā)明所述的具有治療骨質疏松作用的組合物，將各原料提取物和藥學上可接受的載體制備成片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、口服液劑型的藥物。
本發(fā)明提供的具有治療骨質疏松作用的組合物，可以將各原料藥的提取物和藥學上可接受的載體制備成片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、口服液劑型的藥物。
本發(fā)明提供的組合物的提取物制成膠囊劑時把各原料的提取物和載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。
將本發(fā)明提供的組合物的各原料的提取物制成口服液時，將各原料的提取物加蒸餾水溶解，過濾，加入糖漿，調節(jié)pH值，制成口服液。
將本發(fā)明提供的組合物的各原料的提取物制成片劑時，把各原料和乳糖或玉米淀粉，需要時加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，整粒，然后壓片制成片劑。
本發(fā)明提供的組合物的各原料的提取物制成顆粒劑時，把各原料的提取物和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。
本發(fā)明所述的具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，置于600～1000℃馬弗爐中煅燒1-4h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO；按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1～3:1～3，在pH值為4～6，在50～80℃下反應1～3h后，離心，得上清液，濃縮，然后加乙醇使乙醇終濃度為65％～85％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣，備用；
(2)按1～20：1～20：1～20取淫羊藿、枸杞子和黃精，加5～10倍量的水提取1～3次，每次1～5小時，合并濾液，濃縮，得淫羊藿、枸杞子和黃精水提取液，減壓濃縮干燥得淫羊藿、枸杞子和黃精提取物，備用；
(3)按權利要求1至3任一項所述的重量份數(shù)，分別取步驟(1)制備得到的天門冬氨酸螯合鈣和步驟(2)得到的淫羊藿、枸杞子和黃精提取物與藥學上可接受的載體制備成片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、口服液劑型的藥物。
本發(fā)明所述的具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，步驟(2)所述的提取方法為：煎煮法、回流提取法或滲漉法。
本發(fā)明所述的具有治療骨質疏松作用的組合物在制備防治骨質疏松藥物中的應用。
有益效果：本發(fā)明和現(xiàn)有技術相比具有以下優(yōu)點：
本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理論和現(xiàn)代醫(yī)學知識，采用辨證論治的理論進行組方篩選，組合物配比科學合理，實驗結果表明，本發(fā)明提供的組合物具有多環(huán)節(jié)、多靶點的綜合作用，可調節(jié)人體內的鈣平衡，補充鈣元素和氨基酸，補腎壯骨，增加骨密度和維持骨礦含量，防治骨質疏松。另外本發(fā)明提供的組合物的提取物可以方便和藥學載體制備成多種劑型，臨床上服用方便，且實驗結果表明本發(fā)明提供的組合物，使用安全，長期服用無毒副作用。同時本發(fā)明提供的中藥制劑的制備方法，工藝設計合理、提取有效成分含量高，可操作性強，適合工業(yè)化大生產。
具體實施方式
下面結合具體實施例進一步闡明本發(fā)明，應理解這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領域技術人員對本發(fā)明的各種等價形式的修改均落于本申請所附權利要求所限定的范圍。
實施例1
具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，在600℃馬弗爐中煅燒4h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO。按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1:3，pH＝4，在50℃下反應3h后，離心，得上清液，濃縮，加乙醇使乙醇終濃度為65％％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣；
(2)按1：1：1取淫羊藿、枸杞子和黃精，加5倍量的水提取3次，每次2小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，干燥得中藥混合提取物；
(3)將天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精中藥提取物按重量比1:10混勻后，和乳糖，玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。
實施例2
具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，在1000℃馬弗爐中煅燒1h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO。按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為3:1，pH＝6，在80℃下反應1h后，離心，得上清液，濃縮，加乙醇使乙醇終濃度為80％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣；
(2)按10：10：10取淫羊藿、枸杞子和黃精，加10倍量的水提取2次，每次1小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，干燥得中藥混合提取物；
(3)將天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精提取物按重量比10:1混勻后，加入稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。
實施例3
具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，750℃馬弗爐中煅燒3h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO。按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1:1.5，pH＝4.5，在70℃下反應1.5h后，離心，得上清液，濃縮，加乙醇使乙醇終濃度為75％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣；
(2)按10：1：1取淫羊藿、枸杞子和黃精，加6倍量的水提取2次，每次2小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，干燥得中藥提取物；
(3)將天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精中藥提取物按重量比1:6混勻后，加入稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成丸劑。
實施例4
具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，850℃馬弗爐中煅燒1.5h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO。按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1.5:1，pH＝7，在65℃下反應1.5h后，離心，得上清液，濃縮，加乙醇使乙醇終濃度為60％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣；
(2)按10：20：20取淫羊藿、枸杞子和黃精，加8倍量的水提取1次，每次3小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，干燥得中藥提取物；
(3)將天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精提取物按重量比6:1混勻后，和乳糖，玉米淀粉混合均勻，加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，整粒，干燥，然后壓片制成片劑。
實施例5
具有治療骨質疏松作用的組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)取四角蛤蜊貝殼，洗凈干燥，950℃馬弗爐中煅燒2.5h，冷卻后粉碎過篩得活性鈣粉CaO。按天門冬氨酸與活性鈣粉CaO中Ca2+摩爾比為1:2，pH＝7，在80℃下反應1.5h后，離心，得上清液，濃縮，加乙醇使乙醇終濃度為60％，沉淀，濾過，得乙醇沉淀物，干燥，得天門冬氨酸螯合鈣；
(2)按10：10：10取淫羊藿、枸杞子和黃精，加7倍量的水提取3次，每次1小時，合并濾液，濃縮，得水提取液，干燥得中藥混合提取物；
(3)將天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精提取物，按重量比10:10混勻后，加入稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。
實施例6 藥理實驗研究
1.實驗動物
SD大鼠，清潔級，雌性，200～230g，購于南京醫(yī)科大學實驗動物中心，許可證號：SCXK(Beijing)2012-0001。
2.實驗藥物
2.1陽性藥：樂力鈣(1～2粒/d)，美國礦物公司，批號：X000CU2S95。
2.2受試藥物：
按本發(fā)明實施例1方法分別制備得到的淫羊藿、枸杞子和黃精的中藥提取物(10g生藥/kg)；天門冬氨酸螯合鈣(10g生藥/kg)；
實施例1方法制備得到的天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精提取物重量份數(shù)比為1:10，給藥劑量分為低劑量組：天門冬氨酸螯合鈣(0.5g生藥/kg)，中藥混合提取物(5g生藥/kg)和高劑量組：天門冬氨酸螯合鈣(1g生藥/kg)與中藥混合提取物(10g生藥/kg)組合物；
實施例2方法制備得到的天門冬氨酸螯合鈣，與淫羊藿、枸杞子和黃精提取物重量份數(shù)比為10:1，給藥劑量分為低劑量組：天門冬氨酸螯合鈣(5g生藥/kg)，中藥混合提取物(0.5g生藥/kg)和高劑量組：天門冬氨酸螯合鈣(10g生藥/kg)與中藥混合提取物(1g生藥/kg)組合物；
3.實驗方法
3.1天門冬氨酸螯合鈣配伍淫羊藿、枸杞子和黃精中藥混合提取物對去卵巢大鼠骨質疏松模型的影響
對雌性大鼠飼養(yǎng)兩周，待體重增長至230-260g后隨機分為8組，即假手術組，模型組，陽性藥組，天門冬氨酸螯合鈣組，淫羊藿、枸杞子和黃精的中藥提取物組，本發(fā)明實施例1和實施例2制備得到的組合物低劑量組，組合物高劑量組。所有動物飼養(yǎng)條件一致，自由攝食和飲水，對大鼠實施去卵巢手術。3％戊巴比妥鈉溶液(40mg/kg，即0.2ml/100g)腹腔注射麻醉，麻醉后腹部向上固定大鼠，在劍突下剪毛范圍4cm*3cm進行毛發(fā)清理。手術部位用75％酒精進行消毒，鋪上洞巾，于劍突下約1.5cm處，沿腹白線做縱向切口，切口長約1.7cm，分離腹部肌肉和腹膜，暴露腹腔。仔細沿著子宮下角向上小心尋找卵巢，再慢慢將卵巢提出，用羊腸線結扎輸卵管及其周圍脂肪組織及血管。模型組，陽性藥組，天門冬氨酸螯合鈣組，淫羊藿、枸杞子和黃精提取物組，組合物高、低劑量組的大鼠完整摘除雙側卵巢；假手術組大鼠取出卵巢周圍等量脂肪組織。仔細止血，分層縫合手術切口。外傷口涂上紅霉素藥膏，肌肉注射青霉素鈉，每日20萬單位，連續(xù)5d。
各組手術傷口恢復后，第7天開始灌胃治療3個月。灌胃給藥，每日1次，根據(jù)體重1周調整一次給藥量。具體實驗結果見表1。
表1 各組對去卵巢大鼠血清生化測定結果(x±SD)
注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與天門冬氨酸螯合鈣組比較，#P<0.05；##P<0.01；與中藥提取物組比較，△P<0.05，△△P<0.01
根據(jù)表1實驗結果可知，模型組與假手術組相比，血清鈣、血清磷含量顯著減少(P<0.01)，血清BALP及TRAP含量明顯升高(P<0.01)說明造模成功。樂力鈣組和實施例1和實施例2制備得到的天門冬氨酸螯合鈣和中藥提取物組合物與模型對照組比較，血清鈣、磷含量明顯升高(P<0.01或0.05)，血清BALP及TRAP含量明顯降低(P<0.01或0.05)。與單個天門冬氨酸螯合鈣組及單個中藥提取物組比較，血清鈣、血清磷含量顯著性升高(P<0.05)，血清BALP及TRAP含量顯著性降低。實驗結果表明天門冬氨酸螯合鈣與淫羊藿、枸杞子和黃精中藥混合提取物配伍后具有很好的抗去卵巢大鼠造成骨質疏松的作用。
表2 大鼠骨骼指標(n＝12)
注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01；與天門冬氨酸螯合鈣組比較，#P<0.05；##P<0.01；與中藥提取物組比較，△P<0.05，△△P<0.01。
據(jù)表2可知，模型組與假手術組相比，骨密度明顯下降，樂力鈣組和實施例1和實施例2制備得到的天門冬氨酸螯合鈣和中藥提取物組合物與模型對照組比較，骨密度有顯著增加，同時，實施例1和實施例2與單個天門冬氨酸螯合鈣組及單個中藥提取物組比較，藥效更優(yōu)，采用中藥組合物和氨基酸有機鈣配伍，取得了非常好的增效作用。
本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理論和現(xiàn)代醫(yī)學知識，采用辨證論治的理論進行中藥組方篩選，組合物配比科學合理，通過以上實驗結果表明，本發(fā)明提供的組合物能夠有效防治骨質疏松，具有增加骨密度，提高骨強度作用，有望開發(fā)成新的防治骨質疏松的藥物。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。