本發(fā)明涉及一種新型復(fù)合仿生水凝膠的制備方法，特別是一種β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠的制備方法。
背景技術(shù)：
在骨組織修復(fù)生物醫(yī)學工程領(lǐng)域，殼聚糖(chitosan)相關(guān)材料的研究備受關(guān)注，殼聚糖是由甲殼素經(jīng)n-脫乙?；幚砗蟮玫剑悄壳鞍l(fā)現(xiàn)的惟一天然堿性多糖，具有良好的生物降解性和生物相容性，而且還具有選擇性促進表皮細胞生長、促進骨組織修復(fù)的獨特的生物活性。作為良好的骨組織生物醫(yī)學工程材料，要求該材料能夠與骨組織的組成接近，能夠提供給骨組織細胞一個良好的細胞外仿生環(huán)境。人體的骨組織是由有機物與無機材料所共同形成的復(fù)合結(jié)構(gòu)，β-磷酸三鈣(β-tcp，β-tricalciumphosphate)與生物體內(nèi)硬組織的主要成分磷酸鈣其結(jié)構(gòu)和化學組成非常相似，具有良好的生物相容性和生物活性，目前在臨床醫(yī)學上，已被廣泛應(yīng)用于骨組織的修復(fù)與替代。目前，β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合生物陶瓷材料以及三維支架材料已經(jīng)研發(fā)成功，但當臨床中遇到需要快速進行骨骼填充、骨組織修復(fù)部位環(huán)境復(fù)雜，或需要進行微創(chuàng)骨修復(fù)治療時，以上材料就有了應(yīng)用局限性，如能將同樣具有良好生物相容性的β-磷酸三鈣與殼聚糖制備成復(fù)合仿生水凝膠，則可以克服以上缺點，得到可適應(yīng)復(fù)雜骨修復(fù)環(huán)境的、適宜微創(chuàng)手術(shù)應(yīng)用的新型生物醫(yī)學材料。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有的骨修復(fù)材料在需要快速進行骨骼填充、骨組織修復(fù)部位環(huán)境復(fù)雜，或需要進行微創(chuàng)骨修復(fù)治療時的應(yīng)用局限性，提供一種制備簡單、成本低廉、合成安全的新型復(fù)合仿生水凝膠的制備方法。
按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，首先將殼聚糖用一定濃度的稀醋酸溶液溶解，將β-甘油磷酸鈉(β-gp，β-glycerophosphate)溶于適當?shù)娜羲?，將以上兩份溶液置?℃的冰箱中過夜保存使其穩(wěn)定，然后在持續(xù)攪拌下將適當量的β-磷酸三鈣粉末加入上述殼聚糖溶液中，冰浴，加入適當濃度的β-gp溶液，ph中性環(huán)境下，逐滴加入少量乙二醛(gl，glyoxal)，將以上混合溶液在37℃下過夜放置，形成水凝膠，將制備好的水凝膠保存于4℃的冰箱中。
本發(fā)明涉及一種新型β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠的制備方法，采用了以下技術(shù)方案：
1、配制殼聚糖溶液：將殼聚糖按照一定比例溶于一定濃度的稀醋酸溶液中，混合均勻，將所得溶液置于4℃的冰箱中過夜保存使其穩(wěn)定；
2、配制β-甘油磷酸鈉溶液：將β-甘油磷酸鈉(β-gp，β-glycerophosphate)溶于適當?shù)娜羲谢旌暇鶆?，將所得溶液置?℃的冰箱中過夜保存使其穩(wěn)定；
3、制備β-磷酸三鈣/殼聚糖混合溶液：在持續(xù)攪拌下將適當量的β-磷酸三鈣粉末加入上述第一步中的殼聚糖溶液中，充分攪拌一定時間，使其混合均勻；
4、β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠的制備：冰浴的情況下，向上述第三步的β-磷酸三鈣/殼聚糖混合溶液中加入上述第二步中的適當濃度的β-gp溶液，ph中性環(huán)境下，逐滴加入少量乙二醛(gl，glyoxal)，攪拌使其混合均勻后，將以上混合溶液在37℃下過夜放置，形成水凝膠；
5、將上述第四步中所得到的水凝膠貯存于4℃的冰箱中，即可得到新型β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠材料。
本發(fā)明所提供的新型β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠材料的制備方法克服了現(xiàn)有的骨修復(fù)材料在需要快速進行骨骼填充、骨組織修復(fù)部位環(huán)境復(fù)雜，或需要進行微創(chuàng)骨修復(fù)治療時的應(yīng)用局限性，本制備方法工藝簡單、成本低廉、合成安全，對于生物醫(yī)學工程領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價值。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。
一種新型β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠材料的制備方法，采用以下工藝步驟：
1、配制殼聚糖溶液：將殼聚糖按照1.0～2.0％(w/v)的比例溶于1.0～1.5％(v/v)的稀醋酸溶液中，混合均勻，將所得溶液置于4℃的冰箱中過夜保存使其穩(wěn)定；
2、配制β-甘油磷酸鈉溶液：將β-甘油磷酸鈉(β-gp，β-glycerophosphate)0.5～0.7mol溶于4～7ml三蒸水中混合均勻，將所得溶液置于4℃的冰箱中過夜保存使其穩(wěn)定；
3、制備β-磷酸三鈣/殼聚糖混合溶液：在持續(xù)攪拌下將1.0～2.0％(w/w)的β-磷酸三鈣粉末加入上述第一步中的殼聚糖溶液中，充分攪拌一定時間，使其混合均勻；
4、β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠的制備：冰浴的情況下，向上述第三步的β-磷酸三鈣/殼聚糖混合溶液中加入上述第二步中的β-gp溶液，ph中性環(huán)境下，逐滴加入0.7～1.0ml乙二醛(gl，glyoxal)，攪拌使其混合均勻后，將以上混合溶液在37℃下過夜放置，形成水凝膠；
5、將上述第四步中所得到的水凝膠貯存于4℃的冰箱中，即可得到新型β-磷酸三鈣/殼聚糖復(fù)合仿生水凝膠材料。