本發(fā)明屬于中草藥加工領域，具體涉及一種提高功效的靈芝孢子粉的去殼方法，該方法包括將靈芝孢子粉原料經過研磨及分離步驟、噴霧干燥步驟，得到去殼后靈芝孢子粉。

背景技術：

靈芝(Ganoderma lucidum)為擔子菌綱多孔菌科屬真菌，是一種作用廣泛的藥用真菌。其中，靈芝孢子為褐色，卵形，具雙層壁結構。從細胞結構上看，該雙層壁結構，由幾丁質和葡萄糖構成，質地較為堅韌，阻礙有效成分的溶出，影響體內吸收。因此目前絕大部分產品都采用不同的破壁工藝粉碎孢子壁，以期提高活性成分體內生物利用度，增強治療效果。但破壁后幾丁質仍與壁內有效成分混合在一起，影響最終產品的多糖和三萜含量。在現(xiàn)有的靈芝孢子粉破壁方法中，制得的靈芝孢子粉的多糖和三萜的含量僅為1.5-1.8％。此外，特別是一些消化道疾病的患者，他們較大量地服用破壁靈芝孢子粉后，往往難以消化靈芝孢子粉的殼體，造成消化不良甚至影響進食的負面影響。

所以，目前需要一種將靈芝孢子粉的雙層壁結構去除(即去殼)的方法，提高去殼靈芝孢子粉的得率，同時提高其中的多糖和三萜含量。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種提高功效的靈芝孢子粉的去殼方法，該方法包括將破壁靈芝孢子粉原料經過研磨步驟、經水稀釋并離心分離殼肉、去殼、濃縮并噴霧干燥等步驟，得到去殼后的靈芝孢子粉。本發(fā)明產品肉質含量高，多糖和三萜含量高。

本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的：

一種提高功效的靈芝孢子粉的去殼方法，所述去殼方法包括：將靈芝孢子粉原料經過研磨及分離步驟、噴霧干燥步驟，得到去殼后靈芝孢子粉。

進一步地，所述研磨及分離步驟包括以下分步驟：

第一級研磨分離分步驟：

將靈芝孢子粉原料與水混勻，進行研磨處理，得到第一級研磨后的產物；再將所述第一級研磨后的產物進行離心處理，得到上清液和沉淀物；再將所述上清液進行過濾處理，保留濾液；

第二級研磨分離分步驟：

將所述沉淀物與水混勻，進行研磨處理、過濾處理，保留濾液。

進一步地，所述第一級研磨分離分步驟中，所述靈芝孢子粉原料與水的重量比為1：(3-6)；所述研磨處理采用納米級膠體磨，研磨至850目以上，研磨1-4遍；所述離心處理的轉速為4000-10000rpm，時間為10-40min；所述過濾處理采用800-1000目的濾網。

進一步地，所述第二級研磨分離分步驟中，所述沉淀物與水的重量比為1：(3-6)；所述研磨處理采用納米級膠體磨，研磨至850目以上，研磨1-4遍；所述過濾處理采用800-1000目的濾網。

進一步地，所述噴霧干燥步驟包括：合并所述第一級研磨分離分步驟和第二級研磨分離分步驟得到的濾液，再進行濃縮處理、噴霧干燥處理，得到去殼靈芝孢子粉。

進一步地，所述濃縮處理在真空下進行，溫度為70-85℃，濃縮至原體積的(1/2)-(2/3)；所述噴霧干燥處理的噴口溫度為120-130℃。

進一步地，所述靈芝孢子粉原料的制備方法包括以下步驟：將靈芝孢子粉與比重水混勻后，得到混合物；再將所述混合物進行沉淀處理，得到分層次的混合物；再取所述分層次的混合物的中間層；再將所述中間層進行濃縮處理，得到濃縮產物；所述濃縮產物作為靈芝孢子粉原料。

進一步地，所述靈芝孢子粉和比重水的重量比為1：(6-11)；所述比重水為質量百分比10-30％的氯化鈉溶液；所述沉淀處理的時間為2-10分鐘；所述濃縮處理在真空下進行，溫度為70-85℃，所述濃縮產物的體積為原體積的(1/2)-(2/3)。

進一步地，所述靈芝孢子粉原料的制備方法還包括以下步驟：

將所述濃縮產物進行烘干處理，得到靈芝孢子粉原料。

進一步地，所述烘干處理的溫度為60-90℃。

相比現(xiàn)有技術，本發(fā)明具有如下有益效果：

1、本發(fā)明將靈芝孢子粉的雙層壁結構(即殼)部分或徹底去除，有利于活性成分充分釋放并被人體吸收，避免了難以消化的殼體對消化道疾病患者的副作用。

2、本發(fā)明將靈芝孢子粉進行多重研磨，不僅有利于靈芝孢子粉內部有效成分的釋放，也有利于靈芝孢子粉外壁中有效成分的提取，有利于提高多糖和三萜含量。

3、本發(fā)明的破壁、去殼步驟中除去離子水之外基本不引入其他新的試劑，可以確保破壁靈芝孢子粉的高純度。

4、本發(fā)明各個步驟及參數(shù)協(xié)同作用，共同提高了靈芝孢子粉原料加工的得率、多糖和三萜的含量。

5、本發(fā)明操作簡便，生產成本低廉，有利于廣泛使用。

具體實施方式

本發(fā)明提供一種提高功效的靈芝孢子粉的去殼方法，該去殼方法包括以下步驟：

步驟一、沉淀和濃縮：

收集靈芝孢子粉，將該靈芝孢子粉中加入比重水(該比重水為氯化鈉溶液，質量百分濃度為10-30％(優(yōu)選為20％))，其中，靈芝孢子粉和比重水的重量比為1：(6-11)(優(yōu)選為1:7)，混勻后得到混合物；將該混合物于室溫進行沉淀處理2-10分鐘(優(yōu)選為5分鐘)，得到分層次的混合物；該分層次的混合物中，上層為靈芝孢子粉的癟粒，中間層為靈芝孢子粉顆粒，下層為泥沙等雜質；去除上層和下層，取該混合物的中間層；

再將該中間層的靈芝孢子粉原料進行濃縮處理，處理后得到濃縮產物，作為靈芝孢子粉原料進行下一步驟的研磨；該濃縮處理在真空下進行，溫度為70-85℃，濃縮至原體積的(1/2)-(2/3)；

所述濃縮產物也可以再于60-90℃進行烘干處理，至含水量5％以上(優(yōu)選為6-9％)，作為靈芝粉孢子粉原料進行下一步的研磨。

示例性地，上述靈芝孢子粉與比重水的重量比可以為1：6、1：7、1：7.5、1：8、1:10、1:11等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述沉淀時間可以為2min、5min、8min、10min等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述濃縮的溫度可以為70℃、75℃、80℃、85℃等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述濃縮后的體積可以為原體積的1/2、3/5、2/3等中任意值或任意兩者之間的范圍。

步驟二、研磨及分離：

分步驟一、第一級研磨分離：

將上述靈芝孢子粉原料與去離子水按重量比1：(3-6)(優(yōu)選為1:4)混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨1-4遍(優(yōu)選為2遍)，至850目以上，得到第一級研磨后的產物；再將該第一級研磨后的產物于室溫、轉速4000-10000rpm(優(yōu)選為5800rpm)進行離心處理10-40min，分別保留得到的上清液和沉淀物；再將所述上清液采用800-1000目(優(yōu)選為800目)的濾網進行過濾處理后，保留濾液。

示例性地，上述靈芝孢子粉原料與去離子水按重量比可以為1：3、1：4、1：5、1：6等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述研磨的遍數(shù)可以為2、3、4等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述離心轉速可以為4000rpm、5000rpm、6000rpm、8000rpm、10000rpm等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述離心時間可以為10min、20min、30min、40min等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述濾網的目數(shù)可以為800、850、900、950、1000等中任意值或任意兩者之間的范圍。

分步驟二、第二級研磨分離：

將上述沉淀物與去離子水按重量比1：(3-6)(優(yōu)選為1:6)混勻，再次采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨1-4遍(優(yōu)選為2遍)，至850目以上，得到第二級研磨后的產物；再將該第二級研磨后的產物用800-1000目(優(yōu)選為800目)的濾網進行過濾處理，保留濾液。

示例性地，上述沉淀物與去離子水按重量比可以為1：3、1：4、1：5、1：6等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述研磨的遍數(shù)可以為2、3、4等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述濾網的目數(shù)可以為800、850、900、950、1000等中任意值或任意兩者之間的范圍。

上述納米級膠體磨優(yōu)選采用該納米膠體磨優(yōu)選為IKN牌CMS2000型納米膠體磨，優(yōu)選購自上海依肯機械設備有限公司。

步驟三、噴霧干燥：

將上述兩級研磨后得到的濾液(即為靈芝孢子粉內容物的水溶液)合并在一起，在真空環(huán)境下于70-85℃(優(yōu)選為80℃)進行濃縮處理，得到濃縮液，至原體積的(1/2)-(2/3)(優(yōu)選為1/2)，再于噴口溫度120-130℃(優(yōu)選為125℃)進行噴霧干燥處理，得到去殼靈芝孢子粉。

該濃縮處理優(yōu)選采用真空濃縮罐。

示例性地，上述濃縮的溫度可以為70℃、75℃、80℃、85℃等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述濃縮液可以為至原體積的1/2、3/5、2/3等中任意值或任意兩者之間的范圍，上述噴霧干燥的噴口溫度可以為120℃、123℃、125℃、128℃、130℃等中任意值或任意兩者之間的范圍。

下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。對外應理解，在閱讀了本發(fā)明的內容之后，本領域技術人員對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1

本實施例的靈芝孢子粉的去殼方法，依次包括以下步驟：

(1)收集靈芝孢子粉。

(2)將該靈芝孢子粉中加入比重水，其中，靈芝孢子粉和比重水(25％的氯化鈉溶液)的重量比為1：8，混勻后得到混合物；再將該混合物于室溫進行沉淀處理5分鐘，得到分層次的混合物，取其中間層；再將該中間層在真空環(huán)境下于80℃進行濃縮處理至原體積的3/5，作為靈芝孢子粉原料。

(3)將該靈芝孢子粉原料與去離子水按重量比1：6混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨2遍，至850目以上，得到第一級研磨后的產物。

(4)將該第一級研磨后的產物于室溫、轉速5800rpm進行離心處理30min，分別保留得到的上清液和沉淀物。

(5)取該上清液，采用800目的濾網進行過濾處理后，保留濾液。

(6)取該沉淀物，與去離子水按重量比1：6混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨2遍，至850目以上，得到第二級研磨后的產物。

(7)將該第二級研磨后的產物用800目的濾網進行過濾處理，保留濾液。

(8)合并步驟(5)和步驟(7)得到的濾液，該濾液即為靈芝孢子粉內容物的水溶液。

(9)在真空環(huán)境下于80℃進行濃縮處理得到濃縮液，至原體積的3/5。

(10)將該濃縮液于噴嘴溫度125℃進行噴霧干燥處理，得到去殼靈芝孢子粉。

(11)將該去殼靈芝孢子粉用鋁箔袋包裝，入庫儲存。

上述去殼靈芝孢子粉在多糖含量4.2-4.5％，三萜含量5-5.8％的前提下，得率為15-20％。

實施例2

本實施例的靈芝孢子粉的去殼方法，依次包括以下步驟：

(1)收集靈芝孢子粉。

(2)將該靈芝孢子粉中加入比重水，其中，靈芝孢子粉和比重水(10％的氯化鈉溶液)的重量比為1：10，混勻后得到混合物；再將該混合物于室溫進行沉淀處理5分鐘，得到分層次的混合物，取其中間層；再將該中間層在真空環(huán)境下于70℃進行濃縮處理至原體積的1/2，作為靈芝孢子粉原料。

(3)將該靈芝孢子粉原料與去離子水按重量比1：3混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨4遍，至850目以上，得到第一級研磨后的產物。

(4)將該第一級研磨后的產物于室溫、轉速4000rpm進行離心處理40min，分別保留得到的上清液和沉淀物。

(5)取該上清液，采用1000目的濾網進行過濾處理后，保留濾液。

(6)取該沉淀物，與去離子水按重量比1：3混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨2遍，至850目以上，得到第二級研磨后的產物。

(7)將該第二級研磨后的產物用1000目的濾網進行過濾處理，保留濾液。

(8)合并步驟(5)和步驟(7)得到的濾液，該濾液即為靈芝孢子粉內容物的水溶液。

(9)在真空環(huán)境下于70℃進行濃縮處理得到濃縮液，至原體積的1/2。

(10)將該濃縮液于噴嘴溫度120℃進行噴霧干燥處理，得到去殼靈芝孢子粉。

(11)將該去殼靈芝孢子粉用鋁箔袋包裝，入庫儲存。

上述去殼靈芝孢子粉在多糖含量4.2-4.5％，三萜含量5-5.8％的前提下，得率為15-20％。

實施例3

本實施例的靈芝孢子粉的去殼方法，依次包括以下步驟：

(1)收集靈芝孢子粉。

(2)將該靈芝孢子粉中加入比重水，其中，靈芝孢子粉和比重水(25％的氯化鈉溶液)的重量比為1：11，混勻后得到混合物；再將該混合物于室溫進行沉淀處理10分鐘，得到分層次的混合物，取其中間層；再將該中間層在真空環(huán)境下于85℃進行濃縮處理至原體積的2/3，作為靈芝孢子粉原料。

(3)將該靈芝孢子粉原料與去離子水按重量比1：4混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨3遍，至850目以上，得到第一級研磨后的產物。

(4)將該第一級研磨后的產物于室溫、轉速10000rpm進行離心處理10min，分別保留得到的上清液和沉淀物。

(5)取該上清液，采用900目的濾網進行過濾處理后，保留濾液。

(6)取該沉淀物，與去離子水按重量比1：4混勻，采用納米級膠體磨進行研磨處理，研磨2遍，至850目以上，得到第二級研磨后的產物。

(7)將該第二級研磨后的產物用1000目的濾網進行過濾處理，保留濾液。

(8)合并步驟(5)和步驟(7)得到的濾液，該濾液即為靈芝孢子粉內容物的水溶液。

(9)在真空環(huán)境下于85℃進行濃縮處理得到濃縮液，至原體積的2/3。

(10)將該濃縮液于噴嘴溫度130℃進行噴霧干燥處理，得到去殼靈芝孢子粉。

(11)將該去殼靈芝孢子粉用鋁箔袋包裝，入庫儲存。

上述去殼靈芝孢子粉在多糖含量4.2-4.5％，三萜含量5-5.8％的前提下，得率為15-20％。

測試例：

本測試例是檢測本發(fā)明實施例1-3中去殼靈芝孢子粉的得率、多糖含量、三萜含量。

實施例1-3中，去殼靈芝孢子粉在多糖含量4.2-4.5％，三萜含量5-5.8％的前提下，得率為15-20％。

(一)上述得率的計算方式為：(步驟(10)中噴霧干燥后得到的去殼靈芝孢子粉的重量/步驟(1)中收集到靈芝孢子粉的重量)×100％

(二)上述多糖含量的測定方法如下：

A.1、方法提要：

苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下水解成單糖，并迅速脫水生成糠醛衍生物，糠醛與苯酚縮合成有色化合物。用分光光度法在合適的波長處測定多糖含量。

A.2、儀器：

(1)離心機：3000r/min，(2)50ml、100ml容量瓶、10ml離心管、10ml具塞玻璃管，(3)分光光度計，(4)水浴鍋，(5)電加熱板，(6)十萬分之一電子天平。

A.3、試劑：(1)無水葡萄糖，(2)苯酚，(3)硫酸，(4)無水乙醇。

A.4、測定步驟：

(1)對照品溶液：取105℃干燥至恒重的葡萄糖約80mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中約含無水葡萄糖0.7mg)。

(2)標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0.0ml.1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml、4.0ml，分別置50ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取上述各溶液2ml，置具塞試管中，分別加臨用新制的4％苯酚溶液1ml，混勻，迅速加入硫酸7.0ml，搖勻。于40℃水浴中保溫30分鐘，取出，置冰水浴中放置5分鐘，取出，以第一份為空白，依照紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版一部附錄IVA)，在485nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

(3)測定法：取本品約0.3g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加水50ml，稱定重量，加熱回流3小時，放冷，再稱定重量，用水補足減失重量，搖勻，離心15分鐘(每分鐘3000轉)，精密量取上清液2ml，加無水乙醇8ml，攪拌，離心15分鐘(每分鐘3000轉)，取沉淀加水溶解，置100ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml，照標準曲線的制備項下的方法，自“加臨用新制的4％苯酚溶液1ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中多糖重量(μg)，計算，即得。

A.5、計算：

式中：A——每100克樣品中含水溶性多糖的含量；Cx——為供試品中多糖的濃度(ug/ml)；W——為供試品的稱量(g)。

(三)上述三萜含量的測定方法如下：

(1)對照品溶液的配制：取齊墩果酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得；

(2)標準曲線的繪制：精密量取對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，分別置于15ml具塞試管中，揮干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液(精密稱取香草醛0.5g，加冰醋酸使溶解成100ml，即得)0.2ml、高氯酸0.8ml，搖勻，在70℃水浴中加熱15分鐘，立即置冰浴中冷卻5分鐘，取出，精密加入乙酸乙酯4ml，搖勻，以相應試劑為空白，依照紫外-可見分光光度法(2010年版藥典一部附錄VA)，在546nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線；

(3)待測液的配制：將去殼靈芝孢子粉水溶液(精確稱取上述去殼靈芝孢子粉，用蒸餾水配制成為5％的水溶液)過濾，濾液置100ml的容量瓶中，用適量蒸餾水，分別洗滌濾器和濾渣，洗液并入上述容量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，再精密量取0.2ml，置于15ml具塞試管中，蒸干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰乙酸(精密稱取香草醛0.5g，加冰乙酸使溶解成10ml即得)0.2ml及高氯酸0.8ml，搖勻，在70℃水浴中加熱15分鐘，取出，立即置于冰浴中冷卻5分鐘，取出，精密加入乙酸乙酯4ml，搖勻，得到待測液；

(4)三萜含量的測定：精密量取0.2ml水，置于15ml具塞試管中，蒸干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰乙酸(精密稱取香草醛0.5g，加冰乙酸使溶解成10ml即得)0.2ml及高氯酸0.8ml，搖勻，在70℃水浴中加熱15分鐘，取出，立即置于冰浴中冷卻5分鐘，取出，精密加入乙酸乙酯4ml，即得空白對照液；以上述空白對照液為空白，依照紫外-可見分光光度法測定上述待測液在546nm波長處的吸光度。根據(jù)標準曲線讀出待測液中齊墩果酸的含量，三萜的含量按齊墩果酸計。