本發(fā)明涉及植物提取工藝及植物提取物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種三棱提取物的提取方法及含有該三棱提取物的香煙和精華霜。
背景技術(shù)：
我國地大物博，植物種類繁多，所含有效成分的組成也各有特點，為功效性植物添加劑的開發(fā)提供了豐富的資源。可通過不同方式方法對植物有效成分進行提取分離，探索植物有效成分在不同領(lǐng)域的應(yīng)用，以便提升其經(jīng)濟價值。
三棱為黑三棱科植物黑三棱Sparganium stoloniferum Buch. -Ham. 削去外皮的干燥塊莖。冬季至次年春季采挖，洗凈，削去外皮，曬干。始載于唐代《本草拾遺》，自宋代開始作做正品藥用，并一直被《中國藥典》收載。三棱性平、味苦，入肝、脾經(jīng)，具有破血行氣、消積止痛等功能?，F(xiàn)代藥理研究表明，三棱具有抗腫瘤、抗氧化、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗凝血、抗血小板聚集、抗血栓、抗肺纖維化等作用，是常用的活血化瘀類中藥。研究表明，與藥理活性相關(guān)的成分主要是酚類、黃酮類、皂苷類與多糖類。
三棱的應(yīng)用非常廣泛，目前關(guān)于三棱的報道和研究很多，但大部分都是跟其他的藥材混合使用，并且目前對于三棱的提取方法僅限于浸提或有機物提純，時間長，提取效率低，該總方法主要是針對三棱中的黃酮進行提取，對于三棱的其他成分及應(yīng)用研究甚少。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點和不足，本發(fā)明的目的在于提供一種三棱提取物的提取方法，直接從三棱中得到有效活性物質(zhì)，步驟工藝簡單易操作，得到的提取物有效成分高，純度好，可應(yīng)用范圍廣。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種三棱提取物，其有效成分含量高，應(yīng)用效果好。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種三棱提取物的應(yīng)用，其能應(yīng)用在卷煙加料領(lǐng)域，有助于提高卷煙吸食品質(zhì)，還能應(yīng)用到化妝品的保濕和抗衰老領(lǐng)域。
8、一種含有三棱提取物的精華霜
本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)：
一種三棱提取物的提取方法，包括以下步驟：
步驟一：將a重量份的三棱提取物粉碎，加入到乙醇水溶液進行提取1-3次，每次加入乙醇水溶液8a-10a重量份，合并濾液，減壓濃縮得到a重量份三棱提取液；
步驟二：將a重量份所述三棱提取液離心，離心液依次進行兩次酶解處理，酶解溫度為37℃，時間為30-60min，酶解結(jié)束后升溫至80-90℃保持15-30min，得到三棱酶解液；酶解有助于分解影響活性效果的淀粉、蛋白質(zhì)、果膠等成分。
步驟三：將所述三棱酶解液進行第一次柱層析，收集水洗脫液并進行二次柱層析吸附，收集水洗脫液，目標洗脫液進行減壓濃縮、冷凍干燥后得到所述三棱提取物。柱層析的目的是脫色、提純，提高三棱提取物中的活性成分含量。
其中，所述所述步驟一種的乙醇水溶液中乙醇質(zhì)量分數(shù)為5-40%。
其中，步驟二中第一次酶解用的是0.01a-0.03a重量份的復(fù)合酶，所述復(fù)合酶由淀粉酶、纖維素酶、果膠酶按照質(zhì)量比為：3-5：1-2：1-2混合而成；第二次酶解用的是0.005a-0.01a重量份的蛋白酶。所用生物酶可為固體或液體狀。
其中，步驟三中第一次柱層析填料由硅藻石和活性炭顆粒按照質(zhì)量比為1-2：3-5混合而成；第二次柱層析填料為非極性大孔樹脂。型號為但不限于BS-65，X-5，HPD-100，HP20，D101等。硅藻土結(jié)合活性炭顆粒，可高效去除三棱提取物中的色素，比單獨用其中的一種效果好。非極性大孔樹脂將進一步除去三棱提取物中的微量脂溶性雜質(zhì)，起到除雜提純作用。
一種三棱提取物，上述方法提取得到。
一種含有三棱提取物的香煙，有本發(fā)明制得的三棱提取物的添加量為煙絲重量的0.05-0.5%。
一種三棱提取物在化妝品中的應(yīng)用，妝品包括基質(zhì)和所述三棱提取物，所述三棱提取物占所述化妝品總重量的0.01-10%。
所述化妝品的劑型為溶液、乳液或霜。
1、一種含有三棱提取物的精華霜，包括以下質(zhì)量百分比組分：
A相：鯨蠟硬脂醇 1-2%
辛酸/癸酸甘油三酯 4-5%
角鯊?fù)? 1-3%
聚二甲基硅氧烷 2%
環(huán)五聚二甲基硅氧烷 2-5%
B相：甘油 3-5%
1,3-丁二醇 1-3%
尿囊素 0.2%
漢生膠 0.1-0.3%
水 余量
C相：聚丙烯酰胺 0-0.2%
C13-14異鏈烷烴 0-0.4%
桂醇醚-7 0.2%
D相：三棱提取物 0.1-3%
E相：苯氧乙醇 0.1-0.2%
乙基己基甘油 0.1-0.2%，
所述精華霜的制備方法為：將A相加入油相鍋中，加熱到80℃；將B相加入乳化鍋中，加熱到80℃；把A相加入B相均質(zhì)2-3分鐘；加入C相均質(zhì)2-3分鐘；攪拌冷卻至30-40℃加入D相、E相，制得含有三棱提取物的精華霜。
所述精華霜具有保濕和清除自由基的功能，在抗衰老領(lǐng)域效果顯著。
本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明的三棱提取物的制備方法安全可靠、簡單高效，首先通過提取、濃縮、酶解等步驟制備得到粗提取液，進一步通過硅藻土及活性炭顆粒脫色處理，再進行二次大孔樹脂吸附純化，經(jīng)濃縮，冷凍干燥后得到三棱提取物。將其加入卷煙中，可具有改善煙氣狀態(tài)、豐富煙香、除雜降刺等作用。經(jīng)體外測試后，發(fā)現(xiàn)三棱提取物具有良好的清除自由基及保濕功效，也可應(yīng)用于保濕抗衰老化妝品中。
本發(fā)明方法操作簡單、原料易得，具有良好的工業(yè)化生產(chǎn)實際意義。
具體實施方式
為了便于本領(lǐng)域技術(shù)人員的理解，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明，實施方式提及的內(nèi)容并非對本發(fā)明的限定。
實施例1
稱取100g三棱提取物粉碎，加入800-1000g乙醇水溶液（乙醇質(zhì)量分數(shù)35%）進行提取2次，合并濾液，減壓濃縮得到100g三棱提取液；三棱提取液離心，離心液加入1.5g的復(fù)合酶進行酶解，復(fù)合酶為淀粉酶、纖維素酶、果膠酶按照質(zhì)量比為3：1：1的混合物，酶解溫度為37℃，時間為40min。第一次酶解結(jié)束后升溫至85℃保持20min，隨后降溫至37℃，再加入0.8g的蛋白酶酶解30min，第二次酶解結(jié)束后升溫至90℃保持15min，隨后冷卻至常溫，得到三棱酶解液；將三棱酶解液通過裝載有硅藻石和活性炭顆?；旌衔锏牟Ａ游鲋?，混合比例為2：4，收集去離子水洗脫液并進行第二次X-5大孔樹脂吸附，收集去離子水洗脫液，目標洗脫液進行減壓濃縮、冷凍干燥后得到11g三棱提取物。
實施例2
稱取100g三棱提取物粉碎，加入1000g乙醇水溶液（乙醇質(zhì)量分數(shù)20%）進行提取1次，合并濾液，減壓濃縮得到100g三棱提取液；三棱提取液離心，離心液加入2g的復(fù)合酶進行酶解，復(fù)合酶為淀粉酶、纖維素酶、果膠酶按照質(zhì)量比為5： 2：1的混合物，酶解溫度為37℃，時間為50min。第一次酶解結(jié)束后升溫至80℃保持30min，隨后降溫至37℃，再加入1g的蛋白酶酶解40min，第二次酶解結(jié)束后升溫90℃保持30min，隨后冷卻至常溫，得到三棱酶解液；將三棱酶解液通過裝載有硅藻石和活性炭顆?；旌衔锏牟Ａ游鲋?，混合比例為2：5，收集去離子水洗脫液并進行第二次D101大孔樹脂吸附，收集去離子水洗脫液，目標洗脫液進行減壓濃縮、冷凍干燥后得到8.9g三棱提取物。
實施例3
稱取100g三棱提取物粉碎，加入900g乙醇水溶液（乙醇質(zhì)量分數(shù)5%）進行提取3次，合并濾液，減壓濃縮得到100g三棱提取液；三棱提取液離心，離心液加入3g的復(fù)合酶進行酶解，復(fù)合酶為淀粉酶、纖維素酶、果膠酶按照質(zhì)量比為 5：2：1的混合物，酶解溫度為37℃，時間為60min。第一次酶解結(jié)束后升溫至90℃保持20min，隨后降溫至37℃，再加入0.5g的蛋白酶酶解50min，第二次酶解結(jié)束后升溫至85℃保持15min，隨后冷卻至常溫，得到三棱酶解液；將三棱酶解液通過裝載有硅藻石和活性炭顆?；旌衔锏牟Ａ游鲋旌媳壤秊?：5，收集去離子水洗脫液并進行第二次HP20大孔樹脂吸附，收集去離子水洗脫液，目標洗脫液進行減壓濃縮、冷凍干燥后得到9.7g三棱提取物。
下述對上述三個實施例的制備方法制備得到的三棱提取物的保濕活性及消除自由基活性的效果進行測試。
測試1：皮膚保濕功效的檢測
選取10名健康的受試者，平均年齡31歲。采用德國CK公司的皮膚水分測試儀Corneometer825對涂抹不同濃度的三棱提取物的受試者進行角質(zhì)層含水量測定。
環(huán)境條件：測試期間環(huán)境的溫度和濕度恒定，溫度為（25±2）℃，相對濕度為40%～60%。
涂抹部位：距手臂胳膊肘關(guān)節(jié)4、8cm處，受測面積（3×3CM2）；時長60min。讀數(shù)用任意單位(Arbitrary Unit, A. U.)來表示。
樣品用去離子水稀釋成不同濃度，去離子水溶液做空白對照。結(jié)果如下表1。
表1 保濕能力測試結(jié)果
從表2中可以看出，三棱提取物均能實現(xiàn)對較為優(yōu)越的皮膚保濕能力，其中用量達到1%以上時，保濕能力顯著提升。表明三棱提取物可以應(yīng)用于保濕化妝品中，并且效果顯著。
測試2：清除自由基活性的檢測
分別將實施例1、2、3制備得到的三棱提取物溶于去離子水，配制成質(zhì)量百分比為0.5%的溶液，用DPPH 去除自由基法測定其清除自由基活性，以VC（維生素C）為對照樣品。
測定步驟為：準確移取提取液2mL于10mL具塞試管中，加人2mLDPPH乙醇溶液（2×10-4mol/L），充分混勻，室溫靜置，30min后用分光光度計測定517nm波長的吸光度A517（以乙醇為參比）；同時測定2mL DPPH 溶液與2mL 乙醇混合后的吸光度AC，以及2mL 提取液與2mL乙醇溶液混合后的吸光度A0。平行測定三次，取平均值，根據(jù)以下公式計算自由基清除率：
自由基清除率=（1-（A517-A0）/AC）×100%。
最終測得三個實施例得到的三棱提取物及VC的自由基清除率如表2所示。
表2三棱提取物及VC的自由基清除率
從表2中可以看出，本發(fā)明的三棱提取物均能實現(xiàn)自由基清除作用，而且優(yōu)于目前同等濃度的VC。說明可將本發(fā)明的三棱提取物用于抗衰老的化妝品中。
下述結(jié)合具體實施例對本發(fā)明優(yōu)選實施例中的三棱提取物在化妝品中的應(yīng)用作進一步說明。
實施例4：一種含三棱提取物的精華霜
取三棱提取物，用于制備具有保濕及抗衰老功效的護膚精華霜。具體原料及含量如表3所示。
表3精華霜的原料及含量
該精華霜可由以下工藝制備：將A相加入油相鍋中，加熱到80℃；將B相加入乳化鍋中，加熱到80℃；把A相加入B相均質(zhì)2-3分鐘；加入C相均質(zhì)2-3分鐘；攪拌冷卻至30-40℃加入D相、E相；制得精華霜，將該精華霜再次進行皮膚保濕功效和清除自由基活性的檢測結(jié)果顯示，該精華霜具有優(yōu)越的保濕性能及抗衰老功效。
下述結(jié)合具體實施例對本發(fā)明優(yōu)選實施例中的三棱提取物在卷煙中的應(yīng)用作進一步說明。
實施例5：卷煙加香加料測試
一種本發(fā)明的三棱提取物的新用途，將所述三棱提取物噴施于烤煙的煙葉表面，所述三棱提取物的噴施量占其所噴施的烤煙煙絲重量的0.05～0.5%。
具體的試驗測試：將實施例1中的三棱提取物用去離子水稀釋后作為添加劑噴灑在同一種中檔空白（未加香加料）烤煙煙絲表面，添加量分別為煙絲重量的0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、0.8%。后續(xù)處理按常規(guī)的卷煙工藝進行，即在噴施煙用香料后，將烤煙煙絲貯存4小時，再經(jīng)過切絲、烘絲、加香、貯絲、卷接和包裝工序制成卷煙成品。由8人組成的評吸小組分別對上述樣品進行評吸對比，得到的總體感官試驗結(jié)果如下表4所示。其中，將空白樣品的內(nèi)在品質(zhì)均設(shè)定為0，相對于空白樣品內(nèi)在品質(zhì)有所改進（如煙氣狀態(tài)流暢，掩蓋雜氣，增加香氣量，降低刺激），則相應(yīng)得正分，分值越高，改進越好；相對于空白樣品內(nèi)在品質(zhì)有所降低（如煙氣狀態(tài)下沉，雜氣增加，香氣量減低，余味不舒適），則相應(yīng)得負分，負分越低，改進越差。
表4 總體感官試驗結(jié)果
經(jīng)過卷煙加料評吸實驗表明，制備的三棱提取物具有良好的加香效果，與煙香協(xié)調(diào)，能夠改善煙氣狀態(tài)，增加香氣量，掩蓋雜氣及降低刺激的作用。整體能夠提升烤煙卷煙的吸食品質(zhì)，具有應(yīng)用價值。
上述實施例為本發(fā)明較佳的實現(xiàn)方案，除此之外，本發(fā)明還可以其它方式實現(xiàn)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下任何顯而易見的替換均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。