本發(fā)明屬于保健品生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種改善睡眠的褪黑素制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
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人的一生，有大約三分之一的時間是在睡眠中度過的，睡眠的好壞與健康息息相關(guān)。醫(yī)學研究表明，偶爾失眠會造成第二天疲倦和動作不協(xié)調(diào)，長期失眠則會帶來注意力不能集中、記憶出現(xiàn)障礙和工作力不從心等后果，同時，睡眠不足會使人體免疫力下降，抗病和康復能力降低，常常會易發(fā)感冒，并有加重其他疾病或誘發(fā)原有疾病的可能。
目前市場上改善睡眠的產(chǎn)品品種很多，其中大部分都是中成藥成分，以褪黑素為原料的品種較少，劑型有口服液、膠囊劑、茶劑、片劑等，口感較差。
褪黑素是一種人體內(nèi)源性的激素，主要負責人體的睡眠、清醒周期。松果體分泌褪黑素，在夜晚來臨時，松果體釋放褪黑素，使體溫下降，心跳速度減慢，大腦由興奮轉(zhuǎn)為抑制，進入睡眠狀態(tài)。隨著曙光漸露，褪黑素的分泌量會逐漸降低，白天褪黑素的分泌量不足夜晚的50％，這就是褪黑素晝夜節(jié)律性變化的規(guī)律。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的第一個目的是提供一種安全無毒、口感良好、服用量少、無依賴性的改善睡眠的褪黑素制劑及其制備方法。
一種改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下重量份的原料，褪黑素1～3份、淀粉130～170份、白砂糖100～156份、糊精70～144份、滑石粉2～6份、硬脂酸鎂2～6份和羧甲基纖維素鈉0.2～2份。
優(yōu)選，包括以下重量份的原料，褪黑素2～3份、淀粉150～170份、白砂糖120～150份、糊精90～130份、滑石粉4～5份、硬脂酸鎂4～6份和羧甲基纖維素鈉0.5～1份。
優(yōu)選，包括以下重量份的原料，褪黑素3份、淀粉150份、白砂糖128份、糊精110份、滑石粉4份、硬脂酸鎂4份和羧甲基纖維素鈉1份。
優(yōu)選，按重量份計，還包括薄膜包衣劑8～16份。
所述的薄膜包衣劑，包括以下重量份的原料：羥丙甲纖維素3.6份、滑石粉3.6份、二氧化鈦0.8份、1，2-丙二醇1.3份和吐溫-80 1.3份。
本發(fā)明的第二個目的是提供一種上述的改善睡眠的褪黑素制劑的制備方法，包括以下步驟：a)按上述的改善睡眠的褪黑素制劑中所需重量份分別稱取褪黑素、淀粉、糊精、白砂糖、滑石粉和硬脂酸鎂粉碎后過篩；b)將所需重量份的羧甲基纖維素鈉溶解于水中得羧甲基纖維素鈉漿；c)將褪黑素、淀粉、糊精和白砂糖混合均勻后得混合物料；d)將混合物料與羧甲基纖維素鈉漿混合均勻，經(jīng)制粒、干燥、整粒得到干顆粒；e)將干顆粒與滑石粉、硬脂酸鎂混合均勻后得總混的物料，經(jīng)壓片、包衣得到改善睡眠的褪黑素制劑。
優(yōu)選，所述的羧甲基纖維素鈉漿為質(zhì)量分數(shù)為2％的羧甲基纖維素鈉漿。
所述的將褪黑素、淀粉、糊精和白砂糖混合均勻后得混合物料是按等量遞增混合法先將褪黑素和淀粉混合均勻，然后與糊精、白砂糖混合均勻后得混合物料。
本發(fā)明的改善睡眠的褪黑素制劑具有安全無毒、口感良好、服用量少和無依賴性的特點。試驗表明，本發(fā)明的褪黑素制劑能夠顯著延長戊巴比妥鈉睡眠時間、協(xié)同戊巴比妥鈉閾下劑量催眠作用和縮短巴比妥鈉睡眠潛伏期，具有顯著改善睡眠的功能。
附圖說明：
圖1是本發(fā)明的改善睡眠的褪黑素制劑的制備流程圖。
具體實施方式：
以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。
實施例1：改善睡眠的褪黑素制劑A的制備
本實施例的改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下原料：褪黑素3kg、淀粉150kg、白砂糖128kg、糊精110kg、滑石粉4kg、硬脂酸鎂4kg、羧甲基纖維素鈉1kg和薄膜包衣劑10.6kg。
改善睡眠的褪黑素制劑A的制備方法(如圖1所示)，包括以下步驟：
步驟1)稱取配方量的褪黑素、淀粉、白砂糖和糊精粉碎后過100目篩；稱取配方量的滑石粉和硬脂酸鎂粉碎后過40目篩，備用；
步驟2)將配方量的羧甲基纖維素鈉加入到純化水中，加熱到50-60℃，攪拌至羧甲基纖維素鈉完全溶解，成為澄清透明溶液，制成質(zhì)量分數(shù)為2％的羧甲基纖維素鈉漿，備用；
步驟3)按等量遞增混合法，先將褪黑素和淀粉進行混合，再與糊精、白砂糖進行混合，得到混合物料；
步驟4)將混合物料與質(zhì)量分數(shù)為2％的羧甲基纖維素鈉漿進行混合，過16目篩制粒，得濕顆粒，備用；
步驟5)使用箱式干燥器對濕顆粒進行干燥，干燥溫度為55-50℃，干燥時間為1-3小時，干燥15min后翻動盤內(nèi)顆粒，使顆粒受熱均勻，得到干顆粒，干顆粒的水分控制在≤5％；
步驟6)將干顆粒過16目篩進行整粒；
步驟7)將整粒后的干顆粒與滑石粉、硬脂酸鎂進行總混，混合時間為15-30分鐘，得到總混的物料；
步驟8)對總混的物料進行壓片，得到素片；
步驟9)將配方量的薄膜包衣劑用體積分數(shù)為70％的乙醇制成質(zhì)量分數(shù)為9.5-12％的薄膜包衣漿，將素片投入包衣機中，然后加入薄膜包衣漿，使素片包上薄膜衣，得到改善睡眠的褪黑素制劑A。
上述的薄膜包衣劑，包括以下重量份的原料：羥丙甲纖維素3.6份、滑石粉3.6份、二氧化鈦0.8份、1，2-丙二醇1.3份和吐溫-80 1.3份。
實施例2：改善睡眠的褪黑素制劑B的制備
本實施例的改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下原料：褪黑素1kg、淀粉130kg、白砂糖120kg、糊精144kg、滑石粉5kg、硬脂酸鎂2kg、羧甲基纖維素鈉0.5kg和薄膜包衣劑8kg。
改善睡眠的褪黑素制劑B的制備方法同實施例1的制備方法相同。
本實施例的薄膜包衣劑的配方同實施例1的配方相同。
實施例3：改善睡眠的褪黑素制劑C的制備
本實施例的改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下原料：褪黑素2kg、淀粉170kg、白砂糖150kg、糊精70kg、滑石粉2kg、硬脂酸鎂4kg、羧甲基纖維素鈉2kg和薄膜包衣劑12kg。
改善睡眠的褪黑素制劑C的制備方法同實施例1的制備方法相同。
本實施例的薄膜包衣劑的配方同實施例1的配方相同。
實施例4：改善睡眠的褪黑素制劑D的制備
本實施例的改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下原料：褪黑素2kg、淀粉130kg、白砂糖100kg、糊精70kg、滑石粉6kg、硬脂酸鎂6kg、羧甲基纖維素鈉0.2kg和薄膜包衣劑8.8kg。
改善睡眠的褪黑素制劑D的制備方法同實施例1的制備方法相同。
本實施例的薄膜包衣劑的配方同實施例1的配方相同。
實施例5：改善睡眠的褪黑素制劑E的制備
本實施例的改善睡眠的褪黑素制劑，包括以下原料：褪黑素3kg、淀粉130kg、白砂糖156kg、糊精90kg、滑石粉4kg、硬脂酸鎂4kg、羧甲基纖維素鈉2kg和薄膜包衣劑16kg。
改善睡眠的褪黑素制劑E的制備方法同實施例1的制備方法相同。
本實施例的薄膜包衣劑的配方同實施例1的配方相同。
實施例6：褪黑素制劑毒理學安全性評價試驗
對本發(fā)明的實施例1～實施例5的改善睡眠的褪黑素制劑A～E進行毒理學安全性評價試驗。檢驗結(jié)論：1.急性經(jīng)口毒性試驗：以最大給藥量(劑量為30000mg/kg BW)給予改善睡眠的褪黑素制劑后，未見小鼠有中毒癥狀，無動物死亡，試驗結(jié)束解剖動物，大體觀察未見異常，屬無毒物。2.遺傳毒性試驗：三項遺傳毒性試驗(Ames、小鼠骨髓細胞微核試驗、小鼠精子畸形試驗)結(jié)果均為陰性。3.30天喂養(yǎng)試驗：以667、500、333mg/kg BW(分別相當于人體推薦用量100、75、50倍)3個劑量的改善睡眠的褪黑素制劑連續(xù)給大鼠灌胃30天，實驗期間動物的生長發(fā)育良好，各劑量組的動物體重、增重量、進食量、食物利用率、血常規(guī)指標、血生化指標、臟器重量及臟器/體重比值與對照組比較，均無顯著性差異(P>0.05)；大體解剖觀察和組織病理學檢查未見與改善睡眠的褪黑素制劑有關(guān)的異常改變。提示未見該改善睡眠的褪黑素制劑30天喂養(yǎng)對大鼠有毒性作用。
實施例7：褪黑素制劑改善睡眠功能試驗
1材料和方法
1.1樣品：由實施例1制備的改善睡眠的褪黑素制劑A，規(guī)格為0.4g/片。置陰涼干爽通風處保存。人口服推薦用量為每人(成人)每日1次，每次1粒，成人體重按60kg計算，折合劑量為6.7mg/kg BW。
1.2實驗動物與分組：選用廣西醫(yī)科大學醫(yī)學實驗動物中心繁殖的清潔級(II級)健康成年昆明種雄性小鼠192只，體重為18～22克，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK桂2003-0003。每48只小鼠為1組，共4組，分別進行直接睡眠試驗、延長戊巴比妥鈉睡眠時間試驗、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗、巴比妥鈉睡眠潛伏期試驗。
1.3實驗環(huán)境條件：實驗動物室溫度：22～25℃，相對濕度：55～70％。實驗動物使用許可證號：SYXK桂2006-0001。
1.4劑量選擇及改善睡眠的褪黑素制劑A處理：根據(jù)該改善睡眠的褪黑素制劑A的人體推薦用量，設(shè)33.6、67.0、134.0mg/kg BW(分別相當于人體推薦用量的5、10、20倍)3個劑量的試驗組，同時設(shè)一個陰性對照組，每組12只動物。因改善睡眠的褪黑素制劑A難溶于水，故以3％食用淀粉溶液配制。分別稱取0.168、0.335、0.670g改善睡眠的褪黑素制劑A，各加3％食用淀粉溶液至l00mL，混勻、配成1.68、3.35、6.70mg/mL濃度溶液，分別給予相應劑量組動物灌胃，灌胃體積為0.2mL/l0g BW，陰性對照組給予等體積的蒸餾水，每天灌胃一次，連續(xù)30天。
1.5主要儀器與試劑：
儀器：動物臺秤、電子分析天平、秒表等。
試劑：戊巴比妥鈉(批號：F20030816)、巴比妥鈉(批號：20040428)，中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司進口分裝。
1.6實驗方法：
1.6.1直接睡眠試驗：在給末次樣品后觀察小鼠的睡眠情況，以動物的翻正反射消失超過60秒判為進入睡眠，翻正反射恢復即為動物覺醒。結(jié)果用X2檢驗進行統(tǒng)計分析。如試驗組入睡動物數(shù)及睡眠時間增加并與陰性對照組有顯著性差異，即判定該項試驗結(jié)果為陽性。
1.6.2延長戊巴比妥鈉睡眠時間試驗：在給末次樣品20分鐘后，各組動物經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉45mg/kg BW，注射量為0.2mL/20g BW。以動物的翻正反射消失為指標，觀察改善睡眠的褪黑素制劑A能否延長戊巴比妥鈉睡眠時間。結(jié)果用方差分析進行統(tǒng)計分析。如試驗組小鼠的睡眠時間比陰性對照組延長并有統(tǒng)計學意義，即判定該項試驗結(jié)果為陽性。
1.6.3戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗：在給末次樣品20分鐘后，各組動物經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg BW。觀察30分鐘內(nèi)小鼠的睡眠情況，以翻正反射消失60秒以上者為入睡，記錄各組的入睡動物數(shù)，計算入睡動物發(fā)生率。結(jié)果用X2檢驗分析。如試驗組入睡動物發(fā)生率高于陰性對照組并有統(tǒng)計學意義，即判定該項試驗結(jié)果為陽性。
1.6.4巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗：各組動物在給末次樣品后20分鐘經(jīng)腹腔注射巴比妥鈉300mg/kg BW，注射量為0.2mL/20g BW。以翻正反射消失為指標，觀察改善睡眠的褪黑素制劑A能否縮短巴比妥鈉睡眠潛伏期。結(jié)果用方差分析進行統(tǒng)計分析。如試驗組小鼠的睡眠潛伏期比陰性對照組縮短并有統(tǒng)計學意義，即判定該項試驗結(jié)果為陽性。
1.7結(jié)果判定
若延長戊巴比妥鈉睡眠時間實驗、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗、巴比妥鈉睡目民潛伏期實驗三項實驗中二項陽性，且無明顯直接睡眠作用，可判定該改善睡眠的褪黑素制劑A具有改善睡眠功能作用。
2結(jié)果
2.1改善睡眠的褪黑素制劑A對小鼠體重的影響
表1 改善睡眠的褪黑素制劑A改善睡眠功能試驗小鼠體重
注：P值表示各劑量組實驗初始、中期和末期的小鼠體重及增重與對照組比較，差異均無顯著性。
由表1可見，實驗初期、實驗中期、實驗末期改善睡眠的褪黑素制劑A各劑量組的小鼠體重及實驗期間小鼠體重增長與陰性對照組間比較，差異均無顯著性(P>0.05)，表明該改善睡眠的褪黑素制劑A對小鼠的體重增長無明顯影響。
2.2改善睡眠的褪黑素制劑A的直接睡眠作用
從表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的改善睡眠的褪黑素制劑A30天，各劑量組均沒有動物出現(xiàn)翻正反射消失，即全部動物均沒有進入睡眠狀態(tài)，提示該改善睡眠的褪黑素制劑A沒有直接誘導小鼠睡眠的作用。
表2 改善睡眠的褪黑素制劑A小鼠直接睡眠試驗結(jié)果
2.3改善睡眠的褪黑素制劑A對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響
表3 改善睡眠的褪黑素制劑A延長戊巴比妥鈉睡眠時間試驗結(jié)果
從表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的改善睡眠的褪黑素制劑A30天，各劑量組小鼠的睡眠時間均比陰性對照組延長，其中的高、中劑量組與陰性對照組的差異具有顯著性(分別P<0.01和P<0.05)，提示該改善睡眠的褪黑素制劑A具有延長戊巴比妥鈉睡眠時間的作用。
2.4改善睡眠的褪黑素制劑A對戊巴比妥鈉閾下劑量催眠作用的影響
從表4可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的改善睡眠的褪黑素制劑A30天，各劑量組的動物入睡率高于陰性對照組，其中的高劑量組與陰性對照組的差異具有顯著性(P<0.05)，提示該改善睡眠的褪黑素制劑A與閾下劑量的戊巴比妥鈉有協(xié)同催眠的作用。
表4 改善睡眠的褪黑素制劑A戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗結(jié)果
2.5改善睡眠的褪黑素制劑A對巴比妥鈉催眠潛伏期的影響
表5 改善睡眠的褪黑素制劑A巴比妥鈉睡眠潛伏期試驗結(jié)果
從表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的改善睡眠的褪黑素制劑A 30天，各劑量組小鼠的睡眠潛伏期均比陰性對照組的縮短，且各劑量組與陰性對照組的差異均具有顯著性(P<0.01或P<0.05)，提示該改善睡眠的褪黑素制劑A具有縮短巴比妥鈉睡睡眠潛伏期的作用。
3結(jié)果判定
分別以33.6、67.0、134.0mg/kg BW(相當于人體推薦用量的5、10、20倍)劑量的改善睡眠的褪黑素制劑A連續(xù)給小鼠灌胃30天，能延長戊巴比妥鈉睡眠時間、協(xié)同戊巴比妥鈉閾下劑量催眠作用、縮短巴比妥鈉睡眠潛伏期，無直接睡眠作用，對小鼠的體重無影響，提示該改善睡眠的褪黑素制劑A具有改善睡眠的功能。
實施例2～實施例5的褪黑素制劑B～E也得出相同的結(jié)論。