本發(fā)明涉及一種脫氧野尻霉素緩釋制劑及其在ⅱ型糖尿病治療(對餐后血糖調(diào)控)方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

桑葉為桑科桑屬植物桑morusalbal.的葉，明李時珍曾說過︰桑葉乃手、足陽明之藥，汁煎代茗，能止消渴；現(xiàn)代藥理研究證明桑葉具有抑制血糖上升的作用。而進(jìn)一步的研究表明桑葉降糖作用主要來源于其生物堿成分，如fagomine、1,4-dideoxy-1,4-imino-d-arabinitol、zarzissine以及1-脫氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，dnj)等。其中fagomine通過增強(qiáng)受體對胰島素的敏感性來增強(qiáng)胰島素活性從而起到促進(jìn)糖代謝的作用，而1-脫氧野尻霉素(dnj)則是一種化學(xué)結(jié)構(gòu)與葡萄糖相似的多羥基生物堿，是一種高活性的α-糖苷酶抑制劑。dnj通過與小腸刷狀邊緣細(xì)胞上α-糖苷酶的中心位點相結(jié)合，抑制α-糖苷酶對雙糖的水解作用，從而降低體內(nèi)葡萄糖的產(chǎn)生，以此達(dá)到降低血糖的目的。而桑生物堿提取物因富含上述生物堿成分而具有良好的降糖效果。

現(xiàn)有的藥效學(xué)實驗表明僅需較低劑量的dnj即可有效抑制大鼠或人餐后血糖的上升。在以健康大鼠為給藥對象的研究中，與空白組相比，給予dnj的大鼠，在給予等量蔗糖后，血糖水平明顯降；而在用鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型中，研究者發(fā)現(xiàn)給予dnj的實驗組較之對照組，具有更低的餐后血糖水平，這表明dnj對糖尿病大鼠同樣具有降血糖作用。

在以人為實驗對象的進(jìn)一步研究中，相關(guān)數(shù)據(jù)表明含6mgdnj的桑葉提取物即能在2小時內(nèi)顯著降低健康志愿者餐后血糖水平，而對糖類代謝系統(tǒng)受損患者的研究則表明含3mgdnj的桑葉提取物即能起到一定的降糖效果，并且這種效果呈劑量依賴性，同時長時間的服用有利于糖尿病患者的血糖系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。以上這些研究及數(shù)據(jù)均表明dnj作為一種α-糖苷酶抑制劑能在生物個體層面有效降低體內(nèi)餐后血糖。

但體內(nèi)實驗表明dnj腸道消除半衰期短，僅約15min。其經(jīng)口服進(jìn)入腸道后被迅速吸收入血，因此為了維持小腸dnj濃度，延長其對小腸α-糖苷酶的抑制作用，提高其生物利用度，以達(dá)到持續(xù)降低餐后血糖的作用，有必要延緩dnj在腸道的作用時間。

目前關(guān)于dnj以及含dnj的桑提取物的緩釋研究較少，有文獻(xiàn)報道的僅有兩種方式，一種是通過采用凝膠包裹的方式制備含dnj的微囊，另一種則是通過采用cmc-na作為緩釋材料延緩dnj釋放速度。兩者雖然均起到了一定的緩釋效果，但是采用cmc-na作為緩釋材料時，雖然與單純給予dnj相比cmax值有所降低，但auc并未明顯增加，表明所制備的緩釋制劑dnj釋放并不完全，同時其作用時間也較短僅2h。而采用凝膠制備的dnj微囊在3h內(nèi)表現(xiàn)出良好的緩釋能力，但制備過程復(fù)雜，對設(shè)備要求較高。

蒙脫土(montmorillonite，mmt)是一種主要由蒙脫石構(gòu)成的2:1層狀硅酸鹽粘土，目前國內(nèi)外已有許多mmt用于緩釋制劑的研究。與其他常見緩釋材料相比，mmt具有比表面積大以及陽離子交換容量(cec)適宜等特點，其適宜的cec使得mmt對溶液中的生物堿具有良好的選擇性及口服安全等特點。

并且mmt口服進(jìn)入人體后，僅需1～2g即能在幼兒消化道粘膜上形成一層保護(hù)性覆蓋膜，不僅對腸道具有保護(hù)作用，而且可以延長藥物在腸道的作用時間，起到一定的定位釋放作用。同時mmt插層復(fù)合物的釋放是由擴(kuò)散和離子交換兩種形式共同組成的，因此對于dnj等生物堿而言，腸道弱堿性條件更利于dnj-mmt插層復(fù)合物的有效釋放，而且實驗結(jié)果表明復(fù)合物中dnj的釋放速度受到環(huán)境溶液中dnj濃度的影響，即脫氧野尻霉素緩釋制劑中的dnj呈濃度依賴型釋放，因此當(dāng)腸道dnj濃度下降時，脫氧野尻霉素緩釋制劑可以迅速釋放dnj，保證腸道dnj濃度，達(dá)到延緩腸道保留時間的目的。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種脫氧野尻霉素緩釋制劑。可延長dnj在腸道作用時間，增加dnj生物利用度。該脫氧野尻霉素緩釋制劑可根據(jù)腸道環(huán)境中dnj濃度調(diào)整復(fù)合物中dnj的釋放速度，保持腸道一定的dnj濃度，因而可以有效延長dnj體內(nèi)作用時間、增加其降糖作用。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：

所述脫氧野尻霉素緩釋制劑由蒙脫土與桑葉提取物按重量比1:(0.1—10)組成，優(yōu)選比例為1:(1—5)，更優(yōu)選比例為1:3.2。

所述蒙脫土選自鈣蒙脫土、鈉蒙脫土、酸改性蒙脫土或fe-柱撐改性蒙脫土，優(yōu)選為fe-柱撐改性蒙脫土。

所述桑葉提取物中dnj的重量百分比含量≥2％，優(yōu)選地，所述桑葉提取物中dnj的重量百分比含量為20—50％。

所述桑野子提物包括從桑葉、桑枝、桑皮、蠶沙等的提取物，是常規(guī)提取方法對桑葉、桑枝、桑皮、蠶沙等進(jìn)行提取后的所得物。

上述脫氧野尻霉素緩釋制劑的制備方法是將蒙脫土分散在分散溶劑中，所述分散溶劑的重量為蒙脫土重量的20—300倍，優(yōu)選20—200倍，更優(yōu)選為200倍，得蒙脫土分散液，所述分散溶劑為純凈水、去離子水或自來水，更優(yōu)選為去離子水；向蒙脫土分散液中加入桑葉提取物，得溶液，調(diào)節(jié)溶液ph值為1.5至弱堿性，優(yōu)選為1.5—6.0，更優(yōu)選為4.5—6.0，在室溫至100℃，優(yōu)選為100℃條件下攪拌1—8h，優(yōu)選為1—3h，更優(yōu)選為1h，攪拌速度優(yōu)選為25～250r/min，使溶液中桑葉提取物中的dnj進(jìn)入蒙脫土層間；將溶液離心，優(yōu)選的離心條件為3500r/min離心10min，得下層固體，將下層固體干燥并粉碎后過160目篩，即得脫氧野尻霉素緩釋制劑，優(yōu)選地，所述干燥是采取真空干燥、冷凍干燥、噴霧干燥、薄膜真空帶式干燥等方法，所述粉碎是采用研磨、剪切粉碎、納米超微粉碎等方式。優(yōu)選地，調(diào)節(jié)溶液ph值時是用0.1mol/l鹽酸調(diào)節(jié)溶液ph。

所述脫氧野尻霉素緩釋制劑可用于制備治療ⅱ型糖尿病的藥物。

下面對本發(fā)明作進(jìn)一步說明：

本發(fā)明將載體分散在溶劑中；然后將一定配比的富含dnj的桑提取物加至分散體系中，用0.1mol/l鹽酸調(diào)節(jié)溶液ph，加熱攪拌形成復(fù)合物；再通過離心、過濾等方式將復(fù)合物分離出來；最后將分離得到的復(fù)合物進(jìn)行干燥和粉碎，得到復(fù)合物粉末；所述的復(fù)合物即為脫氧野尻霉素緩釋制劑。本發(fā)明采用更加安全靈活的蒙脫土作為給藥載體來達(dá)到延緩dnj腸道作用時間的效果，與公開號cn103070842a(一種米格列醇緩釋片的制備方法)的發(fā)明相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于脫氧野尻霉素緩釋制劑所表現(xiàn)出的緩釋行為，是一種隨環(huán)境中dnj濃度降低而逐步釋放dnj的新型緩釋行為。這一特性與傳統(tǒng)的使藥按一定速度隨時間緩慢釋放相比具有極大的優(yōu)勢。因為從理論上分析，如果蒙脫土的載藥量足夠高，且溶液中dnj濃度降低的過程較為緩慢，則脫氧野尻霉素緩釋制劑可以保持dnj足夠長時間的緩慢釋放，而這一點有利于長效或超長效緩釋制劑的研發(fā)。

為更好闡述本發(fā)明一種脫氧野尻霉素緩釋制劑的作用方式，研究過程中的相關(guān)實驗數(shù)據(jù)如下：

分散溶劑選擇

稱取鈉基蒙脫土5.00g三份，分別加入各自裝有500ml去離子水、純凈水、自來水的1000ml大燒杯中，于40℃下攪拌；待其分散均勻后加入3.20g桑葉提取物(dnj含量0.8g)，各自添加相應(yīng)溶劑至1000ml，攪拌2h，離心(3500r/min)5min，上清液加自來水水補(bǔ)足至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同分散溶劑下蒙脫土的載藥量見表1。

表1不同分散溶劑下蒙脫土對dnj的載藥量(mg/g)

上述實驗結(jié)果表明上述三種不同分散溶劑均能使蒙脫土分散，從而利于dnj的吸附，其中以去離子水效果最佳。

接觸時間

稱取鈉基蒙脫土5.00g，緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，40℃下攪拌；待鈉基蒙脫土分散均勻后加入桑葉提取物3.20g(dnj含量0.8g)，加純凈水至1000ml，攪拌，于不同時間(1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24h)取樣1ml過0.45μm濾膜得樣品溶液，并及時補(bǔ)充1ml預(yù)熱過的緩沖液。取100μl上述樣品加純凈水稀釋至1ml，4℃下避光保存，用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同時間下蒙脫土的載藥量見表2。

表2不同接觸時間下蒙脫土對dnj的載藥量

從表2數(shù)據(jù)可知mmt對溶液中dnj的吸附速度較快，在1h內(nèi)即迅速達(dá)到吸附平衡，此后較長時間內(nèi)，載藥量均無較大變化。因此優(yōu)選接觸時間為1h。

插層溫度

稱取鈉基蒙脫土5.00g三份，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，不同溫度(40、80、100℃)下攪拌；待鈉基蒙脫土分散均勻后加入桑葉提取物3.20g(dnj含量0.8g)，加去離子水至1000ml，攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液稀釋至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存；用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。實驗結(jié)果見表3中組1、組2、組3。

表3不同條件下鈉基蒙脫土對dnj的載藥量(n＝3)

從表3組1、組2、組3、組4的比較可知，雖然不同溫度下mmt對溶液中dnj的吸附能力存在差異，但各溫度下mmt均對dnj有較好吸附，故優(yōu)選插層溫度為100℃。溶液濃度

稱取鈉基蒙脫土5.00g，緩慢加入裝有50ml去離子水的100ml小燒杯中，100℃下攪拌；待其分散均勻后加入桑葉提取物3.20g(dnj含量0.8g)，加去離子水至100ml，攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液稀釋至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。結(jié)果見上表3中組4組5。從上述兩組數(shù)據(jù)可知，分散溶液的體積對mmt吸附能力的影響較小，但因溶液體積較小時不利于mmt的分散，且溶液粘度較大，因此優(yōu)選分散體積為蒙脫土用量的200倍。

投料比

稱取鈉基蒙脫土5.00g四份，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，不同溫度100℃下攪拌；待其分散均勻后加入不同重量(3.20、6.40、16.00、32.00g)桑葉提取物，加去離子水至1000ml，攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液稀釋至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。結(jié)果見上表3中組4、組6、組7、組8。從上述四組數(shù)據(jù)可知，mmt對dnj的載藥量隨溶液中dnj總量的增加而增加，因此較大量的桑葉提取物有利于提高蒙脫土對dnj的載藥量；同時這四組條件中dnj的吸附率分別為28.9％、17.3％、13.9％、11.8％。表明當(dāng)dnj的總量增加時，溶液中dnj的利用率呈降低趨勢，而當(dāng)桑葉提取物用量為mmt用量6.4倍時，dnj的吸附率已低至11.8％。因此綜合考慮mmt對dnj的載藥量與dnj的利用率優(yōu)選桑提物使用量為mmt的3.2-6.4倍。

ph的選擇

稱取鈉基蒙脫土5.00g四份，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中待其分散均勻，加入16.00g桑葉提取物(dnj含量4g)，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)分別調(diào)節(jié)溶液ph至1.5、3.0、4.5、6.0，于100℃下攪拌，加去離子水至1000ml，攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液加去離子水補(bǔ)足至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同分散溶劑下蒙脫土的載藥量見表4。

表4不同ph下蒙脫土對桑提物中dnj的載藥量(mg/g)

從表4中可知在一定的酸性環(huán)境中有利于蒙脫土對dnj的吸附，其中當(dāng)溶液ph約為4.5～6.0時，蒙脫土對dnj的吸附量較大，因此優(yōu)選ph為4.5～6.0之間

載體選擇

分別稱取鈉基蒙脫土、鈣基蒙脫土、fe-柱撐蒙脫土、酸改性蒙頭土各5.00g，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，待其分散均勻后加入16.00g(dnj含量4g)桑提物，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph約為5.0，加去離子水至1000ml，于100℃下攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液加純凈水補(bǔ)足至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同蒙脫土下蒙脫土的載藥量見表5。

表5不同蒙脫土對dnj的載藥量(mg/g)

從表5可知不同蒙脫土均能對溶液中的dnj形成有效吸附，其中以fe-柱撐蒙脫土效果最好，故優(yōu)選fe-柱撐蒙脫土。

不同來源桑提取物的選擇

稱取fe-柱撐蒙脫土5.00g，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，待其分散均勻后加入濃度dnj濃度相近的經(jīng)由桑葉、桑皮、桑枝、蠶沙等的桑提物(dnj含量為4g)，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph約為5.0，加去離子水至1000ml，于100℃下攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液加去離子水補(bǔ)足至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同分散溶劑下蒙脫土的載藥量見表6

表6蒙脫土對不同桑提物中dnj的載藥量(mg/g)

從表6數(shù)據(jù)可知來源不同的桑提物，其dnj均能有效吸附于fe-柱撐蒙脫土，且彼此間差異不明顯，因此桑葉提取物的種類并不影響蒙脫土的吸附效果。

桑提物中dnj含量的選擇

取fe-柱撐蒙脫土5.00g五份，分別緩慢加入裝有500ml去離子水的1000ml大燒杯中，待其分散均勻后加入dnj含量為1.3％、2.7％、9.6％、13.7％、25.1％、52.2％的桑葉提物各16.00g，0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph約為5.0，加純凈水至1000ml，于100℃下攪拌1h，離心(3500r/min)5min，上清液加去離子水補(bǔ)足至1000ml得液體樣品，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。用hplc測定上清液中dnj含量，以計算蒙脫土載藥量，重復(fù)三次。不同分散溶劑下蒙脫土的載藥量見表4。

表7蒙脫土對不同dnj含量桑提物中dnj的載藥量(mg/g)

從表7數(shù)據(jù)可知對不同dnj含量的桑葉提取物，蒙脫土均能對其吸附，并且當(dāng)dnj濃度增加時蒙脫土對dnj的吸附量也相應(yīng)增加。其可能原因是蒙脫土對桑葉提取物中各成分的選擇性較差，因此當(dāng)桑葉提取物中dnj含量較高時蒙脫土載藥量也相應(yīng)增加，故要求桑提物中dnj濃度大于2％，以保證蒙脫土中桑葉提取物的載藥量；同時上述六種條件下dnj的吸附率分別為28.6％、26.8％、25.8％、25.9％、25％、21.9％，可以發(fā)現(xiàn)當(dāng)dnj含量為52.2％時dnj的利用率較前面5組有較明顯降低，其原因可能是蒙脫土層間可交換陽離子趨于飽和，因此優(yōu)選桑提物含量為20～50％

根據(jù)上述不同實驗結(jié)果可知，蒙脫土對溶液中桑提物dnj的吸附，與蒙脫土的種類、分散溶劑種類、環(huán)境溫度、環(huán)境ph值、桑提物的用量以及桑提物中dnj的種類存在較大關(guān)聯(lián)。因此優(yōu)選fe-柱撐蒙脫土作為吸附載體，去離子水作為分散溶劑、調(diào)節(jié)溶液ph4.5～6.0，環(huán)境溫度100℃、3.2倍蒙脫土用量的桑提物含(dnj25.1％)，作為脫氧野尻霉素緩釋制劑的制備條件。

按上述最優(yōu)條件制備脫氧野尻霉素緩釋制劑，并稱取脫氧野尻霉素緩釋制劑樣品3份，各500mg，按《中國藥典》所述方法，于900ml磷酸二氫鉀緩沖液(ph＝6.8)中，在37℃，轉(zhuǎn)速50r/mim的條件下進(jìn)行體外釋放，分別于0.5、1.0、2.0、3.0h取樣1ml，并及時補(bǔ)充1ml預(yù)熱過的緩沖液，結(jié)果表明脫氧野尻霉素緩釋制劑在0.5h內(nèi)已經(jīng)達(dá)到平衡狀態(tài)，平均釋放率＝12.1％(rsd＝1.73％)，即脫氧野尻霉素緩釋制劑中dnj能釋放迅速，但dnj仍未能完全釋放(表8)。

表8釋放度實驗中脫氧野尻霉素緩釋制劑中dnj的釋放率

純凈水中的釋放

稱取50mg脫氧野尻霉素緩釋制劑3份，分別轉(zhuǎn)移至10ml、50ml以及500ml容量瓶中，用純凈水分散、超聲1min，定容至刻度，靜置12h，取適量樣品溶液過0.45μm微孔濾膜，計算不同樣品的dnj釋放率。

緩沖液中的釋放

稱取50mg脫氧野尻霉素緩釋制劑3份，分別轉(zhuǎn)移至10ml、50ml以及500ml容量瓶中，用磷酸二氫鉀緩沖液(naoh調(diào)ph＝7.4)分散、超聲1min，定容至刻度，靜置12h，取適量樣品溶液過0.45μm微孔濾膜，計算不同樣品的dnj釋放率。

鹽酸溶液中的釋放

稱取50mg脫氧野尻霉素緩釋制劑3份，分別轉(zhuǎn)移至10ml、50ml以及500ml容量瓶中，用0.1mol/lhcl水溶液分散、超聲1min，定容至刻度，靜置12h，取適量樣品溶液過0.45μm微孔濾膜，計算不同樣品的dnj釋放率。

純凈水、緩沖液和鹽酸溶液中的釋放結(jié)果見圖1。

累計釋放考察

準(zhǔn)確稱取脫氧野尻霉素緩釋制劑50mg，分別轉(zhuǎn)移至250ml小燒杯中，向燒杯中加入純凈水100ml，分散均勻后靜置15min，過濾，濾液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中并定容至刻度線；濾渣轉(zhuǎn)移至小燒杯中，加100ml純凈水分散，重復(fù)上述操作5次，各處理次數(shù)下dnj累計釋放率見表9。

表9不同分散次數(shù)下dnj-mmt的累計釋放率

該部分體外實驗表明脫氧野尻霉素緩釋制劑可以不同生理ph溶液中快速釋放，但當(dāng)環(huán)境溶液中dnj達(dá)到某一平衡濃度時，脫氧野尻霉素緩釋制劑停止釋放dnj，而當(dāng)環(huán)境溶液中dnj的濃度發(fā)生變化時，脫氧野尻霉素緩釋制劑則會繼續(xù)釋放dnj，以穩(wěn)定溶液中dnj濃度。因此脫氧野尻霉素緩釋制劑是一種濃度依賴型的緩釋復(fù)合物。因此與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

(1)脫氧野尻霉素緩釋制劑中dnj的釋放與環(huán)境溶液中dnj的濃度有關(guān)，當(dāng)環(huán)境中dnj濃度下降時，會促使復(fù)合物中的dnj繼續(xù)釋放，此種釋放機(jī)制有利于維持腸道dnj濃度，更適合于對腸道α-腸苷酶發(fā)揮長效抑制作用，因而延長降糖效果。

(2)本發(fā)明所使用的輔料蒙脫土簡單易控、安全性高，且對腸道具有優(yōu)良的吸附保護(hù)作用，因此能有效保證藥物的定位釋放。

(3)本發(fā)明能耗低、環(huán)境友好，對設(shè)備要求不高，適合于工業(yè)大生產(chǎn)。

本發(fā)明將蒙脫土(mmt)分散在去離子水中，待分散均勻后加入一定量的桑提取物，通過mmt巨大的比表面積和離子交換容量在攪拌條件下吸附提取物中所含的1-脫氧野尻霉素(dnj)，從而形成脫氧野尻霉素緩釋制劑。該脫氧野尻霉素緩釋制劑能在不同生理ph條件的溶液中緩慢釋放，發(fā)揮緩釋作用。本發(fā)明不同于傳統(tǒng)緩釋制劑通過骨架或膜控輔料的使用達(dá)到緩釋效果。本發(fā)明使用的mmt不僅具有極高的安全性，而且對腸道還有良好的保護(hù)作用，同時制備的脫氧野尻霉素緩釋制劑能根據(jù)環(huán)境中dnj的濃度迅速調(diào)整釋放速度，以延長其在腸道的作用時間，可用于二型糖尿病患者的治療。

附圖說明

圖1為純凈水、緩沖液和鹽酸溶液中的釋放結(jié)果。

具體實施方式

以下通過具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行闡述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員依據(jù)以上發(fā)明公開的內(nèi)容，均可實現(xiàn)本發(fā)明的目的。本發(fā)明所用桑提物為桑薄皮提取物，dnj含量為25.1％，購于湖南今漢生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司，其制備過程大致為如下：將桑葉用水提取后，濃縮得到桑葉提取物；然后加入一定量的醇水溶液經(jīng)醇沉除去機(jī)械雜質(zhì)，得到含量較低的桑葉提取物，再通過陽離子交換樹脂，陰離子交換樹脂交互使用得到dnj含量較高的桑葉提取物。

實施例1

稱取fe-柱撐蒙脫土10.00g，緩慢加入裝有1000ml去離子水的2000ml大燒杯中，于100℃下攪拌；待其分散均勻后加入32.00g桑葉提取物，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph至6.0加去離子水至2000ml，攪拌1h，離心(3500r/min)10min，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。經(jīng)計算該次制備的脫氧野尻霉素緩釋制劑dnj的載藥量為199.3mg/g。

實施例2

稱取鈣基蒙脫土10.00g，緩慢加入裝有400ml去離子水的1000ml大燒杯中，于40℃下攪拌；待其分散均勻后加入23.00g桑葉提取物，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph至4.5加去離子水至600ml，攪拌2h，離心(4000r/min)10min，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。經(jīng)計算該次制備的脫氧野尻霉素緩釋制劑dnj的載藥量為143.7mg/g。

實施例3

稱取鈉蒙脫土10.00g，緩慢加入裝有600ml去離子水的1000ml大燒杯中，于80℃下攪拌；待其分散均勻后加入19.00g桑葉提取物，用0.1mol/l的鹽酸溶液(去離子水配制)調(diào)節(jié)溶液ph至5.5加去離子水至1000ml，攪拌1h，離心(3500r/min)10min，下層固體于65℃下干燥，研磨，過160目篩，得脫氧野尻霉素緩釋制劑粉末，干燥保存。經(jīng)計算該次制備的脫氧野尻霉素緩釋制劑dnj的載藥量為168.9mg/g。

實施例4

對本發(fā)明脫氧野尻霉素緩釋制劑延緩dnj釋放達(dá)到延長降糖效果的實驗研究。

1實驗材料

1.1動物sd雄性大鼠，體重330～350g，清潔級；由湖南省斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司提供，許可證號為scxk(湘)2013-0004。

1.2藥物蔗糖、桑葉提取物(dnj含量25.1％)，脫氧野尻霉素緩釋制劑(dnj載藥量101.3mg/g)

2實驗環(huán)境實驗動物飼養(yǎng)室溫度20-25℃，相對濕度45％-75％

3實驗方法與結(jié)果

取雄性sd大鼠隨機(jī)分為3組，每組6只，分別為空白組、桑葉提取物組及脫氧野尻霉素緩釋制劑組?？瞻捉M按500mg/kg給予蔗糖溶液，桑葉提取物組給藥12mg(含dnj3mg)，脫氧野尻霉素緩釋制劑組給藥30mg(含dnj3mg)，兩組均在給藥后0.25h按500mg/kg給予蔗糖溶液，上述三組均在給予蔗糖后0.25、0.5、1、2、3h，眼眶取血，并測定血液中葡萄糖含量變化。

表10不同處理組大鼠血漿中葡萄糖含量

從表3可以看出，給予脫氧野尻霉素緩釋制劑的大鼠在較長時間內(nèi)均保持較低的血糖水平，表明脫氧野尻霉素緩釋制劑對餐后血糖的作用效果優(yōu)于桑葉提取物，提示脫氧野尻霉素緩釋制劑具有良好的緩釋效果。