本發(fā)明涉及一種內(nèi)服用組合物。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代社會(huì)中，有因長期營養(yǎng)攝取量過多，運(yùn)動(dòng)不足等各種原因而造成體內(nèi)脂肪堆積的傾向。體內(nèi)脂肪堆積過多可能會(huì)增加高血壓，高血糖，脂質(zhì)異常癥等各種的癥狀的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。因此，建立一個(gè)可以不費(fèi)力地降低體脂的技術(shù)是一個(gè)很大的課題。
已知有各種材料作為食材能夠降低內(nèi)臟脂肪。據(jù)報(bào)道，通過長期攝入茶葉中的兒茶素對(duì)飲食性肥胖有效(非專利文獻(xiàn)1)。此外，有報(bào)道多酚加強(qiáng)的烏龍茶飲料，有著可以抑制餐后血清甘油三酯上升的作用(非專利文獻(xiàn)2)。另一方面，乳鐵蛋白是存在于奶中的微量蛋白質(zhì)，其水解物具有抗菌作用(非專利文獻(xiàn)3)，而且，健康受試者口服含有牛乳鐵蛋白的膠囊，可表現(xiàn)出免疫活化的作用(非專利文獻(xiàn)4)。還報(bào)道有乳鐵蛋白的腸溶劑能抑制脂肪蓄積并通過分解堆積的脂肪而降低內(nèi)臟脂肪(非專利文獻(xiàn)5，6和7)。
巖藻黃質(zhì)是褐藻類的海藻，是微藻類的生物體中以高濃度含有的一種類胡蘿卜素。非專利文獻(xiàn)8中記載了，含有巖藻黃質(zhì)的成分能夠降低非糖尿病肥胖婦女的體重、減少體脂肪和肝臟的脂肪含量。非專利文獻(xiàn)9和專利文獻(xiàn)1公開了巖藻黃質(zhì)的作用機(jī)制。即，脂肪燃燒蛋白u(yù)cp1(線粒體解偶聯(lián)蛋白)通常在白色脂肪細(xì)胞中不能表達(dá)，但巖藻黃質(zhì)能增加其表達(dá)。在另一方面，本來褐色脂肪細(xì)胞中可以高度表達(dá)ucp1，通過巖藻黃質(zhì)可以進(jìn)一步增加表達(dá)。
現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
專利文獻(xiàn)
【專利文獻(xiàn)1】jp2010-270021a
非專利文獻(xiàn)
【非專利文獻(xiàn)1】internationaljournalofobesity(2002)26,1459-1464
【非專利文獻(xiàn)2】藥理與治療32(6),335-342(2004)
【非專利文獻(xiàn)3】jdairysci1991；74:4137-4142
【非專利文獻(xiàn)4】archimmunoltherexp(warsz)1998；46；231-240
【非專利文獻(xiàn)5】brjnutr(2010)104、1688-95
【非專利文獻(xiàn)6】brjnutr(2011)105、200-11
【非專利文獻(xiàn)7】bioscibiotechnolbiochem(2013)77、566-71
【非專利文獻(xiàn)8】diabetesobesmetab(2010)12、72-81
【非專利文獻(xiàn)9】archbiochembiophys(2010)504、17-25
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
發(fā)明解決的技術(shù)問題
但是，乳鐵蛋白是一種微量蛋白質(zhì)，作為在實(shí)際中能夠使用的原材料，絕不能說是可以以充足的量供應(yīng)。因此希望研發(fā)出一種方法，能夠不受使用量大小的牽扯而發(fā)揮出乳鐵蛋白的原有效果，發(fā)揮出脂肪降低效果。
但是，關(guān)于巖藻黃質(zhì)，只報(bào)道有其具有可單獨(dú)降低脂肪的效果，至于其與其他成分的組合、以及至少與其它成分組合使用能否提高脂肪降低效果并不清楚。
本發(fā)明的課題在于找到能夠表現(xiàn)出良好的脂肪降低效果的內(nèi)服用組合物。
解決技術(shù)問題的手段
本發(fā)明提供以下[1]～[13]。
[1]內(nèi)服用組合物，其含有成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。
[2]如[1]所述的內(nèi)服組合物，其中，成分(b)的含量相對(duì)于成分(a)的含量的比率為0.0001以上且小于0.3。
[3]體脂肪減少劑，其以成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物作為活性成分的。
[4]體重減輕促進(jìn)劑，其以成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物作為活性成分。
[5]血中中性脂肪減少劑，其以成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物作為活性成分。
[6]血中游離脂肪酸減少劑，其以成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)作為活性成分。
[7]如[3]～[6]任一項(xiàng)所述的劑，其中，成分(b)的含量相對(duì)于成分(a)的含量的比率為0.0001以上且小于0.3的。
[8]如[1]或[2]所述的組合物，或如[3]～[6]任一項(xiàng)所述的劑，其中，成分(a)的使用量為10mg～2000mg/日。
[9]如[1]或[2]所述的組合物，或如[3]～[6]任一項(xiàng)所述的劑，其中，成分(b)的使用量為0.01mg～10mg/日。
[10]預(yù)防、改善或治療高血壓、高血糖、脂質(zhì)異常癥的方法，其中，對(duì)需要的受試者施用成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。
[11]如[10]所述的方法，其中，需要的受試者是肥胖癥或脂質(zhì)異常癥的患者。
[12]組合物的非醫(yī)療用途，其中，所述組合物為選自體脂肪減少劑、體重減輕促進(jìn)劑、血中中性脂肪減少劑和血中游離脂肪酸減少劑中的一種以上，所述組合物含有成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。
[13]組合物的使用，是組合物在預(yù)防、改善或治療高血壓，高血糖或脂質(zhì)異常癥中的使用，所述組合物含有成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。
發(fā)明效果
根據(jù)本發(fā)明，可以提供一種能夠?qū)崿F(xiàn)選自體脂肪減少效果、中性脂肪降低效果、體重減少效果及游離脂肪酸降低效果至少其一的內(nèi)服用組合物。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物含有成分(a)：乳鐵蛋白和成分(b)：巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。
成分(a)是乳鐵蛋白。
乳鐵蛋白的來源和制備方法沒有特別限制，舉例如來源于哺乳動(dòng)物的乳鐵蛋白、來源于植物的乳鐵蛋白、人工制造的乳鐵蛋白等。乳鐵蛋白也可以是市售的產(chǎn)品。
哺乳動(dòng)物舉例如人類，馬，牛，綿羊，山羊等。來源于哺乳動(dòng)物乳汁的乳鐵蛋白的生產(chǎn)方式舉例有通過常規(guī)方法(例如，離子交換層析)對(duì)哺乳動(dòng)物乳汁(例如初乳，過渡乳，常乳，末期乳)或脫脂乳，乳清等乳處理物分離出乳鐵蛋白的方法。植物舉例有番茄，稻谷，煙草等。
乳鐵蛋白可以含有金屬離子。即，組分(a)可以是無鐵型乳鐵蛋白(不包含金屬離子的乳鐵蛋白)和富鐵型乳鐵蛋白(含有金屬離子的乳鐵蛋白)的任一種或兩種?？梢院薪饘匐x子的乳鐵蛋白沒有特別限定，可以是例如鐵離子和銅離子，優(yōu)選鐵離子。乳鐵蛋白含有金屬離子的情況下，對(duì)其量沒有限制，可以是一個(gè)或兩個(gè)以上。富鐵型乳鐵蛋白舉例如鐵乳鐵蛋白(乳鐵蛋白的一個(gè)分子中具有三個(gè)以上的鐵離子的乳鐵蛋白)。
乳鐵蛋白的人工制造方法舉例如基因重組技術(shù)等生物學(xué)方法、化學(xué)合成等化學(xué)方法。
成分(a)可以是單獨(dú)一種的乳鐵蛋白，也是可以是兩種以上乳鐵蛋白的組合。乳鐵蛋白根據(jù)易得性、成本低等因素，優(yōu)選為來源于牛乳的乳鐵蛋白(牛乳鐵蛋白)。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物中的成分(a)的含量沒有特別限定，下限值優(yōu)選為0.1質(zhì)量％以上，更優(yōu)選為0.5質(zhì)量％以上，進(jìn)一步優(yōu)選為1質(zhì)量％以上。成分(a)的含量的上限值，一般在70質(zhì)量％以下，優(yōu)選為50質(zhì)量％以下，更優(yōu)選為40質(zhì)量％以下。
成分(b)是巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物。巖藻黃質(zhì)的代謝物舉例如巖藻黃醇及amarouciaxanthin。巖藻黃質(zhì)及其代謝物的來源及生產(chǎn)方法并無特別限制，可以是天然物由來、人工制造品以及市售品中的任一種。
天然物舉例如藻類。藻類舉例如：海帶、銅藻、羊棲菜、海蘊(yùn)、裙帶菜等褐藻類、石莼、青海菜等綠藻類、紫菜、石花菜等紅藻類、微細(xì)藻類。天然物優(yōu)選為褐藻類。
從天然物中獲得的巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物的方法并無特別限定，例如可列舉：使用萃取劑從天然物中進(jìn)行萃取，之后根據(jù)需要進(jìn)行精制的方法。
萃取溶劑只要是可以從天然物中萃取出巖藻黃質(zhì)和/或其代謝物的即可，并沒有特別限定，例如可以是：水；醇(甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等)；酮(丙酮、甲基乙基酮等)；乙腈；醚(二乙醚，二異丙醚，二甘醇二乙醚，四氫呋喃等)；鹵代烴(二氯甲烷，氯仿等)；酯類(乙酸乙酯等)；脂肪烴(戊烷，己烷，環(huán)己烷等)；芳香烴(苯，甲苯，二甲苯等)；這些溶劑的兩種以上的混合物。萃取溶劑優(yōu)選含有醇，醚，脂族烴和水中選擇的一種以上的溶劑，更優(yōu)選為乙醇，己烷和鹽水的混合溶劑、二乙醚。萃取可以是一次也可進(jìn)行兩次，優(yōu)選進(jìn)行兩次。第1次萃取溶劑優(yōu)選為乙醇、己烷和鹽水的混合溶劑，第2次萃取溶劑優(yōu)選為二乙醚。
精制只要通過色譜法及/或再結(jié)晶來進(jìn)行即可。色譜法的展開溶劑可以是例如己烷和丙酮的混合溶劑。再結(jié)晶的方法可以是例如：將樣品溶解于丙酮等溶劑中并靜置后，通過減壓、加熱等方法將溶劑蒸餾去除，其后冷卻而進(jìn)行再結(jié)晶的方法。
人工制造方法可以是例如基因重組技術(shù)等生物學(xué)方法、化學(xué)合成等化學(xué)方法。
巖藻黃質(zhì)及其代謝物的純度并無特別限定。純度沒有必要為100％，例如可以是30％以下，70％以下以及90％以下的任一種。純度也可以通過精制來調(diào)整。精制的方法并無特別限定，舉例如使用溶劑萃取、柱色譜法和再結(jié)晶。
巖藻黃質(zhì)及其代謝物的形態(tài)并無特別限定，例如可列舉油狀形態(tài)、結(jié)晶形態(tài)以及非晶形態(tài)。
成分(b)可為選自所述組群中的單獨(dú)一種，也可以是兩種以上的巖藻黃質(zhì)的組合或混合物。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物中的成分(b)的含量并無特別限定，下限值優(yōu)選為0.0001質(zhì)量％以上，更優(yōu)選為0.0005質(zhì)量％以上，進(jìn)一步優(yōu)選為0.001質(zhì)量％以上。成分(b)的含量的上限值通常為10質(zhì)量％以下，優(yōu)選為5質(zhì)量％以下，更優(yōu)選為3質(zhì)量％以下。
內(nèi)服用組合物中也可以添加含有成分(b)的組合物。該組合物可以是例如所述的天然物、其萃取物以及精制物。含有成分(b)的組合物可添加一種或兩種以上。在添加該組合物的情況下，內(nèi)服用組合物中的成分(b)的含量并非該組合物的含量，而是指該組合物所含的成分(b)的含量。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的使用量并無特別限定，可根據(jù)所施用的動(dòng)物的條件(例如種類、體重、年齡、癥狀的嚴(yán)重程度等)、可獲得所需的效能、控制成本、保證安全性等因素進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑O(shè)定。例如對(duì)人施用時(shí)，成分(a)的使用量通常為10mg～2000mg/日，優(yōu)選為50mg～900mg/日，更優(yōu)選為100mg～600mg/日。成分(b)的使用量通常為0.01mg～10mg/日，優(yōu)選為0.1mg～5mg/日，更優(yōu)選為0.3mg～3mg/日。
成分(b)的含量相對(duì)于成分(a)的含量的比率(固體成分換算的質(zhì)量比：(b)/(a))并無特別限定，可根據(jù)以下等理由進(jìn)行適當(dāng)設(shè)定：可發(fā)揮體脂肪減少作用，血中中性脂肪減少作用、體重減輕促進(jìn)作用、血中游離脂肪酸減少作用等作用，抑制成本等。(b)/(a)的下限值優(yōu)選為0.0001以上，更優(yōu)選為0.0005以上，進(jìn)一步優(yōu)選為0.001以上。上限值優(yōu)選為小于0.3，更優(yōu)選為小于0.1。(b)/(a)優(yōu)選為0.001以上且小于0.3，更優(yōu)選為0.0005以上且小于0.3，進(jìn)一步優(yōu)選為0.001以上且0.1以下。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的施用對(duì)象通常為哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物可以是例如：人、家畜(例如馬、牛、綿羊、豬、山羊、驢)、寵物(例如狗、貓)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(例如豚鼠、小鼠、倉鼠、大鼠、家兔)等。其中，優(yōu)選為人。近年來由于代謝異常癥侯群(metabolicsyndrome)成為問題等原因，優(yōu)選為寵物。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可減少脂肪。所謂的減少脂肪，可以是例如：施用對(duì)象攝取內(nèi)服用組合物時(shí)，施用對(duì)象的脂肪減少；施用對(duì)象同時(shí)攝取內(nèi)服用組合物與其他食品時(shí)，可防止施用對(duì)象的脂肪增加。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可減少體脂肪。體脂肪可以是內(nèi)臟脂肪，也可以指皮下脂肪，也可以為此兩者，但優(yōu)選為內(nèi)臟脂肪。所述的減少體脂肪，是指與應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前的施用對(duì)象的體脂肪量相比較，應(yīng)用后的該量減少。
體脂肪減少可以通過應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前后的體脂肪量的指標(biāo)的變化來確認(rèn)。體脂肪量的指標(biāo)可以是例如體脂肪的面積，腹圍，體脂肪率，皮下脂肪量等數(shù)值。體脂肪的面積以及皮下脂肪量只要根據(jù)腹部周邊截面的電腦斷層攝影法所得的圖像(ct圖像)來算出即可。腹圍只要對(duì)施用對(duì)象進(jìn)行測定即可。體脂肪率只要根據(jù)由生物阻抗法所得的測定結(jié)果來推測即可。體脂肪的定量也可以使用市售試劑盒來進(jìn)行。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可減少中性脂肪。中性脂肪為甘油和飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸等脂肪酸的酯，可以是例如三甘油酯、二甘油酯和單甘油酯。所述的減少中性脂肪，是指與應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前的施用對(duì)象的全身或局部的中性脂肪量相比較，應(yīng)用后的相應(yīng)脂肪量減少。
施用對(duì)象的局部的中性脂肪量減少的情形下，“局部”并沒有特別限定，可以是例如循環(huán)器官或其局部(例如心臟、血管)、血液或其它成分(例如血清、血漿)、體脂肪或其局部、肝臟或其局部。這些中，優(yōu)選為血液或其局部，更優(yōu)選為血漿。
關(guān)于中性脂肪減少，可分別測定應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前后的中性脂肪量而確認(rèn)。對(duì)中性脂肪進(jìn)行定量的方法可以是例如：利用酵素(例如脂蛋白激酶)或堿(例如甲醇性koh)將中性脂肪分解為甘油與脂肪酸，根據(jù)所生成的甘油對(duì)中性脂肪間接地進(jìn)行定量，或測定脂肪酸的產(chǎn)量而對(duì)中性脂肪直接地進(jìn)行定量的方法。根據(jù)甘油的產(chǎn)量對(duì)中性脂肪間接進(jìn)行定量的方法可列舉：使用酵素等將甘油轉(zhuǎn)變成3磷酸甘油，由3磷酸甘油定量地生成色素，測定色素的溶度，從而對(duì)中性脂肪進(jìn)行定量的方法；將中性脂肪分解為甘油與脂肪酸，對(duì)所生成的游離的脂肪酸進(jìn)行定量，從而對(duì)中性脂肪進(jìn)行定量的方法。中性脂肪的定量也可以通過市售試劑盒來進(jìn)行。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可促進(jìn)體重的減輕。關(guān)于促進(jìn)體重的減輕，可分別測定應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前后的體重而確認(rèn)。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可減少游離脂肪酸。游離脂肪酸是指存在于生物體內(nèi)的脂肪酸中的非酯類物。減少游離脂肪酸，是指與應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前的施用對(duì)象的全身或局部的中性脂肪量相比較，應(yīng)用后的相應(yīng)量減少。
施用對(duì)象的局部的游離脂肪酸量減少的情形下，“局部”并沒有特別限定，可與關(guān)于中性脂肪所說明的“局部”的定義相同。
關(guān)于游離脂肪酸減少，可分別測定應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物前后的游離脂肪酸量而確認(rèn)。游離脂肪酸的定量只要根據(jù)常用方法進(jìn)行即可，也可以使用市售試劑盒進(jìn)行。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可以減少體脂肪。因此，本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的攝取目的可以舉例如：減少堆積的體脂肪、預(yù)防體脂肪的堆積、緩和體脂肪的增加、預(yù)防肥胖、改善肥胖、代謝癥候群(metabolicsyndrome)等可能因體脂肪的增加所引起的疾病的預(yù)防及/或緩和。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可減少中性脂肪。因此，本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的攝取目的可以舉例如：減少堆積的中性脂肪、預(yù)防中性脂肪的堆積、緩和中性脂肪的增加、預(yù)防肥胖、改善肥胖、減少中性脂肪從而預(yù)防及/或緩和代謝癥候群(metabolicsyndrome)、脂質(zhì)異常癥、糖尿病、心血管系疾病(例如動(dòng)脈硬化、狹心癥)、肝疾病(例如脂肪肝、肝硬化)等疾病。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的施用對(duì)象的健康狀態(tài)并無特別限制。另外，可以是實(shí)際上體內(nèi)可以已經(jīng)堆積了體脂肪、中性脂肪等脂肪，也可沒有堆積脂肪。本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可由施用對(duì)象自身根據(jù)上述所述示例的目的依自身意愿而服用，也可以依據(jù)施用對(duì)象周圍的人的期望而使施用對(duì)象按照上述所示例的目的攝取。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的施用途徑?jīng)]有特別限定，可以是經(jīng)口施藥，即通過口服而施用。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的施用方法可根據(jù)活性成分的濃度、劑型、施用對(duì)象(例如年齡、體重、性別、健康狀態(tài)、脂肪堆積程度)等條件而適當(dāng)設(shè)定。劑型為片劑的情形時(shí)的施用方法可以是例如與水等一并服用的方法。施用間隔可適當(dāng)設(shè)定，可為餐前、餐后、進(jìn)餐同時(shí)及兩餐之間的任一種。優(yōu)選為開始運(yùn)動(dòng)(sports)前施用。因此，可以進(jìn)一步促進(jìn)運(yùn)動(dòng)的脂肪燃燒。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物也可以含有任意成分。任意成分可舉例如：賦形劑，稀釋劑，緩沖劑，增香劑，著色劑，調(diào)味劑，甜味劑，粘合劑，表面活性劑，增稠劑，潤滑劑，懸浮劑，防腐劑，抗氧化劑，研磨劑，潤濕劑，粘結(jié)劑，ph調(diào)節(jié)劑，光澤劑，藥物成分，溶劑、其它內(nèi)服用組合物中常用的輔助成分等、藥理學(xué)上可容許的載體。任意成分可以為一種也可以為兩種以上。任意成分可根據(jù)劑型而適當(dāng)選擇。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的劑型可是小型片劑，片劑，散劑，顆粒劑，小包劑(sachet)，微膠囊劑，膠囊劑，膠劑等固體形態(tài)；水溶液，懸浮液，糖漿劑，乳劑等液體形態(tài)；半液體狀，霜狀，糊狀，凝膠狀等狀態(tài)；將小型片劑，散劑，顆粒劑，微膠囊劑等固體形態(tài)，半液體狀，霜狀，糊劑或凝膠狀等形態(tài)封入膠囊、無縫膠囊中而形成的丸劑的形態(tài)。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的劑型優(yōu)選為片劑，更優(yōu)選為腸溶劑。是否為腸溶劑可根據(jù)日本藥典第14修訂版-崩解實(shí)驗(yàn)法來確認(rèn)。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物的制造方法并無特別限定，可根據(jù)劑型而適當(dāng)選擇。劑型為片劑的情形的制造方法舉例如：將乳鐵蛋白、巖藻黃質(zhì)及根據(jù)需要可調(diào)配的任意成分混合，將所得混合物壓縮成形而獲得片劑的方法；進(jìn)一步通過由腸溶性成分將所述壓縮成形后的所得的片劑包衣的方法(制成腸溶劑的方法)，優(yōu)選為后者的方法。
腸溶性成分舉例如：藻酸鹽，蟲膠，羥甲基纖維素鄰苯二甲酸酯，羧甲基纖維素，鄰苯二甲酸醋酸纖維素，乙基纖維素，氨基烷基甲基丙烯酸酯共聚物等甲基丙烯酸共聚物，啤酒酵母細(xì)胞壁(例如商品名yeastrap)，木薯淀粉，明膠，果膠等。
關(guān)于本發(fā)明的內(nèi)服用組合物，可將其自身直接施用于施用對(duì)象，也可以添加至食品或食品組合物(例如功能性食品)、醫(yī)藥或醫(yī)藥組合物等中而施用。
本發(fā)明的內(nèi)服用組合物可作為食品添加組合物。本發(fā)明的食品添加組成物可進(jìn)一步含有食品添加組合物中所含的任意成分。本發(fā)明的食品添加組合物作為食品添加物，可接受來自公共機(jī)構(gòu)的指定，也可不接受指定。
醫(yī)藥可為所述的醫(yī)藥品，也可以是準(zhǔn)藥品。
對(duì)食品并無特別限定，可為健康食品、功能性食品、保健功能食品、特定保健用食品、營養(yǎng)功能食品及營養(yǎng)輔助食品的任一種，也可以是限定對(duì)象者的食品(例如嬰兒用食品、老人用食品、患者用食品)。
在應(yīng)用本發(fā)明的內(nèi)服用組合物時(shí)，可以與其他體脂肪減少劑、中性脂肪減少劑、脂質(zhì)異常癥藥等藥劑一起應(yīng)用。也可以將應(yīng)用發(fā)明的內(nèi)服用組合物的與食物療法、運(yùn)動(dòng)療法等療法相組合應(yīng)用。
成分(a)以及成分(b)作為體脂肪減少劑的活性成分有用。本發(fā)明的體脂肪減少劑也可以含有成分(a)以及成分(b)以外的任意成分，任意成分與關(guān)于內(nèi)服用組合物所說明的任意成分相同。體脂肪減少的定義、體脂肪減少劑的攝取目的、施用對(duì)象及其健康狀態(tài)、施用方法、任意成分、制造方法、作為食品及醫(yī)藥的用途與關(guān)于內(nèi)服用組合物的各說明相同。
成分(a)以及成分(b)作為中性脂肪減少劑的活性成分而有用。本發(fā)明的中性脂肪減少劑也可以含有成分(a)以及成分(b)以外的任意成分，任意成分與關(guān)于內(nèi)服用組合物所說明的任意成分相同。中性脂肪減少的定義、中性脂肪減少劑的攝取目的、施用對(duì)象及其健康狀態(tài)、施用方法、任意成分、制造方法、作為食品及醫(yī)藥的用途與關(guān)于內(nèi)服用組合物的各說明相同。
成分(a)以及成分(b)作為體重減輕促進(jìn)劑、肥胖預(yù)防或抑制劑的活性成分而有用。該制劑也可以含有成分(a)以及成分(b)以外的任意成分，任意成分與關(guān)于內(nèi)服用組合物所說明的任意成分相同。施用對(duì)象及其健康狀態(tài)、施用方法、任意成分、制造方法、作為食品及醫(yī)藥的用途與關(guān)于內(nèi)服用組合物的各說明相同。
本發(fā)明的制劑的施用形態(tài)并沒特別限定，例如可列舉：口服施用(例如口腔內(nèi)施用、舌下施用等)、非口服施用(靜脈內(nèi)施用、肌肉內(nèi)施用、皮下施用、經(jīng)皮施用、經(jīng)鼻施用、經(jīng)肺施用等)等。其中，優(yōu)選為侵襲性小的施用形態(tài)，更優(yōu)選為口服施用，進(jìn)一步優(yōu)選為作為食品而口服施用。
實(shí)施例【0063】以下，使用實(shí)施例對(duì)本發(fā)明加以更詳細(xì)的說明，但本發(fā)明不限定于該實(shí)施例。實(shí)施例中，“％”只要無特別說明，則表示為“質(zhì)量％”。
[制造例1]來源于海帶的巖藻黃質(zhì)的制造
通過以下順序制備在實(shí)施例中使用的來源于海帶的巖藻黃質(zhì)(fx)。
1)萃取步驟(粗制巖藻黃質(zhì)的制備)
在分液漏斗中加入500g巖藻黃質(zhì)1％油(南方產(chǎn)品股份有限公司制造，來源于海帶)500g己烷、500g甲醇和50g飽和鹽水，混合1分鐘后，靜置10分鐘，回收下層(暗紅色)。對(duì)剩余的上層(深綠色)，加入250g甲醇和25g飽和鹽水，并進(jìn)行相同的操作，回收下層。將回收的下層和250g己烷在分液漏斗中混合，靜置10分鐘后，回收下層并用蒸發(fā)器濃縮至干，以獲得固體份。將所得的固體份溶解于250g二乙醚中并置入分液漏斗中，混合100g水并靜置10分鐘。收集上層(暗紅色)，在硫酸鈉中干燥并通過濾紙過濾，用蒸發(fā)器將所得濾液濃縮至干，從而得到粗制的巖藻黃質(zhì)(17g，巖藻黃質(zhì)純度：28％，巖藻黃質(zhì)回收率：95％)。將粗制的巖藻黃質(zhì)應(yīng)用于下述工序2。
2)色譜法精制工序(精制巖藻黃質(zhì)的制備)
將粗制的巖藻黃質(zhì)(9g)溶解在50ml的己烷/丙酮＝50/50(v/v)中，并通過硅膠色譜法
3)再結(jié)晶工序(制備高純度的巖藻黃質(zhì))
將精制的巖藻黃質(zhì)(3.5g)溶解在最小量的丙酮中，添加適當(dāng)量的水，使用蒸發(fā)器以不析出晶體的程度蒸餾除去丙酮。此后，將溶液冰浴冷卻并靜置直至生成結(jié)晶。以己烷為清洗液進(jìn)行抽吸過濾，使結(jié)晶干燥，獲得高純度的巖藻黃質(zhì)(2g，巖藻黃質(zhì)純度：83％，巖藻黃質(zhì)回收率：99％)。
該制造例的各工序的產(chǎn)物中的巖藻黃質(zhì)的純度的確認(rèn)是通過高效液相色譜法來進(jìn)行。測定條件如下所示。
樣品：精確稱量20mg，用乙醇稀釋至50ml，導(dǎo)入10ul所獲得溶液。
柱：inertsilods-3(5μm，4.6mm(i.d.)×150mm)
流動(dòng)相：甲醇/水＝85/15(0分鐘～)，100/0(8分鐘～)，100/0(35分鐘～)
流量：1.0ml/min
烘箱：60℃
檢測器：uv-vis(440nm)
該制造例中的每個(gè)步驟中的巖藻黃質(zhì)的回收率，由下面的方程算出：
回收率＝各工程的產(chǎn)物中的巖藻黃質(zhì)重量/各工程的處理前的試樣中的巖藻黃質(zhì)重量
巖藻黃質(zhì)的重量是樣品的重量乘以如上所述測定的巖藻黃質(zhì)的純度來計(jì)算得出。此外，各精制步驟中的處理前的樣品，分別為巖藻黃質(zhì)1％油，粗制巖藻黃質(zhì)、精制巖藻黃質(zhì)。
[實(shí)施例1和實(shí)施例2]
使用kk-ay小鼠(雄性，5周齡)作為肥胖動(dòng)物模型，進(jìn)行體重、體脂肪減少、和中性脂肪和游離脂肪酸的減少的評(píng)價(jià)。
在常規(guī)食品(ain93g：rearchdiet公司制造)中分別以質(zhì)量比1重量％和0.1％重量％的濃度混合乳鐵蛋白(frieslandcampina：dmv公司)及制造例1中所得的來源于海帶的巖藻黃質(zhì)(純度99％)的飼料。使小鼠自由攝取該飼料4周(lf1％+fx0.1％群，n＝7)(實(shí)施例1)。與實(shí)施例1相同地，在常規(guī)食品中分別以質(zhì)量比1重量％和0.001％重量％的濃度混合有乳鐵蛋白及制造例1中所得的來源于海帶的巖藻黃質(zhì)(純度99％)的飼料。使小鼠自由攝取該飼料4周(lf1％+fx0.001％群，n＝7)(實(shí)施例2)。然后，麻醉下采取各小鼠的腹部周邊(從第二胸骨向上至骶骨)的ct圖像。采集ct圖像時(shí)，使用x射線ct裝置(smx-100ct：由島津制作所股份有限公司制造)。從ct圖像計(jì)算內(nèi)臟脂肪面積(cm2)和皮下脂肪面積(cm2)。斷食16小時(shí)后進(jìn)行各小鼠的體重測定。然后，從腹部大靜脈回收血液，制備血漿。使用甘油三酯e-testwako(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社制造)及nefa-c-testwako(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社制造)，對(duì)血漿中的脂質(zhì)濃度(三甘油酯的濃度及游離脂肪酸的濃度)進(jìn)行定量。算出內(nèi)臟脂肪面積、皮下脂肪量和體重的各自平均值。
[比較例1]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為1質(zhì)量％的乳鐵蛋白的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(lf1％群，n＝7)。
[比較例2]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為5質(zhì)量％的乳鐵蛋白的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(lf5％群，n＝7)。
[比較例3]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為0.1質(zhì)量％的巖藻黃質(zhì)的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(fx0.1％群，n＝7)。
[比較例4]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為0.001質(zhì)量％的巖藻黃質(zhì)的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(fx0.1％群，n＝7)。
[比較例5]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為0.1質(zhì)量％的生姜萃取物(日本粉末藥品股份有限公司)的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(gin0.1％群，n＝7)。
[比較例6]
使用在常規(guī)食品中添加了質(zhì)量比為1質(zhì)量％的乳鐵蛋白和0.1質(zhì)量％的生姜萃取物(日本粉末藥品股份有限公司)的飼料來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1以相同的方式評(píng)價(jià)(lf1％+gin0.1％群，n＝7)。
使用常規(guī)食品來代替實(shí)施例中所用的飼料，除此之外，與實(shí)施例1同樣的進(jìn)行評(píng)價(jià)而作為對(duì)照群(n＝7)。根據(jù)將對(duì)照群的各測定值設(shè)定為100％時(shí)的各實(shí)施例的各測定值的比例，算出相對(duì)于對(duì)照群的各測定值的減少率(％)。將各實(shí)施例中的內(nèi)臟脂肪面積、皮下脂肪量及體重的各減少率表示于表1中。將各實(shí)施例的三甘油酯及游離脂肪酸的各減少率表示于表2中。
【表1】表1.體重及脂肪的減少率
【表2】表2.血漿中的脂質(zhì)濃度的減少率
lf1％群(比較例1)中，lf5％群(比較例2)和fx0.1％群(比較例3)中的各減少率相比較，lf1％+fx0.1％群(實(shí)施例1)于體重、內(nèi)臟脂肪面積及皮下脂肪量的方面顯示出大的減少率(表1)。類似地，與比較例1、比較例2和fx0.001％群(比較例4)的各減少率相比，lf1％+fx0.001％群(實(shí)施例2)于體重、內(nèi)臟脂肪面積及皮下脂肪量的方面顯示出大的減少率。另外，與比較例1～3的群相比較，實(shí)施例1于三甘油酯及游離脂肪酸濃度的方面也顯示出大的減少率(表2)。同樣地，與比較例1，比較例2及比較例4的群相比較，實(shí)施例2于三甘油酯及游離脂肪酸濃度的方面也顯示出大的減少率。
lf1％+fx0.1％群(實(shí)施例1)中的體重的減少率明顯大于lf1％群(比較例1)的體重的減少率和fx0.1％群(比較例3)的體重的減少率的相加值，確認(rèn)到乳鐵蛋白與巖藻黃質(zhì)的組合的協(xié)同效果。另外，lf1％+fx0.1％群(實(shí)施例1)的體重的減少率也大于乳鐵蛋白的添加量為5倍的lf5％群(比較例2)，確認(rèn)到通過乳鐵蛋白和巖藻黃質(zhì)的組合，有超過大量添加乳鐵蛋白的情形的體重減輕效果。對(duì)內(nèi)臟脂肪面積，皮下脂肪量，三甘油酯及游離脂肪酸濃度而言也是相同的。
lf1％+fx0.001％群(實(shí)施例2)的體重的減少率明顯大于lf1％群的體重減少率與fx0.001％群(比較例4)的體重的減少率的相加值，確認(rèn)到乳鐵蛋白和巖藻黃質(zhì)的組合的協(xié)同效。此外，lf1％+fx0.001％群(實(shí)施例2)中的重量減少率也大于乳鐵蛋白的添加量為5倍的lf5％群(比較例2)，確認(rèn)到通過由乳鐵蛋白和巖藻黃質(zhì)組合，由超過大量添加乳鐵蛋白的情形的體重減輕效果。對(duì)于內(nèi)臟脂肪面積，皮下脂肪量，三甘油酯和游離脂肪酸濃度而言也是相同的。
對(duì)脂肪減少或體重減輕作用已為人所知的生姜萃取物單獨(dú)與乳鐵蛋白的組合效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。與gin0.1％群(比較例5)的體重減少率相比較，lf1％+gin0.1％群(比較例6)表現(xiàn)出較高的效果。然而，在另一方面中，lf1％+gin0.1％群(比較例6)的體重減少率小于，lf1％群(比較例1)的體重的減少率與gin0.1％群(比較例5)的體重減少率的加算值的值，并沒有確認(rèn)到乳鐵蛋白和生姜提取物的組合的協(xié)同效應(yīng)。對(duì)于內(nèi)臟脂肪面積，皮下脂肪量，三甘油酯和游離脂肪酸濃度而言也是相同的。
這些結(jié)果表明本發(fā)明的口服組合物已顯示出具有體重、體脂肪、血中三甘油酯和/或血液中的游離脂肪酸降低效果。
以下顯示處方例。
[處方例1]片劑(300mg片，每天攝入3片)
按照常規(guī)方法將乳鐵蛋白100mg，巖藻黃質(zhì)0.3mg，乳糖110mg，結(jié)晶纖維素80mg，羧甲基纖維素鈣5mg，和蔗糖脂肪酸酯5mg壓片以制備片劑。
[處方例2]顆粒(1克/包，每日攝取1包)
按照常規(guī)方法將乳鐵蛋白300mg，巖藻黃質(zhì)1mg，糊精699mg制粒，制作成顆粒。