本發(fā)明涉及是公認(rèn)的抗腫瘤藥物吉西他濱的單磷酸酯衍生物的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯(化學(xué)名：2'-脫氧-2',2'-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯)的藥物制劑。特別地，本發(fā)明涉及包含極性非質(zhì)子溶劑，優(yōu)選二甲基乙酰胺(DMA)的制劑。包含這些溶劑的制劑提供治療有效量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯。本發(fā)明的制劑可以在施用前稀釋到所需的濃度。
背景技術(shù)：
：吉西他濱(1；商品名)是一種有效的核苷類似物，目前已被證實(shí)可治療乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌和胰腺癌，并廣泛用于治療各種其它癌癥，包括膀胱癌、膽道癌、結(jié)腸直腸癌和淋巴瘤。吉西他濱的臨床效果受到多種固有耐藥機(jī)制和獲得性耐藥機(jī)制的限制。細(xì)胞水平的耐藥取決于三個(gè)參數(shù)：(i)激活成磷酸化基團(tuán)所必需的脫氧胞苷激酶的下調(diào)；(ii)核苷轉(zhuǎn)運(yùn)體特別是通過癌細(xì)胞攝取所需的hENT1的降低的表達(dá)，和(iii)催化酶尤其是降解吉西他濱的胞苷脫氨酶的上調(diào)。WO2005/012327描述了吉西他濱的一系列磷酸酯衍生物和相關(guān)的核苷藥物分子。其中吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯(NUC-1031；2)被認(rèn)為是特別有效的化合物。這些化合物似乎避免了很多限制吉西他濱的效果的固有耐藥機(jī)制和獲得性耐藥機(jī)制(‘ApplicationofProTideTech否logytoGemcitabine:ASuccessfulApproachtoOvercometheKeyCancerResistanceMechanismsLeadstoaNewAgent(NUC-1031)inClinicalDevelopment’；Slusarczyketall；J.Med.Chem.；2014,57,1531-1542)。遺憾的是，NUC-1031非常親脂，因此難溶于水(通過計(jì)算：<0.1mg/mL)，此外，可電離基團(tuán)嘧啶氮和酚羥基的計(jì)算所得的pKa值在適于腸胃外施用的pH范圍之外。無論鹽含量和pH值如何，它基本不溶于水，這對(duì)以足以實(shí)現(xiàn)有效治療的高劑量遞送化合物的臨床可接受方法的發(fā)展產(chǎn)生嚴(yán)重影響。有時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)如NUC-1031般親脂的藥物分子的遞送，但其疼痛水平于患者來說難以接受。NUC-1031以在磷酸酯中心差向異構(gòu)的兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物存在：本發(fā)明的某些實(shí)施方案旨在提供遞送有效劑量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的藥物制劑。本發(fā)明的某些實(shí)施方案旨在提供吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的穩(wěn)定藥物制劑。對(duì)于靜脈內(nèi)施用，合適的輸注制劑通常應(yīng)在大于30分鐘，并達(dá)到48小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。特別說明的是，對(duì)于靜脈內(nèi)施用，制劑的穩(wěn)定包括對(duì)吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的沉淀和吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的降解兩方面穩(wěn)定。本發(fā)明的某些實(shí)施方案旨在提供靜脈內(nèi)遞送有效劑量的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]磷酸酯的藥物制劑。本發(fā)明的某些實(shí)施方案旨在提供可以在外周靜脈中或經(jīng)中心管線(centralline)施用的吉西他濱-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]磷酸酯的腸胃外制劑。因此，本發(fā)明的某些實(shí)施方案旨在提供這樣一種制劑，所述制劑的同滲容摩對(duì)于經(jīng)外周靜脈施用來說是可接受的。本發(fā)明的某些實(shí)施方案滿足一些或全部上述目的。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了一種藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯；極性非質(zhì)子溶劑；和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。極性非質(zhì)子溶劑可以選自二甲基乙酰胺(DMA)，二甲基亞砜(DMSO)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)。優(yōu)選地，極性非質(zhì)子溶劑是DMA。DMA提供了所測試的那些的最佳溶解度曲線。極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA，DMSO或NMP)可以是藥物級(jí)的。極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)可以是施用載體，或者可以是在制劑使用前稀釋所使用的提供所需特征的施用載體。因此，制劑可以準(zhǔn)備用于輸注并且具有極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)作為主要組分；或者其可以是極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)作為主要組分并且在施用前稀釋以產(chǎn)生準(zhǔn)備用于輸注并且極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)僅作為次要組分的制劑的制劑；或者其可以是準(zhǔn)備用于輸注，具有僅作為次要組分的極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)，并且是由其中極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)是主要組分的制劑的稀釋產(chǎn)生的制劑。因此，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)可以占制劑的0.1％v/v至100％v/v。很少的藥學(xué)上可接受的溶劑溶解足夠量的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯以靜脈內(nèi)遞送治療有效劑量。在那些中，許多是不穩(wěn)定的，即吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯將傾向于從溶液中沉淀析出。發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，確實(shí)產(chǎn)生穩(wěn)定溶液的溶劑通常是極性非質(zhì)子溶劑，例如DMA，DMSO和NMP。在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)能夠溶解吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的那些溶劑中，本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)某些極性非質(zhì)子溶劑，特別是DMA，當(dāng)以水性載體稀釋溶液時(shí)特別能夠以遞送所需劑量所必需的濃度將其保持在該溶液中。因此，使用極性非質(zhì)子溶劑，特別是DMA，提供了優(yōu)于其它制劑溶劑的雙重優(yōu)點(diǎn)，令人驚訝地，這使其成為將吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯以實(shí)用和治療有效的方式遞送至患者的優(yōu)良介質(zhì)。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以作為磷酸酯非對(duì)映異構(gòu)體的混合物存在，或其可以以基本上非對(duì)映異構(gòu)純的形式作為(S)-差向異構(gòu)體或作為(R)-差向異構(gòu)體存在。對(duì)于本發(fā)明的目的，“基本上非對(duì)映異構(gòu)純的”被定義為大于約90％的非對(duì)映異構(gòu)純度。如果以基本上非對(duì)映異構(gòu)純的形式存在，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯可以具有大于95％，98％，99％或甚至99.5％的非對(duì)映異構(gòu)純度。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以作為磷酸酯非對(duì)映異構(gòu)體的混合物存在。因此，以非對(duì)映異構(gòu)體的混合物施用NUC-1031提供了遞送有效治療的實(shí)用且經(jīng)濟(jì)的方法。非臨床證據(jù)表明兩種差向異構(gòu)體之間的生物學(xué)效力沒有差異?；蛘撸魉麨I-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯2可以以基本上非對(duì)映異構(gòu)純的形式作為(S)-差向異構(gòu)體3存在。(S)-差向異構(gòu)體相對(duì)于(R)-差向異構(gòu)體顯示令人驚訝和顯著的溶解度增加，其允許更方便的配制，增加制劑的穩(wěn)定性并降低在施用設(shè)備(givingset)或中心管線中沉淀的風(fēng)險(xiǎn)。它還可以允許藥物以這樣的方式遞送，即以經(jīng)稀釋的制劑經(jīng)由外周靜脈施用時(shí)減少患者不適。本發(fā)明的制劑可以在施用前不久稀釋預(yù)定量，即在施用前長達(dá)48小時(shí)(例如長達(dá)24、12或2小時(shí))。所述制劑還可以包含一種或多種藥學(xué)上可接受的增溶劑，例如，藥學(xué)上可接受的非離子增溶劑。增溶劑也可以被稱為表面活性劑。示例性增溶劑包括聚乙氧基化脂肪酸和脂肪酸酯及它們的混合物。合適的增溶劑包括聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的)；或聚乙氧基化硬脂酸(例如以商品名或HS15出售的)；或聚乙氧基化(例如聚氧乙烯(20))失水山梨醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，制劑包含多于一種的藥學(xué)上可接受的增溶劑。所述制劑還可以包含水性載體。本發(fā)明的制劑可以是準(zhǔn)備好施用的，在這種情況下，其通常包含水性載體。該制劑可以用于胃腸外，例如用于靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用。優(yōu)選地，該制劑用于靜脈內(nèi)施用。施用可以通過中心靜脈或其可以通過外周靜脈。適合于施用的制劑中的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的總劑量通常為250mg至3g，例如1g至2g，例如約1.5g?？赡艿氖?，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)占制劑體積的30％或更多。因此，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)占制劑體積的50％或更多，例如60％或更多。極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)可以占制劑體積的95％或更少，例如90％或更少。制劑還可以包含水性載體(例如鹽水)。水性載體可以占制劑體積的50％或更少，例如30體積％或更少。通常，水性載體(例如鹽水)將占制劑體積的5％或更多，例如10％或更多。可能的是，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL500mg或更少。可以是每mL100mg或更多的濃度。優(yōu)選地，濃度為每mL200mg至300mg，例如225mg至275mg，例如約250mg。某些優(yōu)選的制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。更優(yōu)選的制劑包含：70體積％至90體積％的DMA；10體積％至30體積％的水性載體(例如鹽水)；和每mL200mg至300mg的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。前四個(gè)段落中描述的制劑，其中極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可以例如用于施用磷酸酯非對(duì)映異構(gòu)體混合物形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。它們還可用于施用基本上非對(duì)映異構(gòu)純形式的(S)-磷酸酯差向異構(gòu)體的形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。在這些段落中描述的制劑可以通過施用(例如通過輸注或注射)制劑使用，而不用在施用前稀釋。它們可以通過中心靜脈施用?；蛘撸梢韵♂屵@些制劑以形成適于通過外周靜脈施用的制劑。可能的是，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)占制劑體積的10％或更多，例如20％或更多。因此，可能的是極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)占制劑體積的80％或更少，例如60％或更少。極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)可占制劑體積的40％或更少。制劑還可以包含一種或多種增溶劑(例如一種或多種聚乙氧基化脂肪酸)。一種或多種增溶劑可占制劑體積的90％或更少，例如80％或更少。通常，一種或多種增溶劑將占制劑體積的30％或更多，例如50％或更多或60％或更多。一種優(yōu)選的制劑包含作為在30％:70％DMA：增溶劑混合物中的溶液的藥物。可能的是，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL200mg或更少，例如150mg或更少或120mg或更少?？赡艿氖?，濃度為每mL40mg或更多，例如60mg或更多。優(yōu)選地，濃度為每mL70mg至110mg，例如約75mg或約100mg。某些優(yōu)選的制劑包含：20體積％至80體積％的DMA；30體積％至80體積％的增溶劑或多種增溶劑；和50mg/mL至150mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。所述制劑還可以包含水性載體，例如其量為1體積％至15體積％。某些特別優(yōu)選的制劑包含：20體積％至80體積％的DMA；20體積％至60體積％的第一增溶劑；5體積％至40體積％的第二增溶劑；2％至12％的水性載體；和50mg/mL至150mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。第一增溶劑可以是聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的那些)。第二增溶劑可以是聚乙氧基化脫水山梨糖醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。制劑還可以包含水性載體，例如其量為3體積％至15體積％。所述制劑可以包含：50體積％至60體積％的DMA；20體積％至30體積％的第一增溶劑；8體積％至15體積％的第二增溶劑；4體積％至10體積％的水性載體；和75mg/mL至125mg/mL的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。前五個(gè)段落中描述的制劑，其中極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可用于例如施用基本上非對(duì)映異構(gòu)純形式的(S)-磷酸酯差向異構(gòu)體形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。它們也可以用于施用R和S差向異構(gòu)體的混合物或R差向異構(gòu)體。在這些段落中描述的制劑通常在施用之前用水性載體稀釋。一旦稀釋，它們可以通過外周靜脈施用。這些制劑可以通過稀釋不含任何增溶劑的制劑來形成。吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯可以在某些增溶劑的存在下降解?？赡艿氖牵瑯O性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)占制劑體積的0.1％或更多，例如0.5％或更多或1％或更多。因此，可能的是DMA占制劑體積的10％或更少，例如5％或更少或3％或更少。極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)可以占制劑體積的8％或更少或2％或更少。制劑還可以包含水性載體(例如WFI)。水性載體可以以占制劑體積的99.5％或更少存在，例如占制劑體積的99％或98％或更少。通常，水性載體將占制劑體積的85％或更多，例如90％或更多或95％或更多。制劑還可以包含一種或多種增溶劑(例如一種或多種聚乙氧基化脂肪酸)。一種或多種增溶劑可占制劑體積的10％或更少，例如7.5％或更少或5％或更少或3％更少。通常，一種或多種增溶劑將占制劑體積的0.1％或更多，例如0.5％或更多或1％或更多或2％或更多?？赡艿氖?，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯在(多種)制劑溶劑中的濃度為每mL12.0mg或更少或每mL10.0mg或更少，例如每mL7.0mg或更少或4.5mg或更少?？赡艿氖牵瑵舛葹槊縨L1.0mg或更多，例如2.0mg或更多。優(yōu)選地，濃度為2.5mg至11mg/mL，例如3mg至7mg/mL，例如約4.5mg/mL。某些優(yōu)選的制劑包含：0.1體積％至15體積％(例如0.5至5體積％)的DMA；0.1體積％至15體積％(例如0.1％至7.5體積％)的增溶劑或多種增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。某些特別優(yōu)選的制劑包含：0.5體積％至10體積％的DMA；0.2體積％至4體積％的第一增溶劑；0.1體積％至2體積％的第二增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。第一增溶劑可以是聚乙氧基化蓖麻油(例如以商品名ELP出售的那些)。第二增溶劑可以是聚乙氧基化脫水山梨糖醇單油酸酯(例如以商品名80銷售的那些)。所述制劑可以包含：0.5體積％至6體積％的DMA；0.5體積％至6體積％的第一增溶劑；0.2體積％至4體積％的第二增溶劑；85體積％至99體積％的水性載體；和每mL2.0mg至12.0mg(例如2.0mg至10.0mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。前四個(gè)段落中描述的制劑，其中極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)作為主要組分存在，可用于例如施用基本上非對(duì)映異構(gòu)純形式的(S)-磷酸酯差向異構(gòu)體形式的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。它們也可以用于施用R和S差向異構(gòu)體的混合物或R差向異構(gòu)體。在這些段落中描述的制劑通常通過在施用前長達(dá)48小時(shí)用水性載體稀釋濃縮的極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)制劑或濃縮的極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)和增溶劑制劑來制備。所得到的制劑可以通過外周靜脈施用。雖然本發(fā)明的制劑優(yōu)選用于腸胃外施用，但是本發(fā)明的某些實(shí)施方案也可以口服施用。在本發(fā)明的第二方面，提供了藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯；極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑；其中所述制劑用于醫(yī)療用途。在本發(fā)明的第三方面，提供了藥物制劑，其包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯；極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑；其中所述制劑用于治療癌癥。在本發(fā)明的第四方面，提供了治療癌癥的方法，所述方法包括對(duì)有需要的受試者施用藥物制劑，所述藥物制劑包含：吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)；和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。該方法可以包括以下步驟：用水性載體稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的溶液，以提供用于輸注或注射的制劑；和通過輸注或注射對(duì)受試者施用用于輸注或注射的制劑。該方法可以包括以下步驟：用包含極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)和一種或多種增溶劑的第二溶液稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯和極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)和任選的水性載體的第一溶液以形成第三溶液；用水性載體稀釋所述第三溶液以提供用于輸注或注射的制劑；和通過輸注或注射對(duì)受試者施用用于輸注或注射的制劑。第二制劑可以包含多于一種增溶劑。通常，第二制劑不包含活性成分。所述稀釋或各稀釋可以以預(yù)定量。起始溶液可以是第一方面的制劑。同樣地，用于輸注或注射的制劑可以是第一方面的制劑?？梢允窃谙♂尣襟E例如第一或第二稀釋步驟后長達(dá)48小時(shí)(例如長達(dá)12或2小時(shí))進(jìn)行施用步驟。癌癥可以是選自以下的癌癥：胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、結(jié)腸直腸癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、膽管癌、腎癌、子宮頸癌、胸腺癌、未知原發(fā)位點(diǎn)的癌癥、淋巴瘤或白血病。該方法可以包括：用第一制劑的第一部分沖洗中心管線靜脈內(nèi)施用裝置，所述第一制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和經(jīng)由所述施用裝置對(duì)所述患者施用第二制劑，所述第二制劑包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯；和任選地用第一制劑的第二部分沖洗施用裝置。通常，第一制劑不包含活性成分。在本發(fā)明的第五方面，提供了制備用于輸注或注射的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯的藥物制劑的方法，所述方法包括：用水性載體稀釋包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)和任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的溶液，以提供用于輸注或注射的制劑。稀釋可以是預(yù)定量的。起始溶液可以是第一方面的制劑。同樣地，用于輸注或注射的制劑可以是第一方面的制劑。可以是在稀釋步驟后長達(dá)48小時(shí)(例如長達(dá)12或2小時(shí))進(jìn)行施用步驟。水性載體可選自鹽水(例如0.9％鹽水或0.45％鹽水)，葡萄糖溶液和輸注用水(WFI)。優(yōu)選地，水性載體是WFI。WFI的使用提供了與血液基本上等滲的制劑。水性載體可以包含一種或多種藥學(xué)上可接受的增溶劑(也稱為表面活性劑)，例如，藥學(xué)上可接受的非離子增溶劑。示例性增溶劑是聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯(以80銷售)。在本發(fā)明的第六方面，提供了制備吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的藥物制劑的方法，所述方法包括：將吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯溶解在極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)中以形成溶液；向溶液中加入一種或多種其它藥物賦形劑以形成吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的藥物制劑。發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)更有效的方法產(chǎn)生于在極性非質(zhì)子溶劑(例如DMA)中預(yù)溶解吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，然后加入所需的賦形劑，例如增溶劑。一種或多種藥物賦形劑可以包括增溶劑。在本發(fā)明的第七方面，提供了包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-(S)-磷酸酯或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物和至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物制劑。優(yōu)選地，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯基本上是非對(duì)映異構(gòu)純的形式。該制劑可以用于胃腸外，例如用于靜脈內(nèi)，皮下或肌內(nèi)施用。優(yōu)選地，所述制劑用于靜脈內(nèi)施用。制劑可以是任選還包含極性有機(jī)溶劑的水性制劑。在腸胃外(例如靜脈內(nèi))施用的情況下，制劑優(yōu)選還包含極性有機(jī)溶劑。該制劑可以包含DMSO或NMP。制劑還可以包含環(huán)糊精。在本發(fā)明的第八方面，提供了包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物和至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物制劑。優(yōu)選地，吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯是基本上非對(duì)映異構(gòu)純的形式。在本發(fā)明的第九方面，提供了一種試劑盒，所述試劑盒包括：第一制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和第二制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯。第一制劑通常不包含活性成分。因此，其通常不包含吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。第一制劑可以在兩個(gè)分開的容器中或在單個(gè)容器中提供。本發(fā)明第九方面的試劑盒可用于通過中心管線靜脈內(nèi)施用吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯。在施用第二制劑之前用第一制劑沖洗中心管線。通過避免活性制劑與水性介質(zhì)(例如鹽水沖洗溶液)的直接接觸，這減輕了吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯在靜脈內(nèi)施用裝置(即中心管線)中或入口處沉淀的風(fēng)險(xiǎn)。在施用第二制劑后，也可以用第一制劑沖洗中心管線。這進(jìn)一步防止沉淀。在本發(fā)明的第十方面，提供了一種試劑盒，所述試劑盒包括：第一制劑，其包含：30體積％至95體積％的DMA；5體積％至50體積％的水性載體；和每mL100mg至400mg(例如100mg至300mg)的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯；和第二制劑，其包含：20體積％至80體積％的DMA；20體積％至60體積％的第一增溶劑；10體積％至40體積％的第二增溶劑。通常第二制劑不包含任何活性劑。該試劑盒可用于制備適合于外周施用的制劑。施用前長達(dá)48小時(shí)，例如長達(dá)24小時(shí)，用第二制劑稀釋第一制劑以形成第三制劑。在施用前將第三制劑進(jìn)一步用水性載體稀釋至所需濃度以形成通過輸注或注射對(duì)患者施用的制劑。為了實(shí)現(xiàn)在吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的沉淀方面穩(wěn)定的外周施用制劑，通常希望包括增溶劑。然而，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯在這種增溶劑的存在下可能易于降解。因此，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，兩階段稀釋法是實(shí)現(xiàn)用于外周施用的制劑的優(yōu)選方法。具體實(shí)施方式在本說明書中，術(shù)語S-差向異構(gòu)體或S-非對(duì)映異構(gòu)體是指吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯。同樣，在本說明書中，術(shù)語R-差向異構(gòu)體或R-非對(duì)映異構(gòu)體是指吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯。術(shù)語“鹽水”旨在表示氯化鈉的水溶液。本發(fā)明的鹽水溶液通常是無菌的，并且通常將是適合于用于腸胃外施用的濃度。合適的濃度為高達(dá)2w/v％或高達(dá)1w/v％。為了優(yōu)化滲透壓，可以在本發(fā)明的制劑中使用不同濃度的鹽水，例如0.9％或0.45％。本發(fā)明的制劑可用于治療人體。它們可以用于治療動(dòng)物體。特別地，本發(fā)明的化合物可用于治療商業(yè)動(dòng)物例如家畜。或者，本發(fā)明的化合物可用于治療伴侶動(dòng)物，例如貓、狗等。本發(fā)明的制劑中的化合物可以以藥學(xué)上可接受的鹽的形式獲得、儲(chǔ)存和/或施用。合適的藥學(xué)上可接受的鹽包括但不限于藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸的鹽，或藥學(xué)上可接受的有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、乳酸、粘酸、葡萄糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、磺胺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸(edeticacid)、硬脂酸，棕櫚酸，油酸、月桂酸、泛酸、單寧酸、抗壞血酸和戊酸的鹽。合適的堿鹽由形成無毒鹽的堿形成。實(shí)例包括鋁、精氨酸、芐星、鈣、膽堿、二乙胺、二醇胺、甘氨酸、賴氨酸、鎂、葡甲胺、乙醇胺、鉀、鈉、氨基丁三醇和鋅鹽。也可以形成酸和堿的半鹽，例如半硫酸鹽、半草酸鹽和半鈣鹽。在某些實(shí)施方案中，特別是適用于s-差向異構(gòu)體的那些實(shí)施方案，化合物是HCl鹽或半草酸鹽的形式。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物不是鹽的形式，即它們是游離堿/游離酸的形式。對(duì)于本發(fā)明的上述制劑，所施用的劑量當(dāng)然將隨所使用的化合物，精確的施用模式，所需的治療和所示的病癥而變化。預(yù)期本發(fā)明化合物的劑量水平，劑量頻率和治療持續(xù)時(shí)間根據(jù)制劑和患者的臨床適應(yīng)癥，年齡和共病態(tài)醫(yī)學(xué)病癥而不同。根據(jù)眾所周知的藥物原理，用于本發(fā)明的化合物的治療目的的劑量大小將根據(jù)病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，動(dòng)物或患者的年齡和性別以及施用途徑，而自然變化。藥物制劑通常采取組合物的形式，其中活性化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與藥學(xué)上可接受的佐劑，稀釋劑或載體聯(lián)合。本發(fā)明的制劑中的一種這樣的藥學(xué)上可接受的佐劑，稀釋劑或載體是極性非質(zhì)子溶劑。用于選擇和制備合適的藥物制劑的常規(guī)方法描述于例如“Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns”，M.E.Aulton，ChurchillLivingstone，1988中。所述制劑可以適合于局部施用(例如皮膚或膀胱)，用于口服施用或用于腸胃外(例如靜脈內(nèi)施用)。本發(fā)明的藥物制劑中使用的任何溶劑應(yīng)當(dāng)是藥物級(jí)的，這意味著它們具有使得它們適于對(duì)人施用(例如靜脈內(nèi)施用)的雜質(zhì)分布。對(duì)于口服施用，本發(fā)明的制劑可以包括與佐劑或載體混合的活性化合物，所述佐劑或載體例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如馬鈴薯淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉；纖維素衍生物；粘合劑，例如明膠或聚乙烯吡咯烷酮；和/或潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等，然后壓制成片劑。如果需要包衣片劑，可以用濃縮的糖溶液包衣如上所述制備的芯，所述濃縮的糖溶液可以含有例如阿拉伯樹膠、明膠、滑石粉和二氧化鈦?；蛘?，片劑可以用溶解在易揮發(fā)的有機(jī)溶劑中的合適的聚合物包衣。對(duì)于軟明膠膠囊的制備，活性化合物可以與例如植物油或聚乙二醇混合。硬明膠膠囊可以含有使用上述片劑賦形劑的化合物顆粒。也可將活性化合物的液體或半固體制劑填充入硬明膠膠囊中。用于口服應(yīng)用的液體制劑可以是糖漿或懸浮液的形式，例如含有本發(fā)明化合物的溶液，其余是糖以及乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物。任選地，這樣的液體制劑可以含有著色劑、調(diào)味劑、甜味劑(例如糖精)、防腐劑和/或羧甲基纖維素作為增稠劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它賦形劑。然而，優(yōu)選地，本發(fā)明的制劑用于腸胃外(例如靜脈內(nèi))施用或用于稀釋以形成用于胃腸外(例如靜脈內(nèi))施用的制劑。對(duì)于腸胃外(例如靜脈內(nèi))施用，活性化合物可以作為無菌水性或油性溶液施用。優(yōu)選地，活性化合物作為無菌水溶液施用。本發(fā)明的藥物組合物將優(yōu)選包含0.05-99％w(重量百分比)的吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨?；?]-磷酸酯，更優(yōu)選0.05-80％w吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，還更優(yōu)選0.10至70％w吉西他濱-[苯基-苯甲酰基-L-丙氨?；?]-磷酸酯，甚至更優(yōu)選0.10至50％w吉西他濱-[苯基-苯甲?；?L-丙氨?；?]-磷酸酯，所有重量百分比均基于總組合物。已經(jīng)顯示環(huán)糊精在藥物遞送中具有廣泛的應(yīng)用(Rasheed等人，Sci.Pharm.，2008,76,567-598)。環(huán)糊精是環(huán)狀寡糖的家族。它們充當(dāng)“分子籠”，其封裝藥物分子并改變那些藥物分子的性質(zhì)，例如溶解性。環(huán)糊精包含(α-1,4)-連接的α-D-吡喃葡萄糖單元。環(huán)糊精可以含有6,7或8個(gè)吡喃葡萄糖單元(分別稱為α-，β-和γ-環(huán)糊精)。用于藥物制劑中的環(huán)糊精通常是β-環(huán)糊精。側(cè)掛羥基可以用C1-C6取代或未取代的烷基烷基化。環(huán)糊精的實(shí)例是α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、2-羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)、磺丁基醚β-環(huán)糊精鈉鹽、部分甲基化的β-環(huán)糊精。本發(fā)明的制劑還可以包括至少一種環(huán)糊精。本發(fā)明還包括化合物的所有藥學(xué)上可接受的同位素標(biāo)記形式的制劑，其中一個(gè)或多個(gè)原子被具有相同原子序數(shù)但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于自然界中通常存在的主要同位素的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子替換。適合包括在本發(fā)明化合物中的同位素的實(shí)例包括氫的同位素，例如2H和3H，碳的同位素，例如11C、13C和14C，氯的同位素，例如36Cl，氟的同位素，例如18F，碘的同位素，例如123I和125I,，氮的同位素，例如13N和15N，氧的同位素，例如15O、17O和18O，磷的同位素，例如32P，和硫的同位素，例如35S。某些同位素標(biāo)記的化合物，例如摻入放射性同位素的那些可用于藥物和/或底物組織分布研究。放射性同位素氚，即3H，和碳-14，即14C，鑒于其易于摻入和現(xiàn)成的檢測手段，特別可用于此目的。用更重的同位素例如氘，即2H，進(jìn)行的取代可以提供由更大的代謝穩(wěn)定性例如增加的體內(nèi)半衰期或降低的劑量需求帶來的某些治療優(yōu)勢，因此在一些情況下可能是優(yōu)選的。同位素標(biāo)記的化合物通?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)或通過類似于使用適當(dāng)?shù)耐凰貥?biāo)記的試劑代替之前使用的非標(biāo)記試劑所描述的那些方法的方法制備。除了本發(fā)明的制劑之外，用于治療癌癥、淋巴瘤或白血病的治療方法或制劑可以涉及常規(guī)外科手術(shù)或放射療法或化療。這種化療可以包括施用一種或多種其它活性劑。當(dāng)另外的活性劑作為本發(fā)明的治療方法的一部分施用時(shí)，這種組合治療可以通過各個(gè)治療組分的同時(shí)，相繼或分開配量來實(shí)現(xiàn)。這種組合產(chǎn)品使用在上文所述的治療有效劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和在其批準(zhǔn)的劑量范圍內(nèi)的一種或多種其它藥物活性劑。因此，本發(fā)明的藥物制劑可以包含另一種活性劑。一種或多種其他活性劑可以是一種或多種以下類別的抗腫瘤劑：(i)抗增殖/抗腫瘤藥及其組合，例如烷化劑(例如環(huán)磷酰胺、氮芥、苯達(dá)莫司汀(bendamustin)、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥、白消安(busulphan)、替莫唑胺(temozolamide)和亞硝基脲)；抗代謝藥(例如吉西他濱和抗葉酸藥如氟嘧啶如5-氟尿嘧啶和喃氟啶、雷替曲塞、甲氨蝶呤、培美曲塞、阿糖胞苷和羥基脲)；抗生素(例如蒽環(huán)類藥物如阿霉素、博來霉素、多柔比星、道諾霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、絲裂霉素-C、更生霉素和光神霉素)；抗有絲分裂劑(例如長春花生物堿如長春新堿、長春花堿、長春地辛和長春瑞濱和紫杉烷類如紫杉醇和泰素帝和polo激酶(polokinase)抑制劑)；蛋白酶體抑制劑，例如卡非佐米和硼替佐米；干擾素治療；和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如表鬼臼毒素如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、拓?fù)涮婵?、米托蒽醌和喜樹堿)；(ii)細(xì)胞靜止素如抗雌激素(例如他莫昔芬，氟維司群，托瑞米芬，雷洛昔芬，屈洛昔芬和碘氧芬(iodoxyfene))，抗雄激素(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和乙酸環(huán)丙孕酮)，LHRH拮抗劑或LHRH激動(dòng)劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)，孕激素(例如醋酸甲地孕酮)，芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、伏羅唑和依西美坦)和5α-還原酶抑制劑如非那雄胺；(iii)抗侵入劑，例如達(dá)沙替尼和博舒替尼(SKI-606)，和金屬蛋白酶抑制劑，尿激酶纖溶酶原激活物受體功能抑制劑或類肝素酶抗體；(ⅳ)生長因子功能的抑制劑：例如此類抑制劑包括生長因子抗體和生長因子受體抗體，例如抗erbB2抗體曲妥單抗[赫賽汀TM]，抗EGFR抗體帕尼單抗，抗erbB1抗體西妥昔單抗，酪氨酸激酶抑制劑，例如表皮生長因子家族的抑制劑(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制劑，例如吉非替尼、厄洛替尼和6-丙烯酰胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉代丙氧基)-喹唑啉-4-胺(CI1033)、erbB2酪氨酸激酶抑制劑如拉帕替尼)；肝細(xì)胞生長因子家族的抑制劑；胰島素生長因子家族的抑制劑；細(xì)胞凋亡的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)器的調(diào)節(jié)劑(例如Bcl-2抑制劑)；血小板衍生生長因子家族的抑制劑如伊馬替尼和/或尼羅替尼(AMN107)；絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑(例如Ras/Raf信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑如法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，例如索拉非尼、替吡法尼和洛那法尼)，細(xì)胞通過MEK和/或AKT激酶信號(hào)傳導(dǎo)的抑制劑，c-kit抑制劑，abl激酶抑制劑，PI3激酶抑制劑，Plt3激酶抑制劑，CSF-1R激酶抑制劑，IGF受體，激酶抑制劑；極光激酶抑制劑和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑如CDK2和/或CDK4抑制劑；(v)抗血管生成劑，例如抑制血管內(nèi)皮生長因子的作用的那些，[例如抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子抗體貝伐單抗(AvastinTM)]；沙利度胺；來那度胺；和例如，VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑如凡德他尼、瓦他拉尼、舒尼替尼、阿西替尼和帕唑帕尼；(vi)基因治療方法，包括例如替代異?；蛉绠惓53或異常BRCA1或BRCA2的方法；(vii)免疫治療方法，包括例如抗體治療，例如阿侖珠單抗、利妥昔單抗、替伊莫單抗(ibritumomabtiuxetan)和奧法木單抗；干擾素如干擾素α；白細(xì)胞介素如IL-2(阿地白介素)；白細(xì)胞介素抑制劑，例如IRAK4抑制劑；癌癥疫苗，包括預(yù)防和治療疫苗，例如HPV疫苗，例如加德西、希瑞適(Cervarix)、Oncophage和Sipuleucel-T(普羅文奇(Provenge))；和toll樣受體調(diào)節(jié)劑，例如TLR-7或TLR-9激動(dòng)劑；(viii)細(xì)胞毒性劑，例如氟達(dá)拉濱(fludara)、克拉屈濱、噴司他丁(NipentTM)；(ⅸ)類固醇例如皮質(zhì)類固醇，包括糖皮質(zhì)激素和鹽皮質(zhì)激素，例如阿氯米松(aclometasone)、二丙酸阿氯米松、醛固酮、安西奈德、倍氯米松、二丙酸倍氯米松、倍他米松、二丙酸倍他米松、倍他米松磷酸鈉、戊酸倍他米松、布地奈德、氯倍他松、丁酸氯倍他松、丙酸氯倍他索、氯潑尼醇、可的松、醋酸可的松、可的伐唑(cortivazol)、去氧皮甾酮、地奈德、去羥米松(desoximetasone)、地塞米松、地塞米松磷酸鈉、地塞米松異煙酸酯、二氟可的松、氟氯奈德(fluclorolone)、氟甲松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松(fluocinoloneacetonide)、氟輕松醋酸酯(fluocinonide)、氟可丁(fluocortinbutyl)、氟可的松、氟可龍(fluorocortolone)、氟可龍己酸酯、氟可龍三甲基乙酸酯、氟米龍、氟潑尼定、醋酸氟潑尼定、氟氫縮松、氟替卡松、丙酸氟替卡松、哈西奈德、氫化可的松、醋酸氫化可的松、丁酸氫化可的松、醋丙氫可的松、氫化可的松丁丙酸酯、戊酸氫化可的松、艾可米松、醋丁艾可米松、甲潑尼松、甲基強(qiáng)的松龍、莫米松、帕拉米松、糠酸莫米松一水合物、潑尼卡酯、潑尼松龍、潑尼松、替可的松、新戊酸替可的松、曲安西龍(triamcinolone)、曲安奈德(triamcinoloneacetonide)、曲安西龍醇和它們各自的藥學(xué)上可接受的衍生物。可以使用類固醇的組合，例如兩種或更多種本段落中提及的類固醇的組合；(x)靶向治療，例如PI3Kd抑制劑，例如伊達(dá)利塞(idelalisib)和哌立福辛；或抑制PD-1，PD-L1和CART的化合物。一種或多種其它活性劑也可以是抗生素。作為說明性實(shí)例，吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨酰基)]-磷酸酯的非對(duì)映異構(gòu)體混合物可以根據(jù)WO2005/012327中描述的合成方法或在‘ApplicationofProTideTech否logytoGemcitabine:ASuccessfulApproachtoOvercomethKeyCancerResistanceMechanismsLeadstoaNewAgent(NUC-1031)inClinicalDevelopment’；Slusarczyketall；J.Med.Chem.；2014,57,1531-1542中描述的那些制備。在以下條件下通過HPLC分離吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的(R)和(S)同分異構(gòu)體：設(shè)備：Agilent1200TM系列，帶DAD檢測器流速：1.0mL/min柱：ChiralpakADTM；250x4.6mmID(正相)溫度：環(huán)境粒徑：20μm進(jìn)料：溶于MeOH；10g/L溶劑：正庚烷/IPA10->50％IPA(S)-差向異構(gòu)體在8.6分鐘洗脫，(R)-差向異構(gòu)體在10.3分鐘洗脫。使用下面的表征方法可以表征各個(gè)同分異構(gòu)體：在BrukerAvance500光譜儀上在25℃下記錄質(zhì)子(1H)，碳(13C)，磷(31P)和氟(19F)NMR光譜。將光譜自動(dòng)校準(zhǔn)到氘代溶劑峰，并且所有13CNMR和31PNMR都是質(zhì)子去耦的。通過HPLC分析，使用VarianPolarisC18-A(10μM)作為分析柱，在35分鐘內(nèi)進(jìn)行從100/0至0/100的H2O/MeOH梯度洗脫，證實(shí)最終化合物的純度>95％。HPLC分析通過VarianProstar(LCWorkstation-Varianprostar335LC檢測器)進(jìn)行。2'-脫氧-2′,2′-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(S)-磷酸酯3(ES+)m/z，實(shí)測值：(M+Na+)603.14。C25H27F2N4O8NaP理論值：(M+)580.47。31PNMR(202MHz,MeOD):δP3.661HNMR(500MHz,MeOD):δH7.58(d,J＝7.5Hz,1H,H-6),7.38–7.32(m,7H,ArH),7.26–7.20(m,3H,ArH),6.24(t,J＝7.5Hz,1H,H-1’),5.84(d,J＝7.5Hz,1H,H-5),5.20(AB系統(tǒng),JAB＝12.0Hz,2H,OCH2Ph),4.46–4.43(m,1H,H-5’),4.36–4.31(m,1H,H-5’),4.25–4.19(m,1H,H-3’),4.07–4.00(m,2H,H-4’,CHCH3),1.38(d,J＝7.2Hz,3H,CHCH3)。19FNMR(470MHz,MeOD):δF–118.0(d,J＝241Hz,F),–120.24(寬d,J＝241Hz,F)。13CNMR(125MHz,MeOD):δC174.61(d,3JC-P＝5.0Hz,C＝O,酯),167.63(C-NH2),157.74(C＝O基),152.10(d,2JC-P＝7.0Hz,C-Ar),142.40(CH-基),137.22(C-Ar),130.90,129.63,129.39,129.32,126.32(CH-Ar),124.51(d,1JC–F＝257Hz,CF2),121.47,121.43(CH-Ar),96.67(CH-基),85.92(寬信號(hào),C-1′),80.31(C-4′),71.27(明顯t,2JC–F＝23.7Hz,C-3′),68.03(OCH2Ph),65.73(d,2JC–P＝5.30Hz,C-5’),51.66(CHCH3),20.42(d,3JC–P＝6.25Hz,CHCH3)。反相HPLC，用H2O/MeOH從100/0至0/100在35分鐘內(nèi)洗脫，顯示非對(duì)映異構(gòu)體的一個(gè)峰，tR＝22.53min。2'-脫氧-2′,2′-二氟-D-胞苷-5'-O-[苯基(苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-(R)-磷酸酯4。(ES+)m/z，實(shí)測值：(M+Na+)603.14。C25H27F2N4O8NaP理論值：(M+)580.47。31PNMR(202MHz,MeOD):δP3.831HNMR(500MHz,MeOD):δH7.56(d,J＝7.5Hz,1H,H-6),7.38–7.31(m,7H,ArH),7.23–7.19(m,3H,ArH),6.26(t,J＝7.5Hz,1H,H-1’),5.88(d,J＝7.5Hz,1H,H-5),5.20(s,2H,OCH2Ph),4.49–4.46(m,1H,H-5’),4.38–4.34(m,1H,H-5’),4.23–4.17(m,1H,H-3’),4.07–4.01(m,2H,H-4’,CHCH3),1.38(d,J＝7.2Hz,3H,CHCH3).19FNMR(470MHz,MeOD):δF–118.3(d,J＝241Hz,F),–120.38(寬d,J＝241Hz,F).13CNMR(125MHz,MeOD):δC174.65(d,3JC-P＝5.0Hz,C＝O,酯),167.65(C-NH2),157.75(C＝O基),152.10(d,2JC-P＝7.0Hz,C-Ar),142.28(CH-基),137.50(C-Ar),130.86,129.63,129.40,129.32,126.31(CH-Ar),124.50(d,1JC–F＝257Hz,CF2),121.44,121.40(CH-Ar),96.67(CH-基),85.90(寬信號(hào),C-1′),80.27(C-4′),71.30(明顯t,2JC–F＝23.7Hz,C-3′),68.02(OCH2Ph),65.50(C-5’),51.83(CHCH3),20.22(d,3JC–P＝7.5Hz,CHCH3)。反相HPLC，用H2O/MeOH從100/0至0/100在35分鐘內(nèi)洗脫，顯示非對(duì)映異構(gòu)體的一個(gè)峰，tR＝21.87min在本說明書的整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中，詞語“包括”和“含有”及其變體意味著“包括但不限于”，并且它們不旨在(并且不)排除其他部分、添加劑、組分、整數(shù)或步驟。在本說明書的整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中，單數(shù)包括復(fù)數(shù)，除非上下文另有要求。特別地，在使用不定冠詞時(shí)，除非上下文另有要求，否則說明書應(yīng)被理解為考慮復(fù)數(shù)以及單數(shù)。結(jié)合本發(fā)明的特定方面、實(shí)施方案或?qū)嵤├枋龅奶卣?、整?shù)、特性、化合物、化學(xué)部分或基團(tuán)應(yīng)理解為可應(yīng)用于本文所述的任何其它方面、實(shí)施方案或?qū)嵤├?，除非與其不相容。在本說明書(包括任何所附權(quán)利要求，摘要和附圖)中公開的所有特征，和/或如此公開的任何方法或過程的所有步驟可以以任何組合進(jìn)行組合，除了其中至少一些這樣的特征和/或步驟是相互排斥的組合。本發(fā)明不限于任何前述實(shí)施方案的細(xì)節(jié)。本發(fā)明延伸到本說明書(包括任何所附權(quán)利要求，摘要和附圖)中公開的特征的任何新穎的一個(gè)或任何新穎的組合，或如此公開的任何方法或過程的步驟的任何新穎的一個(gè)或任何新穎的組合。讀者的注意力指向與本申請(qǐng)所關(guān)聯(lián)的本說明書同時(shí)或先于本說明書提交的，并且用本說明書對(duì)公眾公開的所有論文和文獻(xiàn)，并且所有這些論文和文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用并入本文。在本說明書中使用以下縮寫：API-活性藥物成分，即吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯DMA-二甲基乙酰胺DMF-N,N-二甲基甲酰胺DMSO-二甲基亞砜IPA-異丙醇NMP-N-甲基吡咯烷酮PEG-聚乙二醇實(shí)施例1-開發(fā)第一代制劑通過WO2005/012327中描述的方法獲得作為磷酸酯非對(duì)映異構(gòu)體的混合物的吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯(NUC-1031；2)。實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)都使用作為磷酸酯非對(duì)映異構(gòu)體的混合物的NUC-1031進(jìn)行。在一系列藥學(xué)上可接受的溶劑系統(tǒng)中測定NUC-1031的溶解度。采用的方案如下：制備小體積，1-2mL的每種溶劑體系，并加入一定量的所述化合物。將溶液攪拌約4小時(shí)，然后0.45μL膜過濾。然后通過HPLC測定確定濾液中所述化合物的濃度。基于用于治療胰腺癌的吉西他濱劑量方案，NUC-1031的分子量調(diào)整劑量為約3200mg，每周一次輸注。作為所需溶解度水平的指示，采用500mL輸注體積的名義目標(biāo)，NUC-1031的所需溶解度在輸注液中將>6mg/ml。然而，這種溶解度水平僅僅是一種指示，并且較低的溶解度仍然可以提供有效的療法。表1顯示了吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯2在適于靜脈內(nèi)施用的一系列溶劑內(nèi)的溶解度。DMSO，DMA和NMP，所有這些都是極性非質(zhì)子溶劑，提供穩(wěn)定的溶液。用水或鹽水稀釋1:1后，NMP和DMA沒有顯示任何沉淀的跡象。附錄1顯示NUC-1031在一系列稀釋溶劑中的溶解度。DMA提供了足夠的溶解性以施用所需的劑量。表2顯示了在稀釋時(shí)NUC-1031在一系列溶劑中的溶解度*含有0.13％Tween80的0.9％鹽水稀釋對(duì)DMA溶解度的影響表2給出了水稀釋對(duì)DMA溶解度的影響表2進(jìn)一步在更長時(shí)間內(nèi)評(píng)價(jià)這些DMA溶液的物理穩(wěn)定性，結(jié)果在表2a中給出表2a在0.9％鹽水中的溶液含量測定(mg/ml)沉淀(2周)80:20DMA304是80:20DMA272No80:20DMA315是80:20DMA270是85:15DMA338否在上述實(shí)驗(yàn)之后，在臨床測試中使用在5ml小瓶中的250mgNUC-1031在80:20DMA：0.9％鹽水溶液中的制劑。該制劑在臨床研究中提供了成功的治療，但由于注射時(shí)疼痛，需要通過中心管線施用。然后尋求允許通過外周靜脈施用的制劑。實(shí)施例2實(shí)施例2至6的實(shí)驗(yàn)都使用NUC-1031的(S)-差向異構(gòu)體進(jìn)行?；旌鲜褂萌绫?所述的DMA和共賦形劑將NUC-1031混合成九種不同的制劑。表3：NUC-1031制劑使用以下方法混合API：1.將DMA加入到在玻璃閃爍小瓶中的NUC-1031中。觀察到API的即時(shí)溶解。2.隨后加入共賦形劑并使用渦旋混合器(Whirlmixer，F(xiàn)isherbrand)短暫混合(小于1分鐘)。發(fā)現(xiàn)這提供了比將NUC-1031溶解在DMA和共賦形劑的混合物中更有效的混合API的方法。在混合物中溶解NUC-1031仍然提供混合的API，但是該方法效率較低。所有制劑是澄清的溶液，其保持穩(wěn)定(通過眼睛)幾天(>7天)。觀察到API有助于制劑體積。本研究中的典型制劑的體積為10.6-10.7mL(API濃度93-94mg/mL)。實(shí)施例3-輸注溶液研究研究了NUC-1031制劑在輸注溶液中的溶解度。在臨床中，其旨在將2g的API溶解在500mL的輸注溶液(4mg/mL)中。將上述制劑稀釋以產(chǎn)生具有稍高的API濃度(4.6-4.7mg/mL)的輸注溶液，以表示最壞的情況。結(jié)果示于表4中。表4：NUC-1031制劑在輸注溶液中的溶解度(p＝沉淀；c＝澄清溶液)選擇制劑B和F用于輸注袋研究。實(shí)施例4-輸注袋研究將制劑B和F(各5mL)注射到100mLWFIBaxter袋中。袋由無PVC塑料制成。這消除了浸出有毒鄰苯二甲酸酯化合物的風(fēng)險(xiǎn)。表5：WFI輸注袋中制劑B和F的溶解度(p＝沉淀；c＝澄清溶液)上述結(jié)果顯示可以產(chǎn)生包含DMA的制劑，其在用水性載體稀釋時(shí)能夠保持穩(wěn)定足夠長時(shí)間以施用于患者?？梢韵♂屩苿┲钡紻MA是相對(duì)較少的組分(1-2％)，其中溶劑的大部分剩余物是水，而沒有吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯從溶液中沉淀出來。實(shí)施例5-進(jìn)一步的制劑穩(wěn)定性研究制備和研究吉西他濱-[苯基-苯甲酰氧基-L-丙氨?；?]-磷酸酯的(S)-同分異構(gòu)體的一系列其他制劑(表6)。表6.其它(S)-同分異構(gòu)體制劑*API的效力99.1％時(shí)作為因素考慮的實(shí)際API重量對(duì)于每種制劑，API最初溶解在DMA中，然后用ELP或80在容量瓶中補(bǔ)足體積。通過施加實(shí)現(xiàn)熔融所需的最小量的熱量熔化ELP(50℃烘箱，10分鐘)。過濾和填充將制劑通過注射器過濾器手動(dòng)過濾到2mL透明玻璃小瓶中。所述制劑在過濾期間提供背壓，使得物理上難以使溶液通過給定的過濾器并且導(dǎo)致樣品損失。制劑中的ELP的濃度越大，在過濾期間經(jīng)歷的背壓越大。在用13mmWest塞密封之前用氮?dú)鉀_洗填充的小瓶的頂部空間，并用鋁外殼卷邊。所有小瓶在2-8℃下儲(chǔ)存3天，之后進(jìn)行T＝0測試并進(jìn)入穩(wěn)定狀態(tài)。在任何小瓶中沒有觀察到沉淀形成或膠凝。穩(wěn)定性對(duì)于每種制劑，在25℃下評(píng)價(jià)四個(gè)小瓶的穩(wěn)定性，在2-8℃下評(píng)價(jià)四個(gè)小瓶的穩(wěn)定性。外觀-批次1-3和5-7在所有儲(chǔ)存條件下在T＝0和1個(gè)月符合描述“澄清無色溶液，不含可見顆粒”。批次4和8在所有儲(chǔ)存條件下在T＝0和1個(gè)月符合描述“澄清的黃色溶液，不含可見顆?！?。含量測定和相關(guān)物質(zhì)-使用NUC-1031的含量測定和相關(guān)物質(zhì)方法ADP173vs.04分析樣品。對(duì)于100mg/mL樣品，使用容積式移液器將200μl轉(zhuǎn)移至20mL容量瓶中，并用稀釋劑稀釋至體積。對(duì)于75mg/mL樣品，使用容積式移液器將250μl轉(zhuǎn)移到20mL容量瓶中，并用稀釋劑稀釋至體積。表7含量測定2-8℃表8含量測定25℃/60％相對(duì)濕度然后將制劑稀釋在0.45％鹽水中，如表9所示評(píng)價(jià)穩(wěn)定性。表9制劑在0.45％鹽水中的穩(wěn)定性結(jié)果表明，在0.45％鹽水中稀釋至3mg/mL的75mg/mL制劑(J-M)物理穩(wěn)定24小時(shí)。在0.45％鹽水中稀釋至5mg/mL的100mg/mL制劑(N-Q)物理穩(wěn)定長達(dá)6小時(shí)。通過不同的操作者在不同的日子評(píng)價(jià)制劑L和O，并且獲得相同的結(jié)果。輸注溶液評(píng)價(jià)在制劑如表10所示儲(chǔ)存1個(gè)月后，通過用0.45％鹽水稀釋來評(píng)價(jià)制劑的長期穩(wěn)定性。表10.在0.45％鹽水中的制劑T＝1個(gè)月結(jié)果表明，已經(jīng)儲(chǔ)存1個(gè)月，然后在0.45％鹽水中稀釋至3mg/mL的75mg/mL制劑(J-M)和100mg/mL制劑(N-Q)在24小時(shí)后是物理穩(wěn)定的。以表11所示的多種濃度在過濾的0.45％鹽水中評(píng)價(jià)已經(jīng)在25℃儲(chǔ)存(2個(gè)月)和含有KolliphorELPTM的制劑。表11在0.45％鹽水中的NUC-1031制劑，T＝2個(gè)月，25℃結(jié)果表明，在0.45％鹽水中稀釋的制劑直至4.5mg/mL的濃度是物理穩(wěn)定的。實(shí)施例7-增溶劑的組合制備其中存在增溶劑的組合的樣品。首先，通過將S-差向異構(gòu)體溶解在DMA中，制備S-差向異構(gòu)體在DMA中的250mg/mL溶液。然后根據(jù)表12通過加入所需的增溶劑組合將其稀釋至100mg/mL溶液。將制劑各自在0.45％鹽水(pH5.9)中稀釋，得到4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL和10mg/mL的溶液。攪拌后和在環(huán)境溫度下儲(chǔ)存3小時(shí)，6小時(shí)和24小時(shí)后檢查溶液的外觀。所有溶液，包括10mg/mL的溶液，在24小時(shí)后保持澄清無色溶液。然而，制劑3的10mg/mL溶液在26小時(shí)后顯示出一些渾濁和顆粒形成。其它10mg/mL溶液的HPLC分析顯示活性物質(zhì)在溶液中的濃度和活性物質(zhì)的純度保持在預(yù)期水平。因此，使用多于一種增溶劑的組合可以允許在更高濃度下形成NUC-1031的穩(wěn)定溶液。實(shí)施例8用于配制NUC-1031的優(yōu)選制劑系統(tǒng)如下：在DMA和0.9％鹽水的80:20(體積)混合物中形成NUC-1031(S-差向異構(gòu)體，R差向異構(gòu)體或其混合物)的250mg/mL溶液。該系統(tǒng)對(duì)于NUC-1031的長期儲(chǔ)存和運(yùn)輸是足夠穩(wěn)定的。該制劑可以經(jīng)由中心管線(例如Hickman管線，PICC管線，Portacath)對(duì)患者靜脈內(nèi)施用。在施用包含NUC-1031的制劑之前和之后，通常用80:20(按體積)的DMA和0.9％鹽水的混合物沖洗靜脈內(nèi)施用裝置。這有助于減輕在與鹽水沖洗接觸時(shí)靜脈內(nèi)施用裝置中NUC-1031的任何潛在沉淀的風(fēng)險(xiǎn)?；蛘撸?dāng)靜脈內(nèi)施用到外周靜脈中是優(yōu)選的施用方法時(shí)，將該第一制劑用DMA：80：ELP的40％:40％:20％混合物稀釋至100mg/mL(例如將6.9mL的在80:20DMA：0.9％鹽水中的250mg/mLNUC-1031加入到10.35mL的DMA:80:ELP稀釋劑中)。對(duì)于S-差向異構(gòu)體和R和S差向異構(gòu)體的混合物，所得(第二)制劑已顯示穩(wěn)定長達(dá)5天。然后通過用鹽水將該第二制劑稀釋至所需濃度來制備最終施用制劑。在pH范圍(4.5,6.0和7.0)下在0.45％和0.9％鹽水中稀釋該制劑后48小時(shí)，4、8和10mg/mL的R和S差向異構(gòu)體的混合物的溶液已經(jīng)顯示出穩(wěn)定(對(duì)于NUC-1031的沉淀和對(duì)于NUC-1031的降解兩者)，條件是不攪拌混合物。所有這些溶液的摩爾滲透壓濃度也已顯示對(duì)于外周施用是可接受的。當(dāng)前第1頁1 2 3