發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于治療個體中的腎癌的方法，其包括向所述個體施用作為抗程序性死亡-1(PD-1)抗體的抗癌劑與另一抗癌劑的組合。在某些實(shí)施方案中，所述其他抗癌劑是抗細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原-4(CTLA-4)抗體、抗血管生成酪氨酸激酶抑制劑或其組合。

發(fā)明背景

人類癌癥攜帶許多遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)改變，生成潛在的可被免疫系統(tǒng)識別的新抗原(Sjoblom等人, 2006)。由T和B淋巴細(xì)胞構(gòu)成的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)具有強(qiáng)力的抗癌潛力，具有響應(yīng)于不同腫瘤抗原的廣泛能力和敏銳特異性。另外，該免疫系統(tǒng)表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)目伤苄院陀洃浗M分。對適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的所有這些屬性的成功利用將使免疫療法在所有癌癥治療形式中是獨(dú)特的。

直到最近，癌癥免疫療法將實(shí)質(zhì)努力聚焦于通過過繼性轉(zhuǎn)移(adoptive-transfer)活化的效應(yīng)細(xì)胞、針對相關(guān)抗原的免疫、或提供非特異性免疫刺激劑諸如細(xì)胞因子來增強(qiáng)抗腫瘤免疫響應(yīng)的方法。然而，在過去十年中，大力開發(fā)特異性免疫檢查點(diǎn)途徑抑制劑已經(jīng)開始提供用于治療癌癥的新免疫治療方法，包括開發(fā)結(jié)合并抑制細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞抗原-4(CTLA-4)的抗體(Ab)伊匹單抗(YERVOY^?)用于治療晚期黑色素瘤患者 (Hodi等人, 2010)和開發(fā)特異性結(jié)合程序性死亡-1(PD-1)受體并阻斷抑制性PD-1/PD-1配體途徑的Ab諸如nivolumab和派姆單抗(原為lambrolizumab；USAN Council Statement, 2013) (Topalian等人, 2012a, b; Topalian等人, 2014; Hamid等人, 2013; Hamid和Carvajal, 2013; McDermott和Atkins, 2013)。

PD-1是由激活的T和B細(xì)胞表達(dá)的關(guān)鍵免疫檢查點(diǎn)受體并介導(dǎo)免疫抑制。PD-1是CD28受體家族的成員，包括CD28、CTLA-4、ICOS、PD-1和BTLA。已經(jīng)識別出PD-1的兩種細(xì)胞表面糖蛋白配體，程序性死亡配體-1(PD-L1)和程序性死亡配體-2(PD-L2)，其在抗原遞呈細(xì)胞以及許多人類癌癥中表達(dá)，并且已顯示在結(jié)合PD-1后下調(diào)T細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分泌。對PD-1/PD-L1相互作用的抑制在臨床前模型中介導(dǎo)有效的抗腫瘤活性(美國專利號8,008,449和7,943,743)，且將PD-1/PD-L1相互作用的Ab抑制劑用于治療癌癥已進(jìn)入臨床試驗(yàn)(Brahmer等人, 2010; Topalian等人, 2012a; Topalian等人, 2014; Hamid等人, 2013; Brahmer等人, 2012; Flies等人, 2011; Pardoll, 2012; Hamid and Carvajal, 2013)。

Nivolumab(以前稱為5C4、BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538)是全人IgG4 (S228P) PD-1免疫檢查點(diǎn)抑制劑Ab，其選擇性防止與PD-1配體(PD-L1和PD-L2) 的相互作用，從而阻斷抗腫瘤T細(xì)胞功能的下調(diào)(美國專利號8008449；Wang等人，2014)。Nivolumab已在各種晚期實(shí)體瘤(包括腎細(xì)胞癌(RCC；腎腺癌或腎上腺樣瘤)、黑色素瘤和非小細(xì)胞肺癌)中顯示活性(Topalian等人, 2012a; Topalian等人, 2014; Drake等人, 2013; WO 2013/173223)。

伊匹單抗(YERVOY?)是全人IgG1單克隆Ab，其阻斷CTLA-4與其B7配體的結(jié)合，由此刺激T細(xì)胞活化并改善晚期黑色素瘤患者的總存活期(OS) (Hodi等人, 2010)。在1期臨床試驗(yàn)中用nivolumab和伊匹單抗同時治療在相當(dāng)比例的晚期黑色素瘤患者中產(chǎn)生迅速且深度的腫瘤消退，并且比任何單獨(dú)抗體明顯更有效(Wolchok等人，2013；WO 2013/173223)。然而，迄今還不知道免疫調(diào)節(jié)性Ab的這種組合在其他腫瘤類型中是否有類似效果。

腎癌(也稱為腎臟癌癥)是源于腎臟的癌癥。最常見類型的腎癌是腎細(xì)胞癌(RCC)。如果在RCC仍局限于腎臟或緊密鄰近組織時(I期)診斷出并治療，則其可以經(jīng)常通過手術(shù)切除來治愈，并且根治性切除是II期以及III期RCC的接受的、經(jīng)?？芍斡寞煼?。相反，當(dāng)存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(IV期)，無疾病存活較差。此外，無論細(xì)胞類型或分期，患有進(jìn)展中、反復(fù)中或復(fù)發(fā)中疾病的任何經(jīng)治療的RCC患者的預(yù)后也較差。約25％-30％的RCC患者在診斷時患有轉(zhuǎn)移性疾病，并且轉(zhuǎn)移性RCC的中值存活期為僅約24個月(Gupta等人, 2008; NCCN GUIDELINES?, 版本3.2014 – Kidney Cancer; Heng等人, 2009)。對于已在足夠數(shù)目的患者中研究的任何方案，對細(xì)胞毒性化療的反應(yīng)通常不超過10％。然而，對RCC生物學(xué)的日漸增進(jìn)的理解已導(dǎo)致開發(fā)且由美國食品和藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)了七種靶向特定生長途徑的新藥物。經(jīng)批準(zhǔn)的靶向療法中的兩種，替西羅莫司和依維莫司，阻斷雷帕霉素的哺乳動物靶標(biāo)(mTOR)，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分裂和存活的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。已經(jīng)開發(fā)了靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)介導(dǎo)的促血管生成途徑的若干種藥劑，包括五種口服酪氨酸激酶抑制劑(TKI)，帕唑帕尼、索拉非尼、舒尼替尼、阿西替尼和tivozanib，和抗VEGF單克隆抗體(mAb)，貝伐單抗。這些藥物顯示出臨床功效和改善的無進(jìn)展存活 (PFS)，但持久性反應(yīng)是罕見的。VEGF TKI已經(jīng)顯示抑制免疫抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg細(xì)胞)和髓源抑制細(xì)胞(MDSC)，使得免疫環(huán)境更利于T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤活性。此外，靶向VEGF軸可以減弱RCC-誘導(dǎo)的免疫抑制，當(dāng)組合使用時允許腫瘤變得對免疫調(diào)節(jié)更具反應(yīng)性，并由此導(dǎo)致更大和更持久的治療益處。

如本文所述，已經(jīng)在臨床前RCC小鼠模型中研究了nivolumab與兩種抗血管生成(抗VEGF) TKI，舒尼替尼(SUTENT?)或索拉非尼(NEXAVAR?)的組合的活性。本文還提供了關(guān)于nivolumab與舒尼替尼、帕唑帕尼(VOTRIENT?)或伊匹單抗的組合的臨床數(shù)據(jù)。

發(fā)明概述

本公開提供了用于治療患有腎癌的個體的方法，其包括向所述個體施用治療有效量的以下的組合：(a)特異性結(jié)合并抑制PD-1的Ab或其抗原結(jié)合部分；和(b)另一抗癌劑。在某些實(shí)施方案中，所述其他抗癌劑是(i)特異性結(jié)合并抑制CTLA-4的Ab或其抗原結(jié)合部分，(ii)抗血管生成TKI，或(iii)其組合。在一些實(shí)施方案中，所述腎癌是RCC。在本文公開的任何治療方法的某些實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是nivolumab。在其他實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是派姆單抗。在本文公開的任何治療方法的某些其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是伊匹單抗。在其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是tremelimumab。在又其他實(shí)施方案中，所述TKI是舒尼替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、阿西替尼或tivozanib。

在某些實(shí)施方案中，所述個體已經(jīng)針對腎癌進(jìn)行了預(yù)先治療。在其他實(shí)施方案中，所述腎癌是晚期、轉(zhuǎn)移性和/或難治性癌癥。在一些實(shí)施方案中，施用Ab或其抗原結(jié)合部分與TKI的組合誘導(dǎo)所述個體中的持久性臨床反應(yīng)。

在某些實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與其他抗癌劑的組合導(dǎo)致腎癌組織或腫瘤的T細(xì)胞浸潤相對于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分或其他抗癌劑的單一療法治療的個體增加。在其他實(shí)施方案中，所述T細(xì)胞浸潤增加的特征在于CD4⁺ T細(xì)胞、CD8⁺ T細(xì)胞或兩者至腎癌組織或腫瘤中的浸潤增加。在仍其他實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與另一抗癌劑的組合導(dǎo)致T細(xì)胞增殖增加。在另一個實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與其他抗癌劑的組合導(dǎo)致T調(diào)節(jié)性細(xì)胞相對于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分或其他抗癌劑的單一療法治療的個體減少。

在某些實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與另一抗癌劑的組合減少單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與另一抗癌劑的組合相對于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分或其他抗癌劑的單一療法治療的個體增加粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞的數(shù)目。在一些實(shí)施方案中，所述單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞的特征在于CD11b⁺/Ly6C^高/Ly6G^-的表達(dá)或CD11b⁺/Ly6C^低/Ly6G^-的表達(dá)。在其他實(shí)施方案中，所述粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞的特征在于CD11b⁺/Ly6C^-/Ly6G⁺的表達(dá)。

在包括使用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與TKI的組合的方法的某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分的治療有效劑量范圍為約0.1至約10.0 mg/kg體重，約每2-4周通過靜脈內(nèi)輸注施用一次。在某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分以約2 mg/kg或約5 mg/kg的劑量施用，每三周一次。

對于抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體的組合，在某些實(shí)施方案中，所述方法包括(a)誘導(dǎo)階段，其包括以3周時間間隔施用4劑抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體，劑量如下：(i) 約1 mg/kg抗PD-1抗體和約3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(ii) 約3 mg/kg抗PD-1抗體和約3 mg/kg抗CTLA-4抗體；或(iii) 約3 mg/kg抗PD-1抗體和約1 mg/kg抗CTLA-4抗體；和(b)維持階段，其包括每2周以約3 mg/kg的劑量重復(fù)施用抗PD-1抗體。

本公開還提供了用于治療患有腎癌的個體的藥劑盒，所述藥劑盒包括：(a)特異性結(jié)合并抑制PD-1的Ab或其抗原結(jié)合部分的劑量；(b) (i) 特異性結(jié)合并抑制CTLA-4的Ab或其抗原結(jié)合部分或(ii)抗血管生成TKI(例如舒尼替尼或帕唑帕尼)的劑量之一；和(c)使用抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體或TKI以治療個體的說明書。

本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)從以下詳細(xì)說明和實(shí)施例將是明顯的，所述詳細(xì)說明和實(shí)施例不應(yīng)被解讀為限制性的。所有引用參考文獻(xiàn)的內(nèi)容，包括整個本申請中引用的科學(xué)論文、報紙報道、GenBank條目、專利和專利申請，明確通過引用并入本文。

附圖簡述

圖1顯示用下列治療劑治療對平均腫瘤體積生長的影響：對照(實(shí)心圓形)、舒尼替尼(空心圓形)、索拉非尼(實(shí)心三角形)、抗PD-1(實(shí)心倒三角形)、舒尼替尼+抗PD-1(空心正方形)和索拉非尼+抗PD-1(實(shí)心菱形)。

圖2顯示用對照(實(shí)心圓形)、舒尼替尼(空心圓形)、索拉非尼(實(shí)心三角形)、抗PD-1(實(shí)心倒三角形)、舒尼替尼+抗PD-1(空心正方形)和索拉非尼+抗PD-1(實(shí)心菱形)治療的腫瘤達(dá)到500 mm³的體積所花費(fèi)的時間。

圖3顯示用下列治療劑治療對體重的百分比變化的影響：對照(實(shí)心圓形)、舒尼替尼(空心圓形)、索拉非尼(實(shí)心三角形)、抗PD-1(實(shí)心倒三角形)、舒尼替尼+抗PD-1(空心正方形)和索拉非尼+抗PD-1(實(shí)心菱形)。

圖4顯示用對照、單獨(dú)的抗PD-1、單獨(dú)的舒尼替尼或抗PD-1與舒尼替尼的組合治療后CD4⁺和CD8⁺ T浸潤入Renca腫瘤中。

圖5顯示用單獨(dú)的舒尼替尼、索拉非尼或抗PD-1抗體或抗PD-1抗體與舒尼替尼或索拉非尼的組合治療之后在Renca腫瘤模型中通過流式細(xì)胞術(shù)評估腫瘤浸潤的CD4⁺免疫細(xì)胞的組成。

圖6顯示用單獨(dú)的舒尼替尼、索拉非尼或抗PD-1抗體或抗PD-1抗體與舒尼替尼或索拉非尼的組合治療之后在Renca腫瘤模型中通過流式細(xì)胞術(shù)評估腫瘤浸潤的CD8⁺免疫細(xì)胞的組成。

圖7顯示用單獨(dú)的舒尼替尼、索拉非尼或抗PD-1抗體或抗PD-1抗體與舒尼替尼或索拉非尼的組合治療之后在Renca腫瘤模型中評估骨髓來源的腫瘤浸潤細(xì)胞亞群(CD11b⁺/Ly6C^高/Ly6G^–、CD11b⁺/Ly6C^低/Ly6G^–或CD11b⁺/Ly6C^–/Ly6G⁺)。門控：細(xì)胞→ 單體(Singlets) → Cd45⁺/活 → CD11b⁺。

圖8顯示抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合對CT26腫瘤模型中的肽特異性細(xì)胞毒性反應(yīng)的影響。X軸顯示細(xì)胞殺傷的百分比。各條從上到下代表(i)對照，(ii)抗PD-1 10 mg/kg, Q3D x 2 IP，(iii)舒尼替尼120 mg/kg, QD x 5, PO, 和(iv)抗PD-1 + 舒尼替尼。

圖9顯示抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合對CT26腫瘤模型中的腫瘤體積的影響。對于對照、抗PD-1 10 mg/kg Q3Dx IP、舒尼替尼120mg/kg QDx5 PO和抗PD-1 +舒尼替尼的施用，腫瘤體積(mm3)顯示于y-軸。

圖10A和10B顯示1期研究的設(shè)計。圖10A和10B分別顯示患有晚期或轉(zhuǎn)移性RCC (mRCC) (NCT01472081)的個體中nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼的組合(A)或nivolumab與伊匹單抗的組合(B)的研究設(shè)計。*當(dāng)兩個劑量遞增組開放時，將先前已接受針對晚期/轉(zhuǎn)移性RCC的至少一個全身性治療方案但先前沒有接受過帕唑帕尼或舒尼替尼的個體以交替方式指定至兩個組。如果僅一個組開放，則將這些個體均指定至開放組。**直到疾病進(jìn)展(PD)或藥物相關(guān)的毒性導(dǎo)致停藥或個體撤回同意書。***當(dāng)兩個伊匹單抗組合組(I-1和I-3)都開放時，將先前已接受至少一次全身性療法且當(dāng)遞增階段組S和/或P開放時沒有資格參加那些組的個體以交替方式指定至這些組。如果僅一個組開放，則將這些個體均指定至開放組。#如果所有組都開放，將未經(jīng)治療的個體以1:1:1:1比率隨機(jī)指定至4個組(擴(kuò)展組S和P，以及I-1和I-3)之一，直到所有登記都完成。##直到疾病進(jìn)展(PD)或藥物相關(guān)的毒性導(dǎo)致停藥或個體撤回同意書。在經(jīng)歷研究者評估的臨床益處和耐受研究療法的個體中考慮進(jìn)行超出最初研究者評估的RECIST 1.1定義的進(jìn)展之外的治療。當(dāng)記錄到進(jìn)一步進(jìn)展時，要求這類個體停止治療。###對于I-1和I-3組群擴(kuò)展和IN 3劑量添加組群，允許針對局部或局部晚期RCC的一種現(xiàn)有輔助或新輔助療法，條件是在所述輔助或新輔助療法的最后一劑之后≥6個月出現(xiàn)復(fù)發(fā)。允許針對RCC的現(xiàn)有基于細(xì)胞因子的治療[例如，干擾素-α(IFN-α)或白介素-2(IL-2)]作為在前療法。如果所有組都開放，則將這些經(jīng)最小程度治療(包括未經(jīng)治療)的個體以1:1:1比率隨機(jī)指定至這3個組(I-1、I-3和IN-3)之一，直到所有登記都完成。

圖11顯示在nivolumab組合療法研究的S和P組中進(jìn)行的劑量遞增。S組包含施用S + N2的7名預(yù)治療的個體；施用S + N5的7名預(yù)治療的個體；和進(jìn)入S + N5擴(kuò)展的19名未經(jīng)治療的患者。P組包括施用P + N2的20名預(yù)治療的個體。P組沒有擴(kuò)展。

圖12A-D顯示用nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼的組合治療的RCC個體的臨床活性。蜘蛛圖顯示接受各種方案的個體中的腫瘤負(fù)荷從基線的百分比變化，以所有目標(biāo)病灶的垂直直徑的乘積之和測量。圖12A顯示舒尼替尼與2 mg/kg nivolumab的方案。圖12B顯示舒尼替尼與5 mg/kg nivolumab的方案。圖12C顯示帕唑帕尼與2 mg/kg nivolumab的方案?！?”表明新病灶的第一次出現(xiàn)。圖12D是顯示S和P組中的個體的基線目標(biāo)病灶的最大百分比反應(yīng)的瀑布圖。示出了具有基線目標(biāo)病灶和至少一個基線后目標(biāo)病灶評估的個體。腫瘤負(fù)荷的正向變化表明腫瘤生長；腫瘤負(fù)荷的負(fù)向變化表明腫瘤縮小。在蜘蛛圖和瀑布圖中，水平線代表30％減少(PR的1.1 RECIST閾值)和20％減少(PD的1.1 RECIST閾值)。并非所有從基線的30％或更大降低都是PR。

圖13顯示用nivolumab與舒尼替尼(S + N)或nivolumab與帕唑帕尼(P + N)治療的個體的針對時間作圖的無進(jìn)展存活(PFS)的比例。符號代表經(jīng)審查的觀察。所列具有風(fēng)險的患者的數(shù)目是在進(jìn)入該時間段之前即具有風(fēng)險的數(shù)目。Tx：治療。

圖14A-14D顯示用伊匹單抗與nivolumab的組合治療的RCC個體的臨床活性。蜘蛛圖顯示接受各種方案的個體中的腫瘤負(fù)荷從基線的百分比變化，以所有目標(biāo)病灶的垂直直徑的乘積之和測量。圖14A顯示3 mg/kg伊匹單抗與1 mg/kg nivolumab的方案。圖14B顯示1 mg/kg伊匹單抗與3 mg/kg nivolumab的方案。圖14C顯示3 mg/kg伊匹單抗與3 mg/kg nivolumab的方案?！?”表明新病灶的第一次出現(xiàn)。圖14D是顯示I-1、I-3和IN-3組中的個體的基線目標(biāo)病灶的最大百分比反應(yīng)的瀑布圖。示出了具有基線目標(biāo)病灶和至少一個基線后目標(biāo)病灶評估的個體。腫瘤負(fù)荷的正向變化表明腫瘤生長；腫瘤負(fù)荷的負(fù)向變化表明腫瘤縮小。在蜘蛛圖和瀑布圖中，水平線代表30％減少(PR的1.1 RECIST閾值)和20％減少(PD的1.1 RECIST閾值)。并非所有從基線的30％或更大降低都是PR。

圖15顯示S、P和I組中的個體的瀑布圖的比較。示出了具有基線目標(biāo)病灶和至少一個基線后目標(biāo)病灶評估的個體。腫瘤負(fù)荷的正向變化表明腫瘤生長；腫瘤負(fù)荷的負(fù)向變化表明腫瘤縮小。水平線代表30％減少(PR的1.1 RECIST閾值)和20％減少(PD的1.1 RECIST閾值)。并非所有從基線的30％或更大降低都是PR。

圖16顯示用1 mg/kg伊匹單抗 + 3 mg/kg nivolumab (IPI1+INV3) (星號)、3 mg/kg伊匹單抗 + 1 mg/kg nivolumab (IPI3 + NIV1)(圓形)和3 mg/kg nivolumab + 3 mg/kg伊匹單抗(IPI3 + NIV3)(三角形)治療的個體針對從第一劑量起的時間(周數(shù))作圖的PFS的比例。符號代表經(jīng)審查的觀察。所列具有風(fēng)險的患者的數(shù)目是在進(jìn)入該時間段之前即具有風(fēng)險的數(shù)目。

發(fā)明詳述

本發(fā)明涉及用于治療腎癌患者的方法，其包括向所述患者施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合片段與另一抗癌劑的組合。在某些實(shí)施方案中，所述其他抗癌劑是抗- CTLA-4抗體、抗血管生成TKI或其任何組合。

術(shù)語

為了可以更容易理解本公開，首先定義某些術(shù)語。如本申請中所用，除了本文另行明確提供以外，下列每個術(shù)語應(yīng)當(dāng)具有下述含義。額外定義記載于整個申請中。

“施用”是指使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何各種方法和遞送系統(tǒng)將包含治療劑的組合物身體引入個體。抗PD-1抗體的優(yōu)選施用途徑包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、脊髓或其他腸胃外施用途徑，例如通過注射或輸注。如本文中所用的短語“腸胃外施用”是指除了腸內(nèi)和局部施用以外的施用模式，通常通過注射，并且包括，但不限于，靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)、淋巴內(nèi)、病灶內(nèi)、囊內(nèi)、眼眶內(nèi)、心內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊柱內(nèi)、硬膜外和胸骨內(nèi)注射和輸注，以及體內(nèi)電穿孔。TKI通常經(jīng)由非腸胃外途徑施用，優(yōu)選口服施用。其他腸胃外途徑包括局部、表皮或粘膜施用途徑，例如，鼻內(nèi)、陰道、直腸、舌下或局部。施用也可以進(jìn)行，例如，一次，多次和/或在一個或多個延長時段內(nèi)。

如本文中所用，“不良事件”(AE)是任何不利且通常無意或不期望的與藥物治療的使用相關(guān)的體征(包括異常的實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn))、癥狀或疾病。例如，不良事件可以與響應(yīng)于治療的免疫系統(tǒng)活化或免疫系統(tǒng)細(xì)胞(例如T細(xì)胞)擴(kuò)增相關(guān)。藥物治療可具有一種或多種相關(guān)的AE，并且每個AE可具有相同或不同水平的嚴(yán)重程度。對能夠“改變不良事件”的方法的提及是指減少與不同治療方案的使用相關(guān)的一種或多種AE的發(fā)生和/或嚴(yán)重程度的治療方案。

“抗體”(Ab)應(yīng)當(dāng)包括而不限于：特異性結(jié)合抗原且包含至少2條重(H)鏈和2條輕(L)鏈的糖蛋白免疫球蛋白或其抗原結(jié)合部分，所述重鏈和輕鏈通過二硫鍵互相連接。每條H鏈包含一個重鏈可變區(qū)(本文縮寫為V_H)和一個重鏈恒定區(qū)。所述重鏈恒定區(qū)包含三個恒定結(jié)構(gòu)域，C_H1、C_H2和C_H3。每條輕鏈包含一個輕鏈可變區(qū)(本文縮寫為V_L)和一個輕鏈恒定區(qū)。所述輕鏈恒定區(qū)包含一個恒定結(jié)構(gòu)域，C_L。V_H和V_L區(qū)域可以進(jìn)一步細(xì)分為高變區(qū)，稱為互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，其間散布著更保守的區(qū)域，稱為框架區(qū)(FR)。每個V_H和V_L包含三個CDR和四個FR，從氨基末端至羧基末端以下列順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈和輕鏈的可變區(qū)含有與抗原相互作用的結(jié)合結(jié)構(gòu)域?？贵w的恒定區(qū)可以介導(dǎo)免疫球蛋白與宿主組織或因子(包括免疫系統(tǒng)的各種細(xì)胞(例如效應(yīng)細(xì)胞)和經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的第一組分(C1q))的結(jié)合。

免疫球蛋白可以來源于任何通常已知的同種型，包括但不限于 IgA、分泌型IgA、IgG和IgM。IgG亞類也是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，并包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3和IgG4?！巴N型”是指由重鏈恒定區(qū)基因編碼的Ab種類或亞類(例如，IgM或IgG1)。通過實(shí)例的方式，術(shù)語“抗體”包括天然存在和非天然存在的Ab；單克隆和多克隆Ab；嵌合和人源化Ab；人或非人Ab；完全合成Ab；和單鏈Ab。非人Ab可通過重組方法來人源化以減少其在人體內(nèi)的免疫原性。當(dāng)無明確記載且除非上下文另有表示時，術(shù)語“抗體”也包括前述免疫球蛋白中任一種的抗原結(jié)合片段或抗原結(jié)合部分，且包括單價和二價片段或部分，以及單鏈Ab。

“分離抗體”是指基本上不含其他具有不同抗原特異性的Ab的Ab (例如，特異性結(jié)合PD-1的分離Ab基本上不含特異性結(jié)合除了PD-1以外的抗原的Ab)。然而，特異性結(jié)合PD-1的分離Ab可與其他抗原諸如來自不同物種的PD-1分子具有交叉反應(yīng)性。此外，分離Ab可以基本上不含其他細(xì)胞物質(zhì)和/或化學(xué)物質(zhì)。

術(shù)語“單克隆抗體”(“mAb”)是指具有單分子組成的Ab分子（即其一級序列基本相同且表現(xiàn)出對特定表位的單一結(jié)合特異性和親和力的Ab分子）的非天然存在的制備物。mAb是分離Ab的實(shí)例。MAb可通過雜交瘤、重組、轉(zhuǎn)基因或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他技術(shù)來產(chǎn)生。

“人”抗體(HuMAb)是指具有可變區(qū)的Ab，其中所述可變區(qū)中的框架區(qū)和CDR區(qū)域都來源于人類種系免疫球蛋白序列。此外，如果該Ab含有恒定區(qū)，則所述恒定區(qū)也來源于人類種系免疫球蛋白序列。本發(fā)明的人Ab可以包含不是由人類種系免疫球蛋白序列編碼的氨基酸殘基(例如，通過體外隨機(jī)或位點(diǎn)特異性誘變或通過體內(nèi)體細(xì)胞突變引入的突變)。然而，如本文中所用，術(shù)語“人抗體”并非意在包括這樣的Ab，其中來源于另一哺乳動物物種(諸如小鼠)的種系的CDR序列被嫁接至人框架序列上。術(shù)語“人”Ab和“全人”Ab同義使用。

“人源化抗體”是指這樣的Ab，其中非人Ab的CDR結(jié)構(gòu)域之外的一些、大部分或所有氨基酸被對應(yīng)的來源于人免疫球蛋白的氨基酸替代。在Ab的人源化形式的一個實(shí)施方案中，CDR結(jié)構(gòu)域之外的一些、大部分或所有氨基酸已被來自人免疫球蛋白的氨基酸替代，而一個或多個CDR區(qū)域內(nèi)的一些、大部分或所有氨基酸不變。氨基酸的小的添加、缺失、插入、置換或修飾是允許的，只要它們沒有消除Ab結(jié)合特定抗原的能力。“人源化”抗體保留與原始Ab類似的抗原特異性。

“嵌合抗體”是指其中可變區(qū)來源于一個物種、而恒定區(qū)來源于另一物種的Ab，諸如其中可變區(qū)來源于小鼠Ab、而恒定區(qū)來源于人Ab的Ab。

“抗-抗原”抗體是指特異性結(jié)合抗原的抗體。例如，抗PD-1抗體特異性結(jié)合PD-1而抗CTLA-4抗體特異性結(jié)合CTLA-4。

Ab的“抗原結(jié)合部分”(也稱為“抗體結(jié)合片段”)是指Ab的一個或多個片段，其保留特異性結(jié)合完整Ab所結(jié)合的抗原的能力。

“癌癥”是指特征在于體內(nèi)異常細(xì)胞不受控制的生長的各種疾病的一大類。不受調(diào)節(jié)的細(xì)胞分裂和生長導(dǎo)致惡性腫瘤的形成，所述惡性腫瘤侵入鄰近組織并還可通過淋巴系統(tǒng)或血流向身體的遠(yuǎn)處部分轉(zhuǎn)移?！鞍┌Y”和“癌組織”可以包括腫瘤。

“細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原-4(CTLA-4)是指屬于CD28家族的免疫抑制受體。CTLA-4在體內(nèi)專門表達(dá)于T細(xì)胞上，并結(jié)合兩種配體，CD80和CD86(也分別稱為B7-1和B7-2)。如本文中所用，術(shù)語“CTLA-4”包括人CTLA-4(hCTLA-4)，hCTLA-4的變體、同種型和物種同系物，以及與hCTLA-4具有至少一個共同表位的類似物。完整hCTLA-4序列可見于GenBank登錄號AAB59385下。

術(shù)語“免疫療法”是指通過包括誘導(dǎo)、增強(qiáng)、抑制或以其他方式改變免疫反應(yīng)的方法治療患有疾病或具有接觸(contracting)或遭受疾病復(fù)發(fā)的風(fēng)險的個體。

患者的“治療”或“療法”是指對個體進(jìn)行的任何類型的干預(yù)或處理或活性劑的施用，其目標(biāo)在于逆轉(zhuǎn)、緩解、改善、抑制、減緩或預(yù)防與疾病相關(guān)的癥狀、并發(fā)癥、病況或生化指標(biāo)的發(fā)作、進(jìn)展、發(fā)展、嚴(yán)重程度或復(fù)發(fā)。

“程序性死亡-1(PD-1)”受體是指屬于CD28家族的免疫抑制性受體。PD-1主要在之前活化的T細(xì)胞上體內(nèi)表達(dá)，并結(jié)合兩種配體，PD-1和 PD-2。如本文中所用，術(shù)語“PD-1”包括人PD-1 (hPD-1)，hPD-1的變體、同種型和物種同系物，以及與hPD-1具有至少一個共同表位的類似物。完整hPD-1序列可見于GenBank登錄號U64863下。

“程序性死亡配體-1(PD-L1)”是PD-1的兩種細(xì)胞表面糖蛋白配體之一(另一種是PD-L2)，其在結(jié)合PD-1后下調(diào)T細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分泌。如本文中所用，術(shù)語“PD-L1”包括人PD-L1 (hPD-L1)，hPD-L1的變體、同種型和物種同系物，以及與hPD-L1具有至少一個共同表位的類似物。完整hPD-L1序列可見于GenBank登錄號Q9NZQ7下。

“個體”包括任何人或非人動物。術(shù)語“非人動物”包括但不限于，脊椎動物諸如非人靈長類、綿羊、狗，和嚙齒類諸如小鼠、大鼠和豚鼠。在一些實(shí)施方案中，個體是人。術(shù)語“個體”和“患者”在本文中可互換使用。

藥物或治療劑的“治療有效量”或“治療有效劑量”是藥物的任何這樣的劑量，當(dāng)單獨(dú)使用或與另一治療劑組合使用時，其保護(hù)個體免于疾病的發(fā)作或促進(jìn)疾病消退，所述疾病消退通過疾病癥狀的嚴(yán)重程度降低、疾病無癥狀期的頻率和持續(xù)時間的增加或防止由于患有疾病導(dǎo)致的損傷或殘疾來證明。治療劑促進(jìn)疾病消退的能力可使用技術(shù)人員已知的各種方法來評價，諸如在臨床試驗(yàn)期間的人類個體中、在預(yù)測人類中的功效的動物模型系統(tǒng)中、或通過在體外測定中測定所述藥劑的活性。

如本文中所用，術(shù)語“亞治療劑量”或“亞治療有效量”是指低于治療化合物 (例如，抗體)在單獨(dú)施用用于治療過度增殖性疾病(例如癌癥)時的通常或典型劑量的治療化合物的劑量。例如，抗PD1抗體(nivolumab)的亞治療劑量是小于約3 mg/kg的該抗體的單一劑量。

替代方案(例如，“或”)的使用應(yīng)被理解為是指替代方案中的任一種、兩種或其任何組合。如本文中所用，不定冠詞“一者(a或an)”應(yīng)被理解為是指任何記載或列舉組分中的“一者或多者”。

通過實(shí)例的方式，“抗癌劑”促進(jìn)個體中的癌癥消退。在其他實(shí)施方案中，治療有效量的藥物促進(jìn)癌癥消退至清除癌癥的點(diǎn)。“促進(jìn)癌癥消退”意味著單獨(dú)或與抗腫瘤劑組合施用有效量的藥物導(dǎo)致腫瘤生長或大小的降低、腫瘤壞死、至少一種疾病癥狀的嚴(yán)重程度減低、疾病無癥狀期的頻率和持續(xù)時間增加、或防止由于患有疾病導(dǎo)致的損傷或殘疾。此外，關(guān)于治療的術(shù)語“有效”和“有效性”包括藥學(xué)有效性和生理學(xué)安全性。藥學(xué)有效性是指藥物在患者中促進(jìn)癌癥消退的能力。生理學(xué)安全性是指由藥物施用導(dǎo)致的細(xì)胞、器官和/或組織水平的毒性或其他不良生理作用(不良作用)的水平。

通過腫瘤治療的實(shí)例的方式，治療有效量的藥物優(yōu)選相對于未經(jīng)治療的個體將細(xì)胞生長或腫瘤生長抑制至少約20％，更優(yōu)選至少約40％、甚至更優(yōu)選至少約60％、并且仍更優(yōu)選至少約80％。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，可觀察到腫瘤消退并持續(xù)至少約20天、更優(yōu)選至少約40天或甚至更優(yōu)選至少約60天的時段。盡管存在治療有效性的這些最終測量，但對免疫治療藥物的評價也必須考慮到“免疫相關(guān)的”反應(yīng)模式。

“免疫相關(guān)的”反應(yīng)模式是指在用免疫治療劑治療的癌癥患者中觀察到的臨床反應(yīng)模式，所述免疫治療劑通過誘導(dǎo)癌癥特異性免疫反應(yīng)或通過修飾天然免疫過程來產(chǎn)生抗腫瘤效果。該反應(yīng)模式的特征在于在腫瘤負(fù)荷的初始增加或新病灶的出現(xiàn)之后的有益的治療效果，所述腫瘤負(fù)荷的初始增加或新病灶的出現(xiàn)在傳統(tǒng)化療劑的評價中將被歸類為疾病進(jìn)展，并且將與藥物失敗同義。因此，對免疫治療劑的正確評價可能需要長期監(jiān)測這些藥劑對目標(biāo)疾病的效果。

藥物的治療有效量包括“預(yù)防有效量”，其是任何這樣的藥物量，當(dāng)藥物單獨(dú)或與抗腫瘤劑組合向具有發(fā)展癌癥(例如，具有惡性前病況的個體)或遭受癌癥復(fù)發(fā)的風(fēng)險的個體施用時，抑制癌癥的發(fā)展或復(fù)發(fā)。在實(shí)施方案中，預(yù)防有效量完全預(yù)防癌癥的發(fā)展或復(fù)發(fā)。“抑制” 癌癥的發(fā)展或復(fù)發(fā)意指減小癌癥發(fā)展或復(fù)發(fā)的可能性，或完全預(yù)防癌癥的發(fā)展或復(fù)發(fā)。

替代方案(例如，“或”)的使用應(yīng)被理解為是指替代方案中的任一種、兩種或其任何組合。如本文中所用，不定冠詞“一者(a或an)”應(yīng)被理解為是指任何記載或列舉組分中的“一者或多者”。

術(shù)語“約”或“基本上包含”是指如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所確定的特定值或組成的可接 受誤差范圍內(nèi)的值或組成，其部分取決于如何測量或確定所述值或組成，即測量系統(tǒng)的限制。例如，“約”或“基本上包含”可以是指根據(jù)本領(lǐng)域中的實(shí)踐在1個或大于1個標(biāo)準(zhǔn)偏差內(nèi)?；蛘?，“約” 或“基本上包含”可以是指多達(dá)10%或20%的范圍(即，±10%或±20%)。例如，約3mg/kg可包括2.7 mg/kg和3.3 mg/kg之間(對于10%)和2.4 mg/kg和3.6 mg/kg之間(對于20%)的任何數(shù)目。此外，特別是關(guān)于生物系統(tǒng)或方法，所述術(shù)語可以是指該值的多達(dá)一個數(shù)量級或多達(dá)5倍。當(dāng)在本申請或權(quán)利要求中提供特定值或組成時，除非另有說明，“約”或“基本上包含”的含義應(yīng)假設(shè)為在該特定值或組成的可接受誤差范圍內(nèi)。

如本文所述，任何濃度范圍、百分率范圍、比率范圍或整數(shù)范圍應(yīng)理解為包括所述范圍內(nèi)的任何整數(shù)值，并且，當(dāng)適當(dāng)時，包括其分?jǐn)?shù)(諸如整數(shù)的十分之一或百分之一)，除非另有指明。

在以下段落中進(jìn)一步詳細(xì)描述了本發(fā)明的各個方面。

抗PD-1抗體

PD-1是由活化的T細(xì)胞和B細(xì)胞表達(dá)的關(guān)鍵免疫檢查點(diǎn)受體并介導(dǎo)免疫抑制。PD-1是CD28受體家族的成員，包括CD28、CTLA-4、ICOS、PD-1和BTLA。已經(jīng)識別出PD-1的兩種細(xì)胞表面糖蛋白配體，程序性死亡配體-1(PD-L1)和程序性死亡配體-2(PD-L2)，其在抗原遞呈細(xì)胞以及許多人類癌癥中表達(dá)，并且已顯示在結(jié)合PD-1后下調(diào)T細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分泌。對PD-1/PD-L1相互作用的抑制介導(dǎo)臨床前模型中有效的抗腫瘤活性。

以高親和力特異性結(jié)合PD-1的HuMAb已公開于美國專利號8,008,449和8,779,105中。其他抗PD-1 mAb已描述于，例如，美國專利號6,808,710、7,488,802、8,168,757和8,354,509以及PCT公開號WO 2012/145493中。美國專利號8,008,449中公開的每一種抗PD-1 HuMAb均已被證明具有以下特征中的一種或多種：(a)以1 x 10^-7 M或更低的K_D結(jié)合人PD-1，如通過表面等離振子共振使用Biacore生物感應(yīng)器系統(tǒng)所測定；(b)基本上不結(jié)合人 CD28、CTLA-4或ICOS；(c)在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)測定中增加T細(xì)胞增殖；(d)在MLR測定中增加干擾素-γ產(chǎn)生；(e)在MLR測定中增加IL-2分泌；(f)結(jié)合人PD-1和食蟹猴PD-1；(g)抑制 PD-L1和/或PD-L2與PD-1的結(jié)合；(h)刺激抗原特異性記憶反應(yīng)；(i)刺激Ab反應(yīng)；和(j) 體內(nèi)抑制腫瘤細(xì)胞生長?？捎糜诒景l(fā)明中的抗PD-1抗體包括特異性結(jié)合人PD-1并具有前述特征中的至少一種、優(yōu)選至少五種的mAb。

在一個實(shí)施方案中，抗PD-1抗體是nivolumab。Nivolumab(也稱為“Opdivo^?”；以前稱為5C4、BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538)是全人IgG4 (S228P) PD-1免疫檢查點(diǎn)抑制劑Ab，其選擇性防止與PD-1配體(PD-L1和PD-L2) 的相互作用，從而阻斷抗腫瘤T細(xì)胞功能的下調(diào)(美國專利號8008449；Wang等人，2014 Cancer Immunol Res.2(9):846-56)。

在另一個實(shí)施方案中，抗PD-1抗體是派姆單抗。派姆單抗(也稱為“Keytruda^?”，lambrolizumab，和MK-3475)是針對人細(xì)胞表面受體PD-1(程序性死亡-1或程序性細(xì)胞死亡-1)的人源化單克隆IgG4抗體。派姆單抗描述于，例如，美國專利號8,354,509和8,900,587；還參見(最后登錄：2014年12月14日)。派姆單抗已經(jīng)由FDA批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)或難治性黑色素瘤。

在其他實(shí)施方案中，抗PD-1抗體是MEDI0608(原為AMP-514)，其為單克隆抗體。MEDI0608描述于，例如，美國專利號8,609,089B2或(最后登錄：2014年12月14日)。

在一些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體是Pidilizumab (CT-011)，其為人源化單克隆抗體。Pidilizumab描述于美國專利號8,686,119 B2或WO 2013/014668 A1中。

可用于本公開方法中的抗PD-1抗體還包括特異性結(jié)合人PD-1并與nivolumab交叉競爭結(jié)合人PD-1的分離Ab (參見，例如，美國專利號8,008,449和8,779,105；WO 2013/173223)。Ab交叉競爭結(jié)合抗原的能力表明這些Ab結(jié)合抗原的相同表位區(qū)，并空間阻礙其他交叉競爭性Ab與該具體表位區(qū)域的結(jié)合。預(yù)期這些交叉競爭性Ab憑借其與PD-1 的相同表位區(qū)域的結(jié)合而具有與nivolumab非常類似的功能特性?？梢栽跇?biāo)準(zhǔn)PD-1結(jié)合測定諸如Biacore分析、ELISA測定或流式細(xì)胞術(shù)中基于其與nivolumab交叉競爭的能力來容易地識別交叉競爭性Ab(參見，例如，WO 2013/173223)。

在某些實(shí)施方案中，與nivolumab交叉競爭結(jié)合人PD-1或結(jié)合人PD-1的相同表位區(qū)域的Ab是mAb。對于施用于人類個體，這些交叉競爭Ab優(yōu)選為嵌合Ab，或更優(yōu)選為人源化或人Ab。這樣的嵌合、人源化或人mAb可以通過本領(lǐng)域眾所周知的方法制備和分離。

可用于本公開發(fā)明的方法中的抗PD-1抗體還包括上述Ab的抗原結(jié)合部分。已充分證明，Ab的抗原結(jié)合功能可通過全長Ab的片段來進(jìn)行。術(shù)語Ab的“抗原結(jié)合部分”所涵蓋的結(jié)合片段的實(shí)例包括(i)Fab片段，由V_L、V_H、C_L和C_H1結(jié)構(gòu)域組成的單價片段；(ii) F(ab’)₂片段，包含通過二硫鍵在鉸鏈區(qū)連接的兩個Fab片段的二價片段；(iii)由V_H和C_H1結(jié)構(gòu)域組成的Fd片段；和(iv)由Ab的單一臂的V_L和V_H結(jié)構(gòu)域組成的Fv片段。

抗CTLA-4抗體

本發(fā)明的抗CTLA-4抗體結(jié)合人CTLA-4從而破壞CTLA-4與人B7受體的相互作用。因?yàn)镃TLA-4與B7的相互作用轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致攜帶CTLA-4受體的T細(xì)胞失活的信號，所以相互作用的破壞有效地誘導(dǎo)、增強(qiáng)或延長此類T細(xì)胞的活化，從而誘導(dǎo)、增強(qiáng)或延長免疫反應(yīng)。

以高親和力特異性結(jié)合CTLA-4的HuMAb已公開于美國專利號6,984,720和7,605,238中。其他抗PD-1 mAb已描述于，例如，美國專利號5,977,318、6,051,227、6,682,736和7,034,121。美國專利號6,984,720和7,605,238中公開的抗PD-1 HuMAb已被證明具有以下特征中的一種或多種：(a)特異性結(jié)合人CTLA-4，其結(jié)合親和力反映為至少約10⁷ M^-1或約10⁹M^-1或約10¹⁰ M^-1至10¹¹ M^-1或更高的平衡結(jié)合常數(shù)(K_a)，如通過Biacore分析所測定；(b)至少約10³、約10⁴或約10⁵ m^-1 s^-1的動力學(xué)結(jié)合常數(shù)(k_a)；(c)至少約10³、約10⁴或約10⁵ m^-1 s^-1的動力學(xué)解離常數(shù)(k_d)；和(d)抑制CTLA-4與B7-1(CD80)和B7-2(CD86)的結(jié)合?？捎糜诒景l(fā)明中的抗CTLA-4抗體包括特異性結(jié)合人CTLA-4并具有前述特征中的至少一種、優(yōu)選至少三種的mAb。示例性臨床抗CTLA-4抗體是人mAb 10D1 (現(xiàn)在稱為伊匹單抗且作為YERVOY?銷售)，如美國專利號6,984,720中所公開。

示例性臨床抗CTLA-4抗體是人mAb 10D1 (現(xiàn)在稱為伊匹單抗且作為YERVOY?銷售)，如美國專利號6,984,720中所公開。伊匹單抗是用于本文公開的方法中的抗CTLA-4抗體。伊匹單抗是全人IgG1單克隆Ab，其阻斷CTLA-4與其B7配體的結(jié)合，由此刺激T細(xì)胞活化并改善晚期黑色素瘤患者的總存活期(OS)。

可用于本方法中的另一種抗CTLA-4抗體是tremelimumab(也稱為CP-675,206)。Tremelimumab是人IgG2單克隆抗CTLA-4抗體。Tremelimumab描述于WO/2012/122444、美國公開號2012/263677或WO公開號2007/113648 A2。

可用于本公開方法中的CTLA-4抗體還包括特異性結(jié)合人PD-1并與伊匹單抗或tremelimumab交叉競爭結(jié)合人CTLA-4或與伊匹單抗或tremelimumab結(jié)合相同的人CTLA-4的表位區(qū)域的分離Ab。在某些實(shí)施方案中，與伊匹單抗或tremelimumab交叉競爭結(jié)合人CTLA-4或結(jié)合人PD-1的相同表位區(qū)域的Ab是包含人IgG1同種型的重鏈的Ab。對于施用于人個體，這些交叉競爭Ab優(yōu)選為嵌合Ab，或更優(yōu)選為人源化或人Ab?？捎玫目笴TLA-4抗體還包括上述Ab的抗原結(jié)合部分，諸如Fab、F(ab’)₂、Fd或Fv片段。

腎癌的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法

本發(fā)明還包括抗PD-1抗體與用于治療腎癌的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法的組合療法?？梢栽诳筆D1抗體治療之前、期間或之后的任何時間對個體進(jìn)行護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法。在一些情況下，護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法和PD-1抗體治療也與額外治療組合。不同癌癥類型的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。例如，美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(National Comprehensive Cancer Network，NCCN)，美國21個主要癌癥中心的聯(lián)盟， 出版了NCCN腫瘤學(xué)臨床實(shí)踐指南(NCCN GUIDELINES?)，其提供了關(guān)于多種癌癥的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)治療的詳細(xì)最新信息(參見NCCN GUIDELINES?, 2014)。

RCC是成人中最常見類型的腎癌，占腎腫瘤的約90%，而這些中的80-90％具有透明細(xì)胞組織學(xué)(NCCN GUIDELINES?, 版本3.2014 – Kidney Cancer)。RCC占美國所有癌癥的約3％，并且2014年在美國，估計63,920例患者將被診斷患有腎癌，而13,860例將死于該疾病(Siegel等人,2014)。約30％的個體在診斷時患有轉(zhuǎn)移性疾病。

對于臨床上局部RCC(IA期和IB期)，手術(shù)切除，包括根治性腎切除術(shù)和腎單位保留手術(shù)(nephron-sparing surgery)，是有效的療法。部分腎切除術(shù)通常不適合于局部晚期腫瘤(II期和III期)患者，在該情況下優(yōu)選根治性腎切除術(shù)。當(dāng)腫瘤局限于腎實(shí)質(zhì)時，5年存活率為60-70％，但在其中轉(zhuǎn)移已經(jīng)擴(kuò)散的IV期疾病中，則大幅降低。IV期RCC對RT和化療相對耐受，但患者可能從手術(shù)中獲益，而全身性療法前的減瘤性腎切除術(shù)(cytoreductive nephrectomy)被推薦用于具有潛在手術(shù)可切除的原發(fā)性和多處可切除轉(zhuǎn)移的患者。

直到最近，細(xì)胞因子IL-2和IFNα，例如，IFN-2b和PegIFN-2b，依然是晚期或轉(zhuǎn)移性RCC(mRCC)的唯一有效的全身性治療，兩者都提供5-27%的報道的客觀反應(yīng)率(ORR)。IL-2基于15％可持久反應(yīng)率而被批準(zhǔn)。然而，由于大量毒性，包括低血壓(71％)、腹瀉(67％)、呼吸困難(43％)、皮疹(42％)、室上性心動過速(12％)和各種代謝和血液紊亂(Fyfe等人，1995)，IL-2僅施用于相對年輕和格外適合醫(yī)療的個體。此外，由于嚴(yán)重的急性毒性，其施用僅限于三級醫(yī)療設(shè)施中的重癥護(hù)理設(shè)置。IFN-α未被批準(zhǔn)用于治療RCC，并且由于IL-2和IFN-α的有限的臨床益處和大量毒性概況，更新的靶向藥物已在晚期或轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌的治療中大量取代細(xì)胞因子。

透明細(xì)胞RCC的發(fā)病機(jī)理中低氧誘導(dǎo)因子α(HIFα)信號傳導(dǎo)的重要性的認(rèn)識已導(dǎo)致兩類靶向療法(酪氨酸激酶抑制劑TKI和mTOR抑制劑)在1L和2L治療中的廣泛 研究(Mulders, 2009)。靶向血管生成是合理的，因?yàn)榻M成型HIFα活化導(dǎo)致若干種蛋白(包括血管內(nèi)皮生長因子(VEGF))的上調(diào)或活化，其可以隨后導(dǎo)致腫瘤增殖和新生血管系統(tǒng)形成。此外，對VEGF活性的阻斷可以調(diào)節(jié)免疫環(huán)境并刺激抗腫瘤反應(yīng)。靶向mTOR途徑是重要的，因?yàn)樯嫌蜳I3K/Akt/mTOR信號傳導(dǎo)途徑的活化是發(fā)生組成型HIFα活化或上調(diào)的一種方法(Mulders, 2009)。

靶向血管生成的藥劑包括 VEGF受體(VEGFr) TKI(例如索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿昔替尼和tivozanib)以及VEGF結(jié)合mAb (例如，貝伐單抗)，而靶向mTOR 途徑的藥劑包括mTOR抑制劑(例如，依維莫司和替西羅莫司)(Mulders, 2009；NCCN GUIDELINES?, 版本3.2014 –腎癌)。然而，持久性反應(yīng)是罕見的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)患者發(fā)展出耐藥性和最終的進(jìn)行性疾病，并且僅在低風(fēng)險患者中的一項(xiàng)3期試驗(yàn)中顯示出OS改善：替西羅莫司(TORISEL?)在晚期RCC患者中顯示出相比于IFNα統(tǒng)計學(xué)顯著的OS的益處(10.9個月相比于7.3個月)(Hudes等人, 2007)。依維莫司(AFINITOR?)也已在中值無進(jìn)展存活(PFS)中顯示出相比于安慰劑的2.1個 月的改善，但無OS改善(Motzer等人, 2008)。在五種批準(zhǔn)的抗血管生成劑(索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿昔替尼和貝伐單抗)以及兩種批準(zhǔn)的mTOR抑制劑(替西羅莫司、依維莫司)中，僅依維莫司被批準(zhǔn)專門在抗血管生成療法的治療失敗后使用。在美國，依維莫司用于在舒尼替尼或索拉非尼的第一線治療失敗后的晚期RCC 的治療，而在歐洲，依維莫司被更廣泛地用于晚期RCC患者，其疾病在用VEGF靶向療法的治療中或治療后已進(jìn)展。對于正在使用mTOR抑制劑卻依然進(jìn)展的患者尚無任何推薦。

腎癌的免疫療法

明確需要用于已經(jīng)進(jìn)行多線靶向療法的患者的有效藥劑，以及相比于目前標(biāo)準(zhǔn)治療使存活延長更長時間的療法。在IL-2和IFN-α之外，更新的免疫治療方法最近已顯示出前景。最初在mRCC患者中測試了免疫療法，因?yàn)閭鹘y(tǒng)化療和放療已證明是令人失望的，已知腎腫瘤能夠激發(fā)免疫應(yīng)答，且RCC是最常見的顯示自發(fā)消退的腫瘤之一(Elhilali等人, 2000; Inman等人, 2013)。目前，用于治療RCC的各種免疫治療策略正處于臨床開發(fā)中，包括T細(xì)胞調(diào)節(jié)、免疫引發(fā)和先天免疫(Rosenblatt和McDermott, 2011; Inman等人, 2013)。使用靶向PD-1受體或其PD-L1配體的Ab逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞免疫抑制的方法也已被證明在治療RCC中非常有希望(Topalian等人, 2012a; Brahmer等人; 2012; WO 2013/173223)。

腎癌的組合免疫療法

涉及藥劑組合(例如抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體)的免疫治療方法已被證明在治療黑色素瘤中高度有效(Wolchok等人, 2013; WO 2013/173223)。通過類比，RCC患者能夠得益于不同免疫治療藥物的組合或此類藥物與靶向藥物或其他治療(包括外科手術(shù)、放療、標(biāo)準(zhǔn)癌癥化療或疫苗)的組合。然而，當(dāng)免疫治療劑與其他抗癌劑組合時，有時已觀察到令人驚訝和意料之外的并發(fā)癥。例如，用抗PD-1藥劑(分別為nivolumab和MK-3475)對兩例攜帶BRAF V600E突變的黑色素瘤患者的一線療法沒有引起顯著毒性，但在疾病進(jìn)展后用vemurafenib (ZELBORAF?)治療導(dǎo)致了嚴(yán)重超敏性藥疹，其中在其vemurafenib療程早期具有多器官損傷(Johnson等人，2013)。一例患者隨后發(fā)生急性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病，另一例在低劑量vemurafenib再攻擊后發(fā)生過敏反應(yīng)。

具體涉及RCC，迄今批準(zhǔn)用于治療mRCC的所有藥劑均已被批準(zhǔn)作為單一療法，除了貝伐單抗(AVASTIN?)，其僅被批準(zhǔn)與IFN-α組合。該組合基于PFS的改善并結(jié)合可接受的安全性概況而被批準(zhǔn)，但是其沒有導(dǎo)致相比于僅接受單獨(dú)IFN-α的患者的中值OS的顯著改進(jìn)(Escudier等人，2010； Rini等人，2010)，并引起≥3級高血壓和蛋白尿的更高發(fā)生率?？寡苌莎煼由厦庖忒煼ǖ脑S多其他組合已在臨床試驗(yàn)中評價，但已經(jīng)經(jīng)常觀察到顯著毒性，包括在舒尼替尼加上IFN-α (Motzer等人，2009)、舒尼替尼加上IL-21(Grunwald等人，2011)、舒尼替尼加上tremelimumab(Rini等人，2011)、索拉非尼加上IFN-α(Escudier等人，2007；Ryan等人，2007；Gollob等人，2007)和索拉非尼加上IL-2(Procopio等人，2011)的試驗(yàn)中。

在研究未經(jīng)治療的mRCC個體(n = 25)中舒尼替尼加上IFN-α的使用的1期試驗(yàn)中，所有個體都經(jīng)歷3/4級治療出現(xiàn)的AE(不良事件)，最常見的中性粒細(xì)胞減少癥、疲勞和血小板減少癥(Motzer等人，2009)。盡管更低起始劑量有更好的耐受性，但臨床活性降低。用舒尼替尼加上IFN-α看到的12％反應(yīng)率低于用單獨(dú)的舒尼替尼看到的27.5％的歷史反應(yīng)率。還在未經(jīng)治療的個體(n = 9)中的1期臨床試驗(yàn)中研究了舒尼替尼加上IL-21(Procopio等人，2011)。全劑量舒尼替尼與10 mcg/kg的IL-21的組合基于所得血液學(xué)劑量限制毒性(DLT)被認(rèn)為毒性太強(qiáng)，而與更低劑量IL-21的組合不被認(rèn)為是治療相關(guān)的。在先前已接受≤ 1次全身性療法的患有mRCC的28名個體中的1期劑量遞增試驗(yàn)中研究了舒尼替尼加上tremelimumab(抗CTLA-4抗體; Ribas, 2010; 美國專利號6,682,736) (Rini等人, 2011)。在接受每天37.5 mg舒尼替尼與每12周10 mg/kg或15 mg/kg tremelimumab的組合的4名個體中觀察到快速發(fā)作的腎衰竭的意料之外的毒性。盡管觀察到43％部分反應(yīng)率，但在MTD下的組合(每天37.5 mg舒尼替尼加上每12周10 mg/kg tremelimumab)的毒性被認(rèn)為是不可接受的。

與索拉非尼的組合也已被證明毒性太強(qiáng)或有效性不超過索拉非尼單一療法。盡管在包括12個mRCC個體的群體中的索拉非尼加上IFN-α的1期臨床試驗(yàn)得出的結(jié)論是全劑量索拉非尼加上IFN 9 MIU被良好耐受且僅遇到一例三級虛弱的DLT(Escudier等人，2007)，但當(dāng)使用該組合時，兩個隨后的2期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了增加的毒性(Ryan等人，2007；Gollob等人，2007)。在患有未經(jīng)治療的mRCC的62名個體中的索拉非尼加上IFN-α的2期試驗(yàn)中，該組合的經(jīng)證實(shí)的反應(yīng)率(19％)高于任一單獨(dú)藥劑的歷史反應(yīng)率，但毒性增加，包括77％的個體中的3級或更壞的毒性，限制了進(jìn)一步開發(fā)(Ryan等人，2007)。在40名第一線或第二線個體中的索拉非尼加上IFN-α的2期試驗(yàn)中，反應(yīng)率為33％，且包括2例完全反應(yīng)(Gollop等人，2007)。然而，該組合的毒性比任一單獨(dú)藥物更強(qiáng)，且療法僅在療程間休息和劑量減少的情況下是可耐受的(65％的個體)。在患有未經(jīng)治療的mRCC的128名個體中的隨機(jī)化2期試驗(yàn)中研究了索拉非尼加上皮下IL-2相比于單獨(dú)的索拉非尼(Procopio等人，2011)。在治療40名個體之后由于毒性而將IL-2劑量從4.5 MIU降低至3 MIU。盡管組合組中的反應(yīng)率高于索拉非尼單一治療組(分別為27％相比于15％)，但兩個治療組之間的中值PFS沒有顯著不同。作者的結(jié)論是：使用索拉非尼加上IL-2的組合沒有改善功效。

因此，當(dāng)相比于用任一藥物的單一療法時，包括抗血管生成TKI的組合方案沒能夠（在無增加的且通常不可接受的毒性的同時）展示出對RCC的改善功效。黑色素瘤和RCC中的上述實(shí)例清楚地表明，免疫療法(包括免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物諸如抗CTLA-4或抗PD-1抗體)與靶向抗癌療法(諸如抗血管生成TKI)的組合是不可預(yù)測的，并且必須在臨床試驗(yàn)中小心地評估安全性以及功效。盡管nivolumab(抗PD-1)與伊匹單抗(抗CTLA-4)的組合已在治療黑色素瘤中高度有效且具有可管控的毒性(Wolchok等人，2013)，但迄今尚不知道該組合在人類個體中是否比用單獨(dú)藥劑治療RCC和其他癌癥明顯更有效。

藥物組合物和劑量

本發(fā)明的治療劑可以構(gòu)成組合物，例如含有Ab或TKI和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。如本文中所用，“藥學(xué)上可接受的載體”包括，生理上相容的任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗細(xì)菌劑和抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑等。優(yōu)選地，用于含有Ab的組合物的載體適合于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腸胃外、脊椎或表皮施用(例如通過注射或輸注)，而用于含有TKI的組合物的載體適合于非腸胃外(例如，口服)施用。本發(fā)明的藥物組合物可以包含一種或多種藥學(xué)上可接受的鹽、抗氧化劑、水和非水載體、和/或佐劑諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。

調(diào)整給藥方案以提供最佳所需反應(yīng)，例如最大治療反應(yīng)和/或最小不良效果。對于抗PD-1抗體(包括與另一抗癌劑組合)的施用，劑量范圍可為約0.01至約20 mg/kg，約0.1至約10 mg/kg個體體重。例如，劑量可以是約0.1、約0.3、約1、約2、約3、約5或約10 mg/kg體重和約0.3、約1、約2、約3或約5 mg/kg體重。通常設(shè)計給藥方案以實(shí)現(xiàn)這樣的暴露，其導(dǎo)致基于Ab的典型藥代動力學(xué)特性的持續(xù)受體占用(RO)。代表性治療方案需要每周一次、約每2周一次、約每3周一次、約每4周一次、約1個月一次、約每3-6個月或更長一次施用。在某些實(shí)施方案中，約每2周一次向個體施用抗PD-1抗體，諸如nivolumab。在其他實(shí)施方案中，約每3周一次施用Ab。劑量和時間表在療程期間可變化。例如，抗PD-1單一療法的給藥時間表可包括如下施用Ab：(i)在6周周期中每2周；(ii)每4周，持續(xù)6個劑量，然后每3個月；(iii)每3周；(iv)3-10 mg/kg一次，隨后每2-3周1 mg/kg?？紤]到IgG4抗體通常具有2-3周的半衰期，本發(fā)明的抗PD-1抗體的劑量方案包括經(jīng)由靜脈內(nèi)施用約0.3-約10 mg/kg體重，優(yōu)選約1-約5 mg/kg體重，更優(yōu)選約1-約3 mg/kg體重，其中在最長達(dá)6周或12周周期中每14-21天給予Ab，直至完全反應(yīng)或證實(shí)疾病進(jìn)展。

當(dāng)與其他抗癌劑組合使用時，抗PD-1抗體的劑量可以相比于單一療法劑量降低。例如，顯著低于典型的每3周約3 mg/kg的nivolumab的劑量，例如約0.1 mg/kg或少于約每3或4周，被視為亞治療劑量。在一些實(shí)施方案中，所述亞治療劑量為約2 mg/kg、約1 mg/kg、約0.1 mg/kg或約0.01 mg/kg。來自接受0.3 mg/kg至10 mg/kg劑量nivolumab的15名個體的受體占用數(shù)據(jù)表明PD-1占用似乎在此劑量范圍內(nèi)是非劑量依賴的。在所有劑量中，平均占用率為85% (范圍，70%至97%)，其中平均平臺占用率為72％(范圍，59％至81％)(Brahmer等人, 2010)。因此，約0.3 mg/kg的劑量可以允許充分暴露，以導(dǎo)致最大生物活性。

盡管已實(shí)現(xiàn)高達(dá)每兩周10 mg/kg的更高nivolumab單一療法劑量而未達(dá)到最大耐受劑量(MTD)，但在檢查點(diǎn)抑制劑加上抗血管生成療法的其他試驗(yàn)中報道的顯著毒性(參見，例如，Johnson等人, 2013; Rini等人, 2011)支持選擇低于10 mg/kg的nivolumab劑量。

伊匹單抗(YERVOY?)被批準(zhǔn)每3周一次靜脈內(nèi)給予3 mg/kg(持續(xù)4個劑量)而用于治療黑色素瘤。因此，在實(shí)施方案中，約3 mg/kg是與抗PD-1抗體組合使用的伊匹單抗的最高劑量，但在某些實(shí)施方案中，抗CTLA-4抗體諸如伊匹單抗，當(dāng)與nivolumab組合時，可以在約每兩或三周約0.3-10 mg/kg體重的范圍內(nèi)給予。顯著低于批準(zhǔn)的每3周3 mg/kg的伊匹單抗的劑量，例如約每3或4周約0.3 mg/kg或更低，被視為亞治療劑量。在一些實(shí)施方案中，所述亞治療劑量為約2 mg/kg、約1 mg/kg、約0.1 mg/kg或約0.01 mg/kg。

已經(jīng)證明，3 mg/kg的nivolumab與3 mg/kg的伊匹單抗的組合超過黑色素瘤群體中的最大耐受劑量(MTD)，而據(jù)發(fā)現(xiàn)，1 mg/kg的nivolumab加上3 mg/kg的伊匹單抗或者3 mg/kg的nivolumab加上1 mg/kg的伊匹單抗的組合在黑色素瘤患者中是可耐受的(Wolchok等人, 2013)。因此，盡管每2周靜脈內(nèi)給予的高達(dá)10 mg/kg的nivolumab是耐受的，但在實(shí)施方案中，當(dāng)與伊匹單抗組合時，抗PD-1抗體的劑量不超過約3 mg/kg。在某些實(shí)施方案中，基于風(fēng)險-效益和PK-PD評估，所用劑量包含約1 mg/kg的nivolumab加上約3 mg/kg的伊匹單抗、約3 mg/kg的nivolumab加上約1 mg/kg的伊匹單抗或約3 mg/kg的nivolumab加上約3 mg/kg的伊匹單抗的組合，其各自以約每2-4周一次、約每3周一次的給藥頻率施用。在某些其他實(shí)施方案中，nivolumab以約0.1、約0.3、約1、約2、約3或約5 mg/kg的劑量施用，相組合地，伊匹單抗以約0.1、約0.3、約1、約2、約3或約5 mg/kg的劑量施用，其每2周施用一次，每3周施用一次，或每4周施用一次。在某些實(shí)施方案中，在誘導(dǎo)階段約每2或3周向個體靜脈內(nèi)施用抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體的組合，持續(xù)2、3或4次施用。在某些實(shí)施方案中，在誘導(dǎo)階段約每3周靜脈內(nèi)施用nivolumab與伊匹單抗的組合，持續(xù)4次施用。誘導(dǎo)階段隨后為維持階段，在其期間每兩或三周僅向個體以約0.1、約0.3、約1、約2、約3、約5或約10 mg/kg的劑量施用抗PD-1抗體，只要治療證明有效或者直到不可管控的毒性或疾病進(jìn)展出現(xiàn)。在某些實(shí)施方案中，在維持階段約每2周以約3 mg/kg體重的劑量施用nivolumab。

對于nivolumab與其他抗癌劑的組合，在一些實(shí)施方案中，這些藥劑可以其批準(zhǔn)的劑量施用。繼續(xù)治療，只要觀察到臨床效果或直到不可接受的毒性或疾病進(jìn)展發(fā)生。盡管如此，在某些實(shí)施方案中，施用的這些抗癌劑的劑量顯著低于批準(zhǔn)的劑量，即，將亞治療劑量的藥劑與抗PD-1抗體組合施用。可以已證明在臨床試驗(yàn)中作為單一療法產(chǎn)生最高功效的劑量，例如約每三周一次施用約3 mg/kg nivolumab，或以顯著更低劑量，即，以亞治療劑量，施用抗PD-1抗體。

TKI的給藥時間表針對不同TKI而變化。例如，舒尼替尼的通常劑量包括每天一次隨或不隨食物向成人口服施用50 mg的固定劑量，其中以約12.5-mg增量或基于個體患者安全性和耐受性推薦的增量進(jìn)行劑量調(diào)整。以四周使用治療、隨后兩周停用治療的時間表給予舒尼替尼。在一些實(shí)施方案中，以約12.5、約25、約37.5、約50、約62.5、約75、約87.5或約90mg的劑量每天一次施用舒尼替尼。在進(jìn)食之前至少一小時或進(jìn)食之后兩小時向成年患者以400 mg的劑量每天兩次口服施用索拉非尼。在一些實(shí)施方案中，以約100、約200、約300、約400、約500、約600或約800 mg的劑量每天兩次施用索拉非尼。不隨食物(在進(jìn)食之前至少1小時或進(jìn)食之后2小時)向患者以800 mg的劑量每天一次口服施用帕唑帕尼。在一些實(shí)施方案中，以約200、約400、約600、約700、約800、約900或約1000mg的劑量每天一次施用帕唑帕尼。在隨或不隨食物向患者以約5 mg的劑量間隔約12小時每天兩次口服施用阿西替尼(INLYTA?)，但必要時可以進(jìn)行劑量調(diào)整至每天兩次口服施用約2、約3、約7或約10mg。Tivozanib尚未被FDA批準(zhǔn)，但推薦口服每日劑量為約1或1.5 mg，優(yōu)選為1.5 mg，使用28天，隨后停用14天(Eskens等人, 2011)，或者使用21天，隨后停用7天(Nosov等人, 2012)。在一些實(shí)施方案中，以約0.5、約0.75、約1、約1.25、約1.5、約1.75或約2 mg的劑量每天一次施用tivozanib。對于TKI與抗PD-1抗體的組合治療，在一些實(shí)施方案中，將TKI以其批準(zhǔn)或推薦的劑量施用。繼續(xù)治療，只要觀察到臨床效果或直到不可接受的毒性或疾病進(jìn)展發(fā)生。

在某些實(shí)施方案中，施用的TKI的劑量是批準(zhǔn)或推薦的劑量。在其他實(shí)施方案中，將顯著低于批準(zhǔn)劑量的劑量(即，亞治療劑量)的TKI與抗PD-1抗體組合施用?？梢砸炎C明在臨床試驗(yàn)中作為單一療法產(chǎn)生最高功效的劑量，例如約每三周一次施用約3 mg/kg nivolumab (Topalian等人, 2012a; Topalian等人, 2012)，或以更低劑量，即，以亞治療劑量，施用抗PD-1抗體。在一些實(shí)施方案中，以約0.1、約0.3、約1、約2、約3或約5 mg/kg的劑量施用抗PD-1抗體，并且以約0.1 mg、約0.5、約1、約2、約3、約5、約7.5、約10、約12.5、約15、約20、約30、約40、約50或約75 mg/kg的劑量施用TKI。

劑量和頻率根據(jù)Ab在個體中的半衰期而變化。通常，人Ab具有最長的半衰期，隨后為人源化Ab、嵌合Ab和非人Ab。施用的劑量和頻率可以根據(jù)治療是預(yù)防性還是治療性的而變化。在預(yù)防性應(yīng)用中，通常在長時間內(nèi)以相對較低頻率時間間隔施用相對低劑量。一些患者在其余生繼續(xù)接受治療。在治療性應(yīng)用中，有時需要相對短時間間隔的相對高劑量，直到疾病進(jìn)程減少或終止，優(yōu)選直到患者顯示疾病癥狀的部分或完全改善。其后，可以向患者施用預(yù)防性方案。

本發(fā)明的藥物組合物中活性成分的實(shí)際劑量水平可以變化，以便獲得一定量的活性成分，其對于具體患者、組合物和施用模式實(shí)現(xiàn)所需治療反應(yīng)是有效的，且對患者沒有過度毒性。所選劑量水平取決于各種藥代動力學(xué)因素，包括本發(fā)明采用的具體組合物的活性、施用途徑、施用時間、采用的具體化合物的分泌速度、治療持續(xù)時間、與采用的具體組合物組合使用的其他藥物、化合物和/或材料、所治療的患者的年齡、性別、體重、狀況、總體健康和既往病史、以及醫(yī)療領(lǐng)域眾所周知的類似因素。本發(fā)明的組合物可以經(jīng)由一種或多種施用途徑使用一種或多種各種本領(lǐng)域眾所周知的方法來施用。如技術(shù)人員將理解，施用途徑和/或模式將根據(jù)所需結(jié)果而變化。

本發(fā)明的方法

本公開提供治療患有腎癌的個體的方法。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療腎癌或患有腎癌的個體的方法，其包括組合療法。在一些實(shí)施方案中，所述方法包括向個體施用治療有效量的以下的組合：(a)作為特異性結(jié)合PD-1受體并抑制PD-1活性的Ab或其抗原結(jié)合部分的抗癌劑；和(b)另一抗癌療法。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療有此需要的個體中的腎癌或患有腎癌的個體的方法，所述方法包括向個體施用治療有效量的以下的組合：(a)抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分；和(b)另一抗癌劑。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療腎癌或患有腎癌的個體的方法，所述方法包括向個體施用治療有效量的以下的組合：(a)抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分；和(b)本文別處公開的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法。由于RCC占腎腫瘤的約90％，在一些實(shí)施方案中，所述腎癌即是RCC。在其他一些實(shí)施方案中，所述個體是人類患者。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療有此需要的個體中的腎癌或患有腎癌的個體的方法，所述方法包括向個體施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述個體同時用另一抗癌劑治療。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療有此需要的個體中的腎癌或患有腎癌的個體的方法，所述方法包括向個體施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，其中所述個體同時用本文別處公開的護(hù)理標(biāo)準(zhǔn)療法治療。由于RCC占腎腫瘤的約90％，在一些實(shí)施方案中，所述腎癌即是RCC。在其他一些實(shí)施方案中，所述個體是人類患者。

在一些實(shí)施方案中，PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分和/或抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分與一種或多種其他抗癌劑組合施用，所述其他抗癌劑選自VEGF-受體(VEGFr) TKI (例如，索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿西替尼和tivozanib)、VEGF-結(jié)合mAb和抑制劑(例如，貝伐單抗、阿柏西普和ziv-阿柏西普)、mTOR抑制劑(例如，依維莫司和替西羅莫司)、細(xì)胞因子(例如，IFN-α、IFN-b2、聚乙二醇化IFNb2 (PegIFN-b2)和IL-2)和有絲分裂抑制劑(例如，紫杉醇、多西他賽、長春新堿、艾瑞布林、雌莫司汀、依托泊苷、伊沙匹隆、卡巴他賽、長春新堿脂質(zhì)體、長春瑞濱、長春新堿、長春堿和替尼泊苷)。在一些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是本文描述的任何其他藥劑。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的療法(例如，施用抗PD-1抗體或施用抗PD-1抗體與另一抗癌療法)有效地增加個體存活的持續(xù)時間。例如，當(dāng)與僅用另一療法(例如，貝伐單抗或替莫唑胺)或在組合療法的情況下僅單獨(dú)使用組合療法的兩個成員之一(例如，單獨(dú)的抗PD-1抗體)治療的另一個體相比時，所述個體存活的持續(xù)時間增加至少約1個月、至少約2個月、至少約3個月、至少約4個月、至少約5個月、至少約6個月、至少約7個月、至少約8個月、至少約9個月、至少約10個月、至少約11個月或至少約1年或更長。在一些實(shí)施方案中，存活的持續(xù)時間增加至少約2個月。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的療法有效地增加個體的無進(jìn)展存活的持續(xù)時間。例如，當(dāng)與未經(jīng)治療的個體或僅用另一療法(例如，貝伐單抗或替莫唑胺)或在組合療法的情況下僅單獨(dú)用組合療法的兩個成員之一(例如，單獨(dú)的抗PD-1抗體)治療的個體相比時，所述個體的無進(jìn)展存活增加至少約1個月、至少約2個月、至少約3個月、至少約4個月、至少約5個月、至少約6個月、至少約7個月、至少約8個月、至少約9個月、至少約10個月、至少約11個月或至少約1年。在一些實(shí)施方案中，無進(jìn)展存活增加至少約2個月。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的療法有效地增加一組個體中的反應(yīng)率。例如，當(dāng)與僅用另一療法(例如，貝伐單抗或替莫唑胺)或在組合療法的情況下僅單獨(dú)用組合療法的兩個成員之一(例如，單獨(dú)的抗PD-1抗體)(即，單一療法)治療的另一組個體相比時，該組個體中的反應(yīng)率增加至少約2％、至少約3％、至少約4％、至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約35％、至少約40％、至少約45％、至少約50％、至少約55％、至少約60％、至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約99％或至少約100％。

適用于本公開的方法中的抗PD-1和抗PD-L1抗體

適用于本公開的方法中的抗PD-1抗體是以高特異性和親和力結(jié)合PD-1、阻斷PD-L1和或PD-L2的結(jié)合并抑制PD-1信號傳導(dǎo)途徑的免疫抑制效果的Ab。在任何本文公開的治療方法中，抗PD-1或抗CTLA-4“抗體”包括分別結(jié)合PD-1或CTLA-4受體并在抑制配體結(jié)合和上調(diào)免疫系統(tǒng)方面表現(xiàn)出類似于完整Ab的功能特性的抗原結(jié)合部分或片段。在某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與nivolumab交叉競爭結(jié)合人PD-1。在其他實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分是嵌合、人源化或人單克隆Ab或其部分。在用于治療人類個體的某些實(shí)施方案中，所述Ab是人源化Ab。在用于治療人類個體的其他實(shí)施方案中，所述Ab是人Ab?？梢允褂肐gG1、IgG2、IgG3或IgG4同種型的Ab。

在某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分包含人IgG1或IgG4同種型的重鏈恒定區(qū)。在某些其他實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分的IgG4重鏈恒定區(qū)的序列包含S228P突變，其用IgG1同種型抗體的相應(yīng)位置處通常存在的脯氨酸殘基替代鉸鏈區(qū)中的絲氨酸殘基。Nivolumab中存在的該突變防止與內(nèi)源IgG4抗體的Fab臂交換，同時保留低親和力用于活化與野生型IgG4抗體相關(guān)的Fc受體(Wang等人, 2014)。在又其他實(shí)施方案中，所述Ab包含作為人κ或λ恒定區(qū)的輕鏈恒定區(qū)。在其他實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分是mAb或其抗原結(jié)合部分。在包括施用抗PD-1抗體的本文描述的任何治療方法的某些實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是nivolumab。在其他實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是派姆單抗。在其他實(shí)施方案中，抗PD-1抗體選自美國專利號8,008,449中描述的人抗體17D8、2D3、4H1、4A11、7D3和5F4。在仍其他實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是MEDI0608(原為AMP-514)、AMP-224或Pidilizumab (CT-011)。

在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療有此需要的個體中的腎癌或患有腎癌的個體的方法，其包括施用抗PD-1拮抗劑或抗PD-1拮抗劑與本文描述的一種或多種抗癌劑的組合以治療癌癥。在一些實(shí)施方案中，所述腎癌是RCC。如本文提及的“抗PD-1拮抗劑”包括抑制PD-1(受體)和PD-L1(配體)之間的相互作用、使得PD-1/PD-L1的信號通路被阻斷的任何分子。PD-L1和PD-L2是已經(jīng)識別出的PD-1的兩種配體。在一個實(shí)施方案中，抗PD-1拮抗劑是抗PD-L1抗體。PD-L1和PD-L2已顯示在結(jié)合PD-1后下調(diào)T細(xì)胞激活。PD-L1和PD-L2均是結(jié)合PD-1、但不結(jié)合其他CD28家族成員的B7同系物。已經(jīng)顯示PD-L1在各種人類癌癥中是富集的。PD-1和PD-L1的相互作用導(dǎo)致腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的減少、T細(xì)胞受體介導(dǎo)的增殖的減少和癌細(xì)胞的免疫逃逸。免疫抑制可通過抑制PD-1與PD-L1的局部相互作用而被逆轉(zhuǎn)，并且當(dāng)PD-1與PD-L2的相互作用同樣被阻斷時，其效果是累加的。在一個實(shí)施方案中，抗PD-L1抗體可以取代本文公開的任何治療方法中的抗PD-1抗體。在某些實(shí)施方案中，所述抗PD-L1抗體是BMS-936559(原為12A4或MDX-1105)(參見，例如，美國專利號7,943,743；WO 2013/173223)。在其他實(shí)施方案中，抗PD-L1抗體是MPDL3280A(也稱為RG7446)(參見，例如，Herbst等人2013；美國專利號8,217,149)或MEDI4736 (Khleif，2013)。

在另一個實(shí)施方案中，抗PD-1拮抗劑是可溶性PD-1蛋白。在其他實(shí)施方案中，抗PD-1拮抗劑是PD-1-Fc融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述PD-1-Fc融合蛋白是本文描述的任何PD-1抗體與Ig Fc結(jié)構(gòu)域融合的結(jié)果。在一些實(shí)施方案中，所述Ig Fc結(jié)構(gòu)域是IgG、IgA或IgM結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，可以通過化學(xué)合成或通過生成編碼所需融合蛋白的多核苷酸而生成融合蛋白。

在某些實(shí)施方案中，抗PD-1拮抗劑包括抑制或阻止PD-1和PD-L1之間的相互作用的抗PD-1融合蛋白、反義分子、小分子、核酶或納米抗體(nanobody)。

用于治療RCC的抗PD-1抗體與抗血管生成TKI的組合

在公開的用于治療RCC的方法的某些實(shí)施方案中，其他抗癌劑，即除了抗PD-1抗體以外與抗PD-1抗體組合使用的抗癌劑是抗血管生成TKI。已批準(zhǔn)用于治療RCC或已在臨床試驗(yàn)中證明功效的各種TKI，包括索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿西替尼和tivozanib，可以與抗PD-1抗體組合用于所公開的組合治療方法中。然而，直到這些組合的功效和安全性在臨床前或臨床試驗(yàn)中得到評估之前，依然存在可導(dǎo)致意料之外的毒性或相對于單一療法缺乏顯著增強(qiáng)的功效的可能性。本文公開的Renca小鼠RCC模型中的臨床前數(shù)據(jù)表明，抗PD-1抗體與舒尼替尼協(xié)同相互作用以抑制RCC腫瘤生長，而抗PD-1抗體和索拉非尼的組合沒有顯著增強(qiáng)索拉非尼在該小鼠RCC模型中的低水平的抗腫瘤活性(圖1和2)。除了證明抗PD-1抗體與舒尼替尼的組合在小鼠模型中治療RCC方面是高度有效的，已經(jīng)在臨床研究中驗(yàn)證了該組合以及nivolumab與帕唑帕尼的組合在人類RCC患者中的功效和安全性。

實(shí)施例5提供mRCC患者中的nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼的組合的正在進(jìn)行的1期試驗(yàn)的中期結(jié)果(NCT01472081；參見實(shí)施例4)。數(shù)據(jù)顯示，nivolumab與任一這些TKI的組合表現(xiàn)出在這些患者中的顯著更高的抗腫瘤活性和可管控的安全性概況(參見圖12)。因此，在本組合治療方法的某些實(shí)施方案中，所述抗血管生成TKI是舒尼替尼。在其他實(shí)施方案中，所述TKI是帕唑帕尼。在另外的實(shí)施方案中，所述TKI是阿西替尼。阿西替尼是VEGF受體1、2和3的高選擇性、有效的抑制劑，其具有有利的毒性概況(Sonpavde等人, 2008)且已經(jīng)由FDA批準(zhǔn)用于在一種先前全身性療法失敗后治療晚期RCC。在其他實(shí)施方案中，所述TKI是索拉非尼。在又另外的實(shí)施方案中，所述TKI是tivozanib。Tivozanib是VEGFR-1、-2和-3的有效、選擇性、長半衰期的抑制劑，其正在進(jìn)行用于治療RCC的臨床試驗(yàn)。阿西替尼和tivozanib還沒有在本文的臨床前或臨床研究中測試。然而，基于其對所有三種VEGF受體的高度選擇性的抑制(其與舒尼替尼、帕唑帕尼和索拉非尼的VEGFR抑制活性重疊，同時使脫靶毒性最小化)，阿西替尼和tivozanib兩者均為在公開的治療方法中與抗PD-1抗體組合的優(yōu)異候選。

在某些實(shí)施方案中，施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與抗血管生成TKI導(dǎo)致相比于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其他抗癌劑的單一療法治療的個體T細(xì)胞對癌組織的浸潤增加。如實(shí)施例2中所述，組合療法可導(dǎo)致例如CD4⁺和CD8⁺ T細(xì)胞在腎腫瘤中定位的增加。T細(xì)胞浸潤的這種增加可以比未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其他抗癌劑的單一療法治療的個體中的T細(xì)胞浸潤水平高至少約10％、至少約20％、至少約30％、至少約40％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％、或至少約90％。公開的方法可以進(jìn)一步導(dǎo)致相比于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其他抗癌劑的單一療法治療的個體T細(xì)胞增殖增加。T細(xì)胞增殖可以增加至少約10％、至少約20％、至少約30％、至少約40％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％或至少約90％。在某些實(shí)施方案中，公開的方法也可以導(dǎo)致相比于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其他抗癌劑的單一療法治療的個體T調(diào)節(jié)性細(xì)胞減少。

在其他實(shí)施方案中，公開的用于治療RCC的方法相比于未經(jīng)治療的個體或用抗PD-1抗體或其他抗癌劑的單一療法治療的個體降低單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞的數(shù)目或增加粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞的數(shù)目。在一個實(shí)施方案中，所述單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞的特征在于CD11b⁺/Ly6C^高/Ly6G^-表達(dá)或CD11b⁺/Ly6C^低/Ly6G^-表達(dá)。在另一個實(shí)施方案中，所述粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞的特征在于CD11b⁺/Ly6C^-/Ly6G⁺表達(dá)。單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞的數(shù)目可以減少至少約5％、至少約10％、至少約15％、至少約20％、至少約25％、至少約30％、至少約40％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％或至少約90％。粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞的數(shù)目可以增加至少約5％、至少約10％、至少約20％、至少約30％、至少約40％、至少約50％、至少約60％、至少約70％、至少約80％或至少約90％。

組合療法中使用的抗PD-1抗體和抗血管生成TKI的劑量

在本組合治療方法的某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分的治療有效劑量包括每周約一次、每2周約一次、每3周約一次或約每個月一次通過靜脈內(nèi)輸注與抗血管生成TKI組合施用約0.1至約10.0 mg/kg體重的劑量。在某些實(shí)施方案中，以2 mg/kg的劑量每3周一次施用抗PD-1抗體。在其他實(shí)施方案中，以約5 mg/kg的劑量約每3周一次施用抗PD-1抗體。

舒尼替尼的劑量可以包括，例如，在42天周期中向成年RCC患者施用約25至約50mg、在一些實(shí)施方案中50mg的劑量，所述42天周期包括28天每天施用，14天未施用，并且重復(fù)周期，只要觀察到臨床益處或直到不可管控的毒性或疾病進(jìn)展出現(xiàn)?；蛘撸?8天每天施用25至50mg和14天未施用之后，可以每天以37.5 mg施用舒尼替尼，只要觀察到臨床益處或直到不可管控的毒性或疾病進(jìn)展出現(xiàn)。在一些實(shí)施方案中，以約5、約10、約15、約20、約25、約30、約35、約40、約45、約50、約55、約60、約65、約70或約75 mg/kg體重的劑量施用舒尼替尼。

帕唑帕尼以每天一次口服約50、約100、約200、約300、約400、約500、約600、約700或約800 mg的劑量與抗PD-1抗體組合施用。在一些實(shí)施方案中，帕唑帕尼每天一次以其800 mg的推薦劑量不隨食物而施用。

與抗PD-1抗體組合的還沒有在臨床試驗(yàn)中測試的除了舒尼替尼和帕唑帕尼以外的TKI的劑量基于已知的治療劑量。因此，在一些實(shí)施方案中，索拉非尼以其每天兩次口服400 mg的推薦劑量施用。在一些實(shí)施方案中，阿西替尼(INLYTA?)以其間隔約12小時每天兩次口服5 mg的推薦劑量向患者施用。在一些實(shí)施方案中，tivozanib以其1.5 mg的推薦口服每日劑量施用，使用28天，隨后停用14天(Eskens等人, 2011)，或者使用21天，隨后停用7天(Nosov等人, 2012)。

在實(shí)施方案中，nivolumab在每6周(42天)周期中在第1天和第22天通過靜脈內(nèi)輸注以約2或約5 mg/kg與TKI組合施用，例如在每42天周期的第1 – 28天口服施用約50 mg舒尼替尼，或者在每42天周期的第1 – 42天口服施用約800 mg帕唑帕尼。本方法中采用的其他TKI根據(jù)其批準(zhǔn)或推薦的劑量方案施用。繼續(xù)治療，只要觀察到臨床效果或直到不可接受的毒性或疾病進(jìn)展發(fā)生。

在例如抗PD-1和舒尼替尼之間的臨床前模型中觀察到的協(xié)同相互作用表明，這些治療劑中的一種或兩種可以亞治療劑量(即，顯著低于當(dāng)作為單一療法施用用于治療癌癥時的通常或FDA批準(zhǔn)的劑量的治療劑的劑量)向患者施用。在公開發(fā)明的某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分以亞治療劑量向RCC患者施用。在其他實(shí)施方案中，TKI以本文描述的亞治療劑量施用。在另外的實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與TKI各自以本文描述的亞治療劑量施用。

抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與其他抗癌劑的組合療法可以同時或依次施用(例如，首先施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，然后施用其他抗癌劑，或者首先施用其他抗癌劑，然后施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分)。

用于治療RCC的抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體的組合

本公開還提供用于治療RCC的組合治療方法，其中將抗PD-1抗體與作為特異性結(jié)合CTLA-4并抑制CTLA-4活性的Ab或其抗原結(jié)合部分的另一抗癌劑組合。本文已經(jīng)證明(參見實(shí)施例6)，抗PD-1抗體 nivolumab與抗CTLA-4抗體伊匹單抗的組合產(chǎn)生一定水平的臨床活性，如通過ORR測量，其顯著高于用單獨(dú)的nivolumab或伊匹單抗觀察到的活性。因此，在某些實(shí)施方案中，與抗PD-1抗體組合使用的抗CTLA-4抗體是伊匹單抗。在實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是tremelimumab。在其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分是與伊匹單抗交叉競爭結(jié)合人CTLA-4的Ab或其部分。在某些其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分是嵌合、人源化或人mAb或其部分。在又其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分包含人IgG1或IgG4同種型的重鏈恒定區(qū)。在實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體包含人IgG1同種型的重鏈恒定區(qū)。

對于抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體的組合，給藥方案包括誘導(dǎo)期(本文中也稱為誘導(dǎo)階段)，其中向患者施用抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體的一個或多個，優(yōu)選約四個，組合劑量，隨后為維持期或階段，其包括用單獨(dú)的抗PD-1抗體給藥，即，不包括抗CTLA-4抗體。在某些實(shí)施方案中，所述方法包括：(a)誘導(dǎo)階段，其中以2、4、6、8或10個劑量組合施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分，每次劑量為至少約每2周一次、約每3周一次或約每4周一次施用約0.1至約10.0 mg/kg體重，隨后是(b)維持階段，其中沒有施用抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分，而至少約每2周一次、約每3周一次或約每4周一次以約0.1至約10 mg/kg的劑量重復(fù)施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分。

在某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分以亞治療劑量施用。在某些其他實(shí)施方案中，抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分以亞治療劑量施用。在另外的實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分均各自以亞治療劑量施用。在一些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與/或抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分以治療劑量施用。

在某些實(shí)施方案中，(a)所述誘導(dǎo)階段包括以3周時間間隔施用至少4個劑量，其中抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體以下列劑量施用：(i) 0.1 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(ii) 0.3 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(iii) 1 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(iv) 3 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(v) 5 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(vi) 10 mg/kg 抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(vii) 0.1 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(viii) 0.3 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(ix) 1 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(x) 3 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(xi) 5 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；或(xii) 10 mg/kg 抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體，并且(b)所述維持階段包括以每2周3 mg/kg的劑量重復(fù)施用抗PD-1抗體。

由于先前用免疫療法通過抑制免疫檢查點(diǎn)所展示出的臨床效果的持久性(參見，例如，WO 2013/173223)，所以在替代實(shí)施方案中，所述維持階段可以包括，有限數(shù)目的劑量，例如，1-10個劑量，或者可以涉及以長時間間隔給藥，例如，約每3-6個月施用一次或約每1-2年或更長時間間隔施用一次?？梢岳^續(xù)維持階段，只要觀察到臨床效果或直到不可管控的毒性或疾病進(jìn)展發(fā)生。

考慮到經(jīng)過12周的伊匹單抗施用是否有助于黑色素瘤中的臨床益處的不確定性以及美國食品和藥品管理局(FDA)和歐洲藥品管理局(EMA)批準(zhǔn)的YERVOY?的時間表為每3周共4個劑量的事實(shí)，在實(shí)施方案中，抗CTLA-4抗體在誘導(dǎo)階段每3周施用一次，共4 個劑量。因此，在某些實(shí)施方案中，所述方法包括(a)由以3周時間間隔施用的4個組合劑量組成的誘導(dǎo)階段，其中(i)以3 mg/kg體重施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，且以1 mg/kg體重施用抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分；(ii)以1 mg/kg體重施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，且以3 mg/kg體重施用抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分；或(iii)以3 mg/kg體重施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分，且以3 mg/kg體重施用抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分；并且(b)維持階段包括以每2周3 mg/kg的劑量重復(fù)施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分。在這些方法的另外的實(shí)施方案中，繼續(xù)維持階段，只要觀察到臨床效果或直到不可接受或不可管控的毒性或疾病進(jìn)展發(fā)生。

在本方法的某些實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體是nivolumab。在其他實(shí)施方案中，其為派姆單抗。在又其他實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是伊匹單抗。在另外的實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是tremelimumab。通常，抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體被配制用于靜脈內(nèi)施用。在一些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分與抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分作為單一組合物或作為單獨(dú)的組合物同時施用。在一些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體依次施用。在一些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體在誘導(dǎo)階段依次施用。在某些實(shí)施方案中，當(dāng)抗PD-1抗體與抗CTLA-4抗體組合施用時， 它們在彼此的30分鐘內(nèi)施用?？梢允紫仁┯萌我籄b，也就是說，在某些實(shí)施方案中，抗PD-1抗體在抗CTLA-4抗體之前施用，而在其他實(shí)施方案中，抗CTLA-4抗體在抗PD-1抗體之前施用。通常，每種Ab在60分鐘內(nèi)通過靜脈內(nèi)輸注施用。在某些實(shí)施方案中，抗 PD-1抗體與抗CTLA-4抗體混合于藥學(xué)上可接受的制劑中作為單一組合物同時施用，或各Ab分別在藥學(xué)上可接受的制劑中作為單獨(dú)的組合物同時施用。

本發(fā)明方法的某些實(shí)施方案包括(a)由以下組成的誘導(dǎo)階段：每3周通過靜脈內(nèi)輸注施用nivolumab，隨后通過靜脈內(nèi)輸注施用伊匹單抗，共4個組合劑量，隨后是(b)在誘導(dǎo)療法的第4個劑量之后或第113天之后(如果由于治療延遲而還沒有施用誘導(dǎo)療法的第4個劑量)3周開始每2周通過靜脈內(nèi)輸注施用nivolumab維持給藥。

在某些實(shí)施方案中，可以向個體施用抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分、抗血管生成TKI與抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分的組合用于治療RCC。在一些實(shí)施方案中，所述抗血管生成TKI是索拉非尼、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿西替尼或tivozanib。在某些實(shí)施方案中，所述抗血管生成TKI是舒尼替尼或帕唑帕尼。在另一個實(shí)施方案中，所述抗CTLA-4抗體是伊匹單抗或tremelimumab。在一個具體實(shí)施方案中，所述抗PD-1抗體或其抗原結(jié)合部分、抗血管生成TKI與抗CTLA-4抗體或其抗原結(jié)合部分的組合以選自以下的劑量施用：(i) 0.1 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(ii) 0.3 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(iii) 1 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(iv) 3 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(v) 5 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(vi) 10 mg/kg抗PD-1抗體與3 mg/kg抗CTLA-4抗體；(vii) 0.1 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(viii) 0.3 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(ix) 1 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(x) 3 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；(xi) 5 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體；或(xii) 10 mg/kg抗PD-1抗體與1 mg/kg抗CTLA-4抗體，其中TKI以約其推薦劑量施用。例如，舒尼替尼可以約25至約50 mg、在一些實(shí)施方案中50 mg的劑量施用；帕唑帕尼可以約200、約400或約800 mg的劑量施用；索拉非尼可以每天兩次以約400 mg的劑量施用；而tivozanib可以其每天約1.5 mg的推薦口服每日劑量施用。

用于治療RCC的抗PD-1抗體與其他已知抗癌藥物的組合

本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，所述用抗PD-1抗體或其抗原片段治療RCC的方法可以與RCC的其他已知治療組合。例如，抗PD-1抗體或其抗原性片段可以與有絲分裂抑制劑諸如紫杉醇、多西他賽、長春新堿、艾瑞布林、雌莫司汀、依托泊苷、伊沙匹隆、卡巴他賽、長春新堿脂質(zhì)體、長春瑞濱、長春新堿、長春堿或替尼泊苷組合。各種細(xì)胞因子也已知可用于治療癌癥，包括如上所討論的IFN-α或IL-2?？筆D-1抗體或其抗原性片段可以與細(xì)胞因子諸如如IFN-α、IFN-b2、聚乙二醇化IFNb2(PegIFN-b2)或IL-2組合。本領(lǐng)域中已知的其他小分子治療也可以是合適的，包括但不限于，長春氟寧。在一些實(shí)施方案中，本文描述的抗PD-1抗體，包括抗PD-1抗體與TKI或抗CTLA-4抗體的組合治療與本文描述的任何其他治療(包括SOC治療)組合使用。

抗PD-1抗體可以與一種或多種本文描述的其他已知抗癌藥物組合施用，其劑量為特定抗癌藥物的標(biāo)準(zhǔn)。例如，帕唑帕尼可以約400至約800mg的劑量施用；阿西替尼可以約1 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg或至少約10 mg的劑量施用；紫杉醇和/或多西他賽可以約10 mg/m²、約25 mg/m²、約30 mg/m²、約35 mg/m²、約40 mg/m²、約45 mg/m²、約50 mg/m²、約75 mg/m²、約100 mg/m²、約125 mg/m²、約150 mg/m²、約175 mg/m²、約200 mg/m²、約225 mg/m²、約250 mg/m²、約275 mg/m²或至少約300 mg/m²的劑量施用；而長春氟寧可以約50 mg/m²、約75 mg/m²、約100 mg/m²、約125 mg/m²、約150 mg/m²、約175 mg/m²、約200 mg/m²、約225 mg/m²、約250 mg/m²、約275 mg/m²、約300 mg/m²、約325 mg/m²、約350 mg/m²、約375 mg/m²、約400 mg/m²、約425 mg/m²、約450 mg/m²、約475 mg/m²或至少約500 mg/m²的劑量施用。

藥劑盒

用于治療用途的包括抗PD-1抗體與TKI的藥劑盒也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。藥劑盒通常包括表明藥劑盒內(nèi)容物的預(yù)期用途的標(biāo)簽和使用說明書。術(shù)語標(biāo)簽包括在藥劑盒上提供或與藥劑盒一起提供或另外伴隨藥劑盒的任何書面或錄制的材料。因此，本公開提供了用于治療患有腎癌的個體的藥劑盒，所述藥劑盒包括：(a)劑量為0.1至10 mg/kg體重的抗癌劑，其為特異性結(jié)合PD-1受體并抑制PD-1活性的Ab或其抗原結(jié)合部分；(b)一定劑量的另一抗癌劑，其為(ⅰ)抗血管生成TKI，例如，以治療四周、隨后停止治療兩周的時間表每天一次12.5、25或50 mg的劑量的舒尼替尼，每天一次200、400或800 mg的劑量的帕唑帕尼，或每天一次或兩次400 mg的劑量的索拉非尼；或(ii)劑量為0.1至10 mg/kg體重的特異性結(jié)合并抑制CTLA-4的抗體或其抗原結(jié)合部分；和(c)用于在本文描述的任何組合治療方法中使用抗PD-1抗體與其他抗癌劑的說明書。在某些實(shí)施方案中，抗PD-1、抗CTLA-4抗體和/或TKI可以共同包裝在單位劑型中。在用于治療人類患者的某些實(shí)施方案中，所述藥劑盒包括本文公開的抗人PD-1抗體，例如，nivolumab或派姆單抗。在其他實(shí)施方案中，所述藥劑盒包括本文公開的抗人CTLA-4抗體，例如，伊匹單抗或者tremelimumab。

本發(fā)明通過以下實(shí)施例進(jìn)一步說明，所述實(shí)施例不應(yīng)被解釋為進(jìn)一步限制性的。整個本申請中引用的所有參考文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用明確地并入本文。

實(shí)施例1

在小鼠模型中用抗PD-1與TKIs治療腎癌

材料和方法

動物

在所有研究中都使用雌性8-12周齡Balb/c和C57/BL6小鼠(Harlan Laboratories, Federick, MD)。將小鼠飼養(yǎng)于無菌微隔離籠中，并隨意施用無菌食物和水，除非另有規(guī)定。

藥劑

舒尼替尼(SUTENT?)是靶向若干種受體酪氨酸激酶(包括VEGFR-1、VEGFR-2 和VEGFR-3、PDGFR-α 和-β、c-Kit、FLT-3、CSF-1R 和RET)的可口服的、小分子、多激酶抑制劑，其由FDA批準(zhǔn)用于治療腎細(xì)胞癌。舒尼替尼已報道具有免疫調(diào)節(jié)作用，包括減少髓源抑制細(xì)胞((Ko等人, 2009; Ko等人, 2010)和減少T調(diào)節(jié)性抑制細(xì)胞(Hipp等人, 2008; Ozao-Choy等人, 2009)。

索拉非尼(NEXAVAR?)是可口服的、小分子多激酶抑制劑(cRAF、bRAF、KIT、FLT-3、VEGFR-2、VEGFR-3和PDGFR-β)，其由FDA批準(zhǔn)用于治療原發(fā)性腎癌(晚期腎細(xì)胞癌)、晚期原發(fā)性肝癌和放射性碘耐受的晚期甲狀腺癌。索拉非尼已報道通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來抑制T細(xì)胞增殖(Houben等人, 2009; Molhoek等人, 2009)、減少抗原特異性T細(xì)胞的誘導(dǎo)和減少樹突細(xì)胞成熟(Hipp等人, 2008)。

抗PD-1 mAb，4H2，是嵌合大鼠-小鼠抗小鼠PD-1抗體(美國專利號8,008,449)，其被純化和證明具有< 0.5 EU/mg的內(nèi)毒素水平、> 95%的純度和<5％的高分子量物質(zhì)。

將小鼠腎癌(Renca)和小鼠結(jié)腸腺癌(CT-26)腫瘤細(xì)胞系在體外維持少于10代。

功效研究

皮下(SC)植入腫瘤細(xì)胞。當(dāng)平均腫瘤體積達(dá)到約100 mm³時，將小鼠以8只為一組隨機(jī)分組。每日一次口服施用媒介物(對照)、舒尼替尼(120 mg/kg)或索拉非尼(200 mg/kg)，持續(xù)14天(QDx14, PO)。每4天以10 mg/kg腹膜內(nèi)(IP)施用MAb 4H2，總共4次治療(Q4Dx4)。每周兩次測量腫瘤，并將腫瘤體積計算為長度 x (寬度²/2)。協(xié)同作用被定義為超過最高單藥劑的量(EOHSA)，即，如果組合的抗腫瘤效果顯著高于用單一療法觀察到的效果，則該組合被認(rèn)為是協(xié)同的(P < 0.05, Wilcoxon符號秩檢驗(yàn))。

結(jié)果

用抗PD-1與舒尼替尼或索拉非尼作為單一療法或組合療法治療對植入的RCC小鼠腫瘤的中值體積的影響顯示于圖1中。舒尼替尼單一療法顯示在該Renca小鼠RCC模型中到治療結(jié)束時(第33天；參見表1)產(chǎn)生85%的腫瘤生長抑制(TGI)的活性；然而，在療法停止之后，腫瘤逐步生長(參見圖1)。當(dāng)作為單一療法施用時，抗PD-1 mAb在該模型中無活性，但抗PD-1與舒尼替尼的組合產(chǎn)生顯著的抗腫瘤活性(101％的TGI)，導(dǎo)致完全腫瘤消退(表1)或腫瘤生長的顯著延遲，直到植入后50天監(jiān)測結(jié)束時(圖1)。在相同模型的兩次獨(dú)立研究中觀察到的這些結(jié)果顯示小鼠RCC (Renca)腫瘤模型中的nivolumab小鼠（代表抗PD-1 mAb）與舒尼替尼之間的協(xié)同相互作用，因?yàn)樵摻M合在抑制腫瘤生長中的作用明顯大于每種治療劑單獨(dú)表現(xiàn)出的抑制水平的總和。

相反，盡管索拉非尼單一療法在RCC模型中有活性(662% TGI；表1)，用抗PD-1 mAb與索拉非尼的組合治療在該鼠模型中沒有顯著增強(qiáng)索拉非尼的抗腫瘤活性，并且沒有導(dǎo)致協(xié)同效應(yīng)(圖1)。

圖2顯示腫瘤達(dá)到500 mm³的體積所花費(fèi)的時間(以天數(shù)計)。與圖1中的數(shù)據(jù)一致，用抗PD-1/舒尼替尼組合治療的腫瘤的生長被顯著抑制，并且這些腫瘤花費(fèi)約63天達(dá)到500 mm³，顯著長于用對照、抗PD-1抗體、舒尼替尼、索拉非尼或抗PD-1/索拉非尼組合治療的腫瘤所花費(fèi)的19-34天。

在植入后33天測量的百分比腫瘤生長抑制顯示于表1中。這些數(shù)據(jù)與圖1和2顯示的數(shù)據(jù)一致，證實(shí)腫瘤生長被抗PD-1與舒尼替尼的組合完全抑制，而其他治療引起更低水平的腫瘤生長抑制?？筆D-1與舒尼替尼的組合相比于抗PD-1和索拉非尼的組合表現(xiàn)出的優(yōu)越功效與舒尼替尼和索拉非尼分別介導(dǎo)的不同免疫調(diào)節(jié)作用一致，這表明，舒尼替尼，而非索拉非尼，適于與用于治療癌癥患者的免疫治療方法進(jìn)行組合(參見Hipp等人, 2008)。然而，抗PD-1與索拉非尼的組合在人類個體中的作用不能完全反映小鼠RCC模型中觀察到的作用，并且該組合在治療人患者中可能是非常有效的。

表 1.植入后33天測試的治療劑介導(dǎo)的腫瘤生長抑制(TGI)和客觀反應(yīng)率

CR = 完全消退；PR = 部分消退。

各種治療對小鼠的總體重的影響顯示于圖3中?？筆D-1與舒尼替尼的組合被良好耐受，如缺乏小鼠體重的降低所證明?？筆D-1與索拉非尼的組合也被良好耐受，但明顯略遜于抗PD-1與舒尼替尼的組合，因?yàn)樗骼悄峤M合引起了小的、但可察覺的體重降低。

實(shí)施例2

用抗PD-1與舒尼替尼治療后腫瘤的免疫細(xì)胞浸潤

材料和方法

使用免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)分析評估腫瘤的免疫細(xì)胞浸潤。

免疫組織化學(xué)

將冷凍切片固定于丙酮/甲醇混合物中，并在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中清洗。針對內(nèi)源性過氧化物酶封閉切片，并添加一抗(抗CD8、抗CD4、抗FoxP3和抗PD-L1)，并溫育過夜。使用基于棕色聚合物的檢測系統(tǒng)(Biocare Medical)進(jìn)行顯色，其中蘇木精用作藍(lán)色復(fù)染劑用于顯現(xiàn)細(xì)胞核。

通過流式細(xì)胞術(shù)的免疫分型

分離腫瘤浸潤性免疫細(xì)胞并制備為單細(xì)胞懸浮液，然后染色，并經(jīng)由流式細(xì)胞術(shù)分析T-細(xì)胞子集(調(diào)節(jié)性和激活的)和骨髓細(xì)胞的表達(dá)(即，CD3、CD4、CD8、FoxP3、CD25和CD69的表達(dá))。

結(jié)果

在對照小鼠中，免疫組織化學(xué)(IHC)分析檢測到腫瘤周邊的CD4⁺和CD8⁺ T細(xì)胞(圖4)。當(dāng)給動物施用舒尼替尼時，存在CD4⁺和CD8⁺ T細(xì)胞向周邊和沿血管的主要流入。相反，當(dāng)給小鼠施用抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合時，在整個腫瘤中觀察到CD4⁺和CD8⁺ T細(xì)胞的更大浸潤。與單獨(dú)的每種藥劑或?qū)φ彰浇槲锵啾?，抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合導(dǎo)致產(chǎn)生更大數(shù)量的腫瘤浸潤性CD4⁺和CD8⁺ T細(xì)胞(圖4)。相反，與對照組相比，用單獨(dú)的抗PD-1 mAb或索拉非尼或抗PD-1 mAb與索拉非尼的組合沒有觀察到增加的T-細(xì)胞浸潤入腫瘤中(數(shù)據(jù)未顯示)。已證明舒尼替尼和索拉非尼表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)作用，這可能同當(dāng)這些藥劑與抗PD-1抗體免疫檢查點(diǎn)抑制劑組合時所觀察到的不同的治療效果密切相關(guān)。

腫瘤浸潤性免疫細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)分析顯示用與舒尼替尼或索拉非尼組合的抗PD-1 mAb治療的組內(nèi)的顯著差異(圖5-7)。與抗PD-1 mAb與索拉非尼的組合相比，抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合導(dǎo)致(i)增殖中的CD4⁺/Ki67⁺、CD8⁺和CD8⁺/Ki67⁺的更大頻率(P < 0.05；圖5和6)；(ⅱ)單核細(xì)胞髓源抑制細(xì)胞(如CD11b⁺/Ly6C^高/Ly6G^-所定義(P < 0.05))、表達(dá)CD11b⁺/Ly6C^低/Ly6G^-的單核細(xì)胞或兩者的減少百分比(P < 0.05；圖7)；和(iii)粒細(xì)胞骨髓細(xì)胞CD11b⁺/Ly6C^-/Ly6G⁺的增加百分比(P < 0.05；圖7)。因此，用舒尼替尼與抗PD-1 mAb的組合治療誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境的組成的變化，這可以支持有效的抗腫瘤免疫應(yīng)答。在所有實(shí)驗(yàn)組中均檢測到低數(shù)目的T-調(diào)節(jié)性細(xì)胞(CD45⁺/CD4⁺/CD25⁺/FoxP3⁺)，使得難以確定治療效果(數(shù)據(jù)未顯示)。

實(shí)施例3

抗原特異性免疫應(yīng)答的體內(nèi)細(xì)胞毒性的增強(qiáng)

材料和方法

細(xì)胞毒性測定

將表達(dá)AH1抗原的CT26小鼠結(jié)腸癌模型用于實(shí)驗(yàn)中以確定治療對抗原特異性T細(xì)胞是否具有任何作用。用CT26細(xì)胞SC植入后五天，將小鼠用媒介物或抗PD-1 mAb 10 mg/kg治療，間隔3天IP給予2個劑量(Q3Dx2)，用或不用舒尼替尼120 mg/kg，每天一次，持續(xù)5天(QDx5)。在最后一次治療后第2和4天確定細(xì)胞殺傷。

測定前一天，將來自未經(jīng)實(shí)驗(yàn)的(naive) BALB/c供體的脾細(xì)胞與或不與 CT26肽([H] SPSYVYHQF [OH]; Sigma-Genosys)一起溫育，并用5(6)-羧基熒光素二乙酸酯N-琥珀酰亞胺基酯(CFSE, Sigma-Aldrich)標(biāo)記。將抗原致敏和不致敏的細(xì)胞合并(1:1)并注入經(jīng)處理的小鼠。24小時后經(jīng)由流式細(xì)胞術(shù)測定百分比細(xì)胞殺傷。

結(jié)果

在CT26腫瘤模型中，抗PD-1 mAb與舒尼替尼的組合導(dǎo)致針對抗原特異性免疫應(yīng)答的體內(nèi)細(xì)胞毒性增強(qiáng)(圖8)。該增強(qiáng)的細(xì)胞毒性顯示增加的免疫應(yīng)答組分。它也與腫瘤體積的減少相關(guān)(圖9)。

實(shí)施例4

用與舒尼替尼、帕唑帕尼或伊匹單抗組合的Nivolumab治療轉(zhuǎn)移性RCC的1期臨床試驗(yàn)

總而言之，實(shí)施例1-3中公開的數(shù)據(jù)支持對抗PD-1抗體諸如nivolumab或派姆單抗與抗血管生成的TKI諸如舒尼替尼、帕唑帕尼、索拉非尼、阿西替尼或tivozanib的組合用于治療患有RCC的個體的研究。這些數(shù)據(jù)表明，舒尼替尼的免疫調(diào)節(jié)特性可以導(dǎo)致腫瘤微環(huán)境的變化，其支持有效的抗腫瘤免疫應(yīng)答，這可以由抗PD-1抗體擴(kuò)增和增強(qiáng)。盡管抗PD-1 mAb與索拉非尼的組合療法沒有顯著增強(qiáng)小鼠RCC模型中的索拉非尼的抗腫瘤活性，并且沒有導(dǎo)致協(xié)同效應(yīng)(圖1)，但該組合被良好耐受，并且在人類患者中是有效的。目前在患有mRCC的個體中在正在進(jìn)行的1期研究(NCT01472081)中評估與舒尼替尼、帕唑帕尼或伊匹單抗組合的nivolumab的安全性和功效。帕唑帕尼是可口服的多激酶抑制劑(VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-α和-β以及c-KIT)，并且與用nivolumab的單一療法相比，nivolumab與伊匹單抗的組合已經(jīng)在黑色素瘤的治療中顯示顯著增強(qiáng)的效力(Wolchok等人, 2013; WO 2013/173223)。

該1期研究的主要目標(biāo)是評估nivolumab加上舒尼替尼、帕唑帕尼或伊匹單抗的總體安全性和耐受性，以確定RCC患者中每種組合的MTD和推薦的2期劑量。次要目標(biāo)是評價組合的初步抗腫瘤活性，而探索性目標(biāo)是確定響應(yīng)是否與基線PD-L1表達(dá)相關(guān)。

方法

研究設(shè)計

患有mRCC的個體中的nivolumab加上舒尼替尼、帕唑帕尼或伊匹單抗的1期開放標(biāo)簽研究正在進(jìn)行。該試驗(yàn)包括5個平行治療組：nivolumab加上舒尼替尼(組S)、nivolumab加上帕唑帕尼(組P)、nivolumab 3 mg/kg加上伊匹單抗1 mg/kg (組I-1)、nivolumab 1 mg/kg加上伊匹單抗3 mg/kg (組I-3)以及nivolumab 3 mg/kg加上伊匹單抗3 mg/kg (組IN-3)。在下列兩個部分中正在進(jìn)行組S和組P的治療：劑量遞增(經(jīng)先前治療的患者)，隨后是劑量擴(kuò)大(未經(jīng)治療的患者)。I-1和I-3組的治療是每組中由經(jīng)先前治療的個體以及未經(jīng)治療的個體兩者組成的單個初始組群。組I-1和I-3以及組IN-3的擴(kuò)大組群由經(jīng)最小程度治療(包括未經(jīng)治療)的個體組成。組S和組P的研究設(shè)計總結(jié)于圖10A中，并且組I-1、I-3和IN-3的研究設(shè)計總結(jié)于圖10B中。

研究群體

研究群體由患有病理證實(shí)的轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌(具有透明細(xì)胞組成)的≥18歲的個體組成，其具有至少一個可測量病灶，如實(shí)體瘤(RECIST) 1.1的反應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)所定義。僅在組S和組P的劑量遞增組群中允許具有如RECIST 1.1所定義的可測量病灶的非透明細(xì)胞RCC患者。對于組S、P以及I-1 和I-3初始組群，還需要有利或中等風(fēng)險MSKCC (Memorial Sloan Kettering Cancer Center)預(yù)后評分和Karnofsky表現(xiàn)狀態(tài)(KPS) ≥ 80%，(對于I-1和I-3擴(kuò)展以及IN-3，任何MSKCC預(yù)后評分是可接受的)。

組S和組P

在晚期/轉(zhuǎn)移性設(shè)置中，個體必須先前已接受至少一個全身治療方案，才有資格參加研究的劑量遞增部分，而個體必須是未經(jīng)治療的，才有資格參加研究的劑量擴(kuò)展部分。指定先前接受帕唑帕尼的參加劑量遞增階段的個體接受nivolumab加上舒尼替尼，而指定先前接受舒尼替尼的個體接受nivolumab加上帕唑帕尼。已接受先前帕唑帕尼和舒尼替尼的個體沒有資格。還從研究中排除用全身性類固醇或任何其他免疫抑制劑長期治療的個體，或先前用抗PD-1、抗PD-L1或抗PD-L2、抗CD137、抗CTLA-4或類似藥劑治療的那些。

先前沒有接受舒尼替尼或帕唑帕尼的個體可登記參加劑量遞增組，或者當(dāng)兩個組開放時，以交替方式被指定至這些組。預(yù)期約36名個體(每組18名個體)在研究的劑量遞增部分中進(jìn)行治療。在遞增組群完成時，基于改良的毒性概率區(qū)間(mTPI)設(shè)計評估MTD。如果在組S或組P中，nivolumab的MTD被確定為< 5 mg/kg，該組將不被進(jìn)一步擴(kuò)展以收集未經(jīng)治療個體中的安全性數(shù)據(jù)。如果與舒尼替尼或帕唑帕尼組合的nivolumab的MTD被確定為5 mg/kg或更高，則相應(yīng)組中的單獨(dú)擴(kuò)展組群將以5 mg/kg的劑量開放登記。在組S和組P的擴(kuò)展組群中，僅登記未經(jīng)治療的患者，使得每組治療約20名未經(jīng)治療的個體。每個治療周期的持續(xù)時間為6周，其中在第1和22天給予nivolumab，并且根據(jù)舒尼替尼(每天50 mg；使用4周，停用2周)和帕唑帕尼(每天800 mg)的批準(zhǔn)產(chǎn)品標(biāo)簽給予抗血管生成療法。

組S和組P的劑量遞增

劑量水平定義于表2和3中。Nivolumab的患者內(nèi)劑量遞增是不允許的。

表 2.nivolumab加上舒尼替尼的劑量遞增的劑量水平

^a 僅在劑量水平1需要遞減(de-escalation)時，才登記劑量水平-1。

表 3.nivolumab加上帕唑帕尼的劑量遞增的劑量水平

^a 僅在劑量水平1需要遞減(de-escalation)時，才登記劑量水平-1。

各個劑量遞增組的nivolumab的開始劑量均為2 mg/kg。最初，在劑量水平1治療每組7名有資格的個體。關(guān)于額外個體是否將在相同劑量水平治療或遞增至更高劑量水平(5 mg/kg)的決定將由DLT觀察時段期間觀察到的劑量限制性毒性(DLTs)的數(shù)目來指導(dǎo)。由于除了劑量限制性毒性以外的原因而未完成DLT時段的個體將被替換。如果2 mg/kg的安全性和耐受性概況是不可接受的，可考慮劑量水平-1 (0.3 mg/kg)。

作為組S和組P的第1階段劑量遞增試驗(yàn)，這些組中每個劑量的樣品大小取決于觀察到的毒性和后驗(yàn)推斷。預(yù)期每個組中在劑量遞增階段期間治療總共18名個體。然而，每組可能由于替換而治療多于18名個體，或者每組可能由于在最低劑量水平的毒性而治療少于18名個體。

組S和組P的劑量擴(kuò)展

一旦已經(jīng)表征測試的所有劑量的安全性概況和耐受性且對于給定治療組已經(jīng)定義nivolumab加上舒尼替尼和nivolumab加上帕唑帕尼的組合施用的MTD，則僅當(dāng)在MTD的nivolumab劑量為5 mg/kg或更高時，對于該組在5mg/kg起始組群擴(kuò)展。如果在任何組中，nivolumab的MTD被確定為< 5 mg/kg，該組將不被進(jìn)一步擴(kuò)展。對于與舒尼替尼或帕唑帕尼組合的nivolumab，以5 mg/kg劑量水平治療額外20名個體/治療組，以獲得額外的安全性信息。

對于組I-1和I-3(第一組群)

先前治療和未經(jīng)治療的個體都有資格被登記，其中每個組治療約20個個體，但排除先前用抗PD-1、抗PD-L1或抗PD-L2、抗CD137、抗CTLA-4或其他類似藥劑治療的個體。I-1、I-3和IN-3組的劑量詳述于下表4中。對于任一藥物均不允許患者內(nèi)劑量遞增或遞減。

表 4.nivolumab加上伊匹單抗的組合的劑量水平

。

每個治療周期的持續(xù)時間為6周。每3周給予Nivolumab和伊匹單抗，持續(xù)四個劑量，然后在誘導(dǎo)療法的第4個劑量之后或第113天之后(如果由于治療延遲還沒有施用誘導(dǎo)療法的第4個劑量)3周開始每2周給予nivolumab。

將登記約20名個體/組，并在I-1和I-3中在個體的初始組群中進(jìn)行治療。將這些組擴(kuò)展至每組治療的總共45名個體(在每組擴(kuò)展組群中治療額外25名個體)，以更好地評估安全性和效力。

對于組 I-1、I-3 (擴(kuò)展組群)和組IN-3

經(jīng)最小程度治療(包括未經(jīng)治療)的個體有資格被登記，其中每個組治療約25個個體。每個治療周期的持續(xù)時間為6周。每3周給予Nivolumab和伊匹單抗，持續(xù)四個劑量，然后在誘導(dǎo)療法的第4個劑量之后或第113天之后(如果由于治療延遲還沒有施用誘導(dǎo)療法的第4個劑量)3周開始每2周給予nivolumab。

將先前治療的個體指定至治療組

將在晚期或轉(zhuǎn)移性設(shè)置中先前已接受治療的個體指定至如上所述的組S和P的劑量遞增組群中。當(dāng)兩個伊匹單抗組合組(I-1和I-3)都開放時，將先前已接受至少一次全身性療法的個體(條件是當(dāng)遞增階段組S和/或P開放時，它們沒有資格參加那些組)，以交替方式指定至這兩個組。如果僅一個組開放，則將這些個體均指定至開放組。

將未經(jīng)治療的個體指定至治療組

如果所有四組(擴(kuò)展組S和P；I-1和I-3)均開放登記，則將未經(jīng)治療的個體以1:1:1:1比率隨機(jī)指定至開放組之一，直到登記完成。

將經(jīng)最小程度治療的個體指定至治療組

對于I-1和I-3擴(kuò)展以及IN-3，將經(jīng)最小程度治療(包括未經(jīng)治療)的個體以1:1:1比率隨機(jī)指定至開放組之一，直到登記完成。根據(jù)NCI CTCAE v4.0分級不良事件。疾病評估從研究藥物的首次劑量起每6周(±1周)進(jìn)行一次（對于前四次評估），然后每12周(±1周)進(jìn)行一次，直到疾病進(jìn)展。根據(jù)RECIST 1.1進(jìn)行反應(yīng)評估。對于組S和組P的劑量遞增階段，治療個體，直到毒性不可接受、疾病進(jìn)展或撤回知情同意書。

研究評估

安全結(jié)果測量

組合的安全性/耐受性結(jié)果測量和MTD的測定是本研究的主要終點(diǎn)。重點(diǎn)安全性評估包括：(1)直至研究藥物的最后一次劑量之后100天(或者對于還沒有消除、穩(wěn)定、回復(fù)至基線或到最后一次劑量之后100天被認(rèn)為不可逆的藥物相關(guān)的不良事件(AE)而言更長)發(fā)生的AE的發(fā)生率，(2)直至研究藥物的最后一次劑量之后100天(或者對于還沒有消除、穩(wěn)定、回復(fù)至基線或到最后一次劑量之后100天被認(rèn)為不可逆的藥物相關(guān)的嚴(yán)重不良事件(SAE)而言更長)發(fā)生的SAE的發(fā)生率，和(3)通過最壞毒性分級(包括血液學(xué)、血清化學(xué)和尿分析測試)的實(shí)驗(yàn)室測試的頻率(其在組S和組P的篩選、基線、周期1-4的第1、8、22和29天、周期5的第1和22天時評估；在組I-1和組I-3的篩選、基線、周期1-2的第1、8、22和29天、周期3+的第1、15和29天時評估；在所有組治療結(jié)束后和最后一次劑量之后100天隨訪時評估)。

功效結(jié)果測量

抗腫瘤活性是本研究的次要終點(diǎn)，并且通過客觀反應(yīng)率(ORR)和反應(yīng)持續(xù)時間(DOR)基于RECIST 1.1進(jìn)行測量。腫瘤反應(yīng)基于篩選時、從研究藥物的首次劑量起每6周(±1周)(對于前4次評估)、之后每12周(±1周)直到疾病進(jìn)展的腫瘤評估。

實(shí)施例5

S和P組中表現(xiàn)出的抗腫瘤活性

組S N2和S N5中各自治療七名個體，其接受與S (50 mg, 使用4周，停用2周)組合的nivolumab (分別為2或5 mg/kg)，直到疾病進(jìn)展或毒性不可接受。沒有觀察到DLT，且未達(dá)到MTD。因此，基于耐受性，將S N5組擴(kuò)展19名未經(jīng)治療的患者(對于S組，總共n=33)。組P在N2登記20名個體，其接受與P (每天800 mg)組合的2 mg/kg nivolumab。觀察到四例DLT(ALT/AST升高[n=3]，疲勞[n=1])，導(dǎo)致終止該組。圖11中舉例說明進(jìn)行的劑量遞增。

S N2組中的七名個體、S N5組中的26名個體和P N2組中的20名個體可通過2014年3月數(shù)據(jù)庫鎖(database lock)評價反應(yīng)。在所有組中都觀察到臨床活性(OR：證實(shí)的完全[CR]或部分[PR]反應(yīng))，如表5中所示。用舒尼替尼與2 mg/kg nivolumab治療的可評價個體的數(shù)目較小(7名患者)，但這些中的1名(14％)顯示完全反應(yīng)，5名(71％)顯示部分反應(yīng)，而1名(14％)具有穩(wěn)定的疾病?？傮w而言，在用舒尼替尼與兩種濃度的nivolumab (2 mg/kg和5 mg/kg)治療的33名可評價個體中，18 名(55%)顯示證實(shí)的客觀反應(yīng)(OR)。在用帕唑帕尼與2 mg/kg nivolumab治療的20名可評價個體中，9 名(45%)顯示證實(shí)的OR。在反應(yīng)個體中的41% (組S)和56% (組P)中，反應(yīng)于首次評價(6周)前發(fā)生。通過Clopper和Pearson的方法計算ORR和對應(yīng)的雙側(cè)精確95% CI。

表 5.用nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼治療的RCC患者中的腫瘤反應(yīng)

BOR：最佳總體反應(yīng)；CR：完全反應(yīng)；PR：部分反應(yīng)；SD：疾病穩(wěn)定；PD：疾病進(jìn)展；UD：不能確定；CI：置信區(qū)間；(A)：僅CR；(B)：CR + 未證實(shí)的反應(yīng)；未證實(shí)的反應(yīng)：在最后一次腫瘤評估時表明的正在進(jìn)行的個體具有腫瘤反應(yīng)；DOR：反應(yīng)持續(xù)時間。

組S中的反應(yīng)持續(xù)時間為18.1-118++周，而組P中的反應(yīng)持續(xù)時間為12.1至117.1++周。組S中的穩(wěn)定疾病率為30% (n=10)，而組P中的穩(wěn)定疾病率為35% (n=7)。使用Kaplan-Meier方法測定中值反應(yīng)持續(xù)時間和相應(yīng)雙側(cè) 95% CI。

通過蜘蛛圖(圖12A-C)和瀑布圖(圖12D)舉例說明對S和P組中的可評估個體的腫瘤負(fù)荷的影響。

表5中顯示的證實(shí)ORR(范圍為PAZ + NIV2組的45%至SUN + NIV2組的86%)顯著高于用nivolumab或舒尼替尼或帕唑帕尼單一療法看到的ORR。例如，WO 2013/173223公開了在1期研究中單獨(dú)的nivolumab (1或10 mg/kg)用于治療RCC的約28-31%的ORR。在更新的分析中，Motzer等人(2014)報道了在2期試驗(yàn)中用分別以0.3、2和10.mg/kg施用于患者的nivolumab治療轉(zhuǎn)移性RCC的20、22和20%的ORR。Choueiri等人(2014)報道了，以0.3、2和10 mg/kg施用的nivolumab在用1-3種先前抗血管生成療法預(yù)治療的轉(zhuǎn)移性RCC患者中分別產(chǎn)生9、23和22%的ORR，而10 mg/kg nivolumab在未經(jīng)治療的患者中產(chǎn)生13％的ORR。對于TKI，已用單獨(dú)的舒尼替尼觀察到約27.5%的歷史ORR(參見，例如，Motzer等人, 2007; 2013)，并且用單獨(dú)的帕唑帕尼觀察到約30％的歷史ORR(參見，例如，Sternberg等人, 2010; Motzer等人, 2013)。

在第一次評估(6周)時，S組中的17名個體中的7名(41.2％)是反應(yīng)者，而P組中的9名個體中的5名(55.6％)是反應(yīng)者。正在進(jìn)行的反應(yīng)者包括S組中的17名個體中的10名(58.8％)和P組中的9名個體中的3名(33.3％)。

S和P組中的無進(jìn)展存活

無進(jìn)展存活(PFS)的比例相對于時間的圖顯示于圖13中。組S的24周時的PFS率為79%，而組P的24周時的PFS率為55%。S組(S + N; n=33)的中值PFS為55.3周(95% CI 47.9-72.4周)，而P組(P + N; n=20)的中值PFS為31.4周(95% CI 12.1-48.1周)。

通過基線PD-L1表達(dá)的客觀反應(yīng)率

腫瘤組織收集是回顧性的(S組有33個樣品可用，而P組有20個樣品可用)。通過 Dako免疫組織化學(xué)測定使用兔抗人PD-L1 mAb, 28-8 (WO 2013/173223)測量表面PD-L1表達(dá)。陽性PD-L1信號的截止值為1％或5％的腫瘤膜染色。在根據(jù)PD-L1表達(dá)狀態(tài)而分類的兩組患者中觀察到的ORR顯示于表6中。

表 6.用nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼的組合治療的RCC患者中的客觀反應(yīng)率(ORR)和PD-L1腫瘤表達(dá)狀態(tài)

^aPD-L1可評價患者的ORR；ORR包括RECIST確定的完全或部分反應(yīng)者。

這些數(shù)據(jù)顯示，RCC患者對nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼的組合的反應(yīng)與PD-L1的腫瘤表達(dá)不相關(guān)。

S和P組中的不良事件

在組S的27/33名患者(82%)和組P的14/20名患者(70%)中觀察到3-4級相關(guān)的不良事件(AE)。大多數(shù)毒性與TKI的已知概況一致。最通常相關(guān)的3-4級AE包括組S中的升高的ALT和高血壓(各自為18％)、低鈉血癥和減少的淋巴細(xì)胞計數(shù)(各自為15％)，以及組P中的升高的ALT和AST以及腹瀉(各自為20％)和疲勞(15％)。1名患者(組S、N5)中發(fā)生3級肺炎。在組S的11/33名患者(33%; 3 N2, 8 N5)和組P的4/20名患者(20%)中，3-4級相關(guān)的AE導(dǎo)致療法中斷。沒有觀察到5級治療相關(guān)的AE。肝毒性是使用治療算法可管控的。

總而言之，臨床數(shù)據(jù)表明，nivolumab與舒尼替尼的組合在患有mRCC的患者中具有令人鼓舞的抗腫瘤活性和可管控的安全性概況。組P由于DLT而關(guān)閉。

實(shí)施例6

伊匹單抗組中表現(xiàn)出的抗腫瘤活性

將mRCC患者(有利或中間的MSKCC評分；Karnofsky表現(xiàn)狀態(tài)≥ 80%；未治療或除了先前免疫-腫瘤治療以外的任何數(shù)目的先前療法)隨機(jī)化至不同的治療組。用1 mg/kg伊匹單抗與3 mg/kg nivolumab (I-1組)治療的四十七名個體、用3 mg/kg伊匹單抗與1 mg/kg nivolumab (I-3組)治療的47名個體和用3 mg/kg伊匹單抗與3 mg/kg nivolumab (IN-3)治療的六名個體可針對反應(yīng)進(jìn)行評估。大多數(shù)患者(n=54; 54%)具有先前的全身性療法(I-1:22; I-3:26;IN-3:3)。在I-1和I-3組中觀察到OR，如表7中所示。通過Clopper和Pearson的方法計算ORR和對應(yīng)的雙側(cè)精確95% CI?？偠灾?，I-1組中的16名(34％)患者顯示證實(shí)的OR，而I-3組中的17名(36%)患者顯示證實(shí)的OR。

這些ORR顯著高于用單獨(dú)的nivolumab(WO 2013/173223; Motzer等人, 2014; Choueiri等人, 2014; 參見實(shí)施例5)或單獨(dú)的伊匹單抗看到的ORR。在2期試驗(yàn)中用伊匹單抗單一療法治療轉(zhuǎn)移性RCC患者導(dǎo)致組群A (3 mg/kg負(fù)荷劑量，隨后1 mg/kg，每3周一次)中的5%的ORR和組群B(對于所有劑量，3 mg/kg，每3周一次)中的12.5%的ORR，但這2組的特征存在差異，因而無法直接比較功效(Yang等人, 2007)。

中值反應(yīng)持續(xù)時間(DOR)在I-3組中為53.9周，而在I-1組中沒有達(dá)到。在19名(40%) (I-1)和18名(38%) (I-3)患者中觀察到穩(wěn)定疾病(SD)作為最佳總體反應(yīng)。

通過蜘蛛圖(圖14A-C)和瀑布圖(圖14D)舉例說明對可評價個體的腫瘤負(fù)荷的影響。S、P和I組中治療的個體的瀑布圖的比較顯示于圖15中。

表 7.用nivolumab與舒尼替尼或帕唑帕尼治療的RCC患者中的腫瘤反應(yīng)

BOR: 最佳總體反應(yīng)；CR：完全反應(yīng)；PR：部分反應(yīng)；SD：疾病穩(wěn)定；PD：疾病進(jìn)展；UD：不能確定；CI：置信區(qū)間；(A)：僅CR；(B)：CR + 未證實(shí)的反應(yīng)；未證實(shí)的反應(yīng)：在最后一次腫瘤評估時表明的正在進(jìn)行的個體具有腫瘤反應(yīng)；PFS：無進(jìn)展存活，DOR：反應(yīng)持續(xù)時間；NR：未達(dá)到；^a由于正在進(jìn)行的反應(yīng)的高百分比，中值DOR可能是誤導(dǎo)的。反應(yīng)持續(xù)時間被定義為第一次反應(yīng)的日期和疾病進(jìn)展或死亡的日期之間的時間(以先發(fā)生者為準(zhǔn))。

I-1和I-3組中的無進(jìn)展存活

PFS的比例相對于時間的圖顯示于圖16中。中值PFS在I-1組中為30.3周，而在I-3組中為36.0周。通過Kaplan-Meier方法估計PFS率，其具有基于Greenwood公式推導(dǎo)的對應(yīng)的95% CI。

通過基線PD-L1表達(dá)的客觀反應(yīng)率

回顧性收集腫瘤組織樣品，并且通過 Dako免疫組織化學(xué)測定使用mAb, 28-8 (WO 2013/173223)測量表面PD-L1表達(dá)。陽性PD-L1信號的截止值為1％或5％的腫瘤膜染色。在根據(jù)PD-L1表達(dá)狀態(tài)而分類的不同患者中觀察到的ORR顯示于表8中。

表 8.用nivolumab與伊匹單抗的組合治療的RCC患者中的客觀反應(yīng)率(ORR)和PD-L1腫瘤表達(dá)狀態(tài)

^aPD-L1可評價患者的ORR；ORR包括RECIST確定的完全或部分反應(yīng)者。

這些數(shù)據(jù)顯示，RCC患者對nivolumab與伊匹單抗的組合的反應(yīng)與PD-L1的腫瘤表達(dá)不相關(guān)。

I-1和I-3組中的不良事件

在I1、I3和IN-3組的16/47(34%)、30/47(64%)和5/6(83%)中分別觀察到3-4級相關(guān)的不良事件(AE)。I1和I3組中的五名(11％)和10名(21％)分別由于相關(guān)AE而停止治療。IN-3組中沒有患者由于不良事件而停止，然而所有六名患者均需要類固醇用于治療免疫介導(dǎo)的不良事件，并且在IN3組中沒有登記額外患者。最常見的3-4級相關(guān)的不良事件包括升高的脂肪酶(20%, n=20)、升高的ALT (11%, n=11)、腹瀉(9%, n=9)和升高的AST (6%, n=6)。沒有看到3-4級肺炎。

總而言之，nivolumab與伊匹單抗顯示可接受的安全性、在確立的治療指導(dǎo)內(nèi)可管控的3-4級事件，和mRCC中的顯著抗腫瘤活性的令人鼓舞的證據(jù)，其中大多數(shù)反應(yīng)正在進(jìn)行。ORR表明在RCC中比先前用nivolumab或伊匹單抗單一療法報道的更大的活性(Topalian等人, 2012a; Motzer等人, 2014; Choueiri等人, 2014; Yang et al., 2007)。I-1組中還沒有達(dá)到中值反應(yīng)持續(xù)時間。一部分患者在停止治療后繼續(xù)反應(yīng)，表明對該方案的免疫記憶組分。初始和擴(kuò)展組群與IN-3組一起繼續(xù)進(jìn)行評估。用nivolumab + 伊匹單抗組合報道的令人鼓舞的抗腫瘤活性是所計劃的第一線mRCC中的III期組合試驗(yàn)的基礎(chǔ)。

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