本發(fā)明屬生物醫(yī)學(xué)和醫(yī)用材料技術(shù)領(lǐng)域，涉及防治冠狀動(dòng)脈再狹窄支架，尤其涉及一種防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的β-欖香烯控釋洗脫支架，
背景技術(shù)：
報(bào)道公開(kāi)了支架植入術(shù)取代了大部分的球囊擴(kuò)張術(shù)，已成為冠心病介入治療(PCI)的主要方法。但醫(yī)療實(shí)踐顯示，裸金屬支架術(shù)后支架內(nèi)再狹窄的常勝已嚴(yán)重阻礙了該項(xiàng)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，目前藥物洗脫支架成為解決支架植入后再狹窄的最佳途徑，有研究顯示，可將再狹窄率由15％～30％降低到10％以內(nèi)。但是即使目前應(yīng)用最廣泛、療效最好的雷帕霉素洗脫支架、紫杉醇洗脫支架仍導(dǎo)致1.2％的支架內(nèi)晚期血栓形成，至今仍未找到有效的解決的辦法。支架內(nèi)晚期血栓形成直接引起致命性的急性心肌梗死或死亡，死亡率高達(dá)45％，因此研制既能抑制再狹窄，又具備抗血栓作用的新一代藥物洗脫支架乃當(dāng)務(wù)之急。
研究顯示，支架術(shù)后再狹窄的形成是由于支架釋放使內(nèi)皮損傷，啟動(dòng)了炎癥反應(yīng)及血栓形成，同時(shí)多種細(xì)胞因子參與，SMC增殖、遷移，細(xì)胞外基質(zhì)積聚，導(dǎo)致血管內(nèi)膜過(guò)度增生，管腔狹窄；其中內(nèi)皮損傷為始動(dòng)因素，完整的內(nèi)皮可抑制PCI術(shù)后內(nèi)膜增生；內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)大量的組織因子則啟動(dòng)了血栓形成；支架內(nèi)晚期血栓形成機(jī)制是多因素的，涉及患者因素(糖尿病、射血分?jǐn)?shù)低、腎功能衰竭等)、病變特征(長(zhǎng)病變、支架重疊、分叉病變、支架內(nèi)再狹窄等)、過(guò)早停用抗血小板藥物或抗血小板藥物抵抗、支架涂層的生物兼容性等諸多原因，而不全再內(nèi)皮化、損傷血管愈合延遲最受關(guān)注。目前臨床上療效最好、應(yīng)用最廣泛的藥物洗脫支架為雷帕霉素和紫杉醇支架.雷帕霉素是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,能阻止有絲分裂過(guò)程中細(xì)胞從G1期向S期轉(zhuǎn)化,抑制細(xì)胞增殖，紫杉醇為一種微管抑制劑,通過(guò)作用于細(xì)胞的微管,抑制G1/GO和G1/M期的細(xì)胞復(fù)制來(lái)抑制細(xì)胞和新生內(nèi)膜的增生，但是在抑制SMC 增殖時(shí)，也抑制內(nèi)皮細(xì)胞再生，延遲了內(nèi)皮化進(jìn)程，導(dǎo)致支架內(nèi)晚期血栓形成。
β-欖香烯(β－elemene)是由碳、氫兩種元素組成的萜類化合物，化學(xué)名1－甲基－1－乙烯基－2，4－二乙丙基環(huán)己烷，分子式為C15H12，相對(duì)分子量為204，主要由中藥莪術(shù)揮發(fā)油中分離獲得，還可由中藥沒(méi)藥、香毛草、白術(shù)、一枝黃花等來(lái)源獲取，目前廣泛應(yīng)用于腫瘤的治療。有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)β-欖香烯可通過(guò)阻滯細(xì)胞從S期進(jìn)入G2/M期抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，保護(hù)過(guò)氧化氫損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，抑制大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓形成，而且毒副作用小，對(duì)人外周血LC50>250μg/ml。
本申請(qǐng)的發(fā)明人鑒于現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀，擬提供一種防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的β-欖香烯控釋洗脫支架，以支架為載藥工具，涂層控制釋放β-欖香烯，通抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡防治支架內(nèi)再狹窄；同時(shí)保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，抑制血栓形成作用防止支架內(nèi)晚期血栓形成。目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)有關(guān)報(bào)道。腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖類似，所以
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種防治冠狀動(dòng)脈支架內(nèi)再狹窄及血栓形成支架，具體涉及一種防治冠狀動(dòng)脈支架內(nèi)再狹窄及血栓形成的藥物洗脫支架。
本發(fā)明提供了一種防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的β-欖香烯控釋洗脫支架，以支架為載藥工具，涂層控制釋放β-欖香烯，通抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡防治支架內(nèi)再狹窄；同時(shí)保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，抑制血栓形成作用防止支架內(nèi)晚期血栓形成。
本發(fā)明中，依據(jù)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)已證實(shí)的β-欖香烯可抑制平滑肌細(xì)胞增殖、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞損傷修復(fù)、抗血栓的基礎(chǔ)理論，采用β-欖香烯原料液，制備β-欖香烯洗脫支架，遞送系統(tǒng)為可降解或不可降解涂層或無(wú)涂層的不銹鋼、鎳－鈦記憶合金、鎂合金、高分子聚合物可降解支架等。
更具體的，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，以β-欖香烯液體為藥物有效成分，以不銹鋼材料為支架，β-欖香烯原料液噴涂于生物可降解或非生物可降解的涂層表面， 制備防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的β-欖香烯控釋洗脫支架，所述控釋涂層為聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料，所述的支架涂層厚度10～35μm，支架表面藥物含量0.01-28.4μg/mm2；
本發(fā)明的實(shí)施例中，優(yōu)選所述涂層厚度為10μm，支架表面藥物含量0.01μg/mm2；或優(yōu)選涂層厚度為35μm，支架表面藥物含量28.4μg/mm2。
本發(fā)明的支架涂層材料中，生物可降解性材料包括天然可降解材料如殼聚糖、透明質(zhì)酸素、甲殼、淀粉、膠原、肝素、纖維素、磷酸膽堿等，以及合成聚合物材料如聚乙二醇(PEG)、聚L－乳酸(PLLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚β－羥基丁酸酯(PHB)、多聚乳酸(PLA)、聚丙交酯(PGA)、聚己內(nèi)酯(PCL)等及其共聚物；
非生物可降解性材料包括聚甲基丙烯酸丁酯、聚二甲基硅氧烷等。
本發(fā)明制備的防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的β-欖香烯控釋洗脫支架進(jìn)行體外控制釋放測(cè)試，結(jié)果表明：藥物6個(gè)月后，仍有超過(guò)一半的藥物沒(méi)有釋放，與同種單純聚合物的釋放時(shí)間相比顯著減緩，保證了藥物的持續(xù)作用；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果顯示，β-欖香烯控釋洗脫支架具有對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物豬支架術(shù)后內(nèi)膜增生的作用。
本發(fā)明制備的支架還可適于頸動(dòng)脈支架、顱內(nèi)動(dòng)脈支架以及其他外周血管支架使用。
本發(fā)明的藥物控釋洗脫支架具有如下優(yōu)點(diǎn)：
支架中的β-欖香烯液，具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抗血栓形成，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)作用，而且β-欖香烯為脂溶性藥物，易通過(guò)細(xì)胞膜，持續(xù)作用于病變局部，即使短暫的、極小的劑量也可以產(chǎn)生長(zhǎng)久的持續(xù)的抗增生作用，結(jié)合聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅涂層控制釋放的特點(diǎn)，植入冠脈后的組織相容性和安全性良好，冠脈內(nèi)新生內(nèi)膜程度明顯減少，管腔顯著增大，比較紫杉醇和雷帕霉素涂層支架單一作用于某一環(huán)節(jié)有明顯優(yōu)勢(shì)，不但能防治支架術(shù)后再狹窄，更具備抑制支架內(nèi)血栓形成作用；采用的生物降解或非生物降解的不銹鋼、鎳－鈦記憶合金、鎂合金等其他生物相容性良好的金屬或合金、以及高分子聚合物可降解支架，能有效控制釋放β-欖香烯，經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物證實(shí)，能有效防治冠狀動(dòng)脈支架內(nèi)再狹窄及血栓形成，具有安全性和可行性。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
取藥材溫莪術(shù)的干燥根莖(產(chǎn)地：浙江瑞安)，粉碎成粗粉，稱量100g，加入1000ml燒瓶中，加8倍量水，用揮發(fā)油提取器提取6h(提取條件經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化)，獲得具有特殊氣味的油狀物，即為莪術(shù)油，含量為2％；將莪術(shù)油進(jìn)行減壓蒸餾，收集50℃-80℃/40Pa的欖香烯餾份，再將此餾份進(jìn)行減壓蒸餾收集70℃-72℃/40Pa的餾份，經(jīng)硅膠柱層析分離，石油醚洗脫，得產(chǎn)物：?jiǎn)我坏摩?欖香烯。
實(shí)施例2制備β-欖香烯控釋洗脫支架
采用不銹鋼材料支架，聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料作為藥物控制釋放涂層，首先配制1％的聚甲基丙烯酸丁酯的四氫呋喃溶液，其中含有聚合物量20％～25％的納米二氧化硅，將所述β-欖香烯藥物加入溶液，使藥物與聚甲基丙烯酸丁酯的重量比為1：1，攪拌使藥物懸浮在溶液中，用噴槍將上述懸浮液均勻地噴涂在支架上，40℃烘干，精確稱重，計(jì)算每平方毫米支架表面的藥物含量；涂層厚度10～35μm，支架表面藥物含量7.1μg～28.4μg/mm2，將藥物洗脫支架安裝在球囊上，環(huán)氧乙烷消毒后備用；
對(duì)β-欖香烯控釋洗脫支架進(jìn)行體外控制釋放測(cè)試，結(jié)果表明：藥物在初始的約2周內(nèi)快速釋放，然后釋放速度逐漸趨緩，6個(gè)月后，仍有超過(guò)一半的藥物沒(méi)有釋放出來(lái)，與同種單純聚合物的釋放時(shí)間相比顯著減緩，保證了藥物的持續(xù)作用；同時(shí)，通過(guò)調(diào)整藥物和涂層的比例，以及涂層中聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅的比例，能在很大程度上調(diào)整釋放曲線的形狀，表明復(fù)合涂層中的納米二氧化硅有延長(zhǎng)釋放時(shí)間的效果。
實(shí)施例3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)測(cè)試β-欖香烯控釋洗脫支架對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物豬支架術(shù)后內(nèi)膜增生的作用，評(píng)價(jià)β-欖香烯控釋洗脫支架防治支架術(shù)后再狹窄的安全性與療效：
健康中華小型豬隨機(jī)分為2組：按支架直徑、冠脈直徑1.2～1.3：1的比例分別將單純涂層支架、實(shí)施例1的β-欖香烯控釋洗脫支架，其涂層厚度10μm，支架表面藥物含量7.1μg/mm2隨機(jī)植入回旋支和前降支合適的血管段，為涂層組、β-欖 香烯組，每組12只，術(shù)前2天服用阿司匹林250mg至術(shù)后停用，1個(gè)月和6個(gè)月各處死6只，取支架植入段血管，涂層組和用藥組再各取其中2只動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎、腦等重要器官，固定；支架術(shù)后即刻、術(shù)后1個(gè)月和6個(gè)月常規(guī)處理前分別冠脈造影觀察是否有血栓病變；
結(jié)果顯示：光鏡及掃描電鏡觀察支架段血管無(wú)炎癥，無(wú)血栓形成，無(wú)動(dòng)脈壁變薄，無(wú)動(dòng)脈瘤形成，無(wú)中膜、外膜壞死，心、肝、脾、肺、腎、腦等組織無(wú)病理性損害，表明β-欖香烯控釋洗脫支架植入犬冠脈后的組織相容性和安全性良好；
支架植入后1個(gè)月和6個(gè)月時(shí)，β-欖香烯組較涂層組新生內(nèi)膜程度明顯減少，管腔顯著增大，表明β-欖香烯控釋洗脫支架能防治犬冠脈支架內(nèi)再狹窄；
支架植入后即刻、1個(gè)月和6個(gè)月時(shí)，冠脈造影結(jié)果均未見(jiàn)血栓形成影像學(xué)改變；
結(jié)果證實(shí)：本發(fā)明聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅洗脫支架具有很好的生物相容性；本發(fā)明β-欖香烯甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅洗脫支架植入豬冠狀動(dòng)脈安全、可行；本發(fā)明β-欖香烯聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅洗脫支架可有效防治豬冠脈支架內(nèi)再狹窄；本發(fā)明β-欖香烯聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅洗脫支架可防止支架內(nèi)急性和晚期血栓形成。
實(shí)施例4
健康小型豬隨機(jī)分為2組：按支架直徑、冠脈直徑1.2～1.3：1的比例分別將單純涂層支架、實(shí)施例1的β-欖香烯控釋洗脫支架，其涂層厚度35μm，支架表面藥物含量28.4μg/mm2，隨機(jī)植入回旋支和前降支合適的血管段，為涂層組、β-欖香烯組，每組12只，術(shù)前2天服用阿司匹林250mg至術(shù)后停用，1個(gè)月和6個(gè)月各處死6只，取支架植入段血管，涂層組和用藥組再各取其中2只動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎、腦等重要器官，固定；支架術(shù)后即刻、術(shù)后1個(gè)月和6個(gè)月處死前分別冠脈造影觀察是否有血栓病變。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果同實(shí)施例2。
以上示例僅作示范而用，并非限制，本發(fā)明的范圍以上述權(quán)利要求為依據(jù)。