本發(fā)明提供一種從得自海綿的天然生物海綿中精制和提取骨針(spicule)的方法。更具體地，提供一種通過使用氫氧化鈉和L-抗壞血酸的溶液從得自海綿的天然生物海綿中去除有機(jī)物并提取多孔骨針的方法。

背景技術(shù)：

在過去，名稱為“含有醫(yī)用草本去皮粉末的化妝品組合物”的韓國專利No.10-1127190用于提供一種含有去角質(zhì)和皮膚再生用醫(yī)用草本去皮粉末的化妝品組合物，其提高了抗刺激性和功效、效果和使用性。其公開了一種含有醫(yī)用草本去皮粉末的化妝品組合物，其向作為商品銷售的9種醫(yī)用草本粉的混合物的草本粉中分別以一定比例加入并配合黃原膠、親水性保濕劑、皮膚再生/功能性成分或天然抗炎性成分、天然草本油而成，從而使用方便，沒有皮膚刺激性，能夠在對(duì)皮膚安全的情況下有效去除角質(zhì)，且由皮膚再生引起的皺紋改善、皮膚彈性和美白效果優(yōu)異。

此外，名稱為“具有DDS機(jī)制的含有草本去皮粉末的化妝品組合物”的國際公開No.WO2010/093065A1用于提供一種具有DDS機(jī)制的含有去角質(zhì)和皮膚再生用草本去皮粉末的化妝品組合物，其提高了抗刺激性和功效、效果和使用性。其公開了一種具有DDS機(jī)制的含有草本去皮粉末的化妝品組合物，其向作為商品銷售的9種醫(yī)用草本粉的混合物的草本粉中分別以一定比例加入并配合黃原膠、親水性保濕劑、皮膚再生/功能性成分或天然抗炎性成分、天然草本油而成，從而使用方便，沒有皮膚刺激性，能夠在對(duì)皮膚安全的情況下有效去除角質(zhì)，且由皮膚再生引起的皺紋改善、皮膚彈性和美白效果優(yōu)異。

根據(jù)專利No.10-1127190，化妝品組合物中的草本粉的針狀結(jié)構(gòu)粉末成分通過常規(guī)的DDS(藥物遞送系統(tǒng)(Drug Delivery System))機(jī)制使功能性成分直接對(duì)皮膚起作用。該化妝品組合物具有有效提供治療粉刺、皮膚彈性、額外的皮膚護(hù)理功能如妊娠紋等的優(yōu)點(diǎn)，這是因?yàn)獒t(yī)用草本去皮粉末中的從淡水海綿提取的針狀結(jié)構(gòu)成分的多孔性表面上的納米化的功能性成分或天然抗炎性成分通過超聲波工序被吸收，針狀結(jié)構(gòu)物通過按摩注入皮膚，從而使功能性成分或天然抗炎性成分通過滲透壓排放到皮膚中，并直接作用于真皮。根據(jù)國際公開No.WO2010/093065 A1，化妝品組合物中的草本粉的針狀結(jié)構(gòu)粉末成分通過新概念DDS(藥物遞送系統(tǒng))機(jī)制使功能性成分直接對(duì)皮膚起作用。該化妝品組合物具有有效提供治療粉刺、皮膚彈性、額外的皮膚護(hù)理功能如妊娠紋等的優(yōu)點(diǎn)，這是因?yàn)獒t(yī)用草本去皮粉末中的從淡水海綿提取的針狀結(jié)構(gòu)成分的多孔性表面上的納米化的功能性成分或天然抗炎性成分通過超聲波工序被吸收，針狀結(jié)構(gòu)物通過按摩注入皮膚，從而使功能性成分或天然抗炎性成分通過滲透壓排放到皮膚中，并直接作用于真皮。

在提到的現(xiàn)有技術(shù)中，應(yīng)當(dāng)以充分確保草本粉的孔隙率為前提。然而，存在難以確保充分的孔隙率的問題，因?yàn)樵趯?shí)際草本粉(海綿)中，有機(jī)物、無機(jī)物、其它雜質(zhì)混在一起。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

技術(shù)問題

本發(fā)明是為了技術(shù)上補(bǔ)充現(xiàn)有技術(shù)中作為問題而指出的草本粉的孔隙率確保而提出的。換句話，目前用于從得自海綿的天然生物海綿中精制骨針的技術(shù)除了含有目標(biāo)物質(zhì)(例如，骨針)之外還含有大量各種雜質(zhì)。因此，其有可能對(duì)人體有害，并且這些雜質(zhì)堵塞得自海綿的天然生物海綿的骨針的多孔表面，從而影響擔(dān)載有效物質(zhì)。該結(jié)果，成為功效檢測(cè)中的變量而難以確立確定對(duì)人體安全用量的標(biāo)準(zhǔn)。

因此，本發(fā)明目的在于，提供一種提取雜質(zhì)被去除的骨針的方法，以確保用于提高功效物質(zhì)的傳遞率的孔隙率且使副作用最小化(骨針)。

技術(shù)方案

本發(fā)明的從得自海綿的天然生物海綿中精制和提取骨針的方法包括：

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿中加入0.5N的氫氧化鈉(NaOH)溶液，進(jìn)行超聲波工序，接著攪拌后離心分離，將溶解于0.5N的氫氧化鈉(NaOH)溶液中的雜質(zhì)和不溶性高密度雜質(zhì)去除(第一步驟)；

向第一步驟中雜質(zhì)幾乎被去除的骨針層中加入精制水作為洗滌水，將可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液稀釋而分離(第二步驟)；

向第二步驟中得到的骨針層中加入抗壞血酸溶液作為反應(yīng)劑，在維持pH為3.0～8.0的情況下將抗壞血酸與氫氧化鈉的反應(yīng)溶液完全分離(第三步驟)；

向第三步驟中去除了氫氧化鈉(NaOH)的骨針層中再次加入精制水，從而將過量加入的抗壞血酸溶液去除(第四步驟)；及

將最大限度地去除了反應(yīng)的氫氧化鈉(NaOH)、生成的抗壞血酸鈉和過剩的抗壞血酸的骨針進(jìn)行熱風(fēng)干燥而提取干燥的骨針(第五步驟)。

有益效果

根據(jù)本發(fā)明的從得自海綿的天然生物海綿中精制和提取骨針的方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比，能夠確保用于提高功效物質(zhì)的傳遞率的孔隙率，且能夠提取雜質(zhì)被去除從而使副作用最小化的骨針。

附圖說明

圖1和圖2是在提取作為骨針的原料的淡水海綿之前拍攝的照片。

圖3a是對(duì)本發(fā)明的第一步驟工序中使用的干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿拍攝的顯微照片，圖3b是對(duì)深褐色粉末拍攝的照片。

圖4是本發(fā)明的第一步驟工序后對(duì)得到的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

圖5是進(jìn)行第二步驟工序后對(duì)得到的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

圖6是進(jìn)行第三步驟工序后對(duì)未剩下氫氧化鈉(NaOH)的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

圖7是進(jìn)行第四步驟工序后對(duì)最大限度地去除了反應(yīng)的氫氧化鈉(NaOH)、生成的抗壞血酸鈉和過剩的抗壞血酸的骨針層拍攝的顯微照片。

圖8是進(jìn)行第一步驟至第四步驟后對(duì)熱風(fēng)干燥的干燥的骨針通過顯微鏡拍攝的照片。

圖9是對(duì)圖8的粉末形態(tài)拍攝的照片。

圖10是對(duì)圖8的截面拍攝的照片。

具體實(shí)施方式

天然生物海綿是原生海綿的晶體；淡水海綿(湖針海綿(songilla lacustris))，其是一種生活在一級(jí)水中的海綿體；淡水。最古老的棲息地是俄羅斯的伏爾加河。最近，在澳大利亞、中國、朝鮮等地觀察到了它。因此，報(bào)導(dǎo)其在一定程度上生活在亞洲、歐洲和澳洲的一級(jí)淡水中。

通過干燥海綿體提取的骨針是粉末型的，且為二氧化硅成為的天然無機(jī)物。提取的骨針的形態(tài)為40～200μm的針狀結(jié)構(gòu)。在提取過程中，有機(jī)物和無機(jī)物包含在了針狀形態(tài)中。已知由于本身是天然采集的物質(zhì)，因此完全精制的骨針在各工藝后是無副作用的材料。然而，未經(jīng)精制的骨針因具有雜質(zhì)(例如，無機(jī)物和有機(jī)物)，如果使用未經(jīng)精制狀態(tài)的骨針，則會(huì)出現(xiàn)副作用如皮疹、炎癥等。

根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例從得自海綿的天然生物海綿中精制和提取骨針的方法由以下步驟構(gòu)成。

第一步驟：向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿中加入0.5N的氫氧化鈉(NaOH)溶液，進(jìn)行超聲波工序，接著攪拌后離心分離，將溶解于0.5N的氫氧化鈉(NaOH)溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)去除的工序。

干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿(參見圖3a)因含有大量有機(jī)物和無機(jī)物而可能對(duì)皮膚有害。通過使用強(qiáng)堿性物質(zhì)氫氧化鈉(NaOH)使有機(jī)物和無機(jī)物溶解，并通過降低分子量分離它們，可以容易地分離出溶解性相當(dāng)?shù)偷墓轻?二氧化硅成分)。具體地，0.5N的氫氧化鈉(NaOH)溶液可以通過對(duì)+1價(jià)、+2價(jià)、+3價(jià)、+4價(jià)無機(jī)離子起反應(yīng)而結(jié)合成小顆粒形狀，并容易使雜質(zhì)與在強(qiáng)堿性溶液中溶解性相當(dāng)?shù)偷墓轻?二氧化硅成分)分離開。然后，如果進(jìn)行超聲波工序，則去除率增加。

離心分離工序使尺寸相對(duì)較大的二氧化硅塊(沙子成分；石英)與針狀結(jié)構(gòu)的骨針(二氧化硅成分)溶解于0.5N NaOH溶液而以水溶液狀態(tài)存在的層分離開。由此，骨針(二氧化硅成分)可以通過分離上下層得到(參見圖4)。

附圖4是進(jìn)行第一步驟的工序后對(duì)得到的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

在第一步驟中，氫氧化鈉(NaOH)的濃度優(yōu)選為0.5N～6N。然而，該溶液的濃度可以根據(jù)草本粉的清潔度來確定。必要時(shí)，可以通過顯微鏡確認(rèn)孔隙率確保狀態(tài)后確定是否要進(jìn)行下個(gè)步驟。

在第一步驟中，離心分離工序優(yōu)選根據(jù)容器的體積和精制試樣的量以50rpm～1000rpm進(jìn)行。

第二步驟：向雜質(zhì)幾乎被去除的骨針層中加入精制水作為洗滌水，將可溶性雜質(zhì)與氫氧化鈉溶液稀釋而分離的工序。

換言之，在第一步驟中，在分離的骨針層(二氧化硅成分)中仍存在與氫氧化鈉(NaOH)結(jié)合的、為較小顆粒的成分，可以通過精制水洗滌它。通過該工序，雜質(zhì)被最大限度去除，且氫氧化鈉(NaOH)被最大限度地稀釋，并以極少量存在于骨針層中(參見圖5)。

附圖5是進(jìn)行第二步驟工序后對(duì)得到的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

第三步驟：向第二步驟中得到的骨針層中加入抗壞血酸溶液作為反應(yīng)劑，在維持pH為3.0～8.0的情況下將抗壞血酸與氫氧化鈉的反應(yīng)溶液完全分離的工序。

在本發(fā)明的第三步驟中，所加入的抗壞血酸溶液的濃度優(yōu)選為2％～5％。一邊攪拌一邊向骨針中加入抗壞血酸溶液為佳。此時(shí)，可以連續(xù)測(cè)量pH，并且優(yōu)選將pH恒定地維持在3.0～8.0的范圍內(nèi)。優(yōu)選當(dāng)進(jìn)行至pH值為8以下時(shí)，暫時(shí)中止操作，只進(jìn)行攪拌，并在一定時(shí)間后再次測(cè)量pH；如果該值維持在8.5以下，則停止操作；如果該值高于8.0，則重復(fù)上述過程。

通過這樣的操作，首先，通過抗壞血酸與氫氧化鈉完全反應(yīng)，生成抗壞血酸鈉與水(H₂O)，或者，其次，在完全反應(yīng)后通過過量加入抗壞血酸使得剩下抗壞血酸鹽、水(H₂O)和過剩的抗壞血酸。

然而，這些物質(zhì)均用于在第三步驟中將氫氧化鈉(NaOH)完全去除(參見圖6)。

附圖6是進(jìn)行第三步驟工序后對(duì)未剩下氫氧化鈉(NaOH)的骨針(二氧化硅成分)拍攝的顯微照片。

第4步驟：向第三步驟中去除了氫氧化鈉(NaOH)的骨針層中再次加入精制水，從而將過量加入的抗壞血酸溶液去除的工序。

換言之，第4步驟是再次用精制水洗滌氫氧化鈉(NaOH)被去除而剩下抗壞血酸和抗壞血酸鈉的溶液的過程。其為最大限度地去除反應(yīng)的氫氧化鈉(NaOH)、生成的抗壞血酸鈉和過剩的抗壞血酸的步驟(參見圖7)。

附圖7是進(jìn)行第四步驟工序后對(duì)最大限度地去除了反應(yīng)的氫氧化鈉(NaOH)、生成的抗壞血酸鈉和過剩的抗壞血酸的骨針層拍攝的顯微照片。

在第四步驟中，洗滌的精制水的pH范圍優(yōu)選為5.0～7.0。

第五步驟：將最大限度地去除了反應(yīng)的氫氧化鈉(NaOH)、生成的抗壞血酸鈉和過剩的抗壞血酸的骨針通過熱風(fēng)干燥而提取干燥的骨針的工序。

在進(jìn)行第四步驟后，只剩下骨針和精制水。骨針在水溶液狀態(tài)時(shí)容易被微生物污染，因此它們應(yīng)以水分被去除的粉末形式存在，以便長期儲(chǔ)存(參見圖8)。為此，進(jìn)行熱風(fēng)干燥，并優(yōu)選溫度在30℃以下進(jìn)行。

如果干燥溫度升高，則會(huì)出現(xiàn)細(xì)石英骨針粉碎或破裂的情況。優(yōu)選在完全干燥后在自然溫度下存儲(chǔ)原料。

附圖8是對(duì)通過本發(fā)明的精制工序利用熱風(fēng)干燥提取到的骨針拍攝的照片。

在本發(fā)明的從得自海綿的天然生物海綿中精制和提取骨針的方法中，可選擇性地使用氫氧化鉀、硫化鈉和硫化鉀代替所使用的氫氧化鈉(NaOH)，并且可選擇性地使用鹽酸、硫酸、草酸、檸檬酸和乳酸代替所使用的抗壞血酸。

下文中，將用實(shí)施例詳細(xì)地說明本發(fā)明。僅出于舉例說明本發(fā)明的目的給出以下實(shí)施例，這些實(shí)施例并不意圖限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿100g中加入500ml 0.5N的氫氧化鈉溶液，進(jìn)行超聲波工序。接著，在攪拌后通過離心分離去除溶解于0.5N的氫氧化鈉溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)。用500ml純的精制水去除在雜質(zhì)去除工序中剩下的可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液。隨后，通過化學(xué)反應(yīng)用500ml 2％的L-抗壞血酸溶液在維持pH為8的情況下去除對(duì)人體有害的少量氫氧化鈉，并用500ml純的精制水去除過量加入的L-抗壞血酸后，提取通過熱風(fēng)去除精制水后的骨針粉末(參見圖9)。

圖7是用顯微鏡拍攝圖9的照片?？芍ㄟ^最大限度地去除雜質(zhì)確保了孔隙率，且內(nèi)部存在孔。然而，圖3a和圖3b示出了深褐色粉末，且精制前的顯微照片表明因雜質(zhì)難以實(shí)現(xiàn)孔隙率確保。

實(shí)施例1中提取的骨針粉末具有如圖9中的白色，而且由于在使用它制造化妝品組合物時(shí)可制得白色乳霜和透明凝膠，因此不會(huì)引起反感，并表現(xiàn)出如同常見乳霜一樣柔和地施用的特征。此外，比現(xiàn)有乳霜的刺激性小，且沒有帶來發(fā)紅。

比較例1

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿100g中添加500ml 0.1N的氫氧化鈉溶液，進(jìn)行超聲波工序。接著，在攪拌后通過離心分離去除溶解于0.1N的氫氧化鈉溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)。用500ml純的精制水去除在雜質(zhì)去除工序中剩下的可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液。

在比較例1中，因?yàn)?.1N的氫氧化鈉與陽離子成分的反應(yīng)能力低，因此在第1輪中沒有得到純凈的精制粉。

比較例2

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿100g中加入500ml 0.3N的氫氧化鈉溶液，進(jìn)行超聲波工序。接著，在攪拌后通過離心分離去除溶解于0.3N的氫氧化鈉溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)。用500ml純的精制水去除在雜質(zhì)去除工序中剩下的可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液。

在比較例2中，因?yàn)?.3N的氫氧化鈉與陽離子成分的反應(yīng)能力低，因此沒有得到純凈的精制粉，。

比較例3

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿100g中加入500ml 0.5N的氫氧化鈉溶液，進(jìn)行超聲波工序。接著，在攪拌后通過離心分離去除溶解于0.5N的氫氧化鈉溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)。用500ml純的精制水去除在雜質(zhì)去除工序中剩下的可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液。隨后，通過化學(xué)反應(yīng)用500ml 0.5％的L-抗壞血酸溶液去除對(duì)人體有害的少量氫氧化鈉。

在比較例3中，因?yàn)?.5N的氫氧化鈉與陽離子成分的反應(yīng)能力良好，顯微鏡觀察顆粒后進(jìn)行了下一步驟。然而，對(duì)于使用0.5％的L-抗壞血酸溶液，沒有得到8.0以下的pH值。

比較例4

向干燥狀態(tài)的得自海綿的天然生物海綿100g中加入500ml 0.4N的氫氧化鈉溶液，進(jìn)行超聲波工序。接著，在攪拌后通過離心分離去除溶解于0.4N的氫氧化鈉溶液中的雜質(zhì)和因具有高密度而比骨針下沉更快的雜質(zhì)。用500ml的純的精制水去除在雜質(zhì)去除工序中剩下的可溶性雜質(zhì)和氫氧化鈉溶液。隨后，通過化學(xué)反應(yīng)用500ml 1％的L-抗壞血酸溶液去除對(duì)人體有害的少量氫氧化鈉。

在比較例3中，因?yàn)?.4N的氫氧化鈉與陽離子成分的反應(yīng)性良好，顯微鏡觀察顆粒后進(jìn)行了下一步驟。然而，對(duì)于使用1％的L-抗壞血酸溶液，沒有得到8.0以下的pH值。