一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌hs11bd1菌株及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌HS11BD1(Bacillus subtilis HS11BD1)菌株，該菌株的基因序列如SEQ ID NO.1所示。該菌株具有高分泌枯草菌素的優(yōu)點，能夠應(yīng)用于制備抗大腸桿菌的藥物中。同時，將該菌株作為助劑添加進家禽家畜飼料中，能夠顯著提高家禽家畜生長速度，降低腹瀉率，對于蛋雞、肉雞以及仔豬和肥育豬的效果尤其明顯。本發(fā)明提供的高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌HS11BD1(Bacillus subtilis HS11BD1)菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址為：湖北省武漢市武昌區(qū)武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCC NO：M2014637。CCTCC NO：M201463720141207
【專利說明】一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌HS11BD1菌株及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種枯草芽孢桿菌菌株，具體涉及一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌 HS11BD1菌株，以及該菌株的用途，屬于微生物應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)代規(guī)?；图s化養(yǎng)殖方式的迅速發(fā)展，導(dǎo)致飼養(yǎng)密度過大、養(yǎng)殖環(huán)境質(zhì)量下 降等多種問題的出現(xiàn)，破壞了動物胃腸道正常菌群的微生態(tài)平衡，使條件性致病菌大量增 殖，降低動物對病菌的抵抗力，易引起動物各種消化道疾病。為達到防治動物疾病、促進動 物生長的目的，目前主要采用改善飼養(yǎng)管理和在飼料中添加抗生素的方法，但大量抗生素 廣泛應(yīng)用于動物生產(chǎn)中，也帶來了菌株的藥物耐藥性增強、藥物殘留增加、動物易感性增 力口、免疫力下降等各種不良后果，甚至?xí)?dǎo)致人畜共患的、具有超強耐藥性的超級細菌出 現(xiàn)，這種狀況引起了科研工作者和廣大消費者的高度關(guān)注。
[0003] 隨著益生菌微生態(tài)制劑技術(shù)的不斷開發(fā)和積累，其具有的安全性、無毒性、無殘留 性以及有利于生態(tài)環(huán)境的可持續(xù)發(fā)展等的特點，使其成為抗生素替代品的首選。微生態(tài)制 劑可分泌多種物質(zhì)，抑制病原菌的生長，改善動物免疫力。而芽孢桿菌更是應(yīng)用于微生態(tài)制 劑最為廣泛的一個菌株。在惡劣環(huán)境下，芽孢桿菌以孢子的形式存活，在飼料顆粒和胃酸環(huán) 境中仍有較強的活性，可產(chǎn)生多種抗菌素和多種酶類，在改善動物生產(chǎn)性能、維持動物胃腸 道微生態(tài)平衡、提高飼料利用率等方面有很好的作用。
[0004] 自然界中，不同的芽孢桿菌菌株在益生性能上存在較大的不同，某些抗菌素的分 泌狀況也存在較大的差異，特別是對枯草菌素高分泌的菌株應(yīng)用尚未見報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌HS11BD1 (Bacillus subtilis HS11BD1)菌株，該菌株的的保藏編號為：CCTCC N0:M2014637,該菌株的基因序列如SEQ ID NO. 1所示。
[0006] 該菌株具有高分泌枯草菌素的優(yōu)點，能夠應(yīng)用于制備抗大腸桿菌的藥物中。
[0007] 同時，將該菌株作為助劑添加進家禽家畜飼料中，能夠顯著提高家禽家畜生長速 度，降低腹瀉率，對于蛋雞、肉雞以及仔豬和肥育豬的效果尤其明顯。
[0008] 本發(fā)明提供的高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽孢桿菌HS11BD1 (Bacillus subtilis HS11BD1)菌株于2014年12月7日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址為：湖北省武漢 市武昌區(qū)武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCC NO :M2014637。

【具體實施方式】
[0009] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做詳細具體的說明，但是本發(fā)明的保護范圍并不局 限于以下實施例。
[0010] 實施例1菌株的篩選、鑒定及檢測
[0011] HSlIBDl菌株的篩選
[0012] 制備土壤稀釋液：從黃石天坑采取的土壤樣品稱取10g，放入150ml的無菌水中， 搖床150r/min震蕩50min，置于50°C的水浴鍋中30min，取出靜置到溶液澄清。無菌操作吸 取上清液Iml與9ml的無菌水，用無菌水稀釋為ΚΓ 1、ΚΓ2、10' ΚΓ4、ΚΓ5、10' 10' ΚΓ8、KT9 共九個濃度梯度。
[0013] 培養(yǎng)：每個稀釋濃度按5%的接種量接入到滅菌過后冷卻至55°C左右的NA培養(yǎng) 基中（牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂粉20.0g，蒸餾水1000ml，pH7.0)，置于 30°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。
[0014] 篩選單菌落：待培養(yǎng)皿中長出菌落后，根據(jù)枯草芽孢桿菌的形態(tài)挑取單個菌落接 種于NA培養(yǎng)皿中，30°C培養(yǎng)36?48h。
[0015] 菌株純化：采用平板劃線分離純化方法，至平板上檢測為單一菌株，并命名為 HS11BD1。
[0016] 菌株保藏：純化的HSlIBDl菌株保存于_20°C的低溫冰箱中。
[0017] 菌株的鑒定
[0018] 1、形態(tài)觀察：將HS11BD1菌株接種于NA培養(yǎng)基中培養(yǎng)適當時間后做革蘭氏染色鏡 檢觀察。
[0019] 2、染色鏡檢結(jié)果：HS11BD1菌株為桿狀細菌，革蘭氏染色為陽性G+，鞭毛側(cè)生，有 芽孢，芽孢橢圓形，中生，芽孢囊不明顯膨脹。
[0020] 表I HSlIBDl菌株形態(tài)學(xué)特征
[0021]

【權(quán)利要求】
1. 一種高產(chǎn)枯草菌素的枯草芽抱桿菌HS11BD1 (Bacillus subtilis HS11BD1)菌株，該 菌株的的保藏編號為：CCTCC NO :M2014637,該菌株的基因序列如SEQ ID NO. 1所示。
2. 權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌HS11BD1菌株在制備抗大腸桿菌的藥物中的應(yīng)用。
3. 權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌HS11BD1菌株在家禽家畜飼料中的應(yīng)用。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于：所述的家禽飼料為蛋雞和肉雞飼料。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于：所述的家畜飼料為仔豬和肥育豬飼料。
【文檔編號】A61K35/742GK104480047SQ201410799351
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月20日
【發(fā)明者】孫國平, 吳正榮, 劉俊, 陳義杰, 范博文 申請人:湖北博大高科生物技術(shù)有限公司