茶黃素的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種茶黃素的制備方法，包括以下步驟：1)將茶葉粉碎，按料液比為1:5～10的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為1.5～2mol/L，再加入鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2～2.5，在溫度28～29℃、供氧13.0～15.0ml/min的條件下發(fā)酵55～60min，得到發(fā)酵液；2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，分別用10～30v％乙醇和70～85v％乙醇洗脫，收集70～85v％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。本方法制得的茶黃素純度大，且茶黃素中茶黃素-3，3’-沒食子酸酯含量高，藥理功效好。
【專利說明】茶黃素的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種茶黃素的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]茶黃素(TFs)是多酚類物質(zhì)氧化聚合形成的一類具有苯并卓酚酮結(jié)構(gòu)的植物酚性色素的總稱，主要由茶黃素(TF)、茶黃素-3-沒食子酸酯(TF-3-G)、茶黃素-3’ -沒食子酸酯(TF-3’ -G)以及茶黃素_3，3’ -沒食子酸酯(TFDG)組成。茶黃素(TFs)具有多種與人體健康有關(guān)的潛在功能，如抗氧化、防治心血管疾病、降血脂、抗癌防癌等功效，而以TFDG的藥理功效最高，TF-3-G、TF-3’ -G功效次之，而TF功效最弱。目前，現(xiàn)有的茶黃素的制備方法包括溶劑提取法、體外酶促氧化法和體外化學(xué)氧化法，溶劑提取法需要耗費(fèi)大量的有機(jī)溶劑，且提取效率極低，十分不經(jīng)濟(jì)，體外酶促氧化法則存在多酚氧化酶容易失活且不易重復(fù)利用的難題，而體外化學(xué)氧化法缺乏底物專一性，副產(chǎn)品復(fù)雜，產(chǎn)品純度不高。不僅如此，以上三種制備方法共同的缺點(diǎn)就是提取得到的茶黃素一般以非酯型茶黃素為主(TF)，酯型茶黃素含量次之，雙酯型茶黃素(TFDG)最低，一定程度上降低了茶黃素的藥理功效。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種茶黃素的制備方法，該方法能顯著提高茶黃素中茶黃素_3，3’ -沒食子酸酯的含量。
[0004]本發(fā)明提供的技術(shù)方案是提供茶黃素的制備方法，包括以下步驟:
[0005]I)將茶葉粉碎，按料液比為1: 5?10的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為1.5?2mol/L，再加入鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2?2.5，在溫度28?29°C、供氧13.0?15.0ml/min的條件下發(fā)酵55?60min,得到發(fā)酵液；
[0006]2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，分別用10?30v%乙醇和70?85v%乙醇洗脫，收集70?85v%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。
[0007]作為優(yōu)選，上述步驟I)中，所述溫度為28.8V。
[0008]作為優(yōu)選，上述步驟I)中，調(diào)節(jié)pH值至2.4。
[0009]作為優(yōu)選，上述步驟I)中，供氧為14.2ml/min。
[0010]作為優(yōu)選，上述步驟I)中，步驟I)中，鹽酸溶液濃度為I?2mol/L。
[0011]作為優(yōu)選，上述步驟2)中，采用I?2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)濾液pH值。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在強(qiáng)酸性條件下對茶葉進(jìn)行體外酸性發(fā)酵，茶葉中的兒茶素可大量轉(zhuǎn)化為雙酯型茶黃素，大大提高茶黃素_3，3’ -沒食子酸酯的含量，從而提高了茶黃素的藥理功效，更富經(jīng)濟(jì)價值。

【具體實(shí)施方式】
[0013]以下具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不作為對本發(fā)明的限定。
[0014]實(shí)施例1
[0015]I)將茶葉粉碎，按料液比為1:5的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為1.5mol/L，再加入lmol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2，在溫度28°C、供氧13.0ml/min的條件下發(fā)酵55min,得到發(fā)酵液；
[0016]2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，上樣流速為0.5BV/h，分別用10v%乙醇和70v%乙醇洗脫，10v%乙醇的洗脫流速為2.5BV/h，洗脫量為5BV ;70V%乙醇洗脫流速為2BV/h，洗脫量為4BV ;收集70v%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。經(jīng)檢測，茶黃素的純度為為56.2%，其中TFDG的含量為35.4%。
[0017]實(shí)施例2
[0018]I)將茶葉粉碎，按料液比為1:10的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為2mol/L，再加入2mol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.5，在溫度29°C、供氧15.0ml/min的條件下發(fā)酵60min,得到發(fā)酵液；
[0019]2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，上樣流速為0.5BV/h，分別用30v%乙醇和85v%乙醇洗脫，30v%乙醇的洗脫流速為2.5BV/h，洗脫量為5BV ;85V%乙醇洗脫流速為2BV/h，洗脫量為4BV ;收集85v%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。經(jīng)檢測，茶黃素的純度為為53.9%，其中TFDG的含量為33.7%。
[0020]實(shí)施例3
[0021]I)將茶葉粉碎，按料液比為1:5的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為2mol/L，再加入lmol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.5，在溫度28°C、供氧15.0ml/min的條件下發(fā)酵55min,得到發(fā)酵液；
[0022]2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，上樣流速為0.5BV/h，分別用30v%乙醇和70v%乙醇洗脫，30v%乙醇的洗脫流速為2.5BV/h，洗脫量為5BV ;70V%乙醇洗脫流速為2BV/h，洗脫量為4BV ;收集70v%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。經(jīng)檢測，茶黃素的純度為為55.8%，其中TFDG的含量為34.8%。
[0023]實(shí)施例4
[0024]I)將茶葉粉碎，按料液比為1:8的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為1.8mol/L，再加入lmol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.4，在溫度28.8°C、供氧14.2ml/min的條件下發(fā)酵58min,得到發(fā)酵液；
[0025]2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，上樣流速為0.5BV/h，分別用20v%乙醇和75v%乙醇洗脫，20v%乙醇的洗脫流速為2.5BV/h，洗脫量為5BV ;75V%乙醇洗脫流速為2BV/h，洗脫量為4BV ;收集75v%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。經(jīng)檢測，茶黃素的純度為為55.2%，其中TFDG的含量為40.5%。
【權(quán)利要求】
1.茶黃素的制備方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將茶葉粉碎，按料液比為1:5?10的比例加水混合，裝入發(fā)酵罐中，加入氯化鐵溶液至濃度為1.5?2mol/L，再加入鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2?2.5，在溫度28?29°C、供氧13.0?15.0ml/min的條件下發(fā)酵55?60min,得到發(fā)酵液； 2)將發(fā)酵液離心、過濾，取濾液調(diào)pH值至中性，上AB-8大孔樹脂柱層析，分別用10?30ν%乙醇和70?85ν%乙醇洗脫，收集70?85ν%乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到茶黃素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶黃素的制備方法，其特征在于:步驟I)中，所述溫度為28.8。。。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶黃素的制備方法，其特征在于:步驟I)中，調(diào)節(jié)pH值至2.4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶黃素的制備方法，其特征在于:步驟I)中，供氧為14.2ml/mir1
5.根據(jù)權(quán)利要求1?4中任一項所述的茶黃素的制備方法，其特征在于:步驟I)中，鹽酸溶液濃度為I?2mol/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶黃素的制備方法，其特征在于:步驟2)中，采用I?2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)濾液pH值。
【文檔編號】A61K36/82GK104383125SQ201410715179
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月28日
【發(fā)明者】周冠旻 申請人:桂林市和胤祥新型材料有限公司