用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑，其原料藥包括大青葉、虎杖、竹葉蘭、馬尾連、牛筋草、沒藥、女貞子、桑螵蛸、北沙參、滇雞血藤、葛根、冬凌草、三加皮、孔雀草、土人參、白側(cè)耳和甘草。通過在飼料中添加這種藥物免疫飼料添加劑，喂食豬，從而提高豬的機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體的防御技能，從而抵抗豬瘟。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及飼料【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑。

【背景技術(shù)】
[0002] 我國養(yǎng)豬業(yè)正處在向商品化、規(guī)?；同F(xiàn)代化生產(chǎn)轉(zhuǎn)化的偉大變革時(shí)期，養(yǎng)豬生 產(chǎn)結(jié)構(gòu)的變化，使人們?cè)絹碓街匾曍i病的預(yù)防和控制。目前難以控制的豬病是豬瘟。如何 有效地控制豬瘟的發(fā)生，提高豬瘟防治率，是獸醫(yī)工作者的重要任務(wù)，也是養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重 要保證。
[0003] 治療病毒性疾病的主要困難，是由于大多數(shù)病毒性疾病在病毒廣泛繁殖才出現(xiàn)臨 床癥狀，使用抗病毒藥已沒有什么作用了。把抗病毒藥用作預(yù)防劑，可能對(duì)控制病毒性疾病 更為有效，但是普遍而持續(xù)地使用抗病毒藥來預(yù)防傳染性疾病，很可能出現(xiàn)藥變異毒株。采 取積極的綜合預(yù)防措施，消除不利因素，調(diào)動(dòng)積極因素，把疾病消滅在萌發(fā)之時(shí)，甚至在萌 發(fā)之前，才是防治的根本宗旨。
[0004] 豬體的免疫反應(yīng)是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過程，受諸多內(nèi)外因素的影響。近年來，在人 工接種免疫過程中，因應(yīng)激、免疫功能下降或免疫抑制等原因都可導(dǎo)致免疫效果下降，如 何提高豬體的免疫功能是當(dāng)今擺在研宄工作者面前的一個(gè)重要課題。中草藥可調(diào)整或提高 機(jī)體免疫功能，以增強(qiáng)機(jī)體的防御機(jī)能，提高機(jī)體的抗病能力。
[0005] 免疫增強(qiáng)劑是能帶來非特異性改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的特異性免疫應(yīng)答和發(fā)揮 輔助作用的一類物質(zhì)，也稱免疫調(diào)節(jié)劑。中藥可調(diào)整和明顯增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，使參與細(xì)胞 免疫的細(xì)胞數(shù)量增加、活性增強(qiáng)，使參與體液免疫的抗體增加。
[0006] 本發(fā)明就是在中獸醫(yī)免疫理論的基礎(chǔ)上，提出一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料 添加劑，通過在飼料中添加這種藥物免疫飼料添加劑，喂食豬，從而提高豬的機(jī)體免疫功 能，增強(qiáng)機(jī)體的防御技能，從而抵抗豬瘟。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑，通 過在飼料中添加這種藥物免疫飼料添加劑，喂食豬，從而提高豬的機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體 的防御技能，從而抵抗豬瘟。
[0008] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑， 其原料藥包括大青葉、虎杖、竹葉蘭、馬尾連、牛筋草、沒藥、女貞子、桑螵蛸、北沙參、滇雞血 藤、葛根、冬凌草、三加皮、孔雀草、土人參、白側(cè)耳和甘草。
[0009] 其中，所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉50g?60g、虎杖 35g?45g、竹葉蘭20g?30g、馬尾連25g?35g、牛筋草20g?30g、沒藥30g?40g、女貞 子30g?40g、桑螺銷20g?30g、北沙參25g?35g、滇雞血藤30g?40g、葛根20g?30g、 冬凌草20g?30g、三加皮25g?35g、孔雀草25g?35g、土人參35g?45g、白側(cè)耳20g? 30g和甘草25g?35g。
[0010] 其中，所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉53g?57g、虎杖 38g?42g、竹葉蘭23g?27g、馬尾連28g?32g、牛筋草23g?27g、沒藥33g?37g、女貞 子33g?37g、桑螵蛸23g?27g、北沙參28g?32g、滇雞血藤33g?37g、葛根23g?27g、 冬凌草23g?27g、三加皮28g?32g、孔雀草28g?32g、土人參38g?42g、白側(cè)耳23g? 27g和甘草28g?32g。
[0011] 其中，所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉55g、虎杖40g、 竹葉蘭25g、馬尾連30g、牛筋草25g、沒藥35g、女貞子35g、桑螵蛸25g、北沙參30g、滇雞血 藤35g、葛根25g、冬凌草25g、三加皮30g、孔雀草30g、土人參40g、白側(cè)耳25g和甘草30g。
[0012] 其中，所述藥物免疫飼料添加劑的制備方法具體為：將各原料藥組分按比例混合， 隨后加入相對(duì)于混合物質(zhì)量3?5倍的醇濃度為90%?95%乙醇溶液，加熱回流2?4小 時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量2?5倍的醇濃度為90%?95%乙 醇溶液，加熱回流1?2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合并，減壓濃縮除去乙醇，獲 得干膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目?300目，隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍 質(zhì)量的淀粉，攪拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑。
[0013] 本發(fā)明還提供了上述用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑的制備方法，具體為各 原料藥組分按比例混合，隨后加入相對(duì)于混合物質(zhì)量3?5倍的醇濃度為90%?95%乙醇 溶液，加熱回流2?4小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量2?5倍的 醇濃度為90%?95%乙醇溶液，加熱回流1?2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合 并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目?300目，隨后 加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑。
[0014] 本發(fā)明的有益效果：
[0015] 本發(fā)明提供一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑，通過在飼料中添加這種藥 物免疫飼料添加劑，喂食豬，從而提高豬的機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體的防御技能，從而抵抗 豬瘟。

【具體實(shí)施方式】
[0016] 本發(fā)明提供了一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑，其原料藥包括大青葉、 虎杖、竹葉蘭、馬尾連、牛筋草、沒藥、女貞子、桑螵蛸、北沙參、滇雞血藤、葛根、冬凌草、三加 皮、孔雀草、土人參、白側(cè)耳和甘草。
[0017] 進(jìn)一步，所述藥物免疫飼料添加劑僅由上述原料藥構(gòu)成。
[0018] 所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉50g?60g、虎杖35g? 45g、竹葉蘭20g?30g、馬尾連25g?35g、牛筋草20g?30g、沒藥30g?40g、女貞子30g? 40g、桑螺銷20g?30g、北沙參25g?35g、滇雞血藤30g?40g、葛根20g?30g、冬凌草 20g?30g、三加皮25g?35g、孔雀草25g?35g、土人參35g?45g、白側(cè)耳20g?30g和 甘草25g?35g。
[0019] 進(jìn)一步優(yōu)選，所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉53g? 57g、虎杖38g?42g、竹葉蘭23g?27g、馬尾連28g?32g、牛筋草23g?27g、沒藥33g? 37g、女貞子33g?37g、桑螵蛸23g?27g、北沙參28g?32g、滇雞血藤33g?37g、葛根 23g?27g、冬凌草23g?27g、三加皮28g?32g、孔雀草28g?32g、土人參38g?42g、白 側(cè)耳23g?27g和甘草28g?32g。
[0020] 最優(yōu)選，所述藥物免疫飼料添加劑中各原料藥的重量分別為大青葉55g、虎杖 4〇g、竹葉蘭25g、馬尾連30g、牛筋草25g、沒藥35g、女貞子35g、桑螵蛸25g、北沙參30g、滇 雞血藤35g、葛根25g、冬凌草25g、三加皮30g、孔雀草30g、土人參40g、白側(cè)耳25g和甘草 30g〇
[0021] 所述藥物免疫飼料添加劑為粉末狀，其制備方法具體為：將各原料藥組分按比例 混合，隨后加入相對(duì)于混合物質(zhì)量3?5倍的醇濃度為90%?95%乙醇溶液，加熱回流2? 4小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量2?5倍的醇濃度為90 %? 95%乙醇溶液，加熱回流1?2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合并，減壓濃縮除去 乙醇，獲得干膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目?300目，隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn) 物2倍質(zhì)量的淀粉，攪拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑。
[0022] 各原料藥藥理如下：
[0023] 大青葉：拉丁名IsatidisFolium，味苦、性大寒，歸心、肝、膽、胃經(jīng)，有清瘟解毒， 涼血化斑，退黃的功效，既能清氣分之實(shí)熱，又能解血分之熱毒，主要用于瘟病熱病所致之 高熱汗出，煩渴引飲；火毒熾盛之發(fā)斑發(fā)狂，吐血等癥狀；麻瘆之高熱神昏，瘆色紫暗；肝膽 濕熱蘊(yùn)蒸之黃疸；肝膽火升之耳聾耳鳴；火郁熱毒所致之咽痛、口舌生瘡、肝炎等證。
[0024] 虎杖：拉丁名PolygoniCuspidatiRhizomaetRadix，微苦，微寒。歸肝、膽、肺 經(jīng)，具有清熱解毒，利膽退黃，祛風(fēng)利濕，散瘀定痛，止咳化痰的功效，用于關(guān)節(jié)痹痛，濕熱黃 疸，經(jīng)閉，癥瘕，咳嗽痰多，水火燙傷，跌撲損傷，癰腫瘡毒等證。
[0025] 竹葉蘭：為鴨拓草科水竹葉屬植物紫背鹿銜草的根或全草，味甘、微苦，性平，具有 清肺止咳，補(bǔ)肺益腎，調(diào)經(jīng)止血的功效，主治肺熱咳嗽，氣虛喘咳，頭暈耳鳴，骨折，吐血。
[0026] 馬尾連：為毛莨科唐松草屬植物金絲馬尾連、昭通唐松草、高原唐松草、多葉唐松 草的根及根莖，味苦，性寒，歸心、肝、大腸經(jīng)，具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效，主治濕熱泄 瀉，痢疾，黃疸，感冒發(fā)熱，麻瘆，目赤腫痛等證。
[0027] 牛筋草：為禾本科蟋蟀草屬植物牛筋草的根或全草，味甘、淡，性涼，具有清熱解 毒，利濕，涼血散瘀的功效，主治傷暑發(fā)熱，小兒驚風(fēng)，乙腦，流腦，黃疸，淋證，小便不利，痢 疾，便血，蕁麻瘆，跌打損傷等證。
[0028] 沒藥：味苦，辛，性平，入肝、脾、心、腎經(jīng)，有活血止痛、消腫生肌的功效，主治胸腹 瘀痛、痛經(jīng)、經(jīng)閉、癥瘕、跌打損傷、癰腫瘡瘍、腸癰、目赤腫痛等證。
[0029] 女貞子：味甘、苦，微寒，入肝、腎經(jīng)，有強(qiáng)肝益腎，清熱明目的作用，主要用于治療 肝腎陰虧，頭目失養(yǎng)之頭昏耳鳴，陰虛內(nèi)熱等癥狀。女貞子能提升白細(xì)胞，增強(qiáng)免疫功能的 功效。
[0030] 桑螵蛸：拉丁名OothecaMantidis，咸甘，平，歸肝、腎、膀胱經(jīng)，具有補(bǔ)腎，固濕，止 遺的功效，主治腎陽不足的小兒遺尿、夜尿多、遺精早泄、陽瘺等證，既補(bǔ)益又收澀，為補(bǔ)腎 助陽、固精縮尿之良藥。凡腎虛陽衰、精氣失固所致的遺精滑精、遺尿、尿頻、陽瘺不育，皆可 選用，尤宜遺尿、尿頻。
[0031] 北沙參：性微寒，味甘、微苦，具有養(yǎng)陰清肺，益胃生津的功效，主治肺熱燥咳、勞嗽 痰血、熱病津傷口渴等證。
[0032] 滇雞血藤：拉丁名KadsuraeCaulis，味苦、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具有活血補(bǔ)血，調(diào) 經(jīng)止痛，舒筋通絡(luò)的功效，主治月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)，麻木癱瘓，風(fēng)濕痹痛，氣血虛弱等證。
[0033] 葛根：拉丁名PuerariaeThomsoniiRadix，味甘、辛，性涼，入脾、胃經(jīng)，有鼓舞胃 氣，清熱生津，解肌發(fā)表，生陽，滲瘆的作用，主要用于外感發(fā)熱，頭痛，項(xiàng)背強(qiáng)痛，熱病口渴， 消渴；脾虛泄瀉，清陽不升等證。
[0034] 冬凌草：味苦、甘，性微寒，歸肺、胃、肝經(jīng)，具有清熱解毒，活血止痛的功效，主治咽 喉腫痛、扁桃體炎、感冒頭痛、氣管炎、慢性肝炎、關(guān)節(jié)風(fēng)濕痛、蛇蟲咬傷等證。
[0035] 三加皮：味苦、辛，性涼，具有清熱解毒，祛風(fēng)利濕，活血舒筋的功效，主治感冒發(fā) 熱，咽痛，頭痛，咳嗽胸痛，泄瀉，痢疾，脅痛，黃疸，石淋，帶下，風(fēng)濕痹痛，腰腿酸痛，跌打損 傷等證。
[0036] 孔雀草：為菊科萬壽菊屬植物孔雀草的全草，味苦，性平，具有清熱利濕，止咳止痛 的功效，主治上呼吸道感染，痢疾，咳嗽，百日咳，牙痛，風(fēng)火眼痛，乳腺炎等證。
[0037] 土人參：拉丁名PedicularismuscicolaMaxim，味甘、微苦，具清熱解毒功效，對(duì) 氣虛乏力，脾虛泄瀉，肺燥咳嗽，神經(jīng)衰弱等有一定療效。大補(bǔ)元?dú)猓虬采?，?qiáng)心。治氣 血虛損，虛勞多汗，虛脫衰竭，血壓降低。
[0038] 白側(cè)耳：為虎耳草科梅花草屬植物突隔梅花草的全草或根，味甘，性寒，具有清熱 潤肺，解毒消腫的功效，主治肺結(jié)核，喉炎，腮腺炎，淋巴結(jié)炎，熱毒瘡腫，跌打損傷等證。
[0039] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防豬瘟的飼料，其原料包括玉米、小麥、豆柏、魚粉、石 粉、蔗糖、葡萄糖、磷酸二氫鈣、食鹽、蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、抗氧化劑、酸化劑、復(fù)合維生 素預(yù)混料、微量元素預(yù)混料、甲酸鈣和上述藥物免疫飼料添加劑。
[0040] 所述飼料中各原料的重量分別為玉米50kg?55kg、小麥15kg?20kg、豆柏 18kg?22kg、魚粉2kg?5kg、石粉0. 5kg?lkg、鹿糖Ikg?2kg、葡萄糖Ikg?2kg、磷酸 二氫1?CL5kg?lkg、食鹽0? 2kg?0? 5kg、蛋氨酸0?Ikg?0? 5kg、賴氨酸0?Ikg?0? 5kg、 蘇氨酸〇. 5kg?lkg、抗氧化劑0.Olkg?0. 02kg、酸化劑0. 2kg?0. 5kg、復(fù)合維生素預(yù)混 料0. 3kg?0. 6kg、微量元素預(yù)混料0. 2kg?0. 4kg、甲酸媽0.Ikg?0. 5kg和上述藥物免 疫飼料添加劑3kg?6kg。
[0041] 進(jìn)一步優(yōu)選，所述飼料中各原料的重量分別為玉米53kg、小麥18kg、豆柏20kg、 魚粉4kg、石粉0. 8kg、蔗糖I. 5kg、葡萄糖I. 5kg、磷酸二氫鈣0. 8kg、食鹽0. 4kg、蛋氨酸 0. 3kg、賴氨酸0. 3kg、蘇氨酸0. 8kg、抗氧化劑0. 015kg、酸化劑0. 4kg、復(fù)合維生素預(yù)混料 0. 5kg、微量元素預(yù)混料0. 3kg、甲酸媽0. 3kg和上述藥物免疫飼料添加劑5kg。
[0042] 進(jìn)一步，所述飼料僅由上述原料構(gòu)成。
[0043] 所述抗氧化劑為L-抗壞血酸、丁羥甲苯、丁羥甲氧苯、生育酚和乙氧基喹啉中的 一種或多種。
[0044] 所述酸化劑為檸檬酸、延胡索酸、乳酸、丙酸、蘋果酸、山梨酸、甲酸、乙酸、苯甲酸、 富馬酸和DL-羥基蛋氨酸鈣中的一種或多種。
[0045] 所述微量元素預(yù)混料可以為硫酸銅、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸鋅、氯化鈷、碘化鉀、 硫酸鎂中的一種或幾種混合，優(yōu)選為復(fù)合微量元素預(yù)混料，最優(yōu)選為青島友和飼料有限公 司生產(chǎn)的復(fù)合微量元素預(yù)混料M-P。
[0046] 所述維生素預(yù)混料可以為維生素A、維生素C、維生素D、維生素E、維生素B12、維生 素B2、維生素B6、葉酸、泛酸鈣中的幾種混合，優(yōu)選為復(fù)合維生素預(yù)混料，例如青島友和飼料 有限公司生產(chǎn)的復(fù)合維生素預(yù)混料SV14。
[0047] 本發(fā)明還提供了上述預(yù)防豬瘟飼料的制備方法，其包括：
[0048] 第一步，按照上述方法制備所述藥物免疫飼料添加劑；
[0049] 第二步，按重量百分比稱取玉米、小麥、豆柏、魚粉，混合均勻后，投入粉碎機(jī)進(jìn)行 粉碎，粉碎粒度為35-45目，然后在70-80°C下進(jìn)行第一次制粒，得到基礎(chǔ)顆粒料，糊化度達(dá) 到 95% ;
[0050] 第三步，按重量百分比稱取其他原料，將上述基礎(chǔ)顆粒料和其他原料混合均勻后 投入環(huán)模0 3.0的制粒機(jī)進(jìn)行第二次制粒，經(jīng)過冷卻、破碎、過20目篩。
[0051] 以下采用實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方式，借此對(duì)本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段 來解決技術(shù)問題，并達(dá)成技術(shù)效果的實(shí)現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。
[0052] 實(shí)施例1藥物免疫飼料添加劑1
[0053] 將大青葉55g、虎杖40g、竹葉蘭25g、馬尾連30g、牛筋草25g、沒藥35g、女貞子 35g、桑螵蛸25g、北沙參30g、滇雞血藤35g、葛根25g、冬凌草25g、三加皮30g、孔雀草30g、 土人參40g、白側(cè)耳25g和甘草30g混合，隨后加入2. 2kg的醇濃度為95 %乙醇溶液，加熱 回流3小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量4倍的醇濃度為95%乙醇 溶液，加熱回流2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干 膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目，隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪 拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑1。
[0054] 實(shí)施例2藥物免疫飼料添加劑2
[0055] 將大青葉53g、虎杖38g、竹葉蘭23g、馬尾連28g、牛筋草23g、沒藥33g、女貞子 33g、桑螵蛸23g、北沙參28g、滇雞血藤33g、葛根23g、冬凌草23g、三加皮28g、孔雀草28g、 土人參38g、白側(cè)耳23g和甘草28g混合，隨后加入2kg的醇濃度為95 %乙醇溶液，加熱回 流3小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量4倍的醇濃度為95%乙醇溶 液，加熱回流2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干膏 體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目，隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪拌 均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑2。
[0056] 實(shí)施例3藥物免疫飼料添加劑3
[0057] 將大青葉57g、虎杖42g、竹葉蘭27g、馬尾連32g、牛筋草27g、沒藥37g、女貞子 37g、桑螵蛸27g、北沙參32g、滇雞血藤37g、葛根27g、冬凌草27g、三加皮32g、孔雀草32g、 土人參42g、白側(cè)耳27g和甘草32g混合，隨后加入2. 2kg的醇濃度為95 %乙醇溶液，加熱 回流3小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量4倍的醇濃度為95%乙醇 溶液，加熱回流2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液合并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干 膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目，隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪 拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑3。
[0058] 實(shí)施例4毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0059] 實(shí)施例4急性毒性實(shí)驗(yàn)和長期毒性實(shí)驗(yàn)
[0060] 急性毒性實(shí)驗(yàn)
[0061] 通過小白鼠一次性灌胃給予本發(fā)明提供的藥物免疫飼料添加劑1，最大灌胃容量 0. 4ml/10g，劑量20g生藥/kg，連續(xù)觀察7天，未發(fā)現(xiàn)任何毒性反應(yīng)，因濃度和劑量無法增 加，故未能測(cè)出該藥的LD5tl。取上述小鼠40只，禁食不禁水12小時(shí)后，按體重隨機(jī)分為給藥 組和水對(duì)照組，每組20只，給藥組給含實(shí)施例1制備的中藥免疫制劑的生藥量2.Og/ml濃 度的藥液0. 4ml/10g，灌胃一天2次，使一日內(nèi)給藥劑量達(dá)合生藥量160.Og/kg，水對(duì)照組給 同等體積的水。各組動(dòng)物給藥后，每盒5只，正常飼養(yǎng)，密切觀察，均連續(xù)觀察七天，記錄可 能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)和死亡情況，給藥后，小鼠外觀毛色光亮，行為活動(dòng)正常，無異常病理性 神經(jīng)反射出現(xiàn)，七天中進(jìn)食良好，末見其它異常表現(xiàn)，體重變化與水對(duì)照組相比無明顯差異 且無一動(dòng)物死亡，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等主要臟器，無明顯的出血、組織變性、壞死等 大體病理改變。
[0062] 長期毒性實(shí)驗(yàn)
[0063] 實(shí)驗(yàn)共設(shè)2組：本發(fā)明藥物免疫飼料添加劑組（給藥量分別為67.Og生藥/kg)和 空白對(duì)照組，對(duì)9周齡大白鼠連續(xù)180天灌服，在給藥90天、180天及停藥30天后，分別處死 大鼠，檢查各組動(dòng)物血液學(xué)指標(biāo)[紅細(xì)胞（RBC)、平均紅細(xì)胞體積（MCV)、紅細(xì)胞比積（HCT)、 血小板（PLT)、平均血小板體積（MPV)、白細(xì)胞（WBC)、血紅蛋白（HGB)、平均紅細(xì)胞血紅蛋 白含量（MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC)、淋巴細(xì)胞百分率（LPR)、中性粒細(xì)胞百分 率（GPR)、中值細(xì)胞百分率（MPR)、紅細(xì)胞分布寬度（RDWR)、紅細(xì)胞分布寬度數(shù)（RDWA)、網(wǎng)織 紅細(xì)胞百分率（RET)、凝積血酶原時(shí)間（PT)];血液生化學(xué)指標(biāo)[谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)、總蛋白 (TP)、白蛋白（ALB)、總膽紅素（TBIL)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)、肌酸激酶（CK)、肌酐（CREA)、尿 素氮（BUN)、血糖（GLU)、總膽固醇（CHOL)、甘油三脂（TG)、谷氨酰胺氨基轉(zhuǎn)移酶（GGT)、堿性 磷酸酶（ALP)、血清鉀離子（K+)、血清鈉離子（Na+)、血清氯離子（CD]。對(duì)所有動(dòng)物心、肝、 脾、肺、腎、腦、子宮、卵巢、胸腺、腎上腺進(jìn)行肉眼觀察，并稱重計(jì)算臟器指數(shù)；同時(shí)對(duì)空白對(duì) 照組和中藥免疫制劑組動(dòng)物心、肝、脾、肺、腎、腦（大腦、小腦、腦干）、垂體、視神經(jīng)、坐骨神 經(jīng)、脊髓（頸段、胸段、腰段）、子宮、卵巢、乳腺、甲狀腺、胸腺、胰腺、腎上腺、唾液腺（頒下 腺）、食道、胃、十二指腸、回、結(jié)腸、膀胱、淋巴結(jié)（頒下淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)）、氣管、主動(dòng) 脈進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)檢查。
[0064] 結(jié)果顯示：各給藥組動(dòng)物在不同給藥周期，以上指標(biāo)與對(duì)照組比較，均無異常發(fā) 現(xiàn)，血液學(xué)和生化學(xué)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)。
[0065] 結(jié)果表明本發(fā)明藥物免疫飼料添加劑長期大劑量使用是安全的。
[0066] 實(shí)施例5飼料1
[0067] 稱取玉米53kg、小麥18kg、豆柏20kg、魚粉4kg，混合均勻后，投入粉碎機(jī)進(jìn)行粉 碎，粉碎粒度為40目，然后在75°C下進(jìn)行第一次制粒，得到基礎(chǔ)顆粒料，糊化度達(dá)到95%， 稱取石粉〇. 8kg、蔗糖I. 5kg、葡萄糖I. 5kg、磷酸二氫鈣0. 8kg、食鹽0. 4kg、蛋氨酸0. 3kg、 賴氨酸〇. 3kg、蘇氨酸0. 8kg、抗氧化劑乙氧基喹啉0. 015kg、酸化劑檸檬酸0. 4kg、青島友和 飼料有限公司生產(chǎn)的復(fù)合維生素預(yù)混料SV140. 5kg、青島友和飼料有限公司生產(chǎn)的復(fù)合微 量元素預(yù)混料M-PO. 3kg、甲酸媽0. 3kg和實(shí)施例1制備的藥物免疫飼料添加劑5kg，進(jìn)一步 加入上面制得的基礎(chǔ)顆粒料，混合均勻后投入環(huán)模C3.0的制粒機(jī)進(jìn)行第二次制粒，經(jīng)過 冷卻、破碎、過20目篩。
[0068] 比較例飼料2
[0069] 稱取玉米53kg、小麥18kg、豆柏20kg、魚粉4kg，混合均勻后，投入粉碎機(jī)進(jìn)行粉 碎，粉碎粒度為40目，然后在75°C下進(jìn)行第一次制粒，得到基礎(chǔ)顆粒料，糊化度達(dá)到95%， 稱取石粉0. 8kg、蔗糖I. 5kg、葡萄糖I. 5kg、磷酸二氫鈣0. 8kg、食鹽0. 4kg、蛋氨酸0. 3kg、 賴氨酸〇. 3kg、蘇氨酸0. 8kg、抗氧化劑乙氧基喹啉0. 015kg、酸化劑檸檬酸0. 4kg、青島友和 飼料有限公司生產(chǎn)的復(fù)合維生素預(yù)混料SV140. 5kg、青島友和飼料有限公司生產(chǎn)的復(fù)合微 量元素預(yù)混料M-PO. 3kg、甲酸鈣0. 3kg，進(jìn)一步加入上面制得的基礎(chǔ)顆粒料，混合均勻后投 入環(huán)模0 3.0的制粒機(jī)進(jìn)行第二次制粒，經(jīng)過冷卻、破碎、過20目篩。
[0070] 免疫效果比較
[0071] 毒株：豬瘟兔化弱毒苗，批號(hào)13. 07. 23,齊魯動(dòng)物藥品廠生產(chǎn)，豬瘟病毒石門株， 青島易邦生物工程公司研發(fā)中心實(shí)驗(yàn)室提供。
[0072] 豬瘟正向間接血凝診斷液（包括陰性、陽性血清和稀釋液）：購自青島農(nóng)業(yè)大學(xué)， 批號(hào)為20130516。
[0073] 喂食飼料：實(shí)施例5制備的飼料1和比較例1制備的飼料2。
[0074] 試驗(yàn)器材：96孔110°V型血凝板、50yL微量移液器、微型振蕩器。
[0075] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：20?30日齡的未進(jìn)行豬瘟疫苗免疫的健康長白豬520頭，雌雄各半，。
[0076] 試驗(yàn)分組
[0077] 將520頭試驗(yàn)豬隨機(jī)分為3組，第一組和第二組各250頭，第三組20頭，第一組和 第二組接種豬瘟兔化弱毒苗疫苗，第一組喂食比較例1制備的飼料2,第二組喂食實(shí)施例5 制備的飼料1，兩組喂食飼料的時(shí)間均為接種疫苗之前7天開始喂食飼料，第三組為攻毒試 驗(yàn)對(duì)照組，喂食比較例1提供的飼料2。試驗(yàn)期間，各組其他飼養(yǎng)條件一致。
[0078] 采血樣：于疫苗接種前1天和疫苗接種后的第15天、第45天、第75天和第105 天，分別從第一組和第二組豬只耳靜脈采血5mL，用于血清抗體測(cè)定和T淋巴細(xì)胞檢測(cè)。
[0079] 抗體測(cè)定：用正向間接血凝試驗(yàn)（IHA)法測(cè)定血清抗體效價(jià)水平，操作方法和判 定標(biāo)準(zhǔn)按《豬瘟正向間接血凝診斷試劑使用說明書》進(jìn)行。
[0080] T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)：分別取第一組和第二組豬只血樣作成血涂片，應(yīng)用酸性a-醋 酸萘酯酶（ANAE)染色法，檢查血涂片中T淋巴細(xì)胞占淋巴細(xì)胞總數(shù)的百分率。
[0081] 攻毒保護(hù)試驗(yàn)：為了檢驗(yàn)免疫保護(hù)效果，于免疫后第75天，分別隨機(jī)選取第一 組、第二組豬各20頭，第三組20頭，進(jìn)行豬瘟病毒石門株攻擊保護(hù)試驗(yàn)。每頭豬肌注豬 瘟強(qiáng)毒復(fù)壯后的脫纖原血清l.OmL。攻毒后連續(xù)觀察16d，每天測(cè)量體溫2次，觀察臨床表 現(xiàn)及食欲情況。
[0082] 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
[0083] 各組數(shù)據(jù)均用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X士 表示，各組均數(shù)作正態(tài)性檢驗(yàn)及重復(fù)測(cè)量方差 齊性檢驗(yàn)，以單因素方差分析進(jìn)行組間比較仔檢驗(yàn)），P〈〇. 05為相差顯著，P〈0. 01為相差非 常顯著。統(tǒng)計(jì)計(jì)算均采用SPSS12.0軟件完成。
[0084] 結(jié)果
[0085] 豬瘟抗體水平統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表1。
[0086] 表1豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果
[0087]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑，其特征在于：原料藥包括大青葉、虎杖、 竹葉蘭、馬尾連、牛筋草、沒藥、女貞子、桑螵蛸、北沙參、滇雞血藤、葛根、冬凌草、三加皮、孔 雀草、土人參、白側(cè)耳和甘草。
2. 如權(quán)利要求1所述的藥物免疫飼料添加劑，其特征在于：各原料藥的重量分別為大 青葉50g?60g、虎杖35g?45g、竹葉蘭20g?30g、馬尾連25g?35g、牛筋草20g?30g、 沒藥30g?40g、女貞子30g?40g、桑螺銷20g?30g、北沙參25g?35g、滇雞血藤30g? 40g、葛根20g?30g、冬凌草20g?30g、三加皮25g?35g、孔雀草25g?35g、土人參35g? 45g、白側(cè)耳20g?30g和甘草25g?35g。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的藥物免疫飼料添加劑，其特征在于：各原料藥的重量分別 為大青葉53g?57g、虎杖38g?42g、竹葉蘭23g?27g、馬尾連28g?32g、牛筋草23g? 27g、沒藥33g?37g、女貞子33g?37g、桑螵蛸23g?27g、北沙參28g?32g、滇雞血藤 33g?37g、葛根23g?27g、冬凌草23g?27g、三加皮28g?32g、孔雀草28g?32g、土人 參38g?42g、白側(cè)耳23g?27g和甘草28g?32g。
4. 如權(quán)利要求1至3所述的藥物免疫飼料添加劑，其特征在于：各原料藥的重量分別 為大青葉55g、虎杖40g、竹葉蘭25g、馬尾連30g、牛筋草25g、沒藥35g、女貞子35g、桑螵蛸 25g、北沙參30g、滇雞血藤35g、葛根25g、冬凌草25g、三加皮30g、孔雀草30g、土人參40g、 白側(cè)耳25g和甘草30g。
5. 如權(quán)利要求1至4所述的藥物免疫飼料添加劑，其特征在于：其制備方法具體為將 各原料藥組分按比例混合，隨后加入相對(duì)于混合物質(zhì)量3?5倍的醇濃度為90%?95%乙 醇溶液，加熱回流2?4小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量2?5倍 的醇濃度為90 %?95 %乙醇溶液，加熱回流1?2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取液 合并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目?300目，隨 后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑。
6. 權(quán)利要求1至4所述用于預(yù)防豬瘟的藥物免疫飼料添加劑的制備方法，其特征在于： 將各原料藥組分按比例混合，隨后加入相對(duì)于混合物質(zhì)量3?5倍的醇濃度為90%?95% 乙醇溶液，加熱回流2?4小時(shí)，過濾，獲得第一提取液，濾渣再次加入相對(duì)于其質(zhì)量2?5 倍的醇濃度為90%?95%乙醇溶液，加熱回流1?2小時(shí)，過濾，獲得第二提取液，將提取 液合并，減壓濃縮除去乙醇，獲得干膏體，采用超微粉磨機(jī)粉碎，粉碎粒度200目?300目， 隨后加入相對(duì)于粉碎產(chǎn)物2倍質(zhì)量的淀粉，攪拌均勻，獲得藥物免疫飼料添加劑。
【文檔編號(hào)】A61P37/04GK104472874SQ201410681281
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】郝智慧, 戰(zhàn)余銘, 龔愛艷, 趙莉 申請(qǐng)人:郝智慧