一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，包括下述步驟：原料處理、高壓提取、雙水相萃取、脫鹽、濃縮干燥，得到絞股藍(lán)皂甙。具有含量高，提取率高，工藝簡(jiǎn)單，適合生產(chǎn)，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】的提取方法，具體說是一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙 的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 絞股藍(lán)，為多年生草質(zhì)藤木，又稱天堂草、福音草、超人參、公羅鍋底、遍地生根、七 葉膽、五葉參和七葉參等，日本稱之甘蔓茶，系葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生草質(zhì)藤本植物。絞股 藍(lán)喜陰濕溫和的氣候，多野生在林下、小溪邊等蔭蔽處，多年生攀援草本。在中國(guó)主要分布 在陜西平利、甘肅康縣、湖南、湖北、云南、廣西等省，號(hào)稱"南方人參"，生長(zhǎng)在南方的絞股藍(lán) 藥用含量比較高，民間稱其為神奇的"不老長(zhǎng)壽藥草"，1986年，國(guó)家科委在"星火計(jì)劃"中， 把絞股藍(lán)列為待開發(fā)的"名貴中藥材"之首位，2002年3月5日國(guó)家衛(wèi)生部將其列入保健 品名單。研究結(jié)果表明絞股藍(lán)含有絞股藍(lán)皂甙、糖類、黃酮類、氨基酸、蛋白質(zhì)、脂肪、無機(jī)元 素、纖維素和維生素。其中前三者是主要的保健功效成分，其他尚有多糖類、黃酮類、氨基 酸、維生素以及鋅、銅、鐵、錳等。絞股藍(lán)皂甙是絞股藍(lán)全草含的有效成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究 證明絞股藍(lán)皂甙具有降低血脂、降血壓、防止衰老、抑制腫瘤、增強(qiáng)免疫力、鎮(zhèn)靜止痛、保護(hù) 心臟和肝臟、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)血管等作用，且無毒副作用。絞股藍(lán)的有效成分皂甙在 保健食品和新型藥品研發(fā)上都有巨大的應(yīng)用前景，具有極大的研究及利用價(jià)值，在日本等 國(guó)，將絞股藍(lán)中的皂甙單獨(dú)提取出來制成多種保健品進(jìn)行銷售已成為一種趨勢(shì)。在醫(yī)藥領(lǐng) 域，將絞股藍(lán)皂甙與糊精、乳糖制成絞股藍(lán)皂甙顆粒藥物，能夠用于高血脂癥的治療，絞股 藍(lán)皂甙顆粒的劑型優(yōu)點(diǎn)為：吸收快、顯效迅速、攜帶方便、質(zhì)量穩(wěn)定等，作為中藥制劑，又具 有毒副作用小、藥效持久、標(biāo)本兼治等特點(diǎn)。
[0003] 目前絞股藍(lán)皂甙的提取方法有水提法、有機(jī)溶劑提取法、微波輔助提取法、超聲波 輔助提取法、酶法提取等方法，以上方法一般都會(huì)在提取后采用大孔樹脂純化作為主要的 分離步驟，然而采用大孔樹脂純化方法，樹脂用前需要處理，純化需經(jīng)過吸附和洗脫過程， 生產(chǎn)周期長(zhǎng)。在用大孔樹脂進(jìn)行純化洗脫時(shí)，由于物理吸附的原因，也容易造成一部分樣品 死吸附，而導(dǎo)致轉(zhuǎn)移率降低。另外采用大孔樹脂純化洗脫液體積較大，溶劑回收時(shí)間長(zhǎng)，增 加了生產(chǎn)成本,并且溶劑回收產(chǎn)生較多的廢液,對(duì)環(huán)保造成一定的負(fù)擔(dān)。此外由于大孔樹脂 的使用，增加了引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烴類、二乙基苯類等有機(jī)殘留溶劑的風(fēng)險(xiǎn)， 對(duì)產(chǎn)品的安全性造成了 一定的影響。
[0004] 綜上所述，研究一種簡(jiǎn)單可行、對(duì)環(huán)境污染小的絞股藍(lán)皂甙的提取方法具有很好 的現(xiàn)實(shí)意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，具有工藝簡(jiǎn)單，適 合生產(chǎn)，時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。
[0006] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，具體包括如下步驟：
[0007] 1)原料處理：將絞股藍(lán)粉碎或打碎；
[0008] 2)高壓提?。簩⑻幚砗蟮脑?，放入高壓罐中，加入相同重量的純凈水，加入相 當(dāng)于原料重量〇. 05-0. 25 %的聚醚改性有機(jī)硅，加壓至4kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持 10-15min，恢復(fù)常壓，過濾，得到提取液；
[0009] 3)分離：對(duì)絞股藍(lán)進(jìn)行雙水相萃取，獲得萃取上相和萃取下相，雙水相萃取所使 用的雙水相體系由聚乙二醇、氫氧化鈉和水構(gòu)成，聚乙二醇在所述雙水相體系中的質(zhì)量百 分比為15-25%,氫氧化鈉在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比為10-15%,余量為水,所述 聚乙二醇的重均分子量為1000-8000 ;
[0010] 4)后續(xù)處理：將步驟3)獲得的萃取上相，脫鹽、濃縮干燥，將步驟3)獲得的萃取 下相，加入相當(dāng)于萃取下相質(zhì)量百分比5-10%氫氧化鈉，脫鹽、濃縮干燥；
[0011] 5)合并干燥后的獲得物得到絞股藍(lán)皂甙。
[0012] 本發(fā)明所述的絞股藍(lán)為新鮮和/或干燥后的絞股藍(lán)。
[0013] 所述的脫鹽優(yōu)選采用超濾法或透析法，超濾法采用截留分子量為1000-100000的 超濾膜脫鹽，透析法采用截留分子量為1000-100000的透析袋脫鹽。
[0014] 所述的干燥優(yōu)選噴霧干燥或冷凍干燥。
[0015] 本發(fā)明得到的絞股藍(lán)皂甙，經(jīng)HPLC檢測(cè)，含量在98. 5%以上。
[0016] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0017] 1、現(xiàn)有技術(shù)采用水提法制備絞股藍(lán)皂甙的方法中，因絞股藍(lán)的有效成分皂甙本身 具有一定乳化作用，能產(chǎn)生泡沫，因此在提取過程中會(huì)產(chǎn)生過多的泡沫，產(chǎn)生的泡沫一方面 會(huì)附著在藥材原料顆粒上，進(jìn)而影響了絞股藍(lán)有效成分的充分溶出，導(dǎo)致提取時(shí)間延長(zhǎng)，提 取溶劑的用量增大；另一方面泡沫還會(huì)附著在提取設(shè)備上，使提取液焦化、變性，進(jìn)而影響 藥效。
[0018] 聚醚改性有機(jī)硅，是在硅氧烷分子中添加聚醚鏈段制得的聚醚-硅氧烷共聚物 (簡(jiǎn)稱硅醚共聚物）。聚硅氧烷類消泡劑具有消泡迅速，抑泡時(shí)間長(zhǎng)和安全無毒等特點(diǎn)，但 它難溶于水，耐高溫，耐強(qiáng)堿性差，聚醚類消泡劑水溶性好，耐高溫，耐強(qiáng)堿性強(qiáng)，但其消泡 速度和抑泡時(shí)間都不甚理想，而聚醚改性有機(jī)硅結(jié)合了聚醚跟有機(jī)硅消泡劑二者的優(yōu)點(diǎn)， 具有無毒無害，對(duì)菌種無害，添加量極少，是一種高性價(jià)比的產(chǎn)品，通過縮合技術(shù)接枝在聚 硅氧烷鏈上引入聚醚鏈，使之具有二類消泡劑的優(yōu)點(diǎn)，成為一種性能優(yōu)良，有廣泛應(yīng)用前景 的消泡劑。在硅醚共聚物的分子中，硅氧烷段是親油基，聚醚段是親水基。聚醚鏈段中聚環(huán) 氧乙烷鏈節(jié)能提供親水性和起泡性，聚環(huán)氧丙烷鏈節(jié)能提供疏水性和滲透力，對(duì)降低表面 張力有較強(qiáng)的作用。在提取時(shí)加入聚醚改性有機(jī)硅，可以有效消除泡沫，提高提取液的澄清 度，增加皂甙的溶出率，使得雜質(zhì)分離更徹底，更有利于后續(xù)工序操作。
[0019] 2、現(xiàn)有技術(shù)在進(jìn)行絞股藍(lán)皂甙的提取時(shí)，前處理一般都是以水或乙醇等為溶劑， 通過加熱提取來將有效成分溶出，而本發(fā)明采用高壓提取，相比加熱提取，經(jīng)過高壓作用， 使得絞股藍(lán)中含有的有機(jī)酸、多酚、絞股藍(lán)皂甙等成分能充分溶出，利于后續(xù)工藝的處理， 利于提高活性成分的收率。
[0020] 3、屬絞股藍(lán)總皂甙的共約有80余種，其中78種分別命名為絞股藍(lán)皂苷 I -LXXV III，其中有一部分分別為人參皂苷Rbl、Rb3、Rd，以及人參二醇、2α-羥基人參二 醇，2 α，19-二羥基-12-脫氧人參二醇等，本發(fā)明通過雙水相萃取，使得不同結(jié)構(gòu)的皂甙在 不同的萃取相中分布，增加了皂甙的溶出率。
[0021] 4、現(xiàn)有技術(shù)得到的絞股藍(lán)皂甙含量一般不超過98%，本發(fā)明采用高壓提取和雙水 相萃取技術(shù)的結(jié)合，可以極大的提高生產(chǎn)效率，現(xiàn)有技術(shù)柱層析所用的樹脂為一般為非極 性樹脂，經(jīng)過一次吸附只能得到絞股藍(lán)皂甙含量40-50%的提取物；如果采用極性樹脂，經(jīng) 過一次吸附也只能得到絞股藍(lán)皂甙含量50%左右，要想獲得更高含量的絞股藍(lán)皂甙必須通 過2次或更多次柱層析吸附，從而增加了工藝時(shí)間和成本。雙水相萃取技術(shù)作為一種新型 的分離技術(shù)，具有條件溫和、操作簡(jiǎn)便、易于放大、分離能力強(qiáng)等一系列優(yōu)點(diǎn)，而采用本發(fā)明 的技術(shù)結(jié)合，出現(xiàn)質(zhì)的提高，可以增加絞股藍(lán)皂甙的含量和提取效率，相比水提或醇提后柱 層析，本發(fā)明時(shí)間短，絞股藍(lán)皂甙含量高。
[0022] 5、本發(fā)明避免了無水乙醇、甲醇等大量有機(jī)溶劑的使用，更加環(huán)保。

【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面以實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。
[0024] 實(shí)施例1 :
[0025] 一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，具體包括如下步驟：
[0026] 1)原料處理：將新鮮絞股藍(lán)打碎；
[0027] 2)高壓提?。簩⑻幚砗蟮脑希湃敫邏汗拗?，加入相同重量的純凈水，加入相當(dāng) 于原料重量0. 25 %的聚醚改性有機(jī)硅，加壓至4kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持lOmin，恢復(fù) 常壓，過濾，得到提取液；
[0028] 3)分離：對(duì)絞股藍(lán)進(jìn)行雙水相萃取，獲得萃取上相和萃取下相，雙水相萃取所使 用的雙水相體系由聚乙二醇、氫氧化鈉和水構(gòu)成，聚乙二醇在所述雙水相體系中的質(zhì)量百 分比為20%，氫氧化鈉在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比為10%，余量為水，聚乙二醇的 重均分子量為1000-8000 ;
[0029] 4)后續(xù)處理：將步驟3)獲得的萃取上相，超濾法采用截留分子量為1000-100000 的超濾膜脫鹽、濃縮、噴霧干燥，將步驟3)獲得的萃取下相，加入相當(dāng)于萃取下相質(zhì)量百分 比10%氫氧化鈉,超濾法采用截留分子量為1000-100000的超濾膜脫鹽、濃縮、噴霧干燥；
[0030] 5)合并干燥后的獲得物得到絞股藍(lán)皂甙。
[0031] 實(shí)施例2:
[0032] 一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，具體包括如下步驟：
[0033] 1)原料處理：將干燥絞股藍(lán)粉碎；
[0034] 2)高壓提取：將處理后的原料，放入高壓罐中，加入相同重量的純凈水，加入相當(dāng) 于原料重量0. 05%的聚醚改性有機(jī)硅，加壓至4kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持15min，恢復(fù) 常壓，過濾，得到提取液；
[0035] 3)分離：對(duì)絞股藍(lán)進(jìn)行雙水相萃取，獲得萃取上相和萃取下相，雙水相萃取所使 用的雙水相體系由聚乙二醇、氫氧化鈉和水構(gòu)成，聚乙二醇在所述雙水相體系中的質(zhì)量百 分比為15%，氫氧化鈉在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比為15%，余量為水，聚乙二醇的 重均分子量為1000-8000 ;
[0036] 4)后續(xù)處理：將步驟3)獲得的萃取上相，透析法采用截留分子量為1000-100000 的透析袋脫鹽、濃縮、冷凍干燥，將步驟3)獲得的萃取下相，加入相當(dāng)于萃取下相質(zhì)量百分 比5%氫氧化鈉，透析法采用截留分子量為1000-100000的透析袋脫鹽、濃縮、冷凍干燥；
[0037] 5)合并干燥后的獲得物得到絞股藍(lán)皂甙。
[0038] 實(shí)施例3 :
[0039] -種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，具體包括如下步驟：
[0040] 1)原料處理：將干燥絞股藍(lán)粉碎；
[0041] 2)高壓提取：將處理后的原料，放入高壓罐中，加入相同重量的純凈水，加入相當(dāng) 于原料重量0. 15%的聚醚改性有機(jī)硅，加壓至4kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持12min，恢復(fù) 常壓，過濾，得到提取液；
[0042] 3)分離：對(duì)絞股藍(lán)進(jìn)行雙水相萃取，獲得萃取上相和萃取下相，雙水相萃取所使 用的雙水相體系由聚乙二醇、氫氧化鈉和水構(gòu)成，聚乙二醇在所述雙水相體系中的質(zhì)量百 分比為25%，氫氧化鈉在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比為12%，余量為水，聚乙二醇的 重均分子量為1000-8000 ;
[0043] 4)后續(xù)處理：將步驟3)獲得的萃取上相，超濾法采用截留分子量為1000-100000 的超濾膜脫鹽、濃縮、冷凍干燥，將步驟3)獲得的萃取下相，加入相當(dāng)于萃取下相質(zhì)量百分 比10%氫氧化鈉，超濾法采用截留分子量為1000-100000的超濾膜脫鹽、濃縮、冷凍干燥；
[0044] 5)合并干燥后的獲得物得到絞股藍(lán)皂甙。
[0045] 結(jié)果：
[0046]

【權(quán)利要求】
1. 一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，其特征在于： 包括如下步驟： 1) 原料處理：將絞股藍(lán)粉碎或打碎； 2) 高壓提?。簩⑻幚砗蟮脑希湃敫邏汗拗?，加入相同重量的純凈水，加入相當(dāng)于原 料重量0. 05-0. 25 %的聚醚改性有機(jī)硅，加壓至4kgf/cm2,使其壓力均勻，并保持10-15min， 恢復(fù)常壓，過濾，得到提取液； 3) 分離：對(duì)絞股藍(lán)進(jìn)行雙水相萃取，獲得萃取上相和萃取下相，雙水相萃取所使用的 雙水相體系由聚乙二醇、氫氧化鈉和水構(gòu)成，聚乙二醇在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比 為15-25%，氫氧化鈉在所述雙水相體系中的質(zhì)量百分比為10-15%，余量為水，所述聚乙 二醇的重均分子量為1000-8000 ; 4) 后續(xù)處理：將步驟3)獲得的萃取上相，脫鹽、濃縮干燥，將步驟3)獲得的萃取下相， 加入相當(dāng)于萃取下相質(zhì)量百分比5-10%氫氧化鈉，脫鹽、濃縮干燥； 5) 合并干燥后的獲得物得到絞股藍(lán)皂甙。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂甙的方法，其特征在于：所述 的絞股藍(lán)為新鮮和/或干燥后的絞股藍(lán)。
【文檔編號(hào)】A61K36/424GK104435060SQ201410620033
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月5日
【發(fā)明者】盧照凱, 鐘德品, 謝冬養(yǎng), 周曉青, 盧樺香, 應(yīng)啟實(shí), 陸美珍 申請(qǐng)人:桂林三寶生物科技有限公司