各種成分比例穩(wěn)定均一的大黃總蒽醌及其組合物用于治療慢性腎衰的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種各種成分比例穩(wěn)定均一的大黃總蒽醌及其組合物用于治療慢性腎衰。
【專利說明】各種成分比例穩(wěn)定均一的大黃總蔥醒及其組合物用于治療 慢性腎衰

【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥提取物制劑的治療用途，特別涉及一種各種成分比例穩(wěn)定均 一的大黃總意釀及其組合物用于治療慢性腎衰。

【背景技術(shù)】：
[0002] 大黃為常用中藥之一，系寥科多年生草本植物掌葉大黃、唐古特大黃或藥用大黃 的干燥根和根莖。
[0003] 大黃味苦，性寒，具有瀉下攻擊，清熱瀉火，涼血解毒，逐癒通經(jīng)之功效?，F(xiàn)代化學(xué) 研究證明大黃的主要化學(xué)成分為意釀類化合物；大黃有效成分的提取分離方法主要有：煎 煮法（水提法）：煎煮法為大黃有效成分的傳統(tǒng)提取方法，由于游離意釀類的極性小，故用 煎煮法對游離意釀類成分的提取效果不佳；而其結(jié)合意釀巧類極性較其巧元較大，故可用 水提取。醇提法：由于大黃中活性成分的極性分布很廣，因此就總意釀類的提取而言，醇提 法的效率要明顯高于煎煮法。目前較常用的醇提法有己醇回流法和滲漉法。
[0004] 大黃化學(xué)成分復(fù)雜，化學(xué)結(jié)構(gòu)已被闡明的至少已有136種，但其主要成分為意釀 類化合物，總含量在2%?5%，其中游離的輕基意釀類化合物只占1/10?1/5,主要為大黃 酷、大黃素、蘆菩大黃素、大黃素甲離和大黃酸等，為大黃的主要抗菌成分。結(jié)合性意釀衍生 物為游離意釀的葡萄糖巧（即大黃酷葡萄糖巧、大黃素葡萄糖巧、蘆菩大黃素葡萄糖巧、大 黃酸葡萄糖巧等）和雙意麗巧類，系大黃的主要瀉下成分，其中雙意麗巧為：番瀉巧A、B、 C、D、E等。番瀉巧A與番瀉巧B互為異構(gòu)體；番瀉巧C與番瀉巧D互為異構(gòu)體。此外尚含 有大黃素、蘆菩大黃素和大黃酷的雙葡萄糖巧。大黃亦含有稼質(zhì)類化合物約5%，其中有沒 食子醜葡萄糖、沒食子酸、d-兒茶素及大黃四聚素等，為收斂止血有效成分。
[0005] 大黃及大黃總意釀的藥物作用在許多文獻(xiàn)中有報道，主要的作用有：
[000引（1)巧腫及口腔炎，似下腿潰瘍（賺瘡），做腸脹氣，（4)傳染性濕疹樣皮炎， 妨咳嗽做急性胃十二指腸出血，（7)慢性腎功能不全，做拔牙術(shù)后出血（9)燒傷，（10) 急性壞死性小腸炎致腸麻瘍，（11)膽道蝴蟲，（12)急性黃痘型肝炎，（13)胃癌出血，（14) 急性膜腺炎，（15)乳蛾（急性化賊性扁桃體炎），（1巧流行性腮腺炎，（17)新生兒不吃奶， (18)慢性前列腺炎，（19)鼻出血，（20)慢性便秘，（21)小兒厭食癥，倘）肝性腦病，似） 腦出血急性期，（24)膽道出血，（25)腦外傷性頗內(nèi)出血，（26)高脂血癥，（27)慢性腎功能 衰竭，（28)急性膽囊炎，（29)急性腸梗阻，（30)闊尾賊腫，（31)張力性水瘡，（32)腹膜后 血腫，（33)帶狀瘡疹，（34)排卵功能失調(diào)，（35)急性淋病，（36)銀屑病，（37)急性軟組織損 傷，（38)甲溝炎，（39)淋己結(jié)核，（40)老年單純性服胖癥，（41)中風(fēng)便秘，（42)瘍閉，（43) 預(yù)治大面積燒傷并發(fā)癥，（44)重型肝炎，（45)流行性出血熱消化道出血。
[0007] 總之，大黃及其意釀提取物具有多種多樣的藥物作用，是近年來研究最多的中藥 之一。
[0008] 用大黃制備的藥物已經(jīng)上市多年，現(xiàn)有的大黃制劑有新清寧片和新清寧膠囊，其 主要成分是熟大黃。具有清熱解毒。活血化癒，緩下功效。用于內(nèi)結(jié)實(shí)熱，藍(lán)腫，汪痛，目赤， 便秘，下癡，感染性炎癥，發(fā)燒等證。
[0009] 因大黃的主要活性成分為大黃總意釀，因此W大黃總意釀作為藥物成分W及相應(yīng) 的提取分離方法多有報道，大黃總意釀提取自大黃的根莖，其顏色形狀為蹤黑色浸膏或蹤 色粉狀結(jié)晶，是游離意釀、結(jié)合意釀、意麗、糖、稼質(zhì)等混合物。
[0010] 已經(jīng)上市的大黃總意釀制劑有大黃總意釀膠囊，其主要成分為大黃提取物。【功能 主治】用于治療濕熱型黃痘肝炎。
[0011] 中國專利申請?zhí)枺?00810107381.8申請日：2008-11-13公開了一種治療濕熱型黃 痘肝炎大黃總意釀膠囊的制備方法，其中大黃總意釀膠囊的主要成份為大黃活性成分組 合物大黃總意釀，并按大黃總意釀18% -22%，淀粉78% -82%的配比進(jìn)行制備
[0012] 本發(fā)明人對大黃總意釀制劑的適應(yīng)癥進(jìn)行了研究，意外的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的大黃總 意釀制劑可W用于治療慢性腎衰，并取得了令人滿意的效果。


【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0013] 本發(fā)明提供一種大黃總意釀制劑的新的治療應(yīng)用，本發(fā)明所述大黃總意釀包括任 何一種方法制備的大黃意釀物質(zhì)，包括游離意釀、結(jié)合意釀、意麗、糖、稼質(zhì)等或它們的混合 物。特別包括W下中國專利中提及的大黃總意釀、大黃意釀或大黃意釀類衍生物：
[0014] 99114211.x 一種提取大黃總游離蔥釀的方法 00125405 7 一種從大黃中提取游離蔥釀的浸膏及制各方法 01113574.3 從大黃中提取游離蔥釀的方法及其藥用新用途 01134161.0 大黃總蔥醜的提取純化方法及其在治療腎衰藥品中的應(yīng)用 02114573.3 大黃屬植物地上部分意釀類物質(zhì)的提取工藝 2006100571酣.日一種超臨界二氧化破萃取大黃總蔥釀的方法 2006100日巧99. 4 超臨界酸水解提取大黃粉游離意釀的方法 200610128443. 4 細(xì)胞超聲破碎提取大黃中的蔥釀類成分的最佳工藝 200610067506. X 一種大黃素的合成改良方法 200710068891. 4 一種采用超臨界C02萃取高純度大黃游離蔥釀的方法 200810059316. 2 一種萃取分離大黃磁蔥釀類化合物的方法 200810107377. 1 一種從大黃提取大黃總蔥釀的方法 200810135343. 3 一種大黃總游離蔥釀提取物的制各方法 20091027巧09. 0 從大黃根莖中提取高純大黃酪的方法 200910307312.6 大黃結(jié)合型蔥釀與大黃轅質(zhì)的分離方法 20091027巧08. 6 -種高純度大黃素的分離方法 200910巧790日.9 一種大黃提取物及其制備和應(yīng)用 201110086108.3 一種超聲提取大黃蔥釀類成分的方法 201110112289.2 一種大黃蔥釀類成分的提取和分離方法 201310292063. 4 一種大黃藥材自身酶解法游離大黃蔥釀類的方法 20.111011229化5 超臨界流體提取中藥大黃中的大黃總蔥釀的方法 20.1310巧1913. 1 -種大黃提取物及其應(yīng)用 20.1310110849. X -種用共結(jié)晶分離大黃素的方法 2013102姑667. X -種從新鮮大黃中提取總意釀的方法
[0015] 本發(fā)明所述大黃總意釀，最優(yōu)選的是采用W下方法制備的大黃總意釀：
[0016] 其制備方法如下；步驟1，
[0017] 取大黃lOOOg，照中國藥典2010年版一部附錄IO流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉 法，用己醇作溶劑，浸潰48小時后，W每公斤藥粉每分鐘1?1. 5ml的速度緩緩滲漉，收集 初漉液5000ml備用；繼續(xù)滲漉，收集續(xù)漉液IOOOOml減壓回收己醇至6(TC相對密度0. 90? 0. 9,，放冷，靜置，濾過，得析出物I，濾液1備用；
[001引 步驟2，
[0019] 取初漉液加50%己醇稀釋至含醇量75%，用10%氨氧化軸的65%己醇溶液堿化 至漉液中無沒食子酸斑點(diǎn)，靜置12小時，取上清液用鹽酸調(diào)節(jié)抑值至6. 0?7. 0,減壓回收 己醇至6(TC相對密度1. 00?1. 02,放冷，靜置，濾過，得沉淀物1和濾液2，
[0020] 步驟 3，
[0021] 濾液2與濾液1合并，減壓濃縮至8(TC相對密度1. 40?1. 45,加6倍稠膏重量的 己醇回流2次，每次0. 5小時，濾過，濾液用10%氨氧化軸的65%己醇溶液堿化至溶液中無 沒食子酸斑點(diǎn)，靜置12小時，濾過，濾液調(diào)節(jié)抑值至6. 0?7. 0,減壓回收己醇，濃縮至8(TC 相對密度為1. 45?1. 48,并與上述沉淀物1合并，稱定重量，加入10倍量0. 5%氨氧化軸 水溶液溶解，濃鹽酸調(diào)節(jié)抑值至6. 0?7. 0,加入0. 2倍合并物重量的明膠，加熱，濃縮至 8(TC相對密度為1. 40?1. 45,趁熱緩緩加入4倍量己醇，加熱攬拌至明膠析出，濾過，收集 沉淀和濾液，沉淀加入適量沸水，加熱使溶解，使8(TC相對密度為1. 40?1. 45,趁熱緩緩加 入4倍量己醇，加熱攬拌至明膠析出，濾過，收集沉淀和濾液，沉淀再重復(fù)操作1次，合并3 次濾液，減壓回收己醇至6(TC相對密度0. 95?0. 97,放冷，濾過，收集析出物II和濾液3， [002引 步驟4，
[0023] 濾液3檢查稼質(zhì)至陰性，加4倍量己醇沉淀除盡殘留明膠，濾過，回收己醇，蒸干， 85°C，0. 07MPa減壓干燥，粉碎，加6倍干固物重量己醇回流2次，每次0. 5小時，合并己醇 液，減壓回收己醇，得殘留物，
[0024] 步驟 5，
[00巧]殘留物與析出物I、析出物II合并，混勻，65C W下減壓干燥，即得本發(fā)明的大黃 總意釀。
[0026] 本發(fā)明的大黃總意釀，其檢測方法如下：
[0027] 其【性狀】為褐黃色粉末，氣微，味微苦。
[0028] 其【鑒別】方法如下：取本發(fā)明的大黃總意釀0. Ig,加H氯甲焼40ml超聲處理10 分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取蘆菩大黃素、大黃酷、大黃素甲離、大黃素、大黃酸對 照品，加甲醇溶解，分別制成每Iml含0. 2mg、0. Img, 0. Img, 0. Img, 0. 2mg的溶液作為對照溶 液，照薄層層析法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種供試品和對照品 溶液各5?10 y 1分別點(diǎn)于同一 W駿甲基纖維素納為黏合劑的娃膠H薄層板上（新活化）， W石油離（30?6(TC) -甲酸己醋一甲酸（15:5: Dicrcw下放置的上層溶液為展開劑，在 25CW下展開，取出，瞭干，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同顏色的英光斑點(diǎn)。
[002引其【檢查】方法如下：
[0030] 沒食子酸的檢查；取本發(fā)明的大黃總意釀細(xì)粉25mg，置5ml量瓶中，加甲醇4? 5ml超聲處理30分鐘使溶解，冷卻，加甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。 另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法 (中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 y 1分別點(diǎn)于同一娃膠G 薄層板上，W甲苯一己酸己醋一甲酸巧:4:1)為展開劑，展開，取出，瞭干，噴W 1%H氯化 鐵己醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)顏色應(yīng)不得深于對 照品斑點(diǎn)的顏色。
[0031] ±大黃巧的檢查；取本發(fā)明的大黃總意釀0. 2g，加甲醇2ml，溫浸10分鐘，放冷，取 上清液IOul點(diǎn)于濾紙上，W 45%己醇展開，取出，瞭干，放置10分鐘，置紫外光燈（365nm) 下檢視，不得顯持久的亮紫色英光。
[0032] 其【含量測定】方法如下：
[0033] (1)、總意釀
[0034] 對照品溶液的制備
[00巧]取大黃素對照品約IOmg,精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即 得。
[0036] 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備；精密量取對照品溶液0ml、0. lml、0. 2ml、0. 4ml、0. 8ml、l. 2ml、 I. 6ml置IOml具塞試管中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入0. 8%醋酸鎮(zhèn)甲醇溶液IOml使溶 解，搖勻，W第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在 SlOnm的波長處測定吸光度，W吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0037] 測定法：取本品約40mg，精密稱定，置IOOml園底燒瓶中，加8%鹽酸溶液20ml，再 加H氯甲焼20mL置沸水浴中加熱回流1小時，冷卻，置分液漏斗中，用少量H氯甲焼洗涂 容器至無色，并入分液漏斗中，分取H氯甲焼層，酸液再用H氯甲焼提取3次（20ml、15ml、 IOml)，合并H氯甲焼提取液置IOOml量瓶中，加H氯甲焼稀釋至刻度，搖勻。精密量取 0. 4ml置IOml具塞試管中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入0. 8 %醋酸鎮(zhèn)甲醇溶液IOml使溶 解，搖勻，W第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)， 在SlOnm的波長處測定吸光度，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中總意釀的量， 計(jì)算，即得。
[003引本品按干燥品計(jì)算，含總意釀W大黃素咕5町。05計(jì)，應(yīng)為50% -60% )。
[00測 （2)、游離意釀
[0040] 對照品溶液的制備
[0041] 取大黃素對照品約IOmg,精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即 得。
[0042] 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備；精密量取對照品溶液0ml、0. lml、0. 2ml、0. 4ml、0. 8ml、l. 2ml、 1. 6ml置IOml具塞試管中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入0. 8%醋酸鎮(zhèn)甲醇溶液IOml使溶 解，搖勻，W第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在 SlOnm的波長處測定吸光度，W吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[004引巧Ij定法；取本品約40ml，精密稱定，置IOOml錐形瓶中，加立氯甲焼約60ml超聲處 理（功率250W，頻率25KHZ) 40分鐘，放冷，濾過，用H氯甲焼沖洗濾器及錐形瓶，并入濾液 中，濾液轉(zhuǎn)移至IOOml量瓶中，加H氯甲焼稀釋至刻度，搖勻。精密量取0. 4ml置IOml具塞 試管中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入0. 8%醋酸鎮(zhèn)甲醇溶液IOml使溶解，搖勻，W第一份 為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在510nm的波長處測 定吸光度，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中游離意釀的量，計(jì)算，即得。
[0044] 本品按干燥品計(jì)算，含游離意釀W大黃素咕5町。〇5)計(jì)，應(yīng)為48% -58%。
[0045] (3)、蘆菩大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酷、大黃素甲離總量；照高效液相色譜法 (中國到典2010年版一部附錄VID)測定。
[0046] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)W十八化基娃化鍵合娃膠為填充劑；W甲醇-0. 1% 磯酸溶液巧5:15)為流動相：檢測波長為44化m。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
[0047] 對照品溶液的制備取蘆菩大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酷、大黃素甲離對照品 適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含蘆菩大黃素、大黃酸、大黃素各IOy g、大黃素甲離 20 U g、大黃酷50 y g的混合溶液，即得。
[004引供試品溶液的制備；取本品約15mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加入甲醇適量，超 聲處理（功率250W，頻率25KHZ) 30分鐘，使其溶解，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾 過，精密量取續(xù)濾液IOml (剩余濾液備用），置燒瓶中，揮去溶劑，加8 %鹽酸溶液20ml再加 H氯甲焼20ml加熱回流2小時，放冷，置分液漏斗中，用少量H氯甲焼洗涂容器，并入分液 漏斗中，分取H氯甲焼層，酸液再用H氯甲焼振搖提取3次，每次10時，合并H氯甲焼液，減 壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取 續(xù)濾液，即得。
[0049] 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 y 1注入液相色譜儀，測定， 即得。
[0050] 本品按干燥品計(jì)算，含蘆菩大黃素咕化?；?、大黃酸咕化〇6)、大黃素咕化?；?、 大黃酷（(：品。〇4)、大黃素甲離（CieHi2〇5)的總量不得少于50%。
[0051] (4)游離蘆菩大黃素、游離大黃酸、游離大黃素、游離大黃酷、游離大黃素甲離總量 照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VID)測定。
[0052] 照高效液相色譜法（中國到典2010年版一部附錄VID)測定。
[0053] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)W十八化基娃化鍵合娃膠為填充劑；W甲醇-0. 1% 磯酸溶液巧5:15)為流動相：檢測波長為440nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
[0054] 對照品溶液的制備取蘆菩大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酷、大黃素甲離對照品 適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含蘆菩大黃素、大黃酸、大黃素各10 y g、大黃素甲離 20 U g、大黃酷50 y g的混合溶液，即得。
[005引供試品溶液的制備；取本品約15mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加入甲醇適量，超 聲處理（功率250W，頻率25KHZ) 30分鐘，使其溶解，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾 過，濾液的一部分作為供試品溶液。
[0056] 測定法；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 y 1注入液相色譜儀，測定， 即得。
[0057] 本品按干燥品計(jì)算，含游離蘆菩大黃素咕化化)、游離大黃酸（Cl品〇e)、游離大黃 素（CisHiuOs)、游離大黃酷（Cl品。〇4)、游離大黃素甲離（CieHi2〇5)的總量不得少于40%。
[0058] 本發(fā)明的大黃總意釀，其中，
[0059] 含總意釀W大黃素計(jì)，為50% -60%。
[0060] 含游離意釀W大黃素計(jì)，為48% -58%。
[006。 按干燥品計(jì)算，含蘆菩大黃素咕5恥05)、大黃酸咕5&06)、大黃素咕化。05)、大黃 酷（CisHi004)、大黃素甲離（CieHi205)的總量不少于50%。
[0062] 按干燥品計(jì)算，含游離蘆菩大黃素（Cl化化)、游離大黃酸（Cl化〇6)、游離大黃素 (Cl品。〇5)、游離大黃酷（CisHiA)、游離大黃素甲離（CieHi2〇5)的總量不少于40%。
[0063] 本發(fā)明的大黃總意釀可W制備成片劑，膠囊等口服藥物形式，也可W制備成外用 和注射用藥物形式，如含有W下重量比例的組分制備的片劑或膠囊劑：
[0064]

【權(quán)利要求】
1. 大黃總蒽醌及其組合物在制備治療慢性腎衰的藥物中的應(yīng)用。
2. 權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其中所述大黃總蒽醌包括任何一種方法制備的大黃蒽醌物 質(zhì)，包括游離蒽醌、結(jié)合蒽醌、蒽酮、糖、鞣質(zhì)等或它們的混合物。 3?權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述大黃總蒽醌是采用以下方法制備的大黃總蒽醌： 步驟1， 取大黃lOOOg，照中國藥典2010年版一部附錄IO流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用 乙醇作溶劑，浸漬48小時后，以每公斤藥粉每分鐘1?I. 5ml的速度緩緩滲漉,收集初漉液 5000ml備用；繼續(xù)滲漉，收集續(xù)漉液10000ml減壓回收乙醇至60°C相對密度0. 90?0. 9,， 放冷，靜置，濾過，得析出物I，濾液1備用； 步驟2， 取初漉液加50%乙醇稀釋至含醇量75%，用10%氫氧化鈉的65%乙醇溶液堿化至漉 液中無沒食子酸斑點(diǎn)，靜置12小時，取上清液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6. 0?7. 0,減壓回收乙醇 至60°C相對密度1. 00?1. 02,放冷，靜置，濾過，得沉淀物1和濾液2， 步驟3， 濾液2與濾液1合并，減壓濃縮至80°C相對密度L 40?L 45,加6倍稠膏重量的乙醇 回流2次，每次0? 5小時，濾過，濾液用10%氫氧化鈉的65%乙醇溶液堿化至溶液中無沒食 子酸斑點(diǎn)，靜置I2小時，濾過，濾液調(diào)節(jié)pH值至6.0? 7.0,減壓回收乙醇，濃縮至80°C相對 密度為1. 45?1. 48,并與上述沉淀物1合并，稱定重量，加入10倍量〇. 5%氫氧化鈉水溶 液溶解，濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6. 0?7. 0,加入0. 2倍合并物重量的明膠，加熱，濃縮至8(TC 相對密度為1. 40?1.妨，趁熱緩緩加入4倍量乙醇，加熱攪拌至明膠析出，濾過，收集沉淀 和濾液，沉淀加入適量沸水，加熱使溶解，使80°C相對密度為1. 40?1. 45,趁熱緩緩加入4 倍量乙醇，加熱攪拌至明膠析出，濾過，收集沉淀和濾液，沉淀再重復(fù)操作1次，合并3次濾 液，減壓回收乙醇至60°C相對密度0? 95?0? 97,放冷，濾過，收集析出物II和濾液3， 步驟4， 濾液3檢查鞣質(zhì)至陰性，加4倍量乙醇沉淀除盡殘留明膠，濾過，回收乙醇，蒸干，85°C， 0? 07MPa減壓干燥，粉碎，加6倍干固物重量乙醇回流2次，每次0.5小時，合并乙醇液，減壓 回收乙醇，得殘留物， 步驟5， 殘留物與析出物I、析出物II合并，混勻，65°C以下減壓干燥，即得。 4?權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其中所述大黃總蒽醌含總蒽醌以大黃素計(jì)，為50% -60%， 含游離蒽醌以大黃素計(jì)，為4S%-5S%，按干燥品計(jì)算，含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大 黃酚、大黃素甲醚的總量不少于50%，按干燥品計(jì)算，含游離蘆薈大黃素、游離大黃酸、游離 大黃素、游離大黃酚、游離大黃素甲醚的總量不少于40%， 其【性狀】為褐黃色粉末，氣微，味微苦， 其【鑒別】方法如下：取本發(fā)明的大黃總蒽醌〇? lg，加三氯甲烷40tnl超聲處理10分鐘， 濾過，濾液作為供試品溶液，另取蘆薈大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、大黃素、大黃酸對照品， 加甲醇溶解，分別制成每Iml含0? 2mg、0. lmg，0. Img, 0. lmg，0? 2mg的溶液作為對照溶液，照 薄層層析法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種供試品和對照品溶液 各5?10 Ul分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素納為黏合劑的硅膠H薄層板上（新活化），以石 油醚（30?60°C) -甲酸乙酯一甲酸（15:5:1)1(rC以下放置的上層溶液為展開劑，在 25。〇 以下展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)， 其【檢查】方法如下： 沒食子酸的檢查：取本發(fā)明的大黃總蒽醌細(xì)粉25呢,置5ml量瓶中，加甲醇4?5ml超 聲處理30分鐘使溶解，冷卻，加甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液，另取沒 食子酸對照品，加甲醇制成每Iml含0? Img的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法（中國 藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 y 1分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板 上，以甲苯一乙酸乙酯一甲酸（5:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇 溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，出現(xiàn)的斑點(diǎn)顏色應(yīng)不得深于對照品斑 點(diǎn)的顏色， 土大黃苷的檢查：取本發(fā)明的大黃總蒽醌〇? 2g，加甲醇2ml，溫浸10分鐘，放冷，取上清 液IOul點(diǎn)于濾紙上，以45%乙醇展開，取出，晾干，放置1〇分鐘，置紫外光燈（365nm)下檢 視，不得顯持久的亮紫色熒光， 其【含量測定】方法如下： (1) 、總蒽醌 對照品溶液的制備 取大黃素對照品約10mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得， 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對照品溶液0ml、0. lml、0. 2ml、0. 4ml、0. 8ml、l. 2ml、l. 6ml 置IOml具塞試管中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入0.8%醋酸鎂甲醇溶液10ml使溶解， 搖勻，以第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在 51〇nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 測定法：取本品約40mg，精密稱定，置IOOml園底燒瓶中，加8%鹽酸溶液20ml，再加三 氯甲烷20mL置沸水浴中加熱回流1小時，冷卻，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器至 無色，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次（20ml、15ml、IOml)， 合并三氯甲烷提取液置IOOrnl量瓶中，加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，精密量取0. 4ml置 IOml具塞試管中，蒸發(fā)至千，殘?jiān)謩e精密加入0.8%醋酸鎂甲醇溶液IOml使溶解，搖勻， 以第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在510nm的 波長處測定吸光度，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中總蒽醌的量，計(jì)算，即得， (2) 、游離蒽醌 對照品溶液的制備 取大黃素對照品約IOmg,精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得， 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對照品溶液0ml、0. lml、0. 2ml、0. 4ml、0. 8ml、l. 2ml、l. 6ml 置IOml具塞試管中，蒸發(fā)至千,殘?jiān)謩e精密加入0? 8%醋酸鎂甲醇溶液IOml使溶解， 搖勻，以第一份為空白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在 51〇 nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 測定法：取本品約40ml，精密稱定，置IOOml錐形瓶中，加三氯甲烷約6Oml超聲處理 (功率250W,頻率25KHz) 40分鐘,放冷，濾過，用三氯甲烷沖洗濾器及錐形瓶，并入濾液中， 濾液轉(zhuǎn)移至IOOml量瓶中，加三氯甲烷稀釋至刻度，搖勻，精密量取〇? 4ml置IOml具塞試管 中，蒸發(fā)至干，殘?jiān)謩e精密加入〇? 8%醋酸鎂甲醇溶液IOml使溶解，搖勻，以第一份為空 白，照紫外一可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄VA)，在5IOnm的波長處測定吸 光度，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中游離蒽醌的量，計(jì)算，即得， (3) 、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酸、大黃素甲醚總量：照高效液相色譜法（中國 到典2〇10年版一部附錄VID)測定， 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八炕基硅炕鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-〇? 磷酸 溶液（85:15)為流動相：檢測波長為440nm,理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000, 對照品溶液的制備取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚對照品適量，精 密稱定，加甲醇制成每Iml含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素各IO11 g、大黃素甲醚2〇 u g、大黃 酚50 u g的混合溶液，即得， 供試品溶液的制備：取本品約15mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加入甲醇適量，超聲處 理（功率25〇W，頻率25KHZ) 30分鐘，使其溶解，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過， 精密量取續(xù)濾液IOml (剩余濾液備用），置燒瓶中，揮去溶劑，加8 %鹽酸溶液20ml再加三 氯甲烷20ml加熱回流2小時，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏 斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷振搖提取3次，每次10時，合并三氯甲烷液，減壓 回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙獠⑥D(zhuǎn)移至 10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù) 濾液,即得， 測定法別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 u 1注入液相色譜儀，測定，即得， (4) 游離蘆薈大黃素、游離大黃酸、游離大黃素、游離大黃酚、游離大黃素甲醚總量照高 效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VID)測定， 照髙效液相色譜法（中國到典2010年版一部附錄VID)測定， 、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八炕基硅炕鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-〇. 1 %磷酸 溶液（85:15)為流動相：檢測波長為440nm,理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000， …對照品溶液的制備取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚對照品適量，精 密稱定，加甲醇制成每Iml含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素各 10 y g、大黃素甲醚2〇 y g、大黃 酚50 Ug的混合溶液，即得， 供試品溶液的制備：取本品約15tng，精密稱定，置100ml量瓶中，加入甲醇適量，超聲處 理（功率2S0W，頻率2SKHz) 30分鐘，使其溶解，取出，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過， 濾液的一部分作為供試品溶液， 測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各2〇il 1注入液相色譜儀，測定，即 得。 5?權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述大黃總蒽醌組合物為大黃總蒽醌的片劑，膠囊劑。
6.權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其中所述大黃總蒽醌膠囊劑，其配方如下： 制備方法如下：
1) 大黃總蒽醌，微晶纖維素，混合均勻； 2) 將聚維酮用％% (v/v)的乙醇溶解,制備成含有10%的聚維酮溶液（10份重量的聚 維酮溶解到95%的乙醇中得到100份體積的聚維酮乙醇溶液）；、 3) 將10%的聚維酮溶液加入上述混合物中攪拌均勻，制軟材，過丨8目篩制顆粒，干燥， 顆粒干燥后加入硬脂酸鎂混勻，裝 1000粒膠囊，或上壓片機(jī)壓1000片，再包衣即可。
【文檔編號】A61K9/48GK104224953SQ201410503768
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月28日
【發(fā)明者】付誠, 付志高 申請人:江西百神昌諾藥業(yè)有限公司