一種從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及到一種從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，將絞股藍(lán)藥材粉粹、過(guò)篩，乙醇提取，提取液過(guò)濾濃縮至無(wú)醇；將濃縮液稀釋通過(guò)大孔樹脂吸附，用水洗脫至澄清后，再用乙醇溶液洗脫，將洗脫液濃縮至無(wú)醇；再將濃縮液用有機(jī)溶劑萃取后，濃縮干燥，與此同時(shí)回收有機(jī)溶劑。本發(fā)明中工藝簡(jiǎn)單、技術(shù)合理、經(jīng)濟(jì)適用，通過(guò)吸附與液液萃取相結(jié)合技術(shù)獲得高純度的產(chǎn)品，是一種適應(yīng)中小型企業(yè)生產(chǎn)，降低生產(chǎn)設(shè)備要求，減少生產(chǎn)成本的生產(chǎn)工藝。
【專利說(shuō)明】一種從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及到天然化合物的提純、分離及純化，具體指一種從絞股藍(lán)根莖原料中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]絞股藍(lán)((Gynostemma pentaphyllum)又名七葉膽、五葉參、七葉參等,是葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生草質(zhì)藤本植物。分布于印度、斯里蘭卡、尼泊爾、緬甸、中南半島、馬來(lái)西亞、菲律賓、朝鮮和日本等地區(qū)，在我國(guó)分布于西南地區(qū)，其中以云南分布最廣、資源最豐富、種類最多，多數(shù)分布于海拔1000?2000m。絞股藍(lán)多為苦含甘，咀嚼清爽，全草可入藥，藥理研究證明，絞股藍(lán)無(wú)毒副作用，經(jīng)臨床試驗(yàn)證明，其對(duì)傳染性肝炎、腎盂腎炎、慢性支氣管炎、胃腸炎等有一定的療效，并具有顯著降血脂、降血糖、平衡血壓、抗癌、抗疲勞、抗缺氧、抗熱、抗衰老、促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝、強(qiáng)壯補(bǔ)益、提高免疫功能、鎮(zhèn)痛、催眠的作用。
[0003]絞股藍(lán)含有皂苷、黃酮、多糖、維生素、菇類、有機(jī)酸、生物堿、蛋白質(zhì)等有效成分。絞股藍(lán)皂苷是絞股藍(lán)的主要有效成分之一，目前已分離出絞股藍(lán)皂苷有84種，毒理研究表明絞股藍(lán)皂苷無(wú)毒性，同時(shí)還有美容、減肥、增進(jìn)食欲等保健功能，可做成保健茶、飲料、食品附加劑等系列滋補(bǔ)健康品。
[0004]絞股藍(lán)皂苷的常規(guī)提取方法有浸潰法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、索氏提取法，以及近年來(lái)研究和開發(fā)的超聲提取法、微波提取、酶輔助提取、超臨界流體萃取等新技術(shù)。目前在皂苷的規(guī)?；a(chǎn)中采用的基本上是常規(guī)提取工藝，該方法操作簡(jiǎn)單，設(shè)備要求低。關(guān)于絞股藍(lán)總苷提取分離方法的研究和改進(jìn)，目前報(bào)道的有兩類:即“通法”提取，用適當(dāng)濃度的乙醇或甲醇提取藥材，乙醚或石油醚脫脂后，再以水飽和正丁醇或乙酸乙酯進(jìn)行液-液萃取，得到絞股藍(lán)總苷；另一方法為“大孔吸附樹脂法”，即將藥材水提液過(guò)濾，濾液通過(guò)大孔吸附樹脂柱，再依次用不同濃度的有機(jī)試劑洗脫，制得絞股藍(lán)總苷。但是目前根據(jù)報(bào)道提取絞股藍(lán)皂苷相對(duì)采用的方法比較單一，絞股藍(lán)皂苷的得率低，純度低，沒(méi)有形成一系列完整的提取分離方法，來(lái)應(yīng)用到工業(yè)化生產(chǎn)中。
[0005]為解決上述絞股藍(lán)皂苷提取的技術(shù)問(wèn)題，目前絞股藍(lán)總苷的提取方法有水提法、有機(jī)溶劑提取法、微波輔助提取法、超聲波輔助提取法、酶法提取等方法，具體的專利申請(qǐng)可參見申請(qǐng)?zhí)枮?01310470936.6和201210125255.1的專利申請(qǐng)，但上述這些方法絞股藍(lán)總苷的提取收率都不高，而且絞股藍(lán)中有效成分的提取生產(chǎn)成本偏高，提取工藝技術(shù)都待進(jìn)一步改善。另外，如一申請(qǐng)?zhí)枮?01010105011.8的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)《一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法》，利用堿液煮沸提取及樹脂層析法從絞股藍(lán)中提取高純度的絞股藍(lán)皂苷，解決了絞股藍(lán)所含皂苷極性大、色素不易分離的問(wèn)題，但通過(guò)在弱堿性介質(zhì)中加熱浸提，再利用樹脂樹和活性炭脫色，工藝復(fù)雜，生產(chǎn)成本高，因此需要對(duì)絞股藍(lán)皂苷的提取和純化工藝作進(jìn)一步的改進(jìn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀提供一種工藝流程短、皂苷得率高、純度高的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法。
[0007]本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為:該從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于:包括如下步驟:
[0008](I)將絞股藍(lán)原料粉碎成粗粉，將絞股藍(lán)粉和提取溶劑按重量比為1:3?6的比例混合，攪拌均勻后回流提取進(jìn)行真空濃縮；
[0009](2)將步驟(I)的濃縮液稀釋，稀釋至原料與稀釋后溶液的重量比為1:1?2，通過(guò)大孔樹脂柱吸附至飽和后先用水洗脫，除雜，至水洗液澄清，再采用以體積濃度為65?80%的乙醇洗至洗脫液無(wú)色后，收集洗脫液減壓回收乙醇并濃縮；
[0010](3)將步驟(2)所得的濃縮液稀釋，稀釋至原料與稀釋后溶液的重量比為1:2?3，再加入與原料重量比為1:1?2的有機(jī)溶劑進(jìn)行絞股藍(lán)皂苷的萃取，反復(fù)萃取，萃取液合并濃縮，回收有機(jī)溶劑后真空干燥，得絞股藍(lán)皂苷。
[0011]進(jìn)一步地，所述步驟(I)的提取溶劑為體積百分比濃度為65?75%的乙醇。
[0012]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中絞股藍(lán)粉和提取溶劑攪拌均勻后在溫度80?85°C下回流提取3次，每次I?2小時(shí)，并在真空壓力為-0.07?-0.095Mpa的條件下，將濾液濃縮至無(wú)醇。
[0013]進(jìn)一步地，所述步驟(2)的具體步驟為:將濃縮液稀釋，用大孔樹脂吸附飽和，上柱流速為I?2BV/h，將吸附至飽和的樹脂先用水洗脫，洗脫速度為I?2BV/h，除雜，至水洗液澄清，再采用乙醇溶液洗脫，洗脫速度為I?2BV/h，收集一定體積洗脫液，將洗脫液于55?70°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.07?-0.095Mpa，將洗脫液濃縮至無(wú)醇。
[0014]進(jìn)一步地，所述步驟(2)中濃縮液稀釋至原料與稀釋后的溶液體積重量比為1:1?2。
[0015]進(jìn)一步地，所述步驟(2)中大孔樹脂型號(hào)為D101、D130、AB_8中的任意一種。
[0016]進(jìn)一步地，所述步驟(3)中的有機(jī)溶劑為正丁醇、乙酸乙酯或正丁醇、乙酸乙酯的組合溶液。
[0017]進(jìn)一步地，所述正丁醇、乙酸乙酯的組合溶液的體積配比為1:0.5?I。
[0018]進(jìn)一步地，所述絞股藍(lán)粉碎成10?20目篩。
[0019]作為優(yōu)選，所述絞股藍(lán)原料為絞股藍(lán)根莖
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于只采用了一次樹脂純化和一次萃取，即達(dá)到純化效果，其損失小且過(guò)柱的收率能達(dá)到85%以上，同時(shí)還具有如下有益效果:
[0021]1、增大了絞股藍(lán)總苷的收率，使提取物的收率提高30%以上；
[0022]2、減少了制備絞股藍(lán)總苷的提取時(shí)間和提取次數(shù)，能使提取時(shí)間控制在I小時(shí)，提取次數(shù)控制在2次，從而極大地縮短了生產(chǎn)周期；
[0023]3、減少提取絞股藍(lán)總苷的溶劑用量，降低生產(chǎn)成本；
[0024]4、本發(fā)明的制備方法有利于大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。

【具體實(shí)施方式】
[0025]以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0026]實(shí)施例1
[0027](I)提取:
[0028]將絞股藍(lán)根莖粉碎成粗粉，過(guò)10目篩，取10kg粗粉至于提取罐中，將絞股藍(lán)粉和濃度為65%的乙醇按重量比為1:4的比例混合，攪拌均勻后在80°C溫度下回流提取3次，每次1.5小時(shí)，將提取液過(guò)濾除去料渣后合并，合并后的濾液于55°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.07Mpa，將濾液濃縮至無(wú)醇。
[0029](2)樹脂純化:
[0030]將步驟(I)的濃縮液稀釋，將濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為
I:1后，用型號(hào)為DlOl的大孔樹脂吸附飽和，上柱流速為lBV/h，將吸附至飽和的樹脂先用水洗脫，除雜，至水洗液澄清，洗脫速度為2BV/h，再采用濃度為65%的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為lBV/h，收集體積為3倍柱體積的洗脫液，最后將洗脫液于55°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.07Mpa，將洗脫液濃縮至無(wú)醇，其過(guò)柱的收率能達(dá)到85%。
[0031](3)液液萃取:
[0032]將步驟(2)所得的濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為1:2后，再加入與絞股藍(lán)根莖重量比為1:1的正丁醇進(jìn)行絞股藍(lán)皂苷的萃取，反復(fù)萃取3次，萃取液合并濃縮，回收正丁醇后真空干燥，得到高純度絞股藍(lán)皂苷5.45kg，絞股藍(lán)皂苷質(zhì)量百分比為98.1%。
[0033]實(shí)施例2
[0034](I)提取:
[0035]將絞股藍(lán)根莖粉碎成粗粉，過(guò)15目篩，取200kg粗粉至于提取罐中，將絞股藍(lán)粉和濃度為75%的乙醇按重量比為1:3的比例混合，攪拌均勻后在85°C溫度下回流提取3次，每次2小時(shí)，將提取液過(guò)濾除去料渣后合并，合并后的濾液于60°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.095Mpa，將濾液濃縮至無(wú)醇。
[0036](2)樹脂純化:
[0037]將步驟(I)的濃縮液稀釋，將濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為
I:2后，用型號(hào)為D130的大孔樹脂吸附飽和，上柱流速為2BV/h，將吸附至飽和的樹脂先用水洗脫，除雜，至水洗液澄清，洗脫速度為lBV/h，再采用濃度為80%的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2BV/h，收集體積為4倍柱體積的洗脫液，最后將洗脫液于70°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.09Mpa，將洗脫液濃縮至無(wú)醇，其過(guò)柱的收率能達(dá)到90%。
[0038](3)液液萃取:
[0039]將步驟(2)所得的濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為1:3后，再加入與絞股藍(lán)根莖重量比為1:2的乙酸乙酯進(jìn)行絞股藍(lán)皂苷的萃取，反復(fù)萃取3次，萃取液合并濃縮，回收正丁醇后真空干燥，得到高純度絞股藍(lán)皂苷5.31kg，絞股藍(lán)皂苷質(zhì)量百分比為 98.7%。
[0040]實(shí)施例3
[0041](I)提取:
[0042]將絞股藍(lán)根莖粉碎成粗粉，過(guò)20目篩，取300kg粗粉至于提取罐中，將絞股藍(lán)粉和濃度為65%的乙醇按重量比為1:6的比例混合，攪拌均勻后在82°C溫度下回流提取3次，每次1.8小時(shí)，將提取液過(guò)濾除去料渣后合并，合并后的濾液于70°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.08Mpa，將濾液濃縮至無(wú)醇。
[0043](2)樹脂純化:
[0044]將步驟(I)的濃縮液稀釋，將濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為
I:2后，用型號(hào)為AB-8的大孔樹脂吸附飽和，上柱流速為2BV/h，將吸附至飽和的樹脂先用水洗脫，除雜，至水洗液澄清，洗脫速度為lBV/h，再采用濃度為70%的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2BV/h，收集體積為5倍柱體積的洗脫液，最后將洗脫液于65°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.08Mpa，將洗脫液濃縮至無(wú)醇，其過(guò)柱的收率能達(dá)到95%。
[0045](3)液液萃取:
[0046]將步驟⑵所得的濃縮液稀釋至絞股藍(lán)根莖與稀釋后溶液的重量比為1:2后，再加入與絞股藍(lán)根莖重量比為1:1的正丁醇與乙酸乙酯的組合液進(jìn)行絞股藍(lán)皂苷的萃取，其中正丁醇與乙酸乙酯的體積配比為1:1，經(jīng)反復(fù)萃取3次，萃取液合并濃縮，回收正丁醇與乙酸乙酯的組合液后真空干燥，得到高純度絞股藍(lán)皂苷5.47kg，絞股藍(lán)皂苷質(zhì)量百分比98.3%。
【權(quán)利要求】
1.一種從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)將絞股藍(lán)原料粉碎成粗粉，將絞股藍(lán)粉和提取溶劑按重量比為1:3?6的比例混合，攪拌均勻后回流提取進(jìn)行真空濃縮； (2)將步驟(I)的濃縮液稀釋，稀釋至原料與稀釋后溶液的重量比為1:1?2，通過(guò)大孔樹脂柱吸附至飽和后先用水洗脫，除雜，至水洗液澄清，再采用以體積濃度為65?80%的乙醇洗至洗脫液無(wú)色后，收集洗脫液減壓回收乙醇并濃縮； (3)將步驟(2)所得的濃縮液稀釋，稀釋至原料與稀釋后溶液的重量比為1:2?3，再加入與原料重量比為1:1?2的有機(jī)溶劑進(jìn)行絞股藍(lán)皂苷的萃取，反復(fù)萃取，萃取液合并濃縮，回收有機(jī)溶劑后真空干燥，得絞股藍(lán)皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(I)的提取溶劑為體積百分比濃度為65?75%的乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(I)中絞股藍(lán)粉和提取溶劑攪拌均勻后在溫度80?85°C下回流提取3次，每次I?2小時(shí)，并在真空壓力為-0.07?-0.095Mpa的條件下，將濾液濃縮至無(wú)醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(2)的具體步驟為:將濃縮液稀釋，用大孔樹脂吸附飽和，上柱流速為I?2BV/h，將吸附至飽和的樹脂先用水洗脫，洗脫速度為I?2BV/h，除雜，至水洗液澄清，再采用乙醇溶液洗脫，洗脫速度為I?2BV/h，收集一定體積洗脫液，將洗脫液于55?70°C下進(jìn)行減壓濃縮，減壓濃縮過(guò)程中抽真空壓力為-0.07?-0.095Mpa，將洗脫液濃縮至無(wú)醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(2)中濃縮液稀釋至原料與稀釋后的溶液體積重量比為1:1?2。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取純化絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(2)中大孔樹脂型號(hào)為D101、D130、AB-8中的任意一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述步驟(3)中的有機(jī)溶劑為正丁醇、乙酸乙酯或正丁醇、乙酸乙酯的組合溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述正丁醇、乙酸乙酯的組合溶液的體積配比為1:0.5?I。
9.根據(jù)權(quán)利要求1?8任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述絞股藍(lán)原料粉碎成10?20目篩。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的從絞股藍(lán)中提取絞股藍(lán)皂苷的方法，其特征在于所述絞股藍(lán)原料為絞股藍(lán)根莖。
【文檔編號(hào)】A61K36/424GK104306428SQ201410481903
【公開日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年9月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月19日
【發(fā)明者】董玲燕, 趙麗娟, 楊盛鑫, 何敏菲, 方明 申請(qǐng)人:寧波中藥制藥有限公司