一種腦蛋白水解物凍干粉針劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種腦蛋白水解物凍干粉針劑及其制備方法，取豬腦，去雜，加純化水勻漿；勻漿液先后經(jīng)胃蛋白酶、胰酶水解，收集清液；清液調(diào)節(jié)pH至1.7～3，加熱至100～110℃，保溫15～45min，然后調(diào)pH至8.0～9.0；8～10kd膜超濾，收集濾液；濾液上柱層析，洗脫液調(diào)pH至8.0～9.0，陰離子交換膜濃縮，0.2μm膜過濾得原液；原液凍結(jié)，然后解凍，加賦形劑，調(diào)pH至6.9～7.5，8～10kd膜超濾，0.2μm膜過濾；灌裝，凍干。所得凍干粉針劑中多肽與對照品相似≥0.90，含有16種氨基酸，總氨基酸的氮量占總氮含量比例≥85％，無需額外補(bǔ)充添加氨基酸，完全依靠豬腦水解制得，穩(wěn)定安全。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物制劑領(lǐng)域，尤其涉及一種腦蛋白水解物凍干粉針劑及其制備方 法。 一種腦蛋白水解物凍干粉針劑及其制備方法

【背景技術(shù)】
[0002] 腦蛋白水解物產(chǎn)品是由原材料經(jīng)檢驗(yàn)、檢疫合格，提取，精制，滅菌等生產(chǎn)工藝制 備得到；腦蛋白水解物的主要成分是低分子肽和游離氨基酸。易通過血腦屏障進(jìn)入腦神經(jīng) 細(xì)胞，低分子肽具有與天然存在的神經(jīng)營養(yǎng)因子相同的作用，能誘導(dǎo)神經(jīng)元分化、維持正常 神經(jīng)細(xì)胞的功能、增加神經(jīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生和突觸傳遞，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受各種損害，調(diào)節(jié)人體 腦代謝、神經(jīng)傳遞及神經(jīng)生長；能提高葡萄糖分解酶活性，增加腦對葡萄糖的無氧能量代 謝，降低腦內(nèi)乳酸的濃度，在缺血缺氧時對神經(jīng)細(xì)胞的線粒體有保護(hù)作用。
[0003] 腦蛋白水解物注射液上世紀(jì)由奧地利EBEWE藥廠進(jìn)口注冊，到2010年底，已有公 開的涉及腦蛋白水解物制劑及工藝的專利申請29件。
[0004] 例如中國發(fā)明專利文獻(xiàn)CN01130523. 1公開了一種腦蛋白水解物注射液生產(chǎn)工 藝：新鮮豬腦去除表面的粘膜及血漬等，勻漿，雙層紗布過濾，胃蛋白酶水解，加胰酶水解， 加鹽酸調(diào)pH值2. 5?3.0, -20?10°C下靜置10?30小時；室溫，雙層紗布過濾，加水， 調(diào)pH值到中性，微孔濾膜過濾澄清，超濾膜超濾，超濾膜進(jìn)行濃縮，濃縮液加熱沸騰15分 鐘，然后迅速冷卻，再微孔濾膜和超濾膜，得到的超濾液，再經(jīng)121°C蒸汽滅菌；根據(jù)所需藥 液量，按國家藥品監(jiān)督管理局2000年12月28日頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn)（編號WS1-XG-25-2000) 計(jì)算需要添加的氨基酸用量，與上述溶液配制成濃配液，然后稀配裝針成成品藥液，滅菌成 無菌制劑。又如CN1857711A公開了一種腦蛋白水解物及其凍干制劑的生產(chǎn)方法：將豬腦勻 漿，胃蛋白酶、胰酶水解，上羥基磷灰石層析柱進(jìn)行吸附分離純化，調(diào)配肽圖，收集目標(biāo)物， 采用對分子截留為8KD的濾膜進(jìn)行超濾，進(jìn)行定氮、氨基酸分析，添加相應(yīng)氨基酸配制成濃 配液，濾膜過濾，即得?，F(xiàn)有的制備工藝在生產(chǎn)制劑時需要額外添加相應(yīng)氨基酸才能制得符 合標(biāo)準(zhǔn)的腦蛋白水解物，而根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局2008年734號關(guān)文件要求，腦蛋 白水解物不得添加外源性氨基酸。因而我們需要進(jìn)行不添加外源性氨基酸的腦蛋白水解物 的制備方法的研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有腦蛋白水解物制備技術(shù)中需要額外添加相應(yīng)氨基酸 的缺陷，提供一種腦蛋白水解物凍干粉針劑及其制備方法，采用該制備方法制備的腦蛋白 水解物凍干粉針劑中小分子肽反相肽圖色譜鑒別與對照品相似度> 〇. 90,無需補(bǔ)充添加外 源性氨基酸，完全依靠豬腦水解制得。
[0006] 本發(fā)明的第一個方面是提供一種腦蛋白水解物凍干粉針劑，所述腦蛋白水解物凍 干粉針劑中小分子多肽與中檢所腦蛋白水解物140697?200602中的小分子多肽的相似度 > 90% ;所述腦蛋白水解物凍干粉針劑含有16種游離氨基酸：門冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、 組氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、精氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、色氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、亮 氨酸、賴氨酸、脯氨酸；所述腦蛋白水解物凍干粉針劑中總的氨基酸的氮含量占所述腦蛋白 水解物凍干粉針劑的總氮量的85%以上。
[0007] 優(yōu)選地，所述腦蛋白水解物凍干粉針劑采用下述步驟制備而成：
[0008] 1)取檢驗(yàn)合格豬腦，去雜（去除血管、脂肪等雜質(zhì)），加純化水勻漿；
[0009] 2)將步驟1)得到的勻漿液先后經(jīng)胃蛋白酶、胰酶水解，收集清液；
[0010] 3)將步驟2)得到的清液調(diào)節(jié)pH至1. 7?3,加熱至100?110°C，保溫15? 45min (優(yōu)選為20?40min，更優(yōu)選為25?35min)，然后調(diào)節(jié)pH至8. 0?9. 0 ;
[0011] 4)冷處理，取清液，8?10kd膜超濾，收集濾液；
[0012] 5)將步驟4)得到的濾液上柱層析，用純化水沖洗柱，解析，收集洗脫液，調(diào)節(jié)pH至 8. 0?9. 0,陰離子交換膜濃縮，0. 2 μ m膜過濾得原液；
[0013] 6)將步驟5得到的原液凍結(jié)，然后解凍，加入賦形劑，控制賦形劑的含量為4? 8wt%，調(diào)節(jié)pH至6. 9?7. 5,8?10kd膜超濾，0· 2 μ m膜過濾；
[0014] 步驟7)灌裝，設(shè)置凍干曲線，凍干，壓塞，軋蓋，既得。
[0015] 其中，步驟4)中所述冷處理，是指將液體冷卻到10°C以下。
[0016] 優(yōu)選地，步驟7)中所述凍干曲線為：將溫度降至_38°C以下，維持3?5小時；開 啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度降至-50°C以下開啟抽真空，當(dāng)真空度低于10Pa，升溫，但控制溫 度低于〇°C，維持4?10小時；再次升溫至10°C?45°C，維持4小時以上。
[0017] 優(yōu)選地，在步驟1)之后，進(jìn)行步驟2)之前，將勻漿液加熱使蛋白質(zhì)變性。
[0018] 進(jìn)一步優(yōu)選地，使蛋白質(zhì)變性具體可采用下述步驟：將勻漿液與75?85°C下保溫 15 ?30min〇
[0019] 優(yōu)選地，步驟6)中所述的賦形劑為甘露醇、聚乙二醇、木糖醇、山梨醇、麥芽糖醇、 乳糖或葡萄糖。
[0020] 優(yōu)選地，步驟5)中上柱層析所使用的層析填料為Amberlite IRA-200。
[0021] 優(yōu)選地，步驟5)中所述陰離子交換膜采用美國進(jìn)口膜DUS-8040C離子膜（孔徑 0· 001 μ m)。
[0022] 優(yōu)選地，步驟2)具體為：調(diào)節(jié)pH至1.7?3.0,加入胃蛋白酶水解，胃蛋白酶水解 于35?45°C下進(jìn)行，保溫3?5h，然后調(diào)節(jié)pH至7. 2?7. 8,加入胰酶水解，胰酶水解于 35?45 °C下進(jìn)行，保溫2?4h，滅活酶，終止水解，收集清液。
[0023] 其中，步驟2)中收集清液可以通過過濾、離心等本領(lǐng)域已知的方式實(shí)現(xiàn)。
[0024] 本發(fā)明的第二個方面是提供一種腦蛋白水解物凍干粉針劑的制備方法，包括以下 步驟：
[0025] 步驟1，取檢驗(yàn)合格豬腦，去雜（去除血管、脂肪等雜質(zhì)），加純化水勻漿；
[0026] 步驟2,將步驟1得到的勻漿液先后經(jīng)胃蛋白酶、胰酶水解，收集清液；
[0027] 步驟3,將步驟2得到的清液調(diào)節(jié)pH至1. 7?3,加熱至100?110°C，保溫15? 45min (優(yōu)選為20?40min，更優(yōu)選為25?35min)，然后調(diào)節(jié)pH至8. 0?9. 0 ;
[0028] 步驟4,冷處理，取清液，8?10kd膜超濾，收集濾液；
[0029] 步驟5,將步驟4得到的濾液上柱層析，用純化水沖洗柱，解析，收集洗脫液，調(diào)節(jié) pH至8. 0?9. 0,陰離子交換膜濃縮，0. 2 μ m膜過濾得原液；
[0030] 步驟6,將步驟5得到的原液凍結(jié)，然后解凍，加入賦形劑，控制賦形劑的含量為 4?8wt%，調(diào)節(jié)pH至6. 9?7. 5,8?10kd膜超濾，0· 2 μ m膜過濾；
[0031] 步驟7灌裝，設(shè)置凍干曲線，凍干，壓塞，軋蓋，既得。
[0032] 其中，步驟4中所述冷處理，是指將液體冷卻到10°C以下。
[0033] 優(yōu)選地，步驟7中所述凍干曲線為：將溫度降至_38°C以下，維持3?5小時；開啟 冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度降至-50°C以下開啟抽真空，當(dāng)真空度低于10Pa，升溫，但控制溫度 低于〇°C，維持4?10小時；再次升溫至10°C?45°C，維持4小時以上。
[0034] 優(yōu)選地，在步驟1之后，進(jìn)行步驟2之前，將勻漿液加熱使蛋白質(zhì)變性。
[0035] 進(jìn)一步優(yōu)選地，使蛋白質(zhì)變性具體可采用下述步驟：將勻漿液于75?85°C下保溫 15 ?30min〇
[0036] 優(yōu)選地，所述制備方法還包括步驟7 :灌裝，100?120°C滅菌,檢漏。
[0037] 優(yōu)選地，步驟6中所述的賦形劑為甘露醇、聚乙二醇、木糖醇、山梨醇、麥芽糖醇、 乳糖或葡萄糖。
[0038] 優(yōu)選地，步驟5中上柱層析所使用的層析填料為Amberlite IRA-200。
[0039] 優(yōu)選地，步驟5中所述陰離子交換膜采用美國進(jìn)口膜DUS-8040C離子膜。
[0040] 優(yōu)選地，步驟2具體為：調(diào)節(jié)pH至1.7?3.0,加入胃蛋白酶水解，胃蛋白酶水解 于35?45°C下進(jìn)行，保溫3?5h，然后調(diào)節(jié)pH至7. 2?7. 8,加入胰酶水解，胰酶水解于 35?45 °C下進(jìn)行，保溫2?4h，滅活酶，終止水解，收集清液。
[0041] 其中，步驟2中收集清液可以通過過濾、離心等本領(lǐng)域已知的方式實(shí)現(xiàn)。與現(xiàn)有技 術(shù)相比，本發(fā)明制備工藝具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0042] 1、本發(fā)明在胃蛋白酶、胰酶水解成多肽與游離氨基酸的清液后，調(diào)pH至1.7? 3. 0,100?110°C加熱30分鐘，可防止水解液中游離氨基酸再次結(jié)合成肽鍵，形成短肽，同 時可以滅活人畜共患病毒，比現(xiàn)有專利更合理，防止多肽與游離氨基酸可逆結(jié)合和滅活人 畜共患病毒在雙酶水解后進(jìn)行，屬于末端控制，無其它生物材料加入，更安全；
[0043] 2、采用Amberlite IRA-200交換填料可大大改善現(xiàn)有陰離子交換不能吸附全部氨 基酸的問題；
[0044] 3、采用陰離子交換膜，在pH8. 0?9. 0溶液中，氨基酸帶負(fù)電荷，與膜表面電荷相 互排斥，游離氨基酸和多肽被截留；陽離子交換膜優(yōu)選美國進(jìn)口膜DUS-8040C離子膜，孔徑 為0. OOlum，孔徑50d分子量，游離氨基酸可進(jìn)一步被截留；
[0045] 4、本發(fā)明工藝中采用了 2次超濾，2次過濾，最大限度降低大分子致敏物質(zhì)、保證 了最終不可滅菌SAL無菌保證值；
[0046] 5、本發(fā)明工藝中采用超濾后凍結(jié)，超濾去除大分子后凍結(jié)可減少氨基酸析出，凍 結(jié)后解凍可以進(jìn)一步去除少量雜質(zhì)；
[0047] 6、本發(fā)明提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑中小分子肽反相肽圖色譜鑒別與腦蛋 白水解物140697?200602的相似度> 0. 90 ;含有16種氨基酸，總氨基酸的氮量占總氮含 量比例> 85%，含有門冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、組氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、精氨酸、纈 氨酸、蛋氨酸、色氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、賴氨酸、脯氨酸等16種氨基酸。
[0048] 本發(fā)明工藝簡單，制得的腦蛋白水解物凍干粉針劑中小分子多肽與16種游離氨 基酸含量恒定，所得腦蛋白水解物凍干粉針劑中多肽與對照品相似> 〇. 90,含有16種氨基 酸，總氨基酸的氮量占總氮含量比例>85%，無需額外補(bǔ)充添加氨基酸，完全依靠豬腦水解 制得，藥效穩(wěn)定，更安全；凍干粉針劑中水分含量小于3%，制劑穩(wěn)定，物質(zhì)不易改變，保存 期質(zhì)量更穩(wěn)定，降低不良反應(yīng)發(fā)生率，提高用藥安全。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0049] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例1制備工藝中的凍干曲線圖；
[0050] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑與中檢所腦蛋白水解物 140697?200602的對比指紋圖譜；
[0051] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例1提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的指紋圖譜；
[0052] 圖4為中檢所腦蛋白水解物140697?200602的指紋圖譜；
[0053] 圖5為本發(fā)明實(shí)施例1提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑與中檢所腦蛋白水解物 140697?200602的重疊指紋圖譜；
[0054] 圖6為中檢所腦蛋白水解物140697?200602的16種氨基酸的高效液相圖譜；
[0055] 圖7為本發(fā)明實(shí)施例1提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的游離氨基酸的高效液相 圖譜；
[0056] 圖8為本發(fā)明實(shí)施例1提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的總氨基酸的高效液相圖 譜；
[0057] 圖9為本發(fā)明實(shí)施例2制備工藝中的凍干曲線圖；
[0058] 圖10為本發(fā)明實(shí)施例2提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑與中檢所腦蛋白水解物 140697?200602的對比指紋圖譜；
[0059] 圖11為本發(fā)明實(shí)施例2提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的指紋圖譜；
[0060] 圖12為本發(fā)明實(shí)施例2提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑與中檢所腦蛋白水解物 140697?200602的重疊指紋圖譜；
[0061] 圖13為本發(fā)明實(shí)施例2提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的游離氨基酸的高效液 相圖譜；
[0062] 圖14為本發(fā)明實(shí)施例2提供的腦蛋白水解物凍干粉針劑的總氨基酸的高效液相 圖譜。

【具體實(shí)施方式】
[0063] 下面參照附圖，結(jié)合具體的實(shí)施方式對本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，以更好地理解本 發(fā)明。
[0064] 實(shí)施例1
[0065] 腦組織（檢疫合格）去除血管、脂肪等等雜質(zhì)后取100kg，加1. 5倍體積純化水勻 漿，于80°C保溫25分鐘，冷卻，鹽酸調(diào)pHl. 7,胃蛋白酶水解，42°C保溫3小時，氫氧化鈉調(diào) PH7. 6,胰酶水解，42°C保溫2小時，離心收集清液；鹽酸調(diào)pH2,105°C下保溫30分鐘，氫氧 化鈉調(diào)PH8. 5 ;冷處理，抽取上清，10kd膜超濾去除大分子，收集濾液150L ;上柱層析，用純 化水沖洗柱，解析，收集洗脫液，調(diào)節(jié)pH至8. 0?9. 0,用DUS-8040C離子膜濃縮50L，0. 2 μ m 膜除菌過濾，得原液，-15°C以下凍結(jié)保存；原液解凍，加入賦形劑5 %，調(diào)節(jié)pH6. 9?7. 5， 8?10kd膜超濾，0.2μπι膜除菌過濾，灌裝；設(shè)置凍干曲線（參照圖1 :灌裝制品溫度達(dá) 至卜40°C以下時，繼續(xù)降溫3小時，且冷凝器的溫度達(dá)到-50°C以下時，抽真空，當(dāng)真空系統(tǒng) 的真空度低于l〇Pa時，一次干燥溫度設(shè)定為0°C以下干燥，維持5小時；二次干燥溫度設(shè)定 為10°C?45°C，到達(dá)溫度恒溫干燥4小時以上），凍干，真空壓塞，乳蓋，每支為含總氮30mg 的規(guī)格。
[0066] 相似度測定：
[0067] 對照品為中檢所腦蛋白水解物140697?200602。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為 填充劑（250mm X 4mm，粒徑5μπι);以0.1 %三氟醋酸溶液為流動相A ;以0.085 %三氟醋酸 乙腈溶液一0. 1 %三氟醋酸溶液（80:20)為流動相B，按表1進(jìn)行梯度洗脫；流速為每分鐘 0.8ml ;檢測波長為276nm。柱溫40°C;按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計(jì)算，結(jié)果如圖 2?5和表2所不。
[0068] 表1相似度測定中的梯度洗脫表
[0069]

【權(quán)利要求】
1. 一種腦蛋白水解物凍干粉針劑，其特征在于，所述腦蛋白水解物凍干粉針劑中小分 子多肽與中檢所腦蛋白水解物140697?200602中的小分子多肽的相似度> 90% ;所述腦 蛋白水解物凍干粉針劑含有16種游離氨基酸：門冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸、組氨酸、甘氨酸、 蘇氨酸、丙氨酸、精氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、色氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、賴氨酸、脯 氨酸；所述腦蛋白水解物凍干粉針劑中總的氨基酸的氮含量占所述腦蛋白水解物凍干粉針 劑的總氮量的85%以上。
2. 所述腦蛋白水解物凍干粉針劑采用下述步驟制備而成： 1) 取檢驗(yàn)合格豬腦，去雜，加純化水勻漿； 2) 將步驟1)得到的勻漿液先后經(jīng)胃蛋白酶、胰酶水解，收集清液； 3) 將步驟2)得到的清液調(diào)節(jié)pH至1. 7?3,加熱至100?110°C，保溫15?45min， 然后調(diào)節(jié)pH至8. 0?9. 0 ; 4) 冷處理，取上清液，8?10kd膜超濾，收集濾液； 5) 將步驟4)得到的濾液上柱層析，用純化水沖洗柱，解析，收集洗脫液，調(diào)節(jié)pH至 8. 0?9. 0,陰離子交換膜濃縮，0. 2 μ m膜過濾得原液； 6) 將步驟5得到的原液凍結(jié)，然后解凍，加入賦形劑，控制賦形劑的含量為4?8wt %， 調(diào)節(jié)pH至6. 9?7. 5,8?10kd膜超濾，0· 2 μ m膜過濾； 步驟7)灌裝，設(shè)置凍干曲線，凍干，壓塞，乳蓋，既得。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的腦蛋白水解物凍干粉針劑，步驟7)中所述凍干曲線為：將溫 度降至-38°C以下，維持3?5小時；開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度降至-50°C以下開啟抽真 空，當(dāng)真空度低于l〇Pa，升溫，但控制溫度低于0°C，維持4?10小時；再次升溫至10°C? 45°C，維持4小時以上。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的腦蛋白水解物凍干粉針劑，其特征在于，在步驟1)之后，進(jìn)行 步驟2)之前，將勻漿液加熱使蛋白質(zhì)變性。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的腦蛋白水解物凍干粉針劑，其特征在于，步驟6)中所述的賦 形劑為甘露醇、聚乙二醇、木糖醇、山梨醇、麥芽糖醇、乳糖或葡萄糖。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦蛋白水解物凍干粉針劑，其特征在于，步驟5)中上柱層析 所使用的層析填料為Amberlite IRA-200,所述陰離子交換膜采用美國進(jìn)口膜DUS-8040C 離子膜。
7. -種腦蛋白水解物凍干粉針劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1，取檢驗(yàn)合格豬腦，去雜，加純化水勻漿； 步驟2,將步驟1得到的勻漿液先后經(jīng)胃蛋白酶、胰酶水解，收集清液； 步驟3,將步驟2得到的清液調(diào)節(jié)pH至1. 7?3,加熱至100?110°C，保溫15?45min， 然后調(diào)節(jié)pH至8. 0?9. 0 ; 步驟4,冷處理，取上清液，8?10kd膜超濾，收集濾液； 步驟5,將步驟4得到的濾液上柱層析，用純化水沖洗柱，解析，收集洗脫液，調(diào)節(jié)pH至 8. 0?9. 0,陰離子交換膜濃縮，0. 2 μ m膜過濾得原液； 步驟6,將步驟5得到的原液凍結(jié)，然后解凍，加入賦形劑，控制賦形劑的含量為4? 8wt%，調(diào)節(jié)pH至6. 9?7. 5,8?10kd膜超濾，0· 2 μ m膜過濾； 步驟7灌裝，設(shè)置凍干曲線，凍干，壓塞，乳蓋，既得。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟7中所述凍干曲線為：將溫度降 至-38°C以下，維持3?5小時；開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度降至-50°C以下開啟抽真空，當(dāng) 真空度低于l〇Pa，升溫，但控制溫度低于0°C，維持4?10小時；再次升溫至10°C?45°C， 維持4小時以上。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，在步驟1之后，進(jìn)行步驟2之前，將勻 漿液加熱使蛋白質(zhì)變性。
10. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟6中所述的賦形劑為甘露醇、聚 乙二醇、木糖醇、山梨醇、麥芽糖醇、乳糖或葡萄糖；步驟5中上柱層析所使用的層析填料為 Amberlite IRA-200,陰離子交換膜采用美國進(jìn)口膜DUS-8040C離子膜。
【文檔編號】A61K38/01GK104096214SQ201410255066
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年6月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月10日
【發(fā)明者】張莉, 李捍雄 申請人:廣州一品紅制藥有限公司