脂肽組合物和相關(guān)方法
【專利摘要】一種脂肽組合物和相關(guān)方法。本發(fā)明提供新的粉末達(dá)托霉素制劑，其在固態(tài)時具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性和較快的重建時間。該組合物的一些實例包含達(dá)托霉素和蔗糖。
【專利說明】脂肽組合物和相關(guān)方法
[0001] 本申請是中國申請?zhí)枮?01080062122. 3、發(fā)明名稱為"脂肽組合物和相關(guān)方法"且 申請日為2010年11月23日的專利申請（PCT申請?zhí)枮镻CT/US2010/057910)的分案申請。
[0002] 相關(guān)申請
[0003] 本申請要求2009年11月23日提交的美國臨時專利申請61/263, 784的權(quán)益，將 其全部內(nèi)容通過引用的方式并入本申請。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0004] 本發(fā)明涉及用于在液體稀釋劑中重建以形成用于腸胃外給藥的藥物組合物的改 善的脂肽組合物，以及制備固體脂肽組合物的方法。優(yōu)選改善的脂肽組合物包括具有在含 水液體中增加的重建速率和/或者增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的固體達(dá)托霉素制劑。

【背景技術(shù)】
[0005] 達(dá)托霉素為適用于治療復(fù)雜性皮膚和皮膚結(jié)構(gòu)感染以及菌血癥（包括具有可疑 的或者被證實的感染性心內(nèi)膜炎的菌血癥）的環(huán)狀脂肽抗生素。用于注射的達(dá)托霉素可 靜脈內(nèi)給藥以治療由多重革蘭氏陽性微生物的易感菌株包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 (methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)引起的指定的感染。用于注射的 達(dá)托霉素 （CUBICIN?，Cubist Pharmaceuticals, Inc.，Lexington, MA)作為凍干粉末來 提供，將其重建且復(fù)合為用于腸胃外給藥的藥物組合物。所述重建的達(dá)托霉素組合物可復(fù) 合為用于腸胃外給藥的藥物組合物，例如通過與醫(yī)藥上適當(dāng)量的藥物稀釋劑（例如〇. 9% 氯化鈉水溶液）組合。所述稀釋劑可相同或者不同。所述包含達(dá)托霉素的腸胃外藥物組合 物可通過靜脈內(nèi)輸注來給藥。含有達(dá)托霉素的凍干粉末可能需要15-45分鐘來在藥物稀釋 劑中重建，這取決于重建操作。
[0006] 達(dá)托霉素（圖1)可由微生物玫瑰孢鏈霉菌（Streptomyces roseosporus)與正癸 酸的填料的發(fā)酵產(chǎn)物衍生得到。Baltz 在 Biotechnology of Antibiotics. 2nd Ed.，ed. W. R. Strohl (New York:Marcel Dekker, Inc. )，1997, pp. 415-435 中開始嘗試由發(fā)酵產(chǎn)物中 的結(jié)構(gòu)相似的組分中分離達(dá)托霉素，這導(dǎo)致鑒別出其它結(jié)構(gòu)相似的化合物包括無水-達(dá)托 霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖4)。無水-達(dá) 托霉素（圖2)可在進(jìn)行由發(fā)酵產(chǎn)物中的結(jié)構(gòu)相似的組分中分離達(dá)托霉素的技術(shù)的過程中 形成。無水-琥珀酰亞胺形式的再水化產(chǎn)生第二降解產(chǎn)物，其含有β-天冬氨?；抑付?為達(dá)托霉素的 β_ 異構(gòu)體形式（圖 3)。Kirsch et al. (Pharmaceutical Research, 6:387 -393, 1989，"Kirsch"）披露了在純化達(dá)托霉素過程中產(chǎn)生的無水-達(dá)托霉素和達(dá)托霉素的 β _異構(gòu)體。Kirsch描述了通過控制pH條件和溫度條件而使無水-達(dá)托霉素和β -異構(gòu)體 的水平最小化的方法。然而，Kirsch不能使達(dá)托霉素穩(wěn)定且不能防止達(dá)托霉素向無水-達(dá) 托霉素的轉(zhuǎn)化及其隨后向β_異構(gòu)體的異構(gòu)化。Kirsch也不能防止達(dá)托霉素降解為與無 水-達(dá)托霉素和β_異構(gòu)體不相關(guān)的其它降解產(chǎn)物。
[0007] 美國專利6, 696, 412披露了存在于發(fā)酵產(chǎn)物中的若干額外的化合物，其中達(dá)托霉 素由所述發(fā)酵產(chǎn)物衍生得到，且該專利提供了產(chǎn)生增加的純度的純化達(dá)托霉素的方法。所 述額外的化合物包括具有圖4的化學(xué)結(jié)構(gòu)的達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物。所述達(dá)托霉素純化 方法可包括形成達(dá)托霉素膠束、通過濾過除去低分子量污染物，然后將含有達(dá)托霉素的膠 束濾液轉(zhuǎn)化為非膠束狀態(tài)，接著進(jìn)行陰離子交換和反滲透滲濾以獲得高純度達(dá)托霉素，然 后將其凍干。
[0008] 在凍干達(dá)托霉素粉末中的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性的一種測量為相比于結(jié)構(gòu)相似 化合物包括無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解 產(chǎn)物（圖4)的量而言的存在于重建達(dá)托霉素組合物中的達(dá)托霉素（圖1)的量。相比于這些 結(jié)構(gòu)相似化合物的量而言的達(dá)托霉素的量可在含水稀釋劑中重建之后通過高效液相色譜 (HPLC)來測量。達(dá)托霉素的純度和結(jié)構(gòu)相似化合物（例如圖2-4)的量可根據(jù)由HPLC(例 如本申請實施例4)獲得的峰面積來確定以提供固體形式的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的測量。 達(dá)托霉素純度和化學(xué)穩(wěn)定性也可隨時間的推移在液體重建達(dá)托霉素組合物中測量，如同液 體形式的重建達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的測量。
[0009] 需要在藥物稀釋劑中快速重建（例如在小于約5分鐘的時間內(nèi)）以形成可復(fù)合為 藥物組合物的重建脂肽組合物的固體脂肽組合物。例如，為了重建500mg小瓶的凍干的用 于注射的達(dá)托霉素凍干粉末與10mL〇. 9%氯化鈉水溶液合并，靜置10分 鐘（或者更長時間）然后輕微旋轉(zhuǎn)或者渦旋"幾分鐘"以形成重建達(dá)托霉素組合物，之后成 形以制備腸胃外達(dá)托霉素藥物組合物。
[0010] 還需要在固體和/或者重建形式中具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性（即隨時間的推移，較 高的總體達(dá)托霉素純度百分?jǐn)?shù)）的固體達(dá)托霉素組合物，這提供了較長的貯存期限、對更 多不同的貯存條件（例如更高的溫度或者濕度）的增加的耐受性以及在重建為用于腸胃外 給藥的液體制劑之后增加的化學(xué)穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明涉及用于在含水稀釋劑中重建以形成藥物組合物的固體脂肽組合物。通過 將包含所述脂肽的藥用水溶液轉(zhuǎn)化為固體脂肽組合物（例如通過凍干、噴霧干燥等）來制 備所述脂肽組合物。所述固體脂肽組合物可隨后在含水藥用稀釋劑中重建以形成用于腸胃 外給藥的藥物產(chǎn)物。
[0012] 在第一個實施方案中，通過增加脂肽水溶液的pH(優(yōu)選增加至約6. 5-7. 5的pH，最 優(yōu)選地約7. 0)、之后凍干所述溶液以形成固體脂肽組合物可不預(yù)期地減少在含水稀釋劑中 重建固體脂肽組合物的時間。例如，相比于其它可比較的在約4. 7的pH凍干的達(dá)托霉素制 齊U，通過凍干pH為約7.0的液體達(dá)托霉素溶液（不含糖或者甘氨酸）制備的固體達(dá)托霉素 組合物在〇. 9 %氯化鈉水溶液中更快地重建。
[0013] 通過將脂肽與甘氨酸或者糖（優(yōu)選非還原性糖）合并、之后將溶液轉(zhuǎn)化為固體脂 肽也加速了某些固體脂肽組合物在含水稀釋劑中的重建速率。例如，由包含達(dá)托霉素和非 還原性糖或者甘氨酸的pH為約7. 0的溶液形成的表6中的500mg的凍干藥物達(dá)托霉素組 合物在0.9%氯化鈉水溶液中在小于2分鐘的時間內(nèi)重建，其中大部分組合物在小于1分鐘 的時間內(nèi)重建。
[0014] 固體藥物脂肽制劑可為通過以下方法獲得的產(chǎn)物：(a)形成pH高于脂肽等電點 (例如高于達(dá)托霉素的約3. 8)的脂肽水溶液；(b)將甘氨酸或者糖（優(yōu)選非還原性糖）在 含有脂肽的水溶液中溶解以形成液體脂肽制劑；（c)將液體脂肽制劑的pH調(diào)節(jié)為約6. 5至 7. 5 ;和（d)將液體脂肽制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物脂肽組合物（例如凍干）。例如，在0. 9%氯化 鈉水溶液稀釋劑中在小于約2分鐘的時間內(nèi)重建的凍干達(dá)托霉素藥物制劑可通過如下制 備：（a)形成pH為約4. 5-5. 0 (例如pH為約4. 7)的達(dá)托霉素水溶液；(b)將包含磷酸鹽、 枸櫞酸鹽、馬來酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入達(dá)托霉素水溶液中以形成緩沖的達(dá)托霉 素制劑；（c)將一種或者多種糖在緩沖的達(dá)托霉素制劑中溶解以形成含有約2. 5% w/v至 約 25% w/v(例如約 3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、 16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%或者24%)的糖的緩沖的達(dá)托霉素糖制劑， 所述一種或者多種糖選自海藻糖、蔗糖、甘露醇和它們的組合；（d)調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖 制劑的pH至約6. 5至7. 5 (例如7. 0)的pH ;和（e)凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形 成固體藥物達(dá)托霉素組合物。優(yōu)選地，所述一種或者多種糖包括蔗糖、蔗糖和甘露醇，或者 海藻糖。
[0015] 在第二個實施方案中，本發(fā)明提供了具有改善的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的達(dá)托霉素 組合物，如隨時間的推移較高的總體達(dá)托霉素純度百分?jǐn)?shù)所測量（如通過實施例4的方法 的HPLC所確定）。令人驚訝的是，相比于在不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素固體制劑中的達(dá) 托霉素而言，在含有某些優(yōu)選的組合物（例如達(dá)托霉素與蔗糖或者海藻糖合并）的固體制 劑中包含的達(dá)托霉素在化學(xué)上更加穩(wěn)定。通過比較來自根據(jù)實施例4分別獲得的多個固體 達(dá)托霉素制劑的總體達(dá)托霉素純度測量結(jié)果來測量固體形式的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性。較 高的化學(xué)穩(wěn)定性作為根據(jù)實施例4在兩個樣品之間較高的可比較的達(dá)托霉素總體純度測 量結(jié)果來測量。例如，在〇. 9%氯化鈉水溶液中重建之前的6個月貯存期內(nèi)，由含有一種或 者多種非還原性糖諸如蔗糖的固體達(dá)托霉素組合物測量的達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性不預(yù)期 地增加10%和大于90%之間的數(shù)值（相比于由不含任何糖的固體達(dá)托霉素組合物測量的 達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性而言）。
[0016] 同樣令人驚訝的是，相比于可比較的不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素制劑而言，在 含有一種或者多種某些非還原性糖（例如蔗糖）的達(dá)托霉素制劑中，在各個溫度條件下在 重建液體達(dá)托霉素溶液中觀察到持續(xù)多達(dá)14天的較高的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性。例如，對于 含有達(dá)托霉素以及某些非還原性糖（例如蔗糖）的組合物而言，歷時14天的重建溶液中的 達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性同樣不預(yù)期地增加。
[0017] 固體藥物達(dá)托霉素制劑的優(yōu)選實例包含約2. 5%至25. 0%的一種或者多種非還 原性糖或者甘氨酸。固體藥物達(dá)托霉素制劑的其它優(yōu)選實例包含約2. 5%至25. 0%的選自 蔗糖、甘露醇和海藻糖的糖。特別優(yōu)選的固體藥物達(dá)托霉素制劑基本上由達(dá)托霉素、蔗糖、 磷酸鈉緩沖劑（例如磷酸氫二鈉，Na 2HP04)和多達(dá)約8 %的其它物質(zhì)（例如根據(jù)實施例4在 214nm經(jīng)HPLC峰面積所測量）組成。
[0018] 固體藥物達(dá)托霉素制劑可通過轉(zhuǎn)化包含達(dá)托霉素和非還原性糖（例如在溶液中 15-20W/V%的蔗糖）的pH高于達(dá)托霉素的等電點（例如pH為約3. 7或者更高）的水溶液 來獲得。優(yōu)選地，當(dāng)轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑（例如粉末劑）時，含有達(dá)托霉素和非 還原性糖（例如蔗糖）的水溶液的pH為約4. 5-8. 0 (包括例如pH值為4. 5-7. 5、4· 7-7. 5、 5. 0-7. 5、5. 5-7. 5、4. 7-7. 0、5. 0-7. 0、5. 5-7. 0、6. 0-7. 0 和 6. 5-7. 0 以及介于它們之間的 值）。優(yōu)選地，具有約2分鐘或者更少的在含水稀釋劑中的重建時間的凍干達(dá)托霉素藥物制 劑通過如下制備：（a)形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；(b)將包含磷酸鹽、枸櫞酸 鹽、TRIS、馬來酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素水溶液中；（c)將糖（例如非 還原性糖諸如蔗糖）在含有達(dá)托霉素的水溶液中溶解以形成緩沖的達(dá)托霉素糖制劑；（d) 調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH為約6. 5至8. 0(包括例如pH值為6. 5-7. 5、6. 5-7. 0、6. 5、 7. Ο、7. 5、8. Ο、7. 0-8. Ο、7. 0-7. 5以及介于它們之間的值）；和（e)凍干所述緩沖的達(dá)托霉素 糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素制劑。
[0019] 本申請所使用的所有科技術(shù)語的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解的 含義相同，除非另作限定。以下描述適宜的方法和物質(zhì)，但類似于或者等同于本申請所述方 法和物質(zhì)的方法和物質(zhì)也可用于本發(fā)明的實施或者測試。將本申請?zhí)峒暗乃泄_出版 物、專利申請、專利和其它參考文獻(xiàn)的全部內(nèi)容通過引用的方式并入本申請。在出現(xiàn)矛盾的 情況下，由本申請的說明（包括定義）決定。另外，物質(zhì)、方法和實施例僅僅是示例性的而 不是限制性的。
[0020] 通過說明書和權(quán)利要求，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)勢將是顯而易見的。
[0021] 本申請還涉及以下各項：
[0022] 項1.固體達(dá)托霉素制劑，其相比于根據(jù)實施例la復(fù)合的達(dá)托霉素制劑而言具有 改善的重建和在粉末和重建形式中增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性，所述固體達(dá)托霉素制劑包含達(dá) 托霉素、蔗糖以及磷酸鹽緩沖劑；其中
[0023] a.所述固體達(dá)托霉素制劑包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3和實施例4通 過重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜（HPLC)在214nm測量的達(dá)托霉素的吸光度（曲線下 面積）除以總體曲線下面積的比值來計算；且
[0024] b.所述達(dá)托霉素制劑通過如下獲得：
[0025] i.形成包含105mg/mL(10. 5% w/v)達(dá)托霉素、7. lmg/mL(50mM)磷酸氫二鈉緩沖劑 和lSOmg/mLQS% w/v)鹿糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液；且
[0026] i i.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體達(dá)托霉素制劑。
[0027] 項2.固體達(dá)托霉素制劑，其包含達(dá)托霉素以及選自下述的物質(zhì)：甘氨酸；一種或 者多種糖；以及兩種或者更多種非還原性糖的組合；所述達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg 的固體藥物達(dá)托霉素組合物在4分鐘或者更少的時間內(nèi)在25°C溶解于lOmLO. 9%氯化鈉水 溶液中。
[0028] 項3.項1的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖為非還原性糖且所述達(dá)托霉素制劑進(jìn)一步 包含緩沖劑。
[0029] 項4.項2-3中任一項的達(dá)托霉素制劑，其中
[0030] a.至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3和實施例4通過重建達(dá)托霉素溶液的高效 液相色譜（HPLC)在214nm測量的達(dá)托霉素的吸光度（曲線下面積）除以總體曲線下面積 的比值來計算；且
[0031] b.所述達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在1分鐘或者 更少的時間內(nèi)在25°C在4. 7和7. 0之間的pH溶解于lOmLO. 9%氯化鈉水溶液中。
[0032] 項5.項2-4中任一項的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖選自蔗糖、海藻糖和甘露醇。
[0033] 項6.項2-4中任一項的達(dá)托霉素制劑，其中所述糖包含蔗糖，且所述達(dá)托霉素制 劑通過如下獲得：
[0034] a.形成包含達(dá)托霉素和約15. 0% -約20% w/v蔗糖的pH為約4. 7-7. 0的達(dá)托霉 素水溶液，且
[0035] b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
[0036] 項7.項6的達(dá)托霉素制劑，其中所述達(dá)托霉素水溶液的pH為約7. 0。
[0037] 項8.項6-7的達(dá)托霉素制劑，其中所述達(dá)托霉素制劑通過如下獲得：
[0038] a.形成包含達(dá)托霉素、磷酸氫二鈉緩沖劑和約15. 0% w/v蔗糖的pH為約7. 0的 達(dá)托霉素水溶液，且
[0039] b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
[0040] 項9.固體藥物達(dá)托霉素制劑，通過如下獲得：
[0041] a.形成包含達(dá)托霉素、50mM含有磷酸鹽的緩沖劑和約15. 0%蔗糖的pH為約7. 0 的達(dá)托霉素水溶液，且
[0042] b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑，
[0043] 其中所述固體藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物 在2分鐘或者更少的時間內(nèi)在25°C溶解于10mL0. 9%氯化鈉水溶液中。
[0044] 項10.項9的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù) 表3和實施例4通過重建達(dá)托霉素溶液的高效液相色譜（HPLC)在214nm測量的達(dá)托霉素 的吸光度（曲線下面積）除以總體曲線下面積的比值來計算。
[0045] 項11.項1-10中任一項的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其進(jìn)一步的特征在于相比于通 過將達(dá)托霉素和達(dá)托霉素-相關(guān)化合物在〇. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中凍干而獲得的固體 藥物達(dá)托霉素制劑而言，所述達(dá)托霉素制劑在40°C在氮氣下儲存1個月后具有較低量的一 種或者多種選自下述的物質(zhì)：無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖3)和達(dá) 托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖4)，其中所述物質(zhì)的量根據(jù)實施例4的方法通過HPLC在214nm 進(jìn)行檢測。
[0046] 項12.液體藥物達(dá)托霉素制劑，其具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性，且通過如下 獲得：
[0047] a.形成包含達(dá)托霉素、50mM含有磷酸鹽的緩沖劑和約15. 0%蔗糖的pH為約7. 0 的達(dá)托霉素水溶液，
[0048] b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑，然后
[0049] c.將所述固體藥物達(dá)托霉素制劑在含水稀釋劑中重建以形成液體藥物達(dá)托霉素 制劑。
[0050] 項13.項12的液體藥物達(dá)托霉素制劑，其中所述液體藥物達(dá)托霉素制劑針對靜脈 內(nèi)給藥來配制。
[0051] 項14.制品，包含項1-13中任一項的藥物達(dá)托霉素制劑。
[0052] 項15.制備固體藥物達(dá)托霉素制劑的方法，所述固體藥物達(dá)托霉素制劑具有增加 的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性，所述增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性通過在含水稀釋劑中重建后3-14 天在固體達(dá)托霉素制劑中的結(jié)構(gòu)上類似于達(dá)托霉素的物質(zhì)的形成速率降低所測量，其中所 述結(jié)構(gòu)上類似于達(dá)托霉素的物質(zhì)選自無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖 3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖4);所述結(jié)構(gòu)上類似于達(dá)托霉素的物質(zhì)的形成速率根據(jù) 實施例4來測量；且所述方法包括：
[0053] a.形成包含達(dá)托霉素和約5. 0 - 20. 0% w/v蔗糖的pH為約4. 5至7. 5的達(dá)托霉 素水溶液，且
[0054] b.將所述含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑。
[0055] 項16.項15的方法，其中所述達(dá)托霉素水溶液具有約7. 0的pH且包含達(dá)托霉素、 15% w/v蔗糖和50nM磷酸鈉緩沖劑；且所述達(dá)托霉素水溶液通過凍干轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托 霉素制劑。
[0056] 項17.項15-16中任一項的方法，其特征在于相對于在40°C保持6個月后通過實 施例4的方法測量的不含蔗糖的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度百分?jǐn)?shù)而言， 通過實施例4的方法測量的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度百分?jǐn)?shù)增加至少 10%。
[0057] 項18.項17的方法，其中通過實施例5計算的40°C的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于 1. 000。
[0058] 項19.項1-11中任一項的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過實施例5計算的40°C 的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于1. 〇〇〇。
[0059] 項20.項1-11中任一項的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過實施例5計算的40°C 的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于〇. 500。
[0060] 項21.項1-11中任一項的固體藥物達(dá)托霉素制劑，其中通過實施例5計算的40°C 的達(dá)托霉素穩(wěn)定性比率小于〇. 300。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0061] 圖1為達(dá)托霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0062] 圖2為無水-達(dá)托霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0063] 圖3為達(dá)托霉素的β -異構(gòu)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0064] 圖4為達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0065] 圖5為表6,其列出優(yōu)選的達(dá)托霉素組合物的實例。這些組合物制備為液體溶液， 然后凍干以提供在含水藥物稀釋劑中在小于2分鐘的時間內(nèi)重建的固體藥物達(dá)托霉素制 劑（包括在小于1分鐘的時間內(nèi)重建的組合物）。在表6中，"重建時間"是指"制劑（固 態(tài)）"欄中所述的約50〇11^凍干達(dá)托霉素組合物在室溫（約25°〇在1〇1^0.9%氯化鈉水 溶液中溶解所需的時間。
[0066]圖6為表7,其列出其它達(dá)托霉素組合物的實例。這些組合物制備為液體溶液，然 后凍干以提供在含水藥物稀釋劑中在2分鐘或者更長的時間內(nèi)重建的固體藥物脂肽制劑。 在表7中，"重建時間"是指約50〇11^凍干達(dá)托霉素溶液在室溫（約25°〇在1〇1^0.9%氯 化鈉水溶液中溶解所需的時間。
[0067] 圖7為表8,其列出含有糖的達(dá)托霉素組合物的實例。
[0068] 圖8為表9,其顯示根據(jù)實施例4各種達(dá)托霉素制劑所測量和計算的總體達(dá)托霉素 純度的變化百分?jǐn)?shù)。

【具體實施方式】
[0069] 具有加速重建的脂肽組合物
[0070] 在本發(fā)明的第一個實施方案中，提供了具有小于5分鐘的在含水藥物稀釋劑中的 重建時間的固體藥物脂肽制劑。例如，通過凍干包含甘氨酸或者一種或者多種糖的達(dá)托霉 素溶液而制備的500mg的固體達(dá)托霉素藥物脂肽制劑可在10mL0. 9%氯化鈉水溶液中在室 溫（約25°C)在4分鐘或者更少的時間內(nèi)溶解（包括4、3、2、1和小于1分鐘的溶解時間）。
[0071] 不預(yù)期地，相比于由較低pH(例如4. 7)的可比較的液體脂肽制劑獲得的其它相同 的固體藥物脂肽制劑而言，由pH為約7. 0的液體脂肽制劑獲得的某些固體藥物脂肽制劑以 較快的速率在含水藥物稀釋劑中重建。例如，pH值為4. 7和7. 0的具有相同組成（不含糖 或者甘氨酸）的兩份達(dá)托霉素水溶液在凍干后分別形成在〇. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中以 5. 0分鐘（對于ρΗ4· 7的溶液）和1. 4分鐘（對于ρΗ7· 0的溶液）重建的粉末（參見表6 和表7)。此外，將甘氨酸或者糖（優(yōu)選地，一種或者多種非還原性糖）加入至達(dá)托霉素制劑 中同樣增加了所得的固體藥物脂肽制劑的重建速率。
[0072] 具有加快的重建速率的固體藥物脂肽制劑可由脂肽水溶液在適當(dāng)?shù)膒H(例如 4. 7-7. 0)和溫度（例如2-10°C )獲得。一般而言，固體藥物脂肽制劑可由脂肽水溶液在高 于脂肽的等電點的pH制備。優(yōu)選地，所述脂肽包括達(dá)托霉素（圖1)。制備固體藥物達(dá)托霉 素制劑的優(yōu)選方法在實施例2a和2b中有述。固體藥物達(dá)托霉素制劑可由達(dá)托霉素水溶液 在高于達(dá)托霉素的等電點的pH(例如高于約3. 7或者3. 8的pH，包括4. 5、4. 7的pH值以及 其它本申請披露的較高的pH值）且在2-10°C的溫度制備。所述達(dá)托霉素可在冷凍的無菌 注射用水（sWFI)溶液中以125-130mg/mL的濃度在pH3.0以及隨后調(diào)節(jié)為理想pH(通過加 入氫氧化鈉（例如3. 0-10. 0N，包括3. 0N和10. 0N))的pH在約2-KTC的溫度來獲得。所 述pH可例如通過加入氫氧化鈉、鹽酸、磷酸和/或者乙酸來調(diào)節(jié)。
[0073] 緩沖劑任選加入至pH高于約4. 7的脂肽水溶液中。緩沖劑可包括例如，包括磷酸 根、枸櫞酸根、馬來酸根或者碳酸根部分或者它們的組合，以及藥用抗衡離子的試劑。緩沖 劑的量可基于緩沖劑與達(dá)托霉素的摩爾比（例如表6所述）進(jìn)行選擇。緩沖劑可以無水或 者含水形式加入。緩沖劑的具體實例為磷酸的鈉鹽或者鉀鹽、硼酸的鈉鹽或者鉀鹽、枸櫞酸 的鈉鹽或者鉀鹽、碳酸的鈉鹽或者鉀鹽、磷酸鈉（例如磷酸氫二鈉 ）、TRIS (三（羥基甲基） 氨基甲烷和馬來酸鹽。在一個方面，所述緩沖劑選自磷酸氫二鈉（Na2HP04)、枸櫞酸鈉、碳酸 氫鈉、組氨酸一鹽酸鹽TRIS和馬來酸鹽。對于達(dá)托霉素水溶液，所述緩沖劑優(yōu)選包括加入 至pH為約4. 5-6. 0 (優(yōu)選地pH為約5. 0)的達(dá)托霉素水溶液的約50mM磷酸鹽緩沖劑（例 如磷酸氫二鈉）。可在加入緩沖劑之前，通過在冷凍條件（2-KTC )下加入3N氫氧化鈉提 高酸性脂肽水溶液（例如pH為約3. 0)的pH。
[0074] -種或者多種糖（例如非還原性糖）和/或者甘氨酸可加入至脂肽水溶液中，之 后將溶液轉(zhuǎn)化為藥物脂肽制劑（例如通過凍干）。優(yōu)選地選擇甘氨酸或者一種或者多種 糖與脂肽水溶液的組合的量和方式以提供液體脂肽溶液，其可隨后調(diào)節(jié)為約6. 5至7. 5的 pH(例如通過在約2-KTC加入3N氫氧化鈉）。對于液體達(dá)托霉素制劑，優(yōu)選地通過在適當(dāng) 溫度（例如2-KTC )攪拌來合并甘氨酸和/或者一種或者多種糖。所述一種或者多種糖 優(yōu)選為非還原性糖，盡管達(dá)托霉素水溶液可由甘氨酸、海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、 果糖、右旋糖以及它們的組合在約5. 0或者更高的pH來制備?？蛇x擇脂肽與甘氨酸和/或 者一種或者多種糖的總量的摩爾比以獲得具有在含水溶劑中更快的重建速率的固體組合 物（例如表6中所述的組合物）。例如，液體達(dá)托霉素糖溶液優(yōu)選包含[1. 00:1. 12]至約 [1.00:8.98]的達(dá)托霉素：蔗糖摩爾比的達(dá)托霉素和蔗糖。
[0075] 在合并脂肽、一種或者多種糖或者甘氨酸以及一種或者多種緩沖劑之后，但在將 液體脂肽溶液轉(zhuǎn)化為固體藥物制劑之前，脂肽溶液的pH可調(diào)節(jié)為約6. 5-7. 5。優(yōu)選地，所述 脂肽包含達(dá)托霉素，且在轉(zhuǎn)化為固體形式之前，但在加入一種或者多種緩沖劑和甘氨酸和/ 或者一種或者多種糖之后，所述液體達(dá)托霉素制劑調(diào)節(jié)為約6. 5-7. 0的pH且最優(yōu)選地調(diào)節(jié) 為約7.0的pH。圖5(表6)描述了優(yōu)選的液體達(dá)托霉素組合物的實例，其凍干以提供在含 水稀釋劑中快速重建（溶解）的固體藥物脂肽制劑。對于表6中含有甘氨酸和非還原性糖 的每種組合物，500mg的固體達(dá)托霉素糖組合物在0. 9%氯化鈉水溶液中在小于1分鐘的時 間內(nèi)溶解。相反地，相比于表6中的組合物，由pH為約4. 7的液體達(dá)托霉素組合物獲得的 表7 (圖3)中所述的許多固體藥物制劑具有較長的重建時間（例如表7中所述的500mg的 固體藥物達(dá)托霉素組合物需要2分鐘或者更長時間在10mL0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中在 25°C重建）。
[0076] 液體脂肽制劑可通過任何適當(dāng)方法包括凍干、噴霧干燥或者流化床干燥來轉(zhuǎn)化為 固體藥物脂肽組合物。實施例3描述了在測量表6中同時提供的重建時間之前，用于將表 6中的某些液體達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體藥物達(dá)托霉素制劑的凍干方法。固體達(dá)托霉素組 合物可為凍干、冷凍干燥、噴霧干燥、流化床干燥、噴霧凝結(jié)、沉淀或者結(jié)晶的粉末或者無定 形固體。在一個方面，所述粉末為凍干或者噴霧干燥的粉末。在本發(fā)明的另一個方面，所述 粉末為凍干的粉末。
[0077] 固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素與糖的摩爾比優(yōu)選在約[1:1. 12]至約
[1:21.32]的范圍內(nèi)。例如，固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含具有以下達(dá)托霉素與蔗糖 的摩爾比的蔗糖：約[1:1. 12]至約[1:8. 98]，包括[1:4. 49]至[1:8. 98]、[1:6. 73] 至[1:8.98]、[1:1.12]、[1:1.344]、[1:1.792]、[1:2.24]、[1:2.688]、[1:3.136]、 [1:3.584]、[1:4.032]、[1:4.49]、[1:4.928]、[1:5.376]、[1:5.824]、[1:6.272]、 [1:6. 73]、[1:7. 168]、[1:7. 616]、[1:8. 064]、[1:8. 512]或者[1:8. 98]的達(dá)托霉素：鹿 糖摩爾比。在一個方面，賦形劑為甘露醇且達(dá)托霉素與甘露醇的摩爾比為約[1:2.52]至約 [1:5. 04]。在另一個方面，達(dá)托霉素與甘露醇的摩爾比為[1:2. 52]、[1:3. 36]、[1:4. 20]或 者[1:5. 04]。在另一個方面，所述賦形劑為蔗糖且達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為約[1:1. 12] 至約[1:8. 98]。在另一個方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為[1:4. 49]至約[1:8. 98]。 在另一個方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為約[1:6.73]至約[1:8.98]。在另一 個方面，所述達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為[1:1. 12]、[1:1.344]、[1:1.792]、[1:2.24]、 [1:2.688]、[1:3.136]、[1:3.584]、[1:4.032]、[1:4.49]、[1:4.928]、[1:5.376]、 [1:5.824]、[1:6.272]、[1:6.73]、[1:7.168]、[1:7.616]、[1:8.064]、[1:8.512]或者 [1:8.98]。在另一個方面，所述賦形劑為海藻糖且達(dá)托霉素與海藻糖的摩爾比為[1:2. 13] 至約[1:21. 32]。在另一個方面，所述達(dá)托霉素與海藻糖的摩爾比為[1:2. 13]、[1:2. 556]、 [1: 3. 408]· [1: 4. 26]、[1: 5. 112]、[1: 5. 964]、[1:6. 816]、[1: 7. 668]、[1:8. 53]、 [1:9.372]、[1:10.224]、[1:11.076]、[1:11.928]、[1:12.78]、[1:13.632]、[1:14.484]、 [1:14. 91]、[1:15. 336]、[1:16. 188]、[1:17. 04]、[1:17. 892]、[1:18. 744]、[1:19. 592]、 [1:20. 448]或者[1:21. 32]。
[0078] 固體藥物脂肽組合物可重建且與一種或者多種藥用稀釋劑合并以獲得用于腸 胃外給藥的藥物組合物。在重建液體組合物中達(dá)托霉素與稀釋劑的比值優(yōu)選在25mg/mL 與200mg/mL之間。例如，包含達(dá)托霉素的凍干組合物可在小瓶中通過將0. 9 %氯化鈉水 溶液加入至凍干組合物中來重建。重建達(dá)托霉素溶液可與藥用稀釋劑合并且靜脈內(nèi)給 藥。藥用稀釋劑包括無菌注射用水（sWFI)、0.9%無菌氯化鈉注射液（sSCl)、抑菌性注射 用水（bWFI)和林格溶液。適當(dāng)稀釋劑的額外的實例可在Remington' s Pharmaceutical Sciences, 17th Ed.，A. R Gennaro, Ed.，Mack Publishing Co.，Easton, PA1985 中找到。所 述稀釋劑可為無菌注射用水或者無菌氯化鈉注射液。優(yōu)選的稀釋劑為sWFI或者乳酸鹽林 格注射液。優(yōu)選地，所述稀釋劑并未緩慢加入同時以45度角旋轉(zhuǎn)。同樣優(yōu)選地，在加入稀 釋劑后，在振動之前，含有達(dá)托霉素的小瓶并未平穩(wěn)靜置10分鐘。
[0079] 任選地，所述稀釋劑進(jìn)一步包括藥用防腐劑。在一個方面，所述防腐劑為苯甲醇、 三氯叔丁醇、間甲酚、對羥基苯甲酸甲酯、苯酚、苯氧乙醇、對羥苯甲酸丙酯、硫柳汞、乙酸苯 基汞、硝酸苯基汞、苯扎氯銨、氯甲酚、苯基汞鹽和羥苯甲酯。
[0080] 一種重建方法包括將稀釋劑快速加入至含有表6的凍干達(dá)托霉素組合物的小瓶 中，接著在需要時回蕩小瓶。所述稀釋劑優(yōu)選為sWFI或者sSCI。例如，所述稀釋劑可在 1-60秒的時間內(nèi)，更優(yōu)選地在1-30秒的時間內(nèi)加入，且最優(yōu)選地所述稀釋劑在小于20秒的 時間內(nèi)加入。優(yōu)選地，組合物中達(dá)托霉素的重量與稀釋劑的體積比在25mg/mL與200mg/mL 的范圍內(nèi)。
[0081] 包含達(dá)托霉素的腸胃外藥物組合物可根據(jù)認(rèn)可的適應(yīng)癥通過靜脈內(nèi)輸注來給藥。 例如，針對治療復(fù)雜性皮膚和皮膚結(jié)構(gòu)感染，用于注射的達(dá)托霉素可在0. 9%氯化鈉中靜脈 內(nèi)給藥，每24小時給藥一次，給藥7-14天。
[0082] 具有增加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物
[0083] 不預(yù)期地，將達(dá)托霉素與一種或者多種非還原性糖（例如蔗糖、海藻糖、蔗糖和甘 露醇）在固體藥物制劑中合并增強了達(dá)托霉素在固體和重建液體相中的化學(xué)穩(wěn)定性。通過 比較來自貯存于已知時間段（例如至多12個月）已知條件（例如恒溫）下的多個固體樣 品的總體達(dá)托霉素純度的測量結(jié)果來測量達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性。根據(jù)實施例4通過高效液 相色譜（HPLC)(使用表3中的參數(shù)）測量各個樣品的達(dá)托霉素總體純度。此外，相對于選 自無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖 4)的物質(zhì)的量而言來測量達(dá)托霉素（圖1)在重建達(dá)托霉素溶液中的量。類似地，為了確定 達(dá)托霉素在重建達(dá)托霉素溶液中的化學(xué)穩(wěn)定性，在制備重建達(dá)托霉素溶液之后至多14天， 根據(jù)實施例4在不同的時間間隔重復(fù)進(jìn)行達(dá)托霉素在重建達(dá)托霉素溶液中的純度的HPLC 測量和計算。
[0084] 在一個方面，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉 素和有效增加達(dá)托霉素在固體達(dá)托霉素制劑中的總體穩(wěn)定性的量的非還原性糖，如根據(jù)實 施例4通過總體達(dá)托霉素純度所測量。在另一個方面，相比于不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉 素制劑的穩(wěn)定性而言，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉 素和非還原性糖，所述非還原性糖的量有效降低選自無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的 β -異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖4)的物質(zhì)在作為固體和/或者液體重 建形式的達(dá)托霉素制劑中的的量（如通過實施例4所測量）。
[0085] 相比于不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉素制劑而言，具有增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的固 體藥物達(dá)托霉素制劑可包含達(dá)托霉素和有效增加達(dá)托霉素的化學(xué)穩(wěn)定性的量的糖，如通過 達(dá)托霉素在作為固體形式的達(dá)托霉素制劑中的總體純度的變化所測量，其中所述達(dá)托霉素 純度根據(jù)實施例4測量。
[0086] 如在實施例5中所述，具有增加的脂肽化學(xué)穩(wěn)定性的固體脂肽組合物包含非還原 性糖（例如諸如蔗糖或者海藻糖）；或者非還原性糖的組合（例如蔗糖和海藻糖）。在根據(jù) 實施例4重建之后，測量在各個固體達(dá)托霉素藥物制劑中的達(dá)托霉素的純度（或者將重建 溶液冷凍并在解凍所述重建溶液之后，根據(jù)實施例4確定達(dá)托霉素純度）。相比于選自無 水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β -異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn)物（圖4)的 物質(zhì)而言，在重建后包含非還原性糖的固體藥物達(dá)托霉素制劑可含有更多的達(dá)托霉素（圖 1)。相比于不含非還原性糖的固體達(dá)托霉素制劑而言，在至少6個月的時間內(nèi)，含有非還原 性糖的優(yōu)選的固體藥物達(dá)托霉素制劑具有增加的達(dá)托霉素純度（以及增加的貯存穩(wěn)定性 (shelf stability))。如在實施例5中所述，固體達(dá)托霉素制劑在小瓶中在不同溫度范圍 (例如2-8°C、25°C和40°C )貯存不同的時間段（例如1個月、2個月、3個月和6個月），接 著重建固體制劑，然后檢測達(dá)托霉素和結(jié)構(gòu)上類似于達(dá)托霉素的物質(zhì)在重建液體組合物中 的量，如在實施例4中所述。
[0087] 如在實施例6中所述，相比于不含任何糖的重建達(dá)托霉素制劑而言，在含有一種 或者多種非還原性糖的重建液體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素不預(yù)期地顯示改善的化 學(xué)穩(wěn)定性。含有非還原性糖的重建達(dá)托霉素制劑的增加的化學(xué)穩(wěn)定性通過比較根據(jù)實施例 4對貯存于5°C、25°C和40°C的溫度的樣品進(jìn)行多達(dá)14天的總體達(dá)托霉素純度的測量結(jié)果 的差異來進(jìn)行測量。例如，在多達(dá)14天的時間內(nèi)，在含有約15. 0-20. 0%蔗糖的冷凍（例如 2-KTC)的重建達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度（根據(jù)實施例4測量并計算）不預(yù)期地 大于不含任何糖的重建達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素的純度。重建達(dá)托霉素制劑可與一種或 者多種藥用稀釋劑合并以獲得用于腸胃外給藥的藥物組合物（例如在用于靜脈內(nèi)給藥的 容器諸如袋子或者注射器中形成或者貯存）。
[0088] 為了評估達(dá)托霉素在重建溶液中的化學(xué)穩(wěn)定性，在重建（或者如果是冷凍的話， 解凍）后的多個時間間隔包括至多14天（3、7和14天）的時間段測量達(dá)托霉素的純度。達(dá) 托霉素在重建液體組合物中的化學(xué)穩(wěn)定性在實施例6所述的不同時期后根據(jù)實施例4通過 測量達(dá)托霉素純度來測量。相比于具有較低的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物而言，具有增 加的達(dá)托霉素化學(xué)穩(wěn)定性的組合物具有較高的相對于圖2-4中的結(jié)構(gòu)上類似于達(dá)托霉素 的物質(zhì)的總體檢測量的達(dá)托霉素的檢測量（如通過實施例4的方法所測量）。
[0089] 具有改善的化學(xué)穩(wěn)定性的固體達(dá)托霉素制劑（作為固體和/或者重建液體形式） 通過將達(dá)托霉素與非還原性糖包括蔗糖和海藻糖以及非還原性糖諸如蔗糖和甘露醇的組 合合并來制備。
[0090] 在一些實施方案中，固體和液體達(dá)托霉素制劑包含至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%或者至少98%純的達(dá)托霉素，如經(jīng)實施例4所測量。 優(yōu)選地，固體藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至 少96%、至少97%或者至少98%的根據(jù)表3在214nm檢測的總體HPLC峰面積由重建形式 的固體藥物達(dá)托霉素制劑中的達(dá)托霉素根據(jù)實施例4的方法獲得。
[0091] 在一些固體藥物達(dá)托霉素制劑中，至少92wt%、至少93wt%、至少94wt%、至少 95wt%、至少96wt%、至少97wt%或者至少98wt%的制劑由達(dá)托霉素以及甘氨酸或者一種 或者多種非還原性糖組成，其中所述藥物達(dá)托霉素制劑的特征在于約500mg的固體藥物達(dá) 托霉素制劑在小于約2分鐘的時間內(nèi)溶解于約10mL的含水稀釋劑（例如0. 9%氯化鈉水溶 液）中。
[0092] 具有增加的重建和在粉末和重建形式中增加的達(dá)托霉素穩(wěn)定性的優(yōu)選的固體達(dá) 托霉素制劑包括包含達(dá)托霉素、蔗糖和磷酸鹽緩沖劑的固體達(dá)托霉素制劑；其中
[0093] a.所述固體達(dá)托霉素制劑包含至少92%純的達(dá)托霉素，其根據(jù)表3通過重建達(dá)托 霉素溶液的高效液相色譜（HPLC)在214nm測量的達(dá)托霉素在214nm的吸光度（曲線下面 積）除以總體曲線下面積的比值來計算；且
[0094] b.所述固體達(dá)托霉素制劑通過如下獲得：
[0095] i.形成包含105mg/mL(10. 5% w/v)達(dá)托霉素、7. lmg/mL(50mM)磷酸氫二鈉緩沖劑 和lSOmg/mLQS% w/v)鹿糖的pH為約7. 0的達(dá)托霉素水溶液；且
[0096] i i.將含水達(dá)托霉素制劑轉(zhuǎn)化為固體達(dá)托霉素制劑。
[0097] 優(yōu)選的固體達(dá)托霉素制劑由包含約2. 5-25. 0% w/v的一種或者多種非還原性糖 (例如蔗糖、海藻糖和甘露醇）以及任選進(jìn)一步包含一種或者多種緩沖劑諸如磷酸氫二鈉 的達(dá)托霉素溶液獲得。特別優(yōu)選的固體達(dá)托霉素制劑通過凍干或者噴霧干燥含有達(dá)托霉素 和蔗糖（且任選進(jìn)一步含有約50mM磷酸氫二鈉）的pH為約4. 5至7. 0 (包括例如pH值為 4. 7-7.0)的液體溶液來制備。
[0098] 本發(fā)明也提供了含有固體達(dá)托霉素制劑的制品（例如，具有用于將含水稀釋劑注 射至小瓶的裝置諸如自動包封的可刺穿的膜的封閉密封的小瓶），以及含有配制用于腸胃 外給藥且包含溶解于含水稀釋劑中的固體達(dá)托霉素制劑的達(dá)托霉素產(chǎn)物的產(chǎn)品（例如適 用于靜脈內(nèi)給藥達(dá)托霉素產(chǎn)物的袋子或者注射器）。
[0099] 優(yōu)選地，500mg的固體藥物達(dá)托霉素組合物在25°C在1分鐘或者更少的時間內(nèi)溶 解于10mL0. 9%氯化鈉水溶液。達(dá)托霉素水溶液的pH可調(diào)節(jié)為至少4. 7的pH，之后將非還 原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中。任選地，所述達(dá)托霉素制劑通過將緩沖劑加入至 達(dá)托霉素水溶液，之后將非還原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中來制備。所述液體達(dá) 托霉素制劑可具有約105mg/mL的達(dá)托霉素濃度。液體達(dá)托霉素制劑中的糖可選自海藻糖、 蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖以及它們的組合。在一個優(yōu)選的實例中，500mg的 固體藥物達(dá)托霉素組合物在25°C在1分鐘或者更少的時間內(nèi)溶解于10mL0. 9%氯化鈉水溶 液中，且所述固體藥物達(dá)托霉素制劑通過如下制備：
[0100] a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；
[0101] b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素 水溶液中；
[0102] c.將非還原性糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成緩沖的達(dá)托霉素糖制 劑；
[0103] d.調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH至約7. 0 ;且
[0104] e.凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。固體藥物達(dá) 托霉素制劑的其它實例可通過如下制備：
[0105] a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；
[0106] b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素 水溶液中；
[0107] c.將糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成達(dá)托霉素糖制劑，所述糖選自海藻 糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖和它們的組合；
[0108] d.調(diào)節(jié)達(dá)托霉素糖制劑的pH至約7. 0 ;且
[0109] e.凍干所述達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。
[0110] 制備具有在〇. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中加快的重建時間的凍干達(dá)托霉素藥物制 劑的方法可包括以下步驟：
[0111] a.形成pH為約4. 7-5. 0的達(dá)托霉素水溶液；
[0112] b.將包含磷酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽或者它們的組合的緩沖劑加入至達(dá)托霉素 水溶液中；
[0113] c.將糖溶解于含有達(dá)托霉素的水溶液中以形成含有約2. 5%至約25%的糖的緩 沖的達(dá)托霉素糖制劑，所述糖選自海藻糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、麥芽糖、果糖、右旋糖和它們 的組合；
[0114] d.調(diào)節(jié)緩沖的達(dá)托霉素糖制劑的pH至約6. 5至7. 5 ;且
[0115] e.凍干所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑以形成固體藥物達(dá)托霉素組合物。
[0116] 優(yōu)選地，500mg的凍干達(dá)托霉素組合物在25°C在1分鐘或者更少的時間內(nèi)溶解于 10mL0. 9%氯化鈉水溶液中。所述緩沖的達(dá)托霉素糖制劑優(yōu)選包含磷酸鹽和約2. 5%至約 25 %的糖。
[0117] 實施例
[0118] 下述實施例為示例性的且不限制本申請所述的本發(fā)明。
[0119] 改善的達(dá)托霉素固體制劑通過以下獲得：(a)如實施例2a和2b所述由含有達(dá)托 霉素和一種或者多種糖或者甘氨酸的溶液形成固體藥物制劑，且（b)如實施例3所述，將達(dá) 托霉素溶液轉(zhuǎn)化為固體藥物制劑（例如通過凍干或者噴霧干燥）。隨后可通過加入含水稀 釋劑以在約4分鐘或者更少的時間內(nèi)溶解固體藥物制劑來重建固體藥物制劑。優(yōu)選地，所 述固體藥物達(dá)托霉素制劑在25°C (任選輕微攪拌）在約1分鐘或者更少的時間內(nèi)在含水稀 釋劑中溶解。
[0120] 根據(jù)銷售商品名為CUBIC1N? (即不含甘氨酸或者糖的達(dá)托霉素）的用于注射 的達(dá)托霉素的包裝說明書：
[0121] "CUBICIN500mg小瓶的內(nèi)容物應(yīng)使用如下無菌操作來重建：
[0122] 注意：為了最小化起泡，在重建過程中或者在重建之后避免劇烈振搖或者振蕩小 瓶。
[0123] 1.由CUBICIN小瓶移去聚丙烯翻轉(zhuǎn)蓋帽以暴露橡皮塞的中心部分。
[0124] 2.經(jīng)橡皮塞的中心部分將10mL0. 9 %氯化鈉注射液緩慢轉(zhuǎn)移至CUBICIN小瓶內(nèi)， 將轉(zhuǎn)移針頭指向小瓶壁。
[0125] 3.保證通過輕微旋轉(zhuǎn)小瓶使整個CUBICIN產(chǎn)品濕潤。
[0126] 4.使產(chǎn)品平穩(wěn)靜置10分鐘。
[0127] 5.需要時，輕微旋轉(zhuǎn)或者渦旋小瓶內(nèi)容物幾分鐘以獲得完全重建溶液。
[0128] 相反地，相比于不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素，改善的達(dá)托霉素固體制劑在含水 稀釋劑中更快地重建。特別優(yōu)選的固體制劑可在含水稀釋劑中在25°C在小于2分鐘的時 間內(nèi)重建，更優(yōu)選地在25°C在小于約1分鐘的時間內(nèi)重建。表6 (圖5)和表5 (圖6)提 供了對于各個固體達(dá)托霉素制劑的重建時間，其通過測量500mg的固體達(dá)托霉素制劑在 10mL0. 9%氯化鈉水溶液稀釋劑中在約25°C溶解所需的時間來獲得。
[0129] 此外，實施例描述了改善的達(dá)托霉素固體制劑，其提供了達(dá)托霉素在實施例5中 所述的固體形式中以及在實施例6中所述的重建液體形式中的較好的化學(xué)穩(wěn)定性。相比 于選自無水-達(dá)托霉素（圖2)、達(dá)托霉素的β-異構(gòu)體（圖3)和達(dá)托霉素的內(nèi)酯水解產(chǎn) 物（圖4)的物質(zhì)而言，所述改善的達(dá)托霉素制劑可包含更多的達(dá)托霉素，如經(jīng)實施例4的 HPLC方法所測量。優(yōu)選地，所述固體達(dá)托霉素制劑通過如下獲得：將液體達(dá)托霉素溶液轉(zhuǎn) 化為固體形式，隨后根據(jù)實施例4重建固體形式，且根據(jù)表3中的HPLC參數(shù)在重建液體中 測量在214nm的總體HPLC峰面積，其中至少92%得自重建溶液中的達(dá)托霉素。所述固體達(dá) 托霉素制劑由達(dá)托霉素、一種或者多種選自蔗糖、海藻糖和甘露醇的糖、藥用鹽（例如氯化 鈉）、一種或者多種緩沖劑諸如磷酸氫二鈉以及提供至多8 %的214nm的總體HPLC峰面積 的物質(zhì)（根據(jù)表3中的HPLC參數(shù)在實施例4中形成的重建液體中測量）組成。
[0130] 表8(圖7)描述了各個達(dá)托霉素藥物組合物。在表8中，名稱"各個存在組分的 摩爾比"是指達(dá)托霉素與按[B]、[C]和[D]所列組分（存在時）的以該順序的摩爾比。例 如，如果組合物包含達(dá)托霉素[A]和一種賦形劑[B]，則摩爾比將表示為[A] : [B]。如果 組合物包含兩種賦形劑[B]和[C]，則摩爾比將表示為達(dá)托霉素[A]:賦形劑[B]:賦形劑 [C]等。如果組合物包含達(dá)托霉素[A]以及賦形劑[B]和緩沖劑[D]，則摩爾比將表示為 [A] : [B] : [D]。
[0131] 表6(圖5)提供了在含水稀釋劑中在小于2分鐘的時間內(nèi)重建的達(dá)托霉素組合物 的非限制性實例。表7(圖6)提供了在含水稀釋劑中在約2分鐘或者更長時間內(nèi)重建的其 它達(dá)托霉素組合物的實例。表6和表7中的不含糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素組合物通過方法 A(實施例la)或者方法B(實施例lb)隨后通過實施例3的凍干來獲得。表6和表7中的 含有糖或者甘氨酸的達(dá)托霉素組合物通過方法A (實施例2a)或者方法B (實施例2b)隨后 通過實施例3的凍干來獲得。表6和7中的摩爾比基于表1中的分子量來計算。
[0132] 表1 :達(dá)托霉素和賦形劑的分子量
[0133]

【權(quán)利要求】
1. 固體藥物達(dá)托霉素組合物，其特征在于含有500mg達(dá)托霉素的一定量所述固體藥物 達(dá)托霉素組合物在約25°C在小于5分鐘的時間內(nèi)溶解于lOmLO. 9%氯化鈉水溶液中，所述 固體藥物達(dá)托霉素組合物包含達(dá)托霉素和至少一種選自甘氨酸和糖的賦形劑。
2. 權(quán)利要求1的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述糖為非還原性糖。
3. 權(quán)利要求2的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中達(dá)托霉素與所述糖的摩爾比為約 1:1. 12 至約 1:21. 32。
4. 權(quán)利要求2或3的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述糖選自海藻糖、蔗糖和甘露 醇。
5. 權(quán)利要求1的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述固體藥物達(dá)托霉素組合物包含達(dá) 托霉素和海藻糖。
6. 權(quán)利要求5的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中達(dá)托霉素與海藻糖的摩爾比為約 1:2. 13 至約 1:21. 32。
7. 權(quán)利要求1的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述固體藥物達(dá)托霉素組合物包含達(dá) 托霉素和蔗糖。
8. 權(quán)利要求7的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中達(dá)托霉素與蔗糖的摩爾比為約1:1. 12 至約 1:8. 98。
9. 權(quán)利要求1的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述固體藥物達(dá)托霉素組合物包含達(dá) 托霉素和甘露醇。
10. 權(quán)利要求9的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中達(dá)托霉素與甘露醇的摩爾比為約 1:2. 52 至約 1:5. 04。
11. 權(quán)利要求1-10中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述固體藥物達(dá)托霉素 組合物如下得到： a. 形成包含達(dá)托霉素和所述賦形劑的pH為約4. 5-8. 0的達(dá)托霉素水溶液；和 b. 將所述達(dá)托霉素水溶液轉(zhuǎn)化為所述固體藥物達(dá)托霉素組合物。
12. 固體藥物達(dá)托霉素組合物，其特征在于含有500mg達(dá)托霉素的一定量所述固體藥 物達(dá)托霉素組合物在約25°C在小于5分鐘的時間內(nèi)溶解于10mL0. 9%氯化鈉水溶液中，其 中所述固體藥物達(dá)托霉素組合物如下得到： a. 形成包含達(dá)托霉素的pH為約4. 5-8. 0的達(dá)托霉素水溶液；和 b. 將所述達(dá)托霉素水溶液轉(zhuǎn)化為所述固體藥物達(dá)托霉素組合物。
13. 權(quán)利要求11的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述步驟a包括形成pH為約 4. 7-7. 5的達(dá)托霉素水溶液。
14. 權(quán)利要求11的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述步驟a包括形成pH為約 5. 0-7. 5的達(dá)托霉素水溶液。
15. 權(quán)利要求12的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述步驟a包括形成pH為約 4. 7-7. 0的達(dá)托霉素水溶液。
16. 權(quán)利要求11或12的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述步驟a包括形成pH為約 6. 5-7. 5的達(dá)托霉素水溶液。
17. 權(quán)利要求11-16中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中所述達(dá)托霉素水溶液 還包含緩沖劑。
18. 權(quán)利要求11-17中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其中步驟b包括通過凍干、 噴霧干燥或流化床干燥將所述達(dá)托霉素水溶液轉(zhuǎn)化為固體藥物組合物。
19. 權(quán)利要求1-18中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物，其特征在于含有500mg達(dá) 托霉素的一定量所述固體藥物達(dá)托霉素組合物在約25°C在小于2分鐘的時間內(nèi)溶解于 1〇11^0.9%氯化鈉水溶液中。
20. -種藥物產(chǎn)品，其包含權(quán)利要求1-19中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物和藥用 稀釋劑。
21. 權(quán)利要求1-19中任一項的固體藥物達(dá)托霉素組合物在制備用于治療細(xì)菌感染的 藥物中的用途。
22. 權(quán)利要求20的藥物產(chǎn)品在治療細(xì)菌感染中的用途。
23. 制備固體藥物達(dá)托霉素組合物的方法，所述方法包括： a. 形成包含達(dá)托霉素和至少一種選自甘氨酸和糖的賦形劑的pH為約4. 5-8. 0的達(dá)托 霉素水溶液；和 b. 將所述達(dá)托霉素水溶液轉(zhuǎn)化為所述固體藥物達(dá)托霉素組合物。
24. 制備固體藥物達(dá)托霉素組合物的方法，所述方法包括： a. 形成包含達(dá)托霉素的pH為約4. 5-8. 0的達(dá)托霉素水溶液；和 b. 將所述達(dá)托霉素水溶液轉(zhuǎn)化為所述固體藥物達(dá)托霉素組合物。
25. 權(quán)利要求23的方法，其中所述步驟a包括形成pH為約4. 7-7. 5的達(dá)托霉素水溶 液。
26. 權(quán)利要求23的方法，其中所述步驟a包括形成pH為約5. 0-7. 5的達(dá)托霉素水溶 液。
27. 權(quán)利要求24的方法，其中所述步驟a包括形成pH為約4. 7-7. 0的達(dá)托霉素水溶 液。
28. 權(quán)利要求23或24的方法，其中所述步驟a包括形成pH為約6. 5-7. 5的達(dá)托霉素 水溶液。
【文檔編號】A61K38/12GK104056250SQ201410208415
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2010年11月23日 優(yōu)先權(quán)日:2009年11月23日
【發(fā)明者】S.孫, G.納伊克, S.奧康納 申請人:丘比斯特藥物股份有限公司