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一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物的制作方法

文檔序號:1300903閱讀:429來源:國知局
一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,該組合物包含活性成分和藥用輔料,所述的活性成分是將糯稻根與花生殼混合后水提而得。本發(fā)明的藥物組合物作用于頰黏膜成纖維細(xì)胞,可以促進(jìn)該細(xì)胞增殖,大大增加了該細(xì)胞對病變區(qū)域的修復(fù)能力,加速了病變的愈合。
【專利說明】一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】,具體而言,涉及一種中藥提取物,尤其涉及一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]口腔扁平苔蘚(oral lichenplanus,0LP)是一種病因不明的T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥性皮膚、黏膜疾病,是口腔黏膜常見病之一?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)也對口腔扁平苔蘚病因沒有明確,認(rèn)為可能與精神因素、感染、藥物、慢性病灶、全身系統(tǒng)疾病、酶異常、內(nèi)分泌異?;驓鉁龅扔嘘P(guān)。該病好發(fā)于中年人,女性多于男性。目前的局部治療方法包括抗生素溶液含漱、損害內(nèi)注射或外用糖皮質(zhì)激素、0.1%維A酸軟膏。但長期外用糖皮質(zhì)激素經(jīng)常產(chǎn)生局部萎縮、感染、毛細(xì)血管擴(kuò)張等不良反應(yīng),抗生素溶液含漱和0.1%維A酸軟膏的療效均不理想。
[0003]總而言之,目前臨床上尚無十分有效的針對口腔扁平苔蘚的治療藥物,因此,尋找有效的干預(yù)藥物有著非常重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明人根據(jù)民間偏方制備了一種水提物凍干粉,并將該藥物凍干粉給予大鼠灌胃后獲得含藥血清,令人意想不到的是,含藥血清可促進(jìn)大鼠頰黏膜成纖維細(xì)胞快速增值?;谏鲜霭l(fā)現(xiàn),本發(fā)明的目的在于提供一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物。
[0005]本發(fā)明的目的是 這樣實(shí)現(xiàn)的:
[0006]一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,包含活性成分和藥用輔料,所述的活性成分是將糯稻根與花生殼混合后水提而得。
[0007]優(yōu)選地,如上所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的活性成分是將糯稻根與花生殼按重量比為3-6:1混合后水提而得。
[0008]進(jìn)一步優(yōu)選地,如上所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的活性成分是將糯稻根與花生殼按重量比為5:1混合后水提而得。
[0009]再進(jìn)一步優(yōu)選地,如上所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述水提的方法為:將干燥糯稻根與花生殼混合后用乙醇加熱回流提取,過濾,濾液棄掉后的剩余藥渣,加水加熱回流提取,再過濾,濾液濃縮干燥。
[0010]本發(fā)明所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物可以被制成口服制劑,所述的口服制劑是顆粒劑、片劑、膠囊。
[0011]需要說明的是,本發(fā)明所采用的糯稻根選用禾本科稻屬植物糯稻Oryza sativaL.var.glutinosa Mat sum.的干燥根狀莖及須根;花生殼選用豆科落花生屬植物落花生Arachis hypogaea L.果實(shí)的莢殼。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和顯著進(jìn)步:本發(fā)明的藥物組合物作用于大鼠頰黏膜成纖維細(xì)胞,可以促進(jìn)該細(xì)胞增殖,大大增加了該細(xì)胞對病變區(qū)域的修復(fù)能力,加速了病變的愈合。在臨床應(yīng)用中的觀察結(jié)果表明,中藥苔蘚合劑治療扁平苔蘚,療效滿意,副作用小,具有安全、持久、穩(wěn)定的特點(diǎn),起到調(diào)節(jié)全身狀況、改善和消除局部病損的作用。
具體實(shí)施例
[0013]以下通過【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步描述本發(fā)明。由于已經(jīng)根據(jù)以下優(yōu)選實(shí)施例描述了本發(fā)明,因此任何等同替換對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言都是顯而易見的,且包括在本發(fā)明之中。
[0014]實(shí)施例1
[0015]干燥糯稻根1.2kg和花生殼0.2kg,加入20L的80%乙醇加熱回流提取2h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入15L的80%乙醇,加熱回流提取1.5h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入20L純水加熱回流分別提取2次,合并濾液后濃縮至膏狀物,冷凍干燥抽真空,得凍干粉。
[0016]實(shí)施例2
[0017]干燥糯稻根1.2kg和花生殼0.4kg,加入22L的85%乙醇加熱回流提取2h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入16L的85%乙醇,加熱回流提取1.5h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入20L純水加熱回流分別提取2次,合并濾液后濃縮至膏狀物,冷凍干燥抽真空,得凍干粉。
[0018]實(shí)施例3
[0019]干燥糯稻根1.2kg和花生殼0.24kg,加入20L的80%乙醇加熱回流提取2h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入15L的80%乙醇,加熱回流提取1.5h,過濾,棄掉濾液,濾渣中加入20L純水加熱回流分別提取2次,合并濾液后濃縮至膏狀物,冷凍干燥抽真空,得凍干粉。
[0020]實(shí)施例4糯稻根花生殼水提物對頰`黏膜成纖維細(xì)胞增殖的影響
[0021]取6周齡SD雄性大鼠6只,3%戊巴比妥鈉(lml/kg)麻醉后,碘伏消毒頰黏膜,于頰黏膜處梭形切口,取0.2cmX0.2cm大小被覆黏膜固有層組織,放入4°C預(yù)冷的含1000 μ g/ml青霉素、500 μ g/ml鏈霉素PBS中清洗2遍。將分離的組織塊在小平皿中剪成
0.5mm3大小,加入5ml的10% FBS的DMEM,用吸管吹打分散組織塊,將組織塊與培養(yǎng)液一同移入25cm2培養(yǎng)瓶中,將組織塊在培養(yǎng)瓶中均勻分布,置37°C、5% CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),4d后第1次觀察換液,去除漂浮的未貼壁的組織,此后每3天換液I次,待細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶底時(shí)行傳代培養(yǎng)。
[0022]成纖維細(xì)胞傳代培養(yǎng):用吸管將培養(yǎng)液吸去,培養(yǎng)瓶中加入消化液(0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTAl:3)2ml,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶,使消化液充分接觸細(xì)胞,37°C下消化2min,倒置相差顯微鏡下見細(xì)胞間隙變大、體積變圓、鏡下胞體變亮,加入10% FBS的DMEM中止消化,吸管輕輕吹打,進(jìn)行分瓶傳代。免疫組化進(jìn)行細(xì)胞波形絲蛋白和細(xì)胞角蛋白抗體熒光染色,做細(xì)胞來源鑒定,結(jié)果顯示成纖維細(xì)胞波形絲蛋白免疫染色陽性,細(xì)胞胞漿著色(棕色),胞核不著色。角蛋白免疫染色陰性,胞漿胞核均不著色,說明培養(yǎng)細(xì)胞為來源于中胚層的成纖維細(xì)胞。六孔板中放蓋玻片,細(xì)胞爬片(24h) ;70%乙醇固定30min,PBS清洗2min ;
0.1% TritonX-1OO浸泡20min ;PBS清洗3次,每次2min ;3%雙氧水室溫孵育IOmin ;10%正常羊血清室溫孵育IOmin ;倒掉血清滴加PBS稀釋的一抗(1: 100),4°C濕盒孵育12h ;PBS清洗3次,每次2min ;滴加FITC標(biāo)記山羊抗兔的二抗,4°C濕盒孵育12h ;PBS清洗3次,每次2min ;甘油封片、鏡檢。
[0023]實(shí)驗(yàn)分為含藥血清組和無藥血清組。含藥血清組血清來自6只連續(xù)7d灌胃給藥的SD大鼠,受試藥物為本發(fā)明實(shí)施例3制備的水提物凍干粉,給藥劑量為80mg/kg/d,每日一次,最后一日間隔2h再次給藥,于末次給藥后Ih腹主動脈采血,離心3000r/min, 20min取上清,濾菌器(0.20 μ m)抽濾除菌后分裝,_20°C保存?zhèn)溆?。無藥血清組血清來自6只SD大鼠,給予等量純水代替藥物按上述方法制備無藥血清。
[0024]將第4代大鼠頰黏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化、顯微鏡下計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度為5X108/L,每孔100 μ L接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,37°C、5 % CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2d,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)將培養(yǎng)液置換成上述兩種血清繼續(xù)培養(yǎng),每組6個(gè)復(fù)孔分別培養(yǎng)24h、48h、72h,各孔中加入5mg/mL MTT20 μ L,繼續(xù)培養(yǎng)4h吸出上清,每孔中加入100 μ L二甲基亞砜,搖床振蕩15min使結(jié)晶充分溶解,用酶聯(lián)免疫測試儀上測定490nm的每孔細(xì)胞吸光度。
[0025]根據(jù)表1的試驗(yàn)結(jié)果可以看出,大鼠頰黏膜成纖維細(xì)胞分別在含藥和無藥血清中培養(yǎng)后,細(xì)胞形態(tài)相同,兩組細(xì)胞隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,細(xì)胞數(shù)量逐漸增多,含藥血清組增加更加顯著,與無藥血清組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0026]表1大鼠頰黏膜成纖維細(xì)胞在兩種血清中培養(yǎng)后細(xì)胞增殖情況比較
[0027]
【權(quán)利要求】
1.一種治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,包含活性成分和藥用輔料,其中所述的活性成分是將糯稻根與花生殼混合后水提而得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的活性成分是將糯稻根與花生殼按重量比為3-6:1混合后水提而得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的活性成分是將糯稻根與花生殼按重量比為5:1混合后水提而得。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其特征在于所述水提的方法為:將干燥糯稻根與花生殼混合后用乙醇加熱回流提取,過濾,濾液棄掉后的剩余藥渣,加水加熱回流提取,再過濾,濾液濃縮干燥。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的藥物組合物是口服制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述治療口腔黏膜扁平苔蘚的藥物組合物,其中所述的口服制劑是顆粒劑 、片劑、膠囊。
【文檔編號】A61P1/02GK103877413SQ201410101719
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月19日
【發(fā)明者】趙曉梅, 張勇哲, 國娥香, 王多誠, 蔡潔鳳 申請人:青島市市立醫(yī)院
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