利用修飾的梭菌屬毒素治療慢性神經(jīng)源性炎癥的方法
【專利摘要】所示的是在有此需要的患者中延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的方法，同樣提供了用于通過局部施用梭菌屬神經(jīng)毒素、例如肉毒神經(jīng)毒素至患者來治療早泄的方法。
【專利說明】利用修飾的梭菌屬毒素治療慢性神經(jīng)源性炎癥的方法
[0001]本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2010年8月10日，申請(qǐng)?zhí)枮?01080048073.8，發(fā)明名稱為“利用修飾的梭菌屬毒素治療慢性神經(jīng)源性炎癥的方法”的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
[0002]交叉引用
[0003]本申請(qǐng)要求于2009年8月26提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)12/548，073的利益，其全部公開內(nèi)容該特定引用被并入本文。
[0004]背景
[0005]所示的是用于治療早泄的方法。更具體地和在一個(gè)方面，提供的是用于通過施用神經(jīng)毒素、例如肉毒神經(jīng)毒素至患者來治療早泄的方法。
[0006]早泄(PE)是男性中常見性功能障礙，特別是那些年齡為約18至約40歲的男性。早泄可以通常定義為在一個(gè)或兩個(gè)性伴侶預(yù)期之前或比一個(gè)或兩個(gè)性伴侶預(yù)期的更快出現(xiàn)的射精[例如參見‘The Merck Manual’，第16版，pl576,由Merck ResearchLaboratories出版，1992]。例如，早泄可以是經(jīng)歷了在陰莖進(jìn)入性伴侶之前、當(dāng)時(shí)或之后即刻的射精。如果早泄的情況是很少和間隔久遠(yuǎn)，那么這類出現(xiàn)可以不必引起關(guān)注。但是，如果實(shí)際上每次嘗試性交時(shí)存在早泄的情況，或甚至如果甚至大于嘗試性交時(shí)間的約10%或約20%存在早泄，那么可能應(yīng)當(dāng)治療病況。
[0007]依照Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,第 4 版(DSM-1V),早泄可以分為原發(fā)性或繼發(fā)性，Diagnostic and Statistical Manual ofMental Disorders,第四版將性功能障礙分為4個(gè)特定的類型:(I)原發(fā)性，(2) —般醫(yī)學(xué)狀況-相關(guān)的，(3)物質(zhì)-導(dǎo)致的，和(4)沒有以其它方式指定的。原發(fā)性適用于自從他們變得能夠行使性功能(即，少壯時(shí)期)就已經(jīng)患有病況的個(gè)體。繼發(fā)性表明病況自身表現(xiàn)在一個(gè)體中，該個(gè)體中先前具有可接受水平的射精的控制，然后在之后開始經(jīng)歷早泄。對(duì)于繼發(fā)性早泄，問題不涉及一般醫(yī)學(xué)障礙，并且它通常不涉及物質(zhì)誘導(dǎo)，但是，在具體的情況中過度興奮可能涉及精神藥物使用并且當(dāng)戒斷藥物時(shí)消退。
[0008]早泄的患病率在美國(guó)男性中估計(jì)為30-70%。國(guó)家健康和社會(huì)生活測(cè)量(NationalHealth and Social Life Survey) (NHSLS)表明30%的患病率，其在所有成人年齡類型中是相當(dāng)穩(wěn)定的。事實(shí)上早泄可以存在于成人男性的生命中任何年齡。作為報(bào)告的病況，最常見的是在年輕男性(年齡為18-30歲)中，但是也可以在年齡為45-65歲男性中伴隨繼發(fā)性陽(yáng)痿存在。
[0009]可以用于治療早泄的組合物是已知的。例如，使用選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRFs)以治療早泄是已知的和要求保護(hù)的，例如，在美國(guó)專利7，105，516 (該專利涉及新的有效用于治療早泄的SSRI’s)以及美國(guó)專利6，777，437中。附加的用于治療早泄的方法可以在美國(guó)專利6，974，839 (其教導(dǎo)在性交之前施用有效量的曲馬多(單胺攝取抑制劑)物質(zhì)至男性)和在美國(guó)專利6，495，154 (其要求保護(hù)的是通過全身性施用含有氯米帕明和其藥理學(xué)可接受的酸加成鹽的快速-釋放藥物制劑至個(gè)體來延遲男性中射精的發(fā)生)中找到。美國(guó)專利7，018，648涉及用于施用睪酮和/或至少一種其衍生物以治療早泄的透皮裝置；美國(guó)專利6，593，335涉及通過施用鉀通道開放劑治療早泄的方法；美國(guó)專利6，727，283公開了口服攝入鹽酸舍曲林的基本上非水性、液體濃縮物。在某些實(shí)例中，氟西汀或帕羅西汀(每日分別服用20mg和40mg)也被開據(jù)藥方以治療早泄。其它已知的方法包括應(yīng)用局部的麻醉藥，例如將利多卡因5%乳膏劑，例如，在性交之前應(yīng)用至陰莖。與使用這類麻醉藥相關(guān)的缺點(diǎn)包括不期望的敏感性降低和/或患者短期不能完成勃起。
[0010]厭氧、革蘭氏陽(yáng)性菌肉毒梭菌產(chǎn)生有效的多肽神經(jīng)毒素，肉毒神經(jīng)毒素，其在人類和動(dòng)物中導(dǎo)致神經(jīng)麻痹疾病，稱為肉毒中毒，但是該神經(jīng)毒素現(xiàn)在已經(jīng)用于在人類中治療多種病癥幾十年。一個(gè)單位(U)的肉毒毒素是定義為在腹膜內(nèi)注射入各自體重為18-20克的雌性Swiss Webster小鼠之后的LD5(i。換言之,一個(gè)單位的肉毒毒素是殺死50%的一組雌性Swiss Webster小鼠的肉毒毒素量。7種通常免疫學(xué)不同的肉毒神經(jīng)毒素已被表征,這些毒素分別是肉毒神經(jīng)毒素血清型A、B、Cl、D、E、F和G，其各自區(qū)別于采用類型_特異性抗體的中合作用。不同血清型的肉毒毒素在它們影響的動(dòng)物種類方面有變化，并且在它們引起的麻痹的嚴(yán)重性和持續(xù)時(shí)間方面有變化。例如，已經(jīng)測(cè)定到，A型肉毒毒素的效力為B型肉毒毒素的500倍，如通過在大鼠中產(chǎn)生麻痹的速率所測(cè)量的。此外，在靈長(zhǎng)類中480U/kg劑量的B型肉毒毒素已經(jīng)被測(cè)定是非毒性的，該劑量是A型肉毒毒素的靈長(zhǎng)類LD5tl的約12倍。肉毒毒素表面上以高親和力結(jié)合至膽堿能運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，被轉(zhuǎn)移至神經(jīng)元和阻斷乙酰膽堿的突觸前釋放。
[0011]肉毒毒素已被用于臨床環(huán)境以用于治療由高活性骨骼肌表征的神經(jīng)肌肉障礙。A型肉毒毒素由美國(guó)食品和藥物管理局在1989年被批準(zhǔn)在超過12歲的患者中用于治療自發(fā)性瞼痙攣，斜視和面部單側(cè)痙攣。在2000年FDA批準(zhǔn)了用于治療子宮頸張力障礙的A型和B型肉毒毒素血清型的商業(yè)制備物，并且在2002年FDA批準(zhǔn)了 A型肉毒毒素用于美容治療的某些運(yùn)動(dòng)過度的(眉間的)面部皺紋。外周肌內(nèi)A型肉毒毒素的臨床效果通常見于注射的一周之內(nèi)和有時(shí)在幾個(gè)小時(shí)之內(nèi)。單一肌內(nèi)注射A型肉毒毒素導(dǎo)致的遲緩性肌肉麻痹的通常持續(xù)時(shí)間可以是約3個(gè)月，盡管在某些情況中肉毒毒素誘導(dǎo)的腺體(例如唾液腺體)的去神經(jīng)支配的效果已被報(bào)告持續(xù)若干年。
`[0012]盡管所有肉毒毒素血清型表面上抑制在神經(jīng)肌肉接頭處神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的釋放，但是它們產(chǎn)生這樣的作用是通過影響在不同部位的不同神經(jīng)分泌蛋白和/或裂解這些蛋白。肉毒毒素A是鋅內(nèi)肽酶，其可以特異性水解細(xì)胞內(nèi)、囊泡相關(guān)蛋白質(zhì)SNAP-25的肽鍵。E型肉毒毒素也裂解25千道爾頓(kD)突觸小體相關(guān)蛋白質(zhì)(SNAP-25)，但是與A型肉毒毒素相比，靶向該蛋白質(zhì)中的不同氨基酸序列。B、D、F和G型肉毒毒素作用于囊泡-相關(guān)的蛋白質(zhì)(VAMP,也稱為突觸泡蛋白)，而各血清型在不同部位裂解蛋白質(zhì)。最終，C1型肉毒毒素已經(jīng)顯示裂解突觸融合蛋白和SNAP-25兩者。
[0013]無論血清型，毒素中毒的分子原理似乎是類似于和涉及至少3個(gè)步驟或階段。在過程的第一步驟，所述毒素通過在重鏈(H鏈)和細(xì)胞表面受體之間的特異性相互作用結(jié)合至突觸前的膜的靶神經(jīng)元；受體被認(rèn)為對(duì)于各血清型的肉毒毒素和對(duì)于破傷風(fēng)毒素來說是不同的。H鏈的羧基端片段，He，似乎對(duì)于將毒素靶向至細(xì)胞表面是重要的。在第二步驟，毒素跨過中毒的細(xì)胞的血漿膜。毒素首先通過受體-介導(dǎo)的胞吞作用被細(xì)胞吞沒，和形成含有毒素的核內(nèi)體。然后毒素逃離核內(nèi)體而進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。該最后步驟被認(rèn)為是由H鏈的氨基端片段，HN介導(dǎo)的，其觸發(fā)響應(yīng)于約5.5或更低的pH的毒素構(gòu)象變化。已知核內(nèi)體具有質(zhì)子泵，其減少內(nèi)部胞內(nèi)體pH。構(gòu)象變化暴露毒素中的疏水殘基，其允許毒素包埋自身在胞內(nèi)體膜中。毒素然后轉(zhuǎn)移通過胞內(nèi)體膜入胞質(zhì)溶膠。肉毒毒素活性原理的最后步驟似乎涉及還原連接H和L鏈的二硫鍵。肉毒毒素和破傷風(fēng)毒素的全部毒性活性包含于全毒素的L鏈；L鏈?zhǔn)卿\(Zn++)內(nèi)肽酶，其選擇性裂解蛋白，所述蛋白是識(shí)別和對(duì)接(docking)包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡與血漿膜的細(xì)胞質(zhì)表面，以及融合囊泡與血漿膜所必需的。破傷風(fēng)神經(jīng)毒素，肉毒毒素B、D，F(xiàn)和G導(dǎo)致突觸泡蛋白(也稱為囊泡-相關(guān)的膜蛋白質(zhì)(VAMP))(—種突觸小體膜蛋白質(zhì))的降解。存在于突觸囊泡的細(xì)胞溶質(zhì)表面的大部分VAMP被移除，這是由于這些裂解事件中的任何一個(gè)所導(dǎo)致。各毒素特異性裂解不同鍵。
[0014]肉毒毒素蛋白質(zhì)分子的分子量，對(duì)于所有7種已知的肉毒毒素血清型來說，是約150kDa。有趣地，肉毒毒素是由作為包括150kD肉毒毒素蛋白質(zhì)分子與相結(jié)合的非毒素蛋白的絡(luò)合物形式的梭菌釋放的。因此，可以由梭菌制備900kDA、500kDa和300kDa形式的A型肉毒毒素絡(luò)合物。B和C1型肉毒毒素被表面上制備為僅僅500kDa的絡(luò)合物。D型肉毒毒素被制備為300kDa和500kDa的絡(luò)合物。最終，E和F型肉毒毒素被制備為僅僅約300kDa的絡(luò)合物。絡(luò)合物(即分子量大于約150kDa)被認(rèn)為含有非毒素血球凝集素蛋白質(zhì)和非毒素和非毒性非血球凝集素蛋白質(zhì)。這兩種非毒素蛋白(其與肉毒毒素分子一同可以含有相關(guān)神經(jīng)毒素絡(luò)合物)可以發(fā)揮作用以提供抵抗肉毒毒素分子的變性作用的穩(wěn)定性和當(dāng)攝入毒素時(shí)防范消化酸。此外，可能的是，較大(大于約150kDa分子量)肉毒毒素絡(luò)合物可以導(dǎo)致更低的肉毒毒素從肌內(nèi)注射肉毒毒素絡(luò)合物的位置的擴(kuò)散速率。通過在PH7.3用紅細(xì)胞處理絡(luò)合物，可以將毒素絡(luò)合物離解成毒素蛋白質(zhì)和血凝素蛋白。毒素蛋白質(zhì)在移除血凝素蛋白質(zhì)之后具有顯著的穩(wěn)定性。
[0015]所有肉毒毒素血清型通過肉毒梭菌被產(chǎn)生為無活性單一鏈蛋白，其必須被蛋白酶裂解或破壞才能變得有神經(jīng)活性。產(chǎn)生肉毒毒素血清型A和G的細(xì)菌菌株具有內(nèi)源性蛋白酶，并且血清型A和G可以因此以它們的主要活性形式從細(xì)菌的培養(yǎng)物被回收。相反的是，肉毒毒素血清型CpD、和E是由非蛋白水解菌株合成的，因此當(dāng)從培養(yǎng)物回收時(shí)是典型地非激活的。血清型B和F由蛋白水解和非蛋白水解菌株兩者產(chǎn)生，并且因此可以是以活性或非活性形式回收。但是，蛋白水解菌株即使產(chǎn)生例如，B型肉毒毒素血清型，也僅僅裂解產(chǎn)生的毒素的部分。切割與未切割的分子的實(shí)際比率取決于孵育的持續(xù)時(shí)間和培養(yǎng)的溫度。因此，某些百分比的例如肉毒毒素B型毒素的任何制備物可能是非活性的，這可能解釋B型肉毒毒素與A型肉毒毒素相比具有更低的效能。無活性肉毒毒素分子在臨床制備物中的出現(xiàn)將促成制備物的總體蛋白質(zhì)負(fù)荷，其已經(jīng)與增加的抗原性相關(guān)，而沒有促進(jìn)其臨床功效。
[0016]體外研究已經(jīng)指明，肉毒毒素抑制鉀陽(yáng)離子導(dǎo)致的乙酰膽堿和去甲腎上腺素兩者從腦干組織的初始細(xì)胞培養(yǎng)物的釋放。此外，已有報(bào)道肉毒毒素抑制甘氨酸和谷氨酸兩者在脊髓神經(jīng)元初始培養(yǎng)物中激發(fā)的釋放，以及在腦突觸小體制備物中肉毒毒素抑制神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿、多巴胺、去甲腎上腺素、CGRP和谷氨酸各自的釋放。
[0017]高質(zhì)量晶體A型肉毒毒素可以從肉毒梭菌的Hall A菌株產(chǎn)生，其特性為=3X IO7U/mg, A260/A278小于0.60和在凝膠電泳上有清楚的帶形物圖。已知的Shantz方法可以用于得到晶體A型肉毒毒素，如在Shantz, E.J.等人，Properties and useof Botulinum toxin and Other Microbial Neurotoxins in Medicine， MicrobiolRev.56:80-99(1992)中所列出的。通常，A型肉毒毒素絡(luò)合物可以通過在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)A型肉毒梭菌從厭氧發(fā)酵得到分離且純化。粗制毒素可以通過用硫酸沉淀而被采集，并通過超微過濾濃縮。可以通過溶解酸沉淀在氯化鈣中進(jìn)行純化。然后可以用冷乙醇沉淀毒素。沉淀可以被溶解在磷酸鈉緩沖劑中并離心。在干燥后，然后可以得到約900kDa晶體A型肉毒毒素絡(luò)合物，其具有3X 107LD5(lU/mg或更大的特異性效能。該已知的方法也可以在分離出非毒素蛋白之后使用，以得到純的肉毒毒素,諸如例如:純化的A型肉毒毒素具有約150kDa分子量以及1-2X 108LD5QU/mg或更大的特異性效能；純化的B型肉毒毒素具有約156kDa分子量以及1-2X 108LD5QU/mg或更大的特異性效能，以及；純化的肉毒毒素類型F具有約155kDa分子量以及1-2X IO7LD5tlUAig或更大的特異性效能。
[0018]適用于制備藥物制劑的已經(jīng)制備和純化的肉毒毒素和毒素絡(luò)合物可以從List Biological Laboratories, Inc., Campbell, Calif ；the Centre for AppliedMicrobiology and Research, Porton Down, U.K.;ffako(Osaka, Japan),以及從 SigmaChemicals of St Louis, Mo 得至丨J0
[0019]已有報(bào)道肉毒毒素已經(jīng)如下用于臨床環(huán)境:
[0020](I)約75-125單元的BOTOX'?./肌內(nèi)注射(多個(gè)肌肉)用于治療子宮頸張力
障礙；
[0021](2)5-10單位的BOTOX? /肌內(nèi)注射用于治療眉間紋(眉毛皺紋)(5單位肌內(nèi)注射入降眉間肌和10單位肌內(nèi)注射入各皺眉肌肌肉);
[0022](3)約30-80單位的BOTOX?以通過恥骨直腸肌的括約肌內(nèi)注射來治療便秘；
[0023](4)約1-5單元/肌肉的肌內(nèi)注射的BOTOX?以通過注射上眼臉的側(cè)面瞼板前的眼輪匝肌肌肉和下眼瞼的側(cè)面瞼板前的眼輪匝肌來治療眼瞼痙攣。
[0024](5)為了治療斜視，已采用約1-5單元的BOTOX?肌內(nèi)注射眼外肌，注射的量基于注射的肌肉尺寸和所需的肌肉麻痹的程度(即所需的屈光度校正的量)兩者而變化。
[0025](6)為了治療中風(fēng)后的上肢痙攣狀態(tài)，如下肌內(nèi)注射BOTOX?入5種不同上肢屈肌:
[0026](a)指(趾)的深屈肌:7.5U至30U
[0027](b)指(趾)的淺屈肌:7.5U至30U
[0028](c)尺側(cè)腕屈肌:10U至40U
[0029](d)橈側(cè)腕屈肌:15U至60U
[0030](e)肱二頭肌:50U至200U。上述5種指明的肌肉各自在相同的治療期間已經(jīng)被注射，以使患者在各治療期間通過肌內(nèi)注射接受90U至360U的上肢屈肌BOTOX?。
[0031](7)為了治療偏頭痛，顱骨膜注射的(對(duì)稱地注射入眉間的肌肉，額肌和顳肌)25U的BOTOX?的注射作為偏頭痛的預(yù)防性治療已經(jīng)顯示比賦形劑更顯著的利益，如通過如下所測(cè)量的:在25U注射后歷經(jīng)3個(gè)月時(shí)期的偏頭痛頻率，最大嚴(yán)重性，相關(guān)嘔吐和急性藥物治療使用的減少的測(cè)量值。
[0032]此外，肌內(nèi)肉毒毒素已經(jīng)用于在患有帕金森病的患者中治療震顫，盡管已有報(bào)道該結(jié)果不顯著(Marjama-Jyons, J.等人，Tremor-Predominant Parkinson'sDisease, Drugs&Agingl6(4) ;273_278:2000)。
[0033]采用肉毒毒素治療某些胃腸道和平滑肌障礙是已知的。參見例如美國(guó)專利號(hào)5,427, 291和5，674，205(Pasricha)。此外，經(jīng)尿道注射肉毒毒素入膀胱括約肌以治療 排尿障礙是已知的（參見例如 DykstrA, D. D.等人，Treatment of detrusor-sphincter dyssynergia with botulinum A toxin:A double-blind study, Arch Phys Med Rehabill990年1月；71:24_6),同樣已知注射肉毒毒素入前列腺以治療前列腺增生。參見 例如美國(guó)專利號(hào)6，365，164(Schmidt)。
[0034]美國(guó)專利號(hào)5，766，605 (Sanders)提議采用肉毒毒素治療多種自主神經(jīng)系統(tǒng)障 礙，例如多涎和鼻炎。
[0035]此外，采用肉毒毒素可治療的多種疾病，例如多汗癥（hyperhydrosis)和頭痛，被 討論于 W095/17904(PCT/US94/14717) (Aoki)。EP060550IB 1 (Graham)討論了用肉毒毒素 治療大腦性癱瘓采，美國(guó)專利號(hào)6，063，768 (First)討論了采用肉毒毒素治療神經(jīng)原性炎 癥。勃起功能障礙已經(jīng)報(bào)告為肉毒中毒癥狀。Jenzer G.等人，Autonomic dysfunction in botulism B:a clinical report, Neurologyl975 ;25:150-153 ；Naumann M.等人，Pure autonomic dysfunction in botulism type B,Naunyn Schmiedeberg’s Archives of Pharmacology，2002年6個(gè)月(supp2) ;365 (在R31的摘要89)。這可以是存在于肉毒中毒 患者中的循環(huán)肉毒毒素的結(jié)果，所述循環(huán)肉毒毒素阻斷乙酰膽堿從陰莖海綿體中膽堿能副 交感神經(jīng)的神經(jīng)末梢的釋放。這將導(dǎo)致陰莖平滑肌放松的抑制和因此減少血流進(jìn)入陰莖結(jié) 構(gòu)，和因此導(dǎo)致松弛的陰莖。相反地，已經(jīng)推測(cè)，肉毒毒素可以用于導(dǎo)致勃起的陰莖（Jones D. High performance. Naturel989 ；3:348)。
[0036]已知的是，A型肉毒毒素可以具有功效至多12個(gè)月（European J N eurology6 (Supp4) : SI 11-SI 150:1999),并且在某些情況中持續(xù) 27 個(gè)月。 Laryngoscope 109:1344-1346:1999。但是，肌內(nèi)注射的Botox?的通常持續(xù)時(shí)間典型 地是約3至4個(gè)月。A型肉毒毒素治療多種臨床病癥的成功已經(jīng)導(dǎo)致對(duì)其它肉毒毒 素血清型的關(guān)注。另外，純的肉毒毒素已經(jīng)用于治療人類。參見例如Kohl A.等人， Comparison of the effect of botulinum toxin A(Botox(R))with the highly-purified neurotoxin(NT201)in the extensor digitorum brevis muscle test, Mov Disord2000 ； 15(Suppl3) :165。因此，可以使用純的肉毒毒素制備藥物組合物。
[0037]肉毒毒素分子（約150kDa),以及肉毒毒素絡(luò)合物（約300_900kDa),例如毒素A 型絡(luò)合物也極其易受變性作用影響，所述變性作用源于表面變性作用，熱和堿性條件。未 激活的毒素形成類毒素蛋白，其可以是免疫原性。所得抗體可以使患者難以用毒素注射治 療。市售的含有肉毒毒素的藥物組合物是以商標(biāo)BOTOX?出售（可從Allergan，Inc.，of Irvine得到)。BOTOX?由純化的A型肉毒毒素絡(luò)合物、白蛋白和氯化鈉組成，被包裝在 無菌、真空-干燥形式中。從肉毒梭菌的Hall菌株的培養(yǎng)物制備A型肉毒毒素，所述Hall 菌株生長(zhǎng)在含有N-Z胺和酵母提取物的培養(yǎng)基中。通過系列酸沉淀從培養(yǎng)物溶液純化A型 肉毒毒素絡(luò)合物來得到晶體絡(luò)合物，該晶體絡(luò)合物由活性高分子量毒素蛋白質(zhì)和相關(guān)血凝 素蛋白質(zhì)組成。晶體絡(luò)合物被再溶解 在含有鹽水和白蛋白的溶液中，并無菌過濾（0.2微 米），之后真空-干燥。boi’ox?可以用無菌、未防腐處理的鹽水在肌內(nèi)注射之前重構(gòu)。 各小瓶的BOTOX?包11在不含保藏劑的無菌、真空-干燥形式中的約100單位（u)的A 型肉毒梭菌毒素絡(luò)合物、0. 5毫克的人血清白蛋白和0. 9毫克的氯化鈉。[0038]為了重構(gòu)不含保藏劑的真空-干燥BOTOX?無菌生理鹽水；通過在適當(dāng)尺寸注射器中擬定適當(dāng)量的稀釋劑使用0.9%氯化鈉注射。因?yàn)橥ㄟ^鼓泡或類似劇烈攪拌使BOTOX?變性，稀釋劑被逐漸地注射入小瓶。BOTOX?應(yīng)在重構(gòu)之后4小時(shí)之內(nèi)被施用。在這時(shí)間期限內(nèi)，重構(gòu)的BOTOX?被儲(chǔ)存在冰箱中(2°C至8°C)。重構(gòu)BOTOX?是澄清的、無色的且不含顆粒物質(zhì)。真空-干燥產(chǎn)物被儲(chǔ)存在或低于_5°C的冷凍器中。BOTOX?在從冷凍器移除小瓶之后4小時(shí)之內(nèi)被施用和重構(gòu)。在這4小時(shí)中，重構(gòu)的BOTOX?可以被儲(chǔ)存在冰箱中(20°C至8°C )。
[0039]其它市售的含有肉毒毒素的藥物組合物包括Dysport? (制劑形式的含白蛋白
和乳糖的A型肉毒梭菌毒素血細(xì)胞凝集素絡(luò)合物,可獲自Ipsen Limited, Berkshire, U.K.，為在使用之前用0.9%氯化鈉重構(gòu)的粉末)，和MyoBloc?.(包含B型肉毒毒素、
人血清白蛋白、琥拍酸鈉，和氯化鈉的在約pH5.6的可注射溶液，可獲自SolsticeNeurosciences, Inc)。
[0040]因此需要的是用于治療早泄和/或延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的簡(jiǎn)單方法。具體的是，用于治療早泄和/或延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的長(zhǎng)效、非全身性的方法是所需的，該方法不必在性行為中展示魅力之前口服或反復(fù)攝入藥物化合物。
[0041]發(fā)明概述
[0042]本發(fā)明滿足了這個(gè)需求，并提供在有此需要的患者中治療早泄和/或延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的有效和長(zhǎng)效的方法。在一個(gè)實(shí)例中，提供的是用于在有此需要的患者中治療早泄的方法，所述方法包括如下步驟:局部施用梭菌屬神經(jīng)毒素至患者，由此治療患者的早泄。作為實(shí)例，依照本文公開的方法，通過透皮、肌內(nèi)、皮下、真皮下、皮內(nèi)或植入劑施用實(shí)現(xiàn)局部施用治療量的梭菌屬神經(jīng)毒素。在一個(gè)實(shí)施方案中，例如，通過注射局部施用治療量的梭菌屬神經(jīng)毒素入患者，例如入`陰莖。用于本文描述的方法的優(yōu)選梭菌屬神經(jīng)毒素是肉毒神經(jīng)毒素，其可以選自A、B、C、D、E、F和G型肉毒神經(jīng)毒素，并且優(yōu)選A型肉毒神經(jīng)毒素。多種范圍/量的肉毒神經(jīng)毒素可以依照本公開內(nèi)容的教導(dǎo)被治療性施用，例如，肉毒毒素可以以約I單位至20，000單位的量被施用，當(dāng)然，這取決于使用的肉毒毒素類型的效能和其施用方法(例如包含在緩慢-釋放植入劑或搏動(dòng)式植入劑中的肉毒毒素的量可以大于從植入劑直接地和立即被施用、而不是緩慢釋放的肉毒毒素量很多倍)。A型或B型肉毒神經(jīng)毒素的示例性適用量，可以分別是約I單位至2500單位或約100至約15，000單位，或其間的量或范圍。
[0043]在特定的實(shí)施方案中，通過注射梭菌屬神經(jīng)毒素入患者陰莖的一個(gè)或多個(gè)位置，來實(shí)現(xiàn)局部施用治療量的梭菌屬神經(jīng)毒素至患者。
[0044]定義
[0045]如本文使用的，下文列出的詞匯或術(shù)語(yǔ)具有下列定義。
[0046]"約"意指大約或幾乎和在本文列出的數(shù)字的值或范圍上下文中意指描述的或要求保護(hù)的數(shù)字的值或范圍的±10%。
[0047]如本文使用的〃治療有效量〃，意指梭菌屬神經(jīng)毒素，例如A、B、C、D、E、F和G型肉毒毒素的量，該量改善或消除特定的疾病或病況的一個(gè)或多個(gè)癥狀或預(yù)防或延遲特定的疾病或病況的一個(gè)或多個(gè)癥狀的發(fā)生。
[0048]"局部施用"意指通過非全身性途徑直接施用在疾病或障礙的部位或與之鄰近的部位。因此，包含梭菌屬神經(jīng)毒素、例如肉毒神經(jīng)毒素的藥物的局部施用排除靜脈內(nèi)或口服施用，但是包括，例如，用于施用神經(jīng)毒素的肌內(nèi)、透皮或皮下注射或放置植入劑。
[0049]〃治療〃意指暫時(shí)地或永久地減輕(或消除)至少一個(gè)癥狀。因此，這包括增加患者在性喚起之后達(dá)到情欲高潮的時(shí)間(即延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間)。在一個(gè)具體的實(shí)施例中，情欲高潮時(shí)間是性交開始至實(shí)現(xiàn)情欲高潮的時(shí)間之間的時(shí)間。梭菌屬毒素優(yōu)選肉毒毒素(作為絡(luò)合物或作為純的毒素[即約150kDa分子，肉毒毒素的神經(jīng)毒性成分,不含絡(luò)合蛋白],例如肉毒毒素A、B、C、D、E、F或G?？梢允峭ㄟ^透皮途徑(例如通過應(yīng)用在乳膏劑、貼劑或洗劑賦形劑中的梭菌屬毒素)、真皮下途徑(即皮下或肌內(nèi)注射)或通過皮內(nèi)施用途徑來施用梭菌屬毒素。
[0050]〃神經(jīng)毒素〃包括梭菌屬神經(jīng)毒素，其作為純的毒素以及與一種至多種非毒素、毒素相關(guān)蛋白絡(luò)合，無論是否通過天然的梭菌細(xì)菌或通過非梭菌物種中的重組手段而被制備?！叭舛旧窠?jīng)毒素”意指非絡(luò)合的肉毒神經(jīng)毒素(即具有約150kDa的分子量的純的肉毒神經(jīng)毒素分子)或作為絡(luò)合物(即具有約300至約900kDa重量的分子量的絡(luò)合物，其包括神經(jīng)毒素分子和一個(gè)或多個(gè)相關(guān)非毒性分子)，并且排除不是神經(jīng)毒素的肉毒毒素，例如細(xì)胞毒性肉毒毒素C2和C3，但是可以包括重組產(chǎn)生的、混合的，修飾的，和嵌合的肉毒毒素。
[0051]〃患者〃意指接受醫(yī)療的人受試者。
[0052]“情欲高潮基線時(shí)間”是患者治療前情欲高潮時(shí)間，即，患者在變得性覺醒之后達(dá)到情欲高潮需要的時(shí)間或平均時(shí)間。
[0053]“延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間”意指患者變得性覺醒至性情欲高潮(即性高潮)的時(shí)間增加(情欲高潮基線時(shí)間增加)。在一個(gè)方面，“治療早泄”意指增加時(shí)間，所述時(shí)間為從患者性喚起開始至患者射精時(shí)的時(shí)間；`和在具體的情況下，它可以意指增加時(shí)間，所述時(shí)間為從性交開始至射精時(shí)的時(shí)間。
[0054]本發(fā)明包括用于通過局部施用梭菌屬毒素至哺乳動(dòng)物、例如人患者來治療早泄的方法。優(yōu)選地，肉毒毒素是A型肉毒毒素。肉毒毒素可以以約I單位至約10，000單位的量被施用，早泄和/或情欲高潮時(shí)間的延長(zhǎng)可以被改善，持續(xù)約2周至約6個(gè)月。在具體的實(shí)施例中，早泄和/或情欲高潮時(shí)間的延長(zhǎng)可以被改善，例如持續(xù)約2個(gè)月至約6個(gè)月，或約4個(gè)月至約6個(gè)月。在一個(gè)方面，通過直接施用梭菌屬毒素，例如肉毒神經(jīng)毒素至患者陰莖的至少一個(gè)位置，進(jìn)行局部施用步驟。
[0055]在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供的是用于在有此需要的患者中治療早泄的方法，其中所述方法包含如下步驟:通過注射，局部施用肉毒神經(jīng)毒素至患者陰莖，由此治療患者的早泄。在具體的實(shí)施方案中，肉毒神經(jīng)毒素被注射入至少兩個(gè)陰莖位置，和在某些實(shí)例中至少3個(gè)陰莖位置。在特定實(shí)施例中，局部施用的肉毒神經(jīng)毒素針對(duì)陰莖的系帶，示例性量是I至約2500單位的A型肉毒毒素。例如，當(dāng)使用B型肉毒毒素時(shí)，施用量可以是約I單位至約25，000單位，或約100單位至約20，000單位或約500單位至約15，000單位或其間的任何量。
[0056]作為另一個(gè)實(shí)施例，本文提供用于在有此需要的患者中治療早泄的方法，其中A型肉毒神經(jīng)毒素被局部施用于患者陰莖的至少一個(gè)位置，其中位置是陰莖的系帶和/或陰莖頭，以由此治療患者的早泄，其中示例性適用的量包括將約I單位至約2500單位的肉毒神經(jīng)毒素施用于至少一個(gè)位置。在具體的實(shí)施方案中，例如在初始施用肉毒神經(jīng)毒素至陰莖之后約至少約2個(gè)月至約3個(gè)月或更久，可以附加施用肉毒神經(jīng)毒素至患者陰莖。在具體的實(shí)施方案中，局部施用的A型肉毒神經(jīng)毒素是約I單位至約500單位/注射位置/就診患者(visit)。示例性肉毒神經(jīng)毒素施用可以針對(duì)陰莖的單一位置(例如系帶)或分布于陰莖2個(gè)或更多個(gè)解剖學(xué)不同的部分的單一位置(例如陰莖系帶，陰莖包皮/包皮，陰莖頭陰莖，尿道開口)。
[0057]此外，提供的是用于在有此需要的患者中延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的方法，其中所述方法包含如下步驟:局部施用肉毒神經(jīng)毒素至患者，以由此延長(zhǎng)患者情欲高潮時(shí)間。施用肉毒神經(jīng)毒素可以是通過透皮、肌內(nèi)、皮下、真皮下、皮內(nèi)或植入劑施用，并且可以針對(duì)例如，系帶或包皮。在具體的實(shí)施方案中，肉毒神經(jīng)毒素通過注射被施用，并且肉毒神經(jīng)毒素是A型或B型肉毒神經(jīng)毒素。
[0058]可以對(duì)其實(shí)踐本文公開的方法的患者的年齡范圍可以是約18歲至約60歲，更具體地，約18歲至約40歲，和甚至更具體地，約18歲至約30歲。在具體的情況中，患者已經(jīng)嘗試多種先前的治療，所述治療沒有被發(fā)現(xiàn)令人滿意地治療患者的早泄。
[0059]通過本文公開的方法可以治療的患者可以先前經(jīng)受了用于治療他們的早泄或用于延長(zhǎng)他們的情欲高潮時(shí)間的方案。例如，示例性方案可以包括服用選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、例如氟西汀或帕羅西汀?？梢砸驯粐L試的其它方法包括應(yīng)用局部的麻醉藥，例如利多卡因5%乳膏劑，其在性交之前應(yīng)用至陰莖。這類方法可以，如果需要，與本文公開的方法組合以治療早泄或用于情欲高潮時(shí)間的延長(zhǎng)。
[0060]在具體的實(shí)施方案中，以是否需要為準(zhǔn)，施用肉毒神經(jīng)毒素。給藥取決于，和尤其是，早泄的患者/ 具體表現(xiàn)，不限于，本文提供示例性量。例如，在肉毒毒素施用之后作用的持續(xù)時(shí)間可以是在施用之后至多約4個(gè)月。在具體的情況中，在肉毒毒素施用之后作用的持續(xù)時(shí)間可以是在肉毒毒素施用之后約2天至約3個(gè)月。例如，更短的持續(xù)時(shí)間的效果可以是與另一種肉毒毒素(例如A型肉毒毒素)相比具有短效特性/作用的持續(xù)時(shí)間的肉毒毒素(例如E型肉毒毒素)相關(guān)。
[0061]說明
[0062]本文提供用于治療早泄的方法，該方法局部施用梭菌屬毒素(優(yōu)選肉毒毒素選自A、B、C、D、E、F和G型肉毒毒素，更優(yōu)選A或B型肉毒毒素、最優(yōu)選A型肉毒毒素)至有此需要的患者。本文公開的方法通過安全的、簡(jiǎn)單、長(zhǎng)效治療方法(可以具有至多約6個(gè)月的所需作用的持續(xù)時(shí)間)為患者提供延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間和/或治療早泄的能力。
[0063]存在若干適用的方法,通過該方法梭菌屬毒素可以被局部施用。例如，使用多種肉毒毒素制劑的用于施用肉毒毒素的透皮方法是本領(lǐng)域已知的。這類制劑可以是基于水的，例如肉毒毒素的目前可利用的商業(yè)形式用鹽水稀釋，或在鹽水中提供。但是，也考慮其它水性或非水性遞送載體，例如乳膏，洗劑，凝膠劑，軟膏，或乳劑(用于肉毒毒素的透皮施用參見，例如下列非徹底的清單:美國(guó)專利申請(qǐng)第20040009180號(hào)，其為2002年7 月 11 日提交的，名為“Transdermal botul inum toxin compositions” ；美國(guó)專利申請(qǐng)第 20090087457 號(hào)，其為 2006 年 3 月 3 日提交的，名為“Compositions and Methods forTopical Application and Transdermal Delivery of Botulinum Toxins，，；美國(guó)專利申請(qǐng)第 20070116724 號(hào)，其為 2006 年 11 月 16 日提交的名為 “Compositions and Methodsof Topical Application and Transdermal Delivery of Botulinum Toxins withoutReduced Non-Toxin Proteins” ；美國(guó)專利申請(qǐng)第 20030113349 號(hào)，其為 2002 年 12 月 18日提交的，名為 “Topically applied clostridium botul inum toxin compositions andtreatment methods” ；美國(guó)專利申請(qǐng)第2008022002號(hào)，其為2008年5月23日提交的，名為“Topical Botulinum Toxin Compositions for the Treatment of Hyperhidrosis，，；WIPO公開文本第W0/2008/070538號(hào)，其為年200711月30日提交的名為“MicellarNanoparticles Comprising Botulinum Toxin”和美國(guó)專利7445783,其名為“Topical andtransdermal treatments using urea formulations，，，所有這類專利和專利申請(qǐng)通過引用以其整體并入本文。
[0064]本發(fā)明在其范圍之內(nèi)包括:(a)通過細(xì)菌的培養(yǎng)、毒素提取、濃縮、防腐處理、冷凍干燥和/或重構(gòu)得到的或加工的肉毒神經(jīng)毒素絡(luò)合物以及純的肉毒神經(jīng)毒素，以及；(b)修飾的或重組的肉毒神經(jīng)毒素，其是肉毒神經(jīng)毒素，該肉毒神經(jīng)毒素的一個(gè)或多個(gè)氨基酸或氨基酸序列通過已知的化學(xué)/生物化學(xué)氨基酸修飾方法或通過使用已知的宿主細(xì)胞/重組體載體重組技術(shù)而有意地被刪除、修飾或代替，以及如此制備的肉毒神經(jīng)毒素的衍生物或片段，并且包括具有一個(gè)或多個(gè)連接的非天然的靶向部分的肉毒神經(jīng)毒素，所述部分針對(duì)在細(xì)胞上存在的細(xì)胞表面受體。
[0065]優(yōu)選地，因?yàn)槠涑晒Φ刂委熤T多適應(yīng)證的臨床歷史，在本發(fā)明的范圍內(nèi)的方法包括局部施用A型肉毒毒素或B型肉毒毒素，盡管與A型毒素相比，采用較大蛋白質(zhì)負(fù)荷使用B型肉毒毒素。用于在本發(fā)明的范圍內(nèi)的方法的A型肉毒毒素可以是毒素和非毒素蛋白的絡(luò)合物，其共同含有至多約900kDa的總分子量。劑量范圍和量，如同任何藥物，是基于患者的尺寸、年齡和健康狀況，以及使用的特定的肉毒毒素商業(yè)制劑。本領(lǐng)域已知的是，肉毒毒素的治療用途針對(duì)特定的患者被調(diào)整，所述毒素被提供以用于治療，例如以治療早泄。用于在本發(fā)明的范圍內(nèi)的方法的B型肉毒毒素可以是純的毒素或毒素和非毒素蛋白的絡(luò)合物，其以約50至約20，000單位的劑量被使用。其它肉毒毒素血清型可以根據(jù)它們的分別的生物學(xué)活性水平與本文被舉例`說明的劑量和濃度成比例地被使用。例如，在本公開內(nèi)容中列舉的大部分單位是針對(duì)BOTOX?的，但是可以使用肉毒毒素的不同血清型或菌株，并且可以施用不同量。例如，可以使用比BOTOX?的量多約3-4倍的DYSPORT? (A型肉毒毒素絡(luò)合物，可獲自Ipsen Inc.);可以使用比BOTOX?的量多約40-50倍的神經(jīng)BLOC0/MYOBLOC? (B 型肉毒毒素，可獲自 Solstice Neurosciences);和可以使用
相對(duì)于BOTOX?單元的約等效量(以單位計(jì))的XEOMIN?彳(純的A型肉毒毒素，獲自Merz Pharma)，以分別實(shí)現(xiàn)所需的治療作用。本發(fā)明也包括同時(shí)或依次施用上述神經(jīng)毒素中的兩種或更多種的混合物以有效治療早泄患者的方法。
[0066]除了用于施用肉毒毒素的透皮方法，可以使用肉毒毒素的注射以治療早泄和/或用于情欲高潮時(shí)間的延長(zhǎng)。當(dāng)使用注射劑時(shí)，可以使用用于肉毒毒素注射的適當(dāng)?shù)尼?，例如，但是不限?0-號(hào)或更小，優(yōu)選約23-號(hào)至約25-號(hào)的針，和在注射之前，優(yōu)選地，例如采用醇，將區(qū)域清潔。局部麻醉劑乳膏劑、全身麻醉、鎮(zhèn)靜作用或任何已知的適用的麻醉劑可以被使用，并且可以是必需的，這取決于依照本方法接受治療的特定的患者(某些患者是比其他人更敏感的)。在具體的實(shí)施例中，可以在通過針施用肉毒毒素之前局部應(yīng)用麻醉劑乳膏劑，例如，比如苯佐卡因、氨苯丁酯、地布卡因、利多卡因、奧布卡因、普莫卡因、丙美卡因、丙美卡因，和丁卡因。此外，遞送肉毒毒素的無針施用方法是本領(lǐng)域熟知的(參見例如，美國(guó)專利號(hào)7，479，281和7，479，134，兩者通過引用并入本文)，這類施用/設(shè)備可以用作用于依照治療本文公開的方法施用肉毒毒素的遞送手段。
[0067]在具體的實(shí)施例中，局部的利多卡因麻醉劑乳膏劑被使用和應(yīng)用至將要注射的區(qū)域?？梢允褂闷渌樽韯┓椒?，例如阻斷陰部(prudendal)神經(jīng)的陰莖分支，使用，例如，2%利多卡因注射(總共約5cc至約IOcc的2%利多卡因制劑)施用于陰莖的基底(至陰莖的基底的前部(腹部)和后部(背部))；和/或有時(shí)可以冷卻將要注射的區(qū)域，例如通過應(yīng)用冰或冷空氣(例如，可以使用來自Zimmer Medizin Systems, Irvine, California的“Zimmer Cryo5”設(shè)備應(yīng)用冷空氣)。
[0068]施用的神經(jīng)毒素，例如肉毒毒素的量可以根據(jù)被治療的特定的患者/病例、其嚴(yán)重性和其它多種患者變量(包括尺寸、體重、年齡和患者對(duì)治療的反應(yīng)性)而廣泛變化。通常，被施用的肉毒神經(jīng)毒素的劑量將根據(jù)年齡、尺寸和呈現(xiàn)的被治療的患者的病況的不同而變化。當(dāng)使用肉毒毒素治療時(shí)，被施用的神經(jīng)毒素的效能也是考慮因素(針對(duì)特定的患者/病例調(diào)節(jié)肉毒毒素的特定的劑量是肉毒神經(jīng)毒素本領(lǐng)域熟知的)。
[0069]在某些情況中，施用的肉毒神經(jīng)毒素的劑量可以增加直到實(shí)現(xiàn)所需的作用(例如直到患者對(duì)所得的射精延遲滿意)。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，第一劑量可以是約10單位至約75單元的肉毒毒素，或約25單元至約50單位的肉毒毒素，例如BOTOX?。如果觀察到不令人滿意的結(jié)果，治療劑量可以增加，如由在手邊的對(duì)特定病例的執(zhí)業(yè)醫(yī)生評(píng)價(jià)所確定的，例如，劑量被增加至多約100單位的肉毒毒素。在這類情況下，在肉毒毒素增加劑量的施用之間的時(shí)間可以是約3周，優(yōu)選約I個(gè)月和最優(yōu)選約2個(gè)月。
[0070]用于治療早泄和/或延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的本發(fā)明的方法可以對(duì)患者實(shí)施，例如，針對(duì)約18歲至約60歲，更具體地，約18歲至約40歲，和甚至更具體地，約18歲至約30歲的患者。在任何這類患者中，當(dāng)患者不可以保持不射精并持續(xù)所需的充足時(shí)間時(shí)，可以認(rèn)為表現(xiàn)出早泄的問題自身。例如，患者可以經(jīng)歷了 “情欲高潮基礎(chǔ)時(shí)間”，即，患者在變得性覺醒的之后達(dá)到情欲高潮花費(fèi)的時(shí)間或平均時(shí)間，其為約I分鐘至約10分鐘。在具體的情況中，這甚至可以不允許患者開始/完成性交，如果患者甚至在開始性交之前(例如在陰莖進(jìn)入伴侶之前)過早地射精，或在陰莖進(jìn)入或甚至企圖進(jìn)入之后立即進(jìn)行射精。顯然，遭受這類困境的患者將通過本文公開的治療方法非常好地被服務(wù)。
[0071]在某些情況中，可以 甚至在開始性交之后經(jīng)歷早泄，也就是說，甚至如果患者能進(jìn)入他們的伴侶(即在進(jìn)入之前不射精)，之后過早地射精。在這類情況中，在進(jìn)入和射精之間的時(shí)間期限被認(rèn)為太短，并且因此延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間(此處指增加從性交開始至射精的時(shí)間)是所需的。在具體的非限制實(shí)施例中，如果在進(jìn)入之后約10秒至約15分鐘，在進(jìn)入之后約15秒至約10分鐘或在進(jìn)入之后約30秒至約5分鐘之后完成射精，那么患者可以被認(rèn)為患有早泄。在具體的病例中，如果在進(jìn)入之后約10秒至約3分鐘，在進(jìn)入之后約25秒至約2分鐘或在進(jìn)入之后約30秒至約I分鐘之后完成射精，患者可以被認(rèn)為患有早泄。
[0072]患有早泄的患者可以已經(jīng)發(fā)現(xiàn)先前的治療方法，例如攝入SSRIs (例如每日分別服用20mg和40mg氟西汀或帕羅西汀)不充足地治療患者的早泄，因此將發(fā)現(xiàn)本治療方法是適用的，無論是代替患者的選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑方案還是與這類方案相結(jié)合?？梢詻]有提供令人滿意的結(jié)果的先前實(shí)施的方法也可以包括使用局部的麻醉劑治療，例如，在性交之前(例如在之前約10分鐘)，例如應(yīng)用5%利多卡因乳膏劑至陰莖。使用局部的麻醉劑治療的患者可以發(fā)現(xiàn)本治療方法是適用于代替他們的局部的麻醉劑治療方案或與局部的麻醉劑治療方案結(jié)合。
[0073]可以施用肉毒毒素,例如A或B型肉毒毒素的示例性位置包括陰莖。具體的是，例如，為了治療早泄，可以將肉毒神經(jīng)毒素的施用靶向區(qū)域例如單獨(dú)的陰莖頭，龜頭包皮的(balonopreputial)表面,系帶，或上述區(qū)域的任何組合。
[0074]在示例性實(shí)施方案中，將接受肉毒神經(jīng)毒素的區(qū)域是使用醇清潔的，例如通過使用例如醇擦拭物。如果需要，然后將局部麻醉劑(如本文公開的)應(yīng)用至清潔的區(qū)域，在這之后肉毒神經(jīng)毒素被施用。在處理之后，指導(dǎo)患者在接下來的48小時(shí)中不要進(jìn)行性行為，并且如果觀察到水腫和/或炎癥，可以應(yīng)用冷敷或冰袋。典型地，患者在約48至約72小時(shí)之內(nèi)觀察到效果(例如延遲先前的早泄)，并且通常在約3周之后觀察到完全的結(jié)果(最大延遲)。下列是非限制性實(shí)施例，其中治療患有早泄的患者。
實(shí)施例
[0075]實(shí)施例1
[0076]治療早泄
[0077]24歲男性出現(xiàn)在他的醫(yī)生的辦公室，抱怨他在進(jìn)入他的伴侶之后約2分鐘之內(nèi)達(dá)到情欲高潮(對(duì)于這患者，他的情欲高潮基線時(shí)間是2分鐘)。這是給患者以及他的伴侶帶來巨大驚恐的主題。醫(yī)生如下治療患者，通過采用異丙基醇清潔將要注射的區(qū)域和使用30號(hào)針施用約50單位的A型肉毒毒素(BOTOX?)至患者的陰莖。注射進(jìn)入陰莖頭和距離尿道開口約Icm和指導(dǎo)患者持續(xù)48小時(shí)不要性交。在隨訪出診時(shí)，患者報(bào)告經(jīng)歷在注射位置的輕微疼痛，其在注射的24小時(shí)之內(nèi)消失，但是另外沒有注意到勃起功能障礙或敏感性喪失。患者報(bào)告他發(fā)現(xiàn)他的情欲高潮基線時(shí)間倍增(約2至約4分鐘)，和經(jīng)常是甚至可以持續(xù)享受性交長(zhǎng)于4分鐘(大于他的情欲高潮基線時(shí)間的兩倍)。這些結(jié)果，即，在性交開始之后延長(zhǎng)該患者射精時(shí)間，在初始肉毒神經(jīng)毒素施用之后被持續(xù)觀察到約4個(gè)月，在這之后患者在相同的位置重新接受相同量的肉毒毒素的再注射。
[0078]注意到的是，在這樣情況中，醫(yī)生可以選擇施用另一種肉毒毒素制劑/血清型，如果他如此選擇，例如，比如，約200單位的DYSP0RT或約50單位的ΧΕ0ΜΙΝ(Α型肉毒毒素制備物)或約2500單位的MY0BL0C (B型肉毒毒素制劑)。
[0079]實(shí)施例2
[0080]治療早泄
[0081]32歲男性出現(xiàn)在他的醫(yī)生的辦公室，抱怨每次他進(jìn)行性交時(shí)，他在進(jìn)入他的伴侶之后約10秒之內(nèi)達(dá)到情欲高潮(他的情欲高潮基線時(shí)間是約10秒)，患者和他的伴侶變得非常厭倦該處境。因此和在考慮患者的詳細(xì)的性歷史之后，醫(yī)生確定患者患有早泄和決定施用肉毒神經(jīng)毒素至患者。因此，醫(yī)生采用異丙基醇清潔患者的分布于陰莖頭前部區(qū)域的陰莖系帶和隨后應(yīng)用局部的利多卡因麻醉乳膏劑以麻醉區(qū)域，在這之后使用25號(hào)針注射25單元的肉毒神經(jīng)毒素(BOTOX?)。處理后，指導(dǎo)患者在接下來的48小時(shí)中不要性交。如果注意到水腫和/或炎癥，推薦適當(dāng)應(yīng)用冰袋至區(qū)域(一次應(yīng)用不長(zhǎng)于約15分鐘)。
[0082]在2周之后的隨訪期間，患者報(bào)告他是依然不能持續(xù)阻止射精長(zhǎng)于約10秒。因此，
醫(yī)生如之前一樣使患者準(zhǔn)備接受注射，這次施用50單位的肉毒神經(jīng)毒素(BOTOX?)和施
用患者相同的處理后指導(dǎo)。在3周之后的隨訪期間，患者報(bào)告他的情欲高潮基線時(shí)間加倍，而且在某些場(chǎng)合持續(xù)約10至15分鐘，以及他和他的伴侶非常滿意所得治療效果。
[0083]實(shí)施例3_4]治療原發(fā)性早泄
[0085]在患病十年之后，42歲男性就診于他的醫(yī)生辦公室以報(bào)告患有早泄妨礙他的性交能力，因?yàn)橐坏┬杂X醒，他就過早地射精，甚至在開始性交之前。他告知醫(yī)生，他自從達(dá)到性成熟就已經(jīng)保持這種狀態(tài)。他的醫(yī)生決定開如下藥方:氟西汀20mg，每日服用以觀察這是否幫助減輕他的原發(fā)性早泄。在服用氟西汀2個(gè)月之后，患者報(bào)告，在他的開始性交之前早泄的情況沒有變化。除了每日氟西汀，也開了局部的治療的藥方，具體的是指導(dǎo)患者在性交之前約10分鐘局部地采用5%利多卡因乳膏劑。3周之后，患者依然報(bào)告他的處境沒有變化。
[0086]醫(yī)生決定施用肉毒神經(jīng)毒素至患者的陰莖。因此，采用醇清潔在龜頭包皮的表面中的陰莖頭后部區(qū)域和系帶的區(qū)域，并應(yīng)用陰部神經(jīng)阻斷，使用2%利多卡因注射至陰莖基底的背部和腹部部分(例如，阻斷施用麻醉劑如對(duì)于男性包皮環(huán)切術(shù)的施用所使用的/類似于男性包皮環(huán)切術(shù)的施用)。約50單位的A型肉毒毒素(BOTOX)被注射入在龜頭包皮的區(qū)域中的陰莖頭后部區(qū)域，而另一個(gè)25單元被施用于系帶。處理后，指導(dǎo)患者在接下來的48小時(shí)中不要性交。如果注意到水腫和/或炎癥，推薦適當(dāng)應(yīng)用冰袋至區(qū)域(一次不長(zhǎng)于約15分鐘)，和指導(dǎo)患者`持續(xù)使用氟西汀?；颊?周之后報(bào)告反饋，他現(xiàn)在可以進(jìn)入和與他的伴侶性交持續(xù)至多約15分鐘，而沒有過早地射精，并且這些陽(yáng)性結(jié)果被持續(xù)觀察到約3個(gè)月。
[0087]實(shí)施例4
[0088]治療繼發(fā)性早泄
[0089]52歲男性出現(xiàn)在他的醫(yī)生的辦公室，抱怨他患有早泄?；颊吒嬷t(yī)生，他先前沒有患有這種病況，但是自從他與他的上一位伴侶性交后，他不可以避免早泄的發(fā)作。醫(yī)生決定
通過施用2500單位的B型肉毒毒素(MYOBLOC?)至患者的系帶，從而治療患者。在注
射之后，指導(dǎo)患者在接下來的48小時(shí)中不要性交。患者2.5周之后報(bào)告反饋，他現(xiàn)在可以進(jìn)入和與他的伴侶性交持續(xù)至多約15分鐘，而沒有過早地射精，并且這些陽(yáng)性結(jié)果被持續(xù)觀察到約4個(gè)月，在這之后患者重新接受其它肉毒毒素施用。這次,醫(yī)生使用B型肉毒毒素透皮制劑將肉毒毒素施用至患者的系帶。陽(yáng)性結(jié)果得到了報(bào)告，即患者在射精發(fā)生之前能夠持續(xù)性交最短約9分鐘。
[0090]根據(jù)本文公開的方法的治療具有很多優(yōu)勢(shì)，包括:
[0091]1.有效減輕早泄，典型地包括至少倍增患者的情欲高潮基線時(shí)間，實(shí)現(xiàn)相對(duì)快的作用的發(fā)生，典型地在施用肉毒神經(jīng)毒素之后約48至約72小時(shí)首先被注意到；
[0092]2.可以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)效減輕早泄，并且觀察到作用的持續(xù)時(shí)間為在施用肉毒神經(jīng)毒素之后約3個(gè)月至約6個(gè)月；[0093]3.沒有來自實(shí)踐公開的發(fā)明的副作用或存在最小的這種副作用，并且該方法被局部使用和不必?cái)z入和全身性循環(huán)藥物，所述藥物在此以前已被用于治療早泄；
[0094]4.依照本文公開的方法使用神經(jīng)毒素不導(dǎo)致勃起功能障礙或敏感性喪失，不同于先前使用的用于治療早泄的方法。
[0095]盡管本發(fā)明已經(jīng)針對(duì)某些優(yōu)選的方法進(jìn)行了詳述描述，在本發(fā)明的范圍內(nèi)的其它實(shí)施方案、形式和修飾是可能的。例如，除了肉毒毒素，可以實(shí)現(xiàn)相同的所需結(jié)果(通過局部施用毒素而治療早泄)的其它神經(jīng)毒素是在本發(fā)明范圍內(nèi)。因此，破傷風(fēng)毒素可以顯示功效以及重組、嵌合的和修飾的梭菌屬毒素，包括重組、嵌合的和修飾的肉毒毒素也可以顯示功效。此外，本發(fā)明包括通過局部施用兩種或更多種神經(jīng)毒素而治療早泄，例如同時(shí)或連續(xù)施用兩種或更多種肉毒毒素。例如，A型肉毒毒素可以被施用直到喪失臨床反應(yīng)或中和抗體發(fā)展，接著施用B或E型肉毒毒素?；蛘撸舛径舅匮逍虯-G中的任何兩種或更多種的組合可以被局部施用以控制所需治療結(jié)果的發(fā)生和持續(xù)時(shí)間。此外，在施用神經(jīng)毒素之前、與之同時(shí)或在其之后，可以施用非神經(jīng)毒素化合物以證實(shí)附加作用，例如在神經(jīng)毒素、例如肉毒毒素開始發(fā)揮其治療作用之前去神經(jīng)支配的增強(qiáng)或更快速的發(fā)生。最終，例如，也可以如本文公開的，使用相對(duì)短效肉毒毒素，例如E型肉毒毒素，其中指明了使用短效毒素，以治療早泄。
[0096]用于描述本發(fā)明(特別是在下列權(quán)利要求的上下文中)上下文的術(shù)語(yǔ)“一個(gè)(a) ”、“一種(an)”、“該(the)”和類似表達(dá)將被理解為包括單數(shù)和復(fù)數(shù)兩者，除非本文另有說明或顯然在上下文中相矛盾。本文提及的值的范圍僅僅意欲用作單獨(dú)提及落入在范圍之內(nèi)的各單獨(dú)值的速記方法。除非本文另有說明，各單獨(dú)的值被并入申請(qǐng)文件，如同它被本文單獨(dú)描述。所有本文描述的方法可以以任何適宜的順序?qū)嵤潜疚牧碛姓f明或另外顯然在上下文中相矛盾。使用本文提供的任何和所有實(shí)施例、或示例性語(yǔ)言(例如，“例如”)僅僅意欲更好地說明本發(fā)明而不施加限制于本發(fā)明另外要求保護(hù)的范圍。在申請(qǐng)文件中沒有語(yǔ)言應(yīng)被理解為表明實(shí)踐本發(fā)明必需的任何非要求保護(hù)的元素。
[0097]本文公開的本發(fā)明的可代替元素或?qū)嵤┓桨傅姆诸惒粚⒈焕斫鉃橄拗啤８黝惓蓡T可以單獨(dú)被提及和要求保護(hù)，或以與本文發(fā)現(xiàn)的所述組的其它成員或其它元素的任何組合被提及和要求保護(hù)?？梢灶A(yù)見的是，為了方便和/或可授予專利權(quán)的原因可以在組中包括，或從組中刪除類的一個(gè)或多個(gè)成員。當(dāng)任何這組包括或刪除存在時(shí)，申請(qǐng)文件被認(rèn)為含有所修飾的組，因此滿足用于所附權(quán)利要求的所有Markush組的書面說明書。
[0098]那些本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在閱讀前述說明書之后，將明確示例性實(shí)施方案的變體。發(fā)明人預(yù)期技術(shù)人員在合適時(shí)使用這類變體，并且發(fā)明人意欲將本發(fā)明以不同于本文特定描述的其他方式實(shí)施。例如，依照本公開內(nèi)容的教導(dǎo)適用的特定的劑量和注射細(xì)節(jié)例如施用位置數(shù)量和施用至患者的位置被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，本發(fā)明包括描述于所附權(quán)利要求的所有修飾和等效的主題，如由適用的法律所允許的。此外，上述的元素的所有可能變體形式的任何組合被本發(fā)明包括，除非本文另有說明或另外顯然上下文相矛盾。
[0099]此外，本申請(qǐng)文件全文已經(jīng)提及了很多專利和印刷出版物。上述文獻(xiàn)和印刷出版物各自通過引用以其整體單獨(dú)并入本文。 [0100]總之，應(yīng)當(dāng)理解本文公開的本發(fā)明實(shí)施方案是說明本發(fā)明的原理?？梢圆捎玫钠渌揎椩诒景l(fā)明范圍內(nèi)。因此，通過舉例，而不是限制，可以依照教導(dǎo)本文使用本發(fā)明的可代替構(gòu)型/方法。因 此，本發(fā)明不限于精確顯示和描述的。
【權(quán)利要求】
1.一種用于治療有此需要的患者的早泄的方法，所述方法包括如下步驟:局部施用梭菌屬神經(jīng)毒素至所述患者，由此治療所述患者的早泄。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中通過透皮、肌內(nèi)、皮下、真皮下、皮內(nèi)或植入劑施用實(shí)現(xiàn)局部施用治療量的梭菌屬神經(jīng)毒素。
3.權(quán)利要求1所述的方法，其中通過注射局部施用治療量的梭菌屬神經(jīng)毒素。
4.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述梭菌屬神經(jīng)毒素是肉毒神經(jīng)毒素。
5.權(quán)利要求4所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素選自A、B、C、D、E、F和G型肉毒神經(jīng)毒素。
6.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述梭菌屬神經(jīng)毒素是肉毒神經(jīng)毒素并且以約I單位至20，000單位的量被施用。
7.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述梭菌屬神經(jīng)毒素是A型或B型肉毒神經(jīng)毒素，并且分別以約I單位至2500單位或約100至約10，000單位的量被施用。
8.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述梭菌屬神經(jīng)毒素是A型肉毒神經(jīng)毒素。
9.權(quán)利要求1所述的方法，其中通過將所述梭菌屬神經(jīng)毒素注射入所述患者的陰莖實(shí)現(xiàn)局部施用治療量的所述梭菌屬神經(jīng)毒素至所述患者。
10.一種用于在有此需要的患者中治療早泄的方法，所述方法包括如下步驟:通過注射肉毒神經(jīng)毒素至所述患者的陰莖進(jìn)行局部施用，由此治療所述患者的早泄。
11.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素是A型肉毒神經(jīng)毒素。
12.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素被注射入至少兩個(gè)陰莖位置。
13.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述局部施用針對(duì)所述陰莖的系帶。
14.權(quán)利要求10所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素是B型肉毒神經(jīng)毒素并且所述B型肉毒神經(jīng)毒素以I單位至約10，000單位的量被施用。
15.一種用于在有此需要的患者中治療早泄的方法，所述方法包括如下步驟:局部施用A型肉毒神經(jīng)毒素到所述患者的陰莖的至少一個(gè)位置，由此治療所述患者的早泄。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中施用于所述陰莖的A型肉毒神經(jīng)毒素的量是約I單位至約2500單位。
17.權(quán)利要求16所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素被施用于所述陰莖的系帶或陰莖頭。
18.權(quán)利要求15所述的方法，還包括在初始施用肉毒神經(jīng)毒素至所述陰莖之后至少約2個(gè)月附加施用肉毒神經(jīng)毒素至所述患者的所述陰莖。
19.權(quán)利要求15所述的方法，其中通過透皮、肌內(nèi)、皮下、真皮下、皮內(nèi)或植入劑施用進(jìn)行局部施用。
20.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述A型肉毒神經(jīng)毒素的局部施用是約I單位至約500單位/注射位置/就診患者。
21.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述A型肉毒神經(jīng)毒素被施用于所述陰莖的包皮。
22.一種用于在有此需要的患者中延長(zhǎng)情欲高潮時(shí)間的方法，所述方法包括如下步驟:局部施用肉毒神經(jīng)毒素至所述患者，由此延長(zhǎng)所述患者的情欲高潮時(shí)間。
23.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素的局部施用使用透皮、肌內(nèi)、皮下、真皮下、皮內(nèi)或植入劑施用。
24.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素的局部施用針對(duì)系帶或包皮。
25.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述肉毒神經(jīng)毒素的局部施用是通過注射并且所述肉毒神經(jīng)毒素是A型或B型肉毒神經(jīng)`毒素。
【文檔編號(hào)】A61K38/16GK103816530SQ201410067182
【公開日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2010年8月10日 優(yōu)先權(quán)日:2009年8月26日
【發(fā)明者】G·M·加西拉, I·E·阿吉拉爾, G·P·帕斯 申請(qǐng)人:阿勒根公司