快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法
【專利摘要】快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒由玻璃管、藥膜及棉塞構(gòu)成。所述的藥膜是將500μL濃度為聯(lián)苯菊酯1.3mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內(nèi)壁及底部，滾動(dòng)晾干后形成，將晾干的指形管塞上棉塞制成。本發(fā)明的使用方法是將準(zhǔn)備好的診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內(nèi)，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率。用蘋果黃蚜死亡率確定對(duì)聯(lián)苯菊酯的敏感度，從敏感度的高低決定施用農(nóng)藥的種類和用量。采用本發(fā)明的診斷試劑盒，能在2小時(shí)內(nèi)快速、簡(jiǎn)便的判斷蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯的敏感性，為科學(xué)有效地指導(dǎo)田間防治蘋果黃蚜提供科學(xué)依據(jù)。
【專利說(shuō)明】快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及害蟲敏感性快速檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)涉及一種快速、簡(jiǎn)便測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘋果黃姆citricola von der (SboO屬半翅目 Hemiptera姆科Aphididae,又名繡線菊蚜，以成蟲、若蟲刺吸葉和枝梢的汁液，葉片被害后向背面橫卷，影響新梢生長(zhǎng)及樹體發(fā)育，是蘋果樹上的主要害蟲之一。為有效控制蘋果黃蚜的危害，需要明確其對(duì)常用藥劑的敏感性，便于科學(xué)選藥和用藥。目前常用點(diǎn)滴法或浸蟲法，通過(guò)比較田間品系和敏感品系對(duì)常用藥劑的致死中量(LD5tl)的區(qū)別，來(lái)確定其敏感度。一是專業(yè)技術(shù)性強(qiáng)，二是工作量大，三是耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，不能及時(shí)為指導(dǎo)用藥提供依據(jù)。
[0003]近年來(lái)，一種更為簡(jiǎn)便的研究病蟲害敏感性的方法逐漸受到研究人員的重視，即診斷劑量法。診斷劑量法亦分兩種，一種為平坡診斷法，另一種為區(qū)分劑量法。黃斌、郭瑩、尤民生等人采用平坡診斷法分別研究了小菜蛾、黃曲條跳甲的敏感性，呂要斌等人亦采用平坡診斷法研究了田間小菜蛾種群對(duì)茚蟲威的敏感性，結(jié)果表明診斷劑量法與浸液法具有相似結(jié)論，并發(fā)現(xiàn)平坡診斷法比浸液法更簡(jiǎn)便，在定性判別是否產(chǎn)生抗藥性時(shí)具有較高可信度；高希武、羅萬(wàn)春、李國(guó)清等人分別采用區(qū)分劑量法研究了盲蝽、棉蚜、馬鈴薯甲蟲、小菜蛾、棉鈴蟲的抗藥性，確定了部分害蟲的敏感基線和抗性診斷劑量。診斷劑量法相比傳統(tǒng)方法更為簡(jiǎn)便，尤其是區(qū)分劑量法在確定區(qū)分劑量后，研究病蟲害敏感性時(shí)較為便捷。但是，在現(xiàn)有相關(guān)技術(shù)方面未見采用診斷劑量法研究蘋果黃蚜對(duì)農(nóng)藥敏感性的報(bào)道；現(xiàn)有對(duì)蘋果黃蚜敏感性的檢測(cè)常 用點(diǎn)滴法或浸蟲法，其通過(guò)比較田間品系和敏感品系對(duì)常用藥劑的致死中量(LD50)的區(qū)別，來(lái)確定其敏感度，現(xiàn)有技術(shù)存在如下問題:一是專業(yè)技術(shù)性強(qiáng)，須專業(yè)技術(shù)人員操作；二是檢測(cè)設(shè)施復(fù)雜，工作量大；三是耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，檢測(cè)時(shí)間均在10小時(shí)以上，不能及時(shí)為指導(dǎo)用藥提供依據(jù)。為指導(dǎo)田間科學(xué)用藥，增強(qiáng)其實(shí)用性和便捷性，供基層科技人員或農(nóng)民使用，發(fā)明人研究了快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的方法，并開發(fā)出了診斷試劑盒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種快速、簡(jiǎn)便測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法，使用該診斷試劑盒，能在2小時(shí)內(nèi)快速測(cè)定和判斷蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯的敏感性，為指導(dǎo)田間科學(xué)用藥提供簡(jiǎn)便快捷的用具和方法。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案。
[0006]本發(fā)明的快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒由玻璃管、藥膜及棉塞構(gòu)成。所述的玻璃管為長(zhǎng)7.5-10 cm、直徑1.5-2.5 cm的指形管；所述的藥膜是將500ML濃度為聯(lián)苯菊酯1.3 mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內(nèi)壁及底部，滾動(dòng)晾干后形成，所述的棉塞是經(jīng)消毒處理后的脫脂棉制成，將晾干的指形管塞上棉塞即制成診斷試劑盒。
[0007]本發(fā)明的快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒的使用方法是:將準(zhǔn)備好的聯(lián)苯菊酯診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內(nèi)，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率。若死亡率大于等于80%，表明被測(cè)試的蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感度較高，可以用常規(guī)的聯(lián)苯菊酯濃度及用量進(jìn)行防治；若死亡率低于80%，則表明被測(cè)試的蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感度較低，應(yīng)改用其他敏感度較高的農(nóng)藥。
[0008]采用本發(fā)明的快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒，能快速、簡(jiǎn)便的判斷蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯的敏感性。與現(xiàn)有診斷方法相比，診斷試劑盒操作簡(jiǎn)單，使用方便，普通農(nóng)民經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的培訓(xùn)即會(huì)操作；極大地簡(jiǎn)化了診斷設(shè)施，診斷工作量也減少到最??；大大縮短了診斷時(shí)間，在2小時(shí)內(nèi)便可得出診斷結(jié)果。為科學(xué)有效地指導(dǎo)田間防治蘋果黃蚜提供科學(xué)依據(jù)，避免造成常規(guī)用量的農(nóng)藥防治效果差，造成果園的經(jīng)濟(jì)損失，或超常規(guī)用藥造成環(huán)境污染。
[0009]藥膜中農(nóng)藥的濃度及用量試驗(yàn)
1、試驗(yàn)藥劑:聯(lián)苯菊酯原藥。
[0010]2、試驗(yàn)種群和材料:
蘋果黃蚜敏感品系(S):溫室內(nèi)自然繼代生長(zhǎng)4年，期間未接觸過(guò)任何藥劑。
[0011]蘋果黃蚜抗性品系(R):田間采集。
[0012]供試?yán)ハx:蘋果黃蟲牙citricola。
[0013]敏感品系(S):采集于太原市小店區(qū)孫家寨溫室大棚。
[0014]抗性品系(R):采集于太原市小店區(qū)孫家寨果園，聯(lián)苯菊酯抗性倍數(shù)為5.69倍。
[0015](抗性倍數(shù)=抗性品系LC5tl/敏感品系LC5tl，其中LC5tl為致死中濃度，即致死50%個(gè)體的藥劑濃度。)
供試試劑:丙酮。
[0016]適用的靶標(biāo)作物為蘋果樹。
[0017]適合的害蟲為蘋果黃蚜。
[0018]3、試驗(yàn)方法:
通過(guò)藥膜法測(cè)定聯(lián)苯菊酯殺蟲活性物質(zhì)對(duì)蘋果黃蚜的毒力，利用毒力回歸方程計(jì)算蘋果黃蚜死亡率在50%、60%、70%、80%、90%時(shí)所對(duì)應(yīng)的劑量(LC5(1、LC6C1、LC7tl、LC8tl、LC9tl)，從而確定防治蘋果黃蚜的藥劑及用量，并據(jù)此制備診斷試劑盒。
[0019](I)試驗(yàn)種群敏感度測(cè)定:
采用指形管藥膜法。用·微量移液器在長(zhǎng)7.5 cm、直徑2.5 cm的指形管中加入500 ML的藥液(用500ML丙酮溶解后的藥液)，緩慢傾斜轉(zhuǎn)動(dòng)使藥液在指形管底面及管壁內(nèi)不同高度范圍內(nèi)形成均勻藥膜；晾干后每管中接入大小一致的蘋果黃蚜20頭，然后將棉塞推至藥膜邊緣處，放于溫度25±1 °C、光周期L: D = 14:10 h的光照培養(yǎng)箱中。I小時(shí)后調(diào)查蚜蟲死亡數(shù)，計(jì)算死亡率，繪制毒力回歸曲線。藥劑濃度設(shè)置參照表1。
[0020](2)回歸方程的建立:采用藥膜法，測(cè)試聯(lián)苯菊酯對(duì)蘋果黃蚜敏感品系的毒力。藥劑濃度設(shè)置見表1。
[0021]表1診斷試劑盒藥劑設(shè)置
【權(quán)利要求】
1.一種快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，它由玻璃管、藥膜和棉塞構(gòu)成，所述的玻璃管為長(zhǎng)7.5-10 cm、直徑1.5-2.5 cm的指形管；所述的藥膜是將500ML濃度為聯(lián)苯菊酯1.3 mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內(nèi)壁及底部，滾動(dòng)晾干后形成；所述的棉塞是經(jīng)消毒處理后的脫脂棉制成；將晾干的指形管塞上棉塞即可； 快速測(cè)定蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感性的診斷試劑盒的使用方法如下: 將準(zhǔn)備好的聯(lián)苯菊酯診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內(nèi) ，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率，若死亡率大于等于80%，表明被測(cè)試的蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感度較高，可以用常規(guī)的聯(lián)苯菊酯濃度及用量進(jìn)行防治；若死亡率低于80%，則表明被測(cè)試的蘋果黃蚜對(duì)聯(lián)苯菊酯敏感度較低，應(yīng)改用其他敏感度較高的農(nóng)藥。
【文檔編號(hào)】A61K49/00GK103656689SQ201310636516
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月3日
【發(fā)明者】張潤(rùn)祥, 封云濤, 范仁俊, 庾琴, 王振, 劉中芳, 張鵬九, 李光玉, 張建華 申請(qǐng)人:山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所