銀杏提取物納米脂質(zhì)體在治療臭汗癥中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及銀杏提取物納米脂質(zhì)體在制備治療臭汗癥的外用制劑中的用途。所述銀杏提取物可通過化學(xué)分離方法，從銀杏的葉、果、外種皮、根莖等部位的提取物中得到。所述銀杏提取物納米脂質(zhì)體，通過采用薄膜超聲-高壓均質(zhì)法制備。含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體的治療臭汗癥的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑，含銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.001－80%，以及藥學(xué)上常用的外用制劑基質(zhì)或可接受的載體；所述制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的外用劑型。藥理學(xué)研究表明本發(fā)明可抑制大汗腺細(xì)胞的增殖，對大汗腺細(xì)胞具有明顯的破壞作用；且作用顯著優(yōu)于銀杏提取物外用制劑對照組。臨床試用表明，本發(fā)明對臭汗癥具有顯著的治療作用，有效率達(dá)100%，使用安全無副作用。
【專利說明】銀杏提取物納米脂質(zhì)體在治療臭汗癥中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥及治療性化妝【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及銀杏提取物納米脂質(zhì)體在治療臭汗癥中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]臭汗癥可分為全身性臭汗癥與局部臭汗癥。腋臭是一種常見的遺傳性皮膚代謝性疾病，俗稱狐臭，主要表現(xiàn)為腋部異味。汗臭的主要原因是大汗腺排泄的汗液中過度分泌的有機(jī)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等成分，受到皮膚表面細(xì)菌(表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌等)的分解，產(chǎn)生不飽和脂肪酸及小分子氨氮化合物等代謝產(chǎn)物而產(chǎn)生難聞的臭味。所以破壞大汗腺被認(rèn)為是腋臭根治的關(guān)鍵。臭汗癥始發(fā)于青春期，青壯年期較為嚴(yán)重，使患者在社會生活中受到生理和心理的雙重壓力，所以徹底有效的治療是非常必要的。 [0003]目前臨床上治療腋臭癥的方法很多，有保守療法和手術(shù)方法，保守療法主要包括:外用藥物、注射、物理療法等。局部外用藥物包括局部應(yīng)用抗菌素、芳香除臭劑、抑汗劑、化學(xué)激素等，存在療效維持時間短，易復(fù)發(fā)，部分患者停藥后反彈更嚴(yán)重；還會出現(xiàn)多種不良反應(yīng)，如用藥部位發(fā)紅、發(fā)癢等過敏反應(yīng)，以及不同程度的皮膚粗糙、色素沉著、脫屑等癥狀。激光治療方法在治療過程中會對皮膚及周圍組織造成熱損傷，術(shù)后存在較高的復(fù)發(fā)率的缺點(diǎn)。手術(shù)方法去除部分腋部皮膚組織會給患者帶來創(chuàng)傷和痛苦，包括疼痛、出血、切口感染、瘢痕攣縮影響美觀和功能等一系列并發(fā)癥發(fā)生的可能，甚至影響上肢功能，手術(shù)后仍有一定的復(fù)發(fā)率，因此手術(shù)治療并不為大多數(shù)腋臭患者所接受。為了避免此類不良現(xiàn)象的發(fā)生，市場需要研制開發(fā)一種來源于天然、效果顯著、無明顯不良反應(yīng)的治療臭汗癥的外用制劑，以減輕患者痛苦。臭汗癥患者眾多，開發(fā)此類治療臭汗癥的外用制劑產(chǎn)品具有良好的臨床應(yīng)用前景，對患者是十分有益和必要的。
[0004]銀杏是我國珍貴的藥用植物，銀杏的葉、果和外種皮等皆具有藥用開發(fā)價(jià)值。據(jù)《本草綱目》記載，銀杏性甘、苦、平、澀；有定喘止咳、止帶濁、止痛之功；主治寒嗽痰喘、哮喘、小便頻數(shù)、赤白帶下、手足皸裂等。特別是近幾十年來人們發(fā)現(xiàn)銀杏葉中含有多種有效成分，主要有效成分為黃酮類和萜類內(nèi)酯化合物，具有防治心腦血管疾病的功能。
[0005]納米脂質(zhì)體是將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層所形成的超微球狀載體制劑。近年來脂質(zhì)體作為一種新型的藥物載體，在皮膚外用制劑研究與應(yīng)用方面得到了迅速的發(fā)展。納米脂質(zhì)體用作皮膚給藥載體的特點(diǎn)為:兼容性，能增強(qiáng)藥物的透皮作用；皮膚組織靶向性；緩釋性；脂質(zhì)體包封可提高藥物溶解度和穩(wěn)定性。納米脂質(zhì)體外用制劑具有高效、長效、安全、皮膚靶向作用強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。開發(fā)皮膚外用納米脂質(zhì)體制劑是改進(jìn)皮膚用藥的趨勢，已成為外用藥物和化妝品研究開發(fā)的方向。
[0006]目前尚未見銀杏提取物納米脂質(zhì)體在治療臭汗癥中的應(yīng)用的報(bào)道。因此，有關(guān)銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑防治臭汗癥新型藥物、化妝品、消毒劑的研究開發(fā)，以及對銀杏資源的充分開發(fā)利用，將產(chǎn)生巨大的社會和經(jīng)濟(jì)效益。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供銀杏提取物納米脂質(zhì)體在治療臭汗癥中的應(yīng)用。銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑具有除臭效果好，療效顯著、不復(fù)發(fā)、使用安全的特點(diǎn)。
[0008]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:
提供銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑在治療臭汗癥、多汗癥中的應(yīng)用。
[0009]所述臭汗癥為腋部、足部、會陰部臭汗癥等。
[0010]所述銀杏提取物通過化學(xué)分離方法，從銀杏的葉、果、外種皮、根莖等部位的提取物中得到，提取溶劑可為乙醇、水、乙醚、石油醚等有機(jī)溶劑；或?qū)︺y杏葉、果、外種皮、根莖提取加工產(chǎn)物在提取加工過程中剩余的廢料中重新回收。
[0011]所述銀杏提取物納米脂質(zhì)體，通過采用薄膜超聲-高壓均質(zhì)法制備。
[0012]還提供含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體的治療臭汗癥的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.001-80%,以及藥學(xué)上常用的外用制劑基質(zhì)或外用制劑可接受的載體。
[0013]更進(jìn)一步的，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.001-30%ο
[0014]更進(jìn)一步的，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.5-20%。
[0015]按上述重量比范圍取主藥銀杏提取物納米脂質(zhì)體、藥學(xué)上常用的外用制劑基質(zhì)或可接受的載體制備得到銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑；以及包含銀杏提取物納米脂質(zhì)體和任何物質(zhì)組合用于治療臭汗癥的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑。所述制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的外用劑型，為液體制劑、膏霜劑、凝膠劑、粉劑、膜劑、洗劑、氣霧噴霧劑、透皮吸收制劑、皮下注射劑。
[0016]本發(fā)明的有益效果是，藥理學(xué)試驗(yàn)研究表明本發(fā)明對汗腺具有明顯的抑制作用；可抑制大汗腺細(xì)胞的增殖，對大汗腺細(xì)胞具有明顯的破壞作用；更為重要的是，銀杏提取物納米脂質(zhì)體作用顯著優(yōu)于銀杏提取物對照組。局部刺激性實(shí)驗(yàn)研究表明本發(fā)明安全，無皮膚刺激、過敏等不良反應(yīng)。臨床試用結(jié)果表明，本發(fā)明對臭汗癥具有顯著的根治作用，有效率達(dá)100%，使用安全無副作用。
【具體實(shí)施方式】
[0017]下面結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步地描述。
[0018]實(shí)施例1:
將白果去皮，放入組織搗碎機(jī)中粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的白果，加入料液比為I:10 (W/V)的80%乙醇，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮，并于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0019]磷脂無水乙醇溶液，過濾；加入上述銀杏提取物浸膏、維生素E，振搖均勻，置圓底燒瓶中，30°C水浴恒溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，減壓成膜，使膜材在瓶壁上形成均勻的類脂薄膜，加入PBS緩沖液50°C下充分振蕩水化，至壁上薄膜完全脫落，浸入50°C水浴中攪拌，于25°C水浴條件下超聲5min,200Hz每次5s,間歇5s ,至形成半透明略顯乳光的池液。高壓均質(zhì)，100 Mpa壓力下循環(huán)3次，過微孔濾膜，即得淺黃色透明膠體狀銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。[0020]酊劑的制備:取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液100ml，溶解于600ml 95%乙醇溶液中，再向其中加入丙二醇200ml攪拌，補(bǔ)95%乙醇溶液至足量1000 ml,即得淡黃色銀杏提取物納米脂質(zhì)體酊劑1000 ml，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為10%。分裝于50支小管中，每支20 ml ο
[0021]實(shí)施例2:
將白果去皮，放入組織搗碎機(jī)中粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的白果，加入料液比為1:10(W/V)的蒸餾水，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。濃縮上清液，并于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0022]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0023]凝膠劑的制備:將卡波普IOg灑在500ml蒸懼水表面,溶脹過夜。稱取甘油60g,丙二醇120ml，分別加入至溶脹好的卡波普中，迅速研磨均勻，得到透明的凝膠基質(zhì)。取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液40ml，溶解于100ml 95%乙醇溶液中，緩慢加入至凝膠基質(zhì)中，攪拌均勻。再緩慢加入三乙醇胺15ml，補(bǔ)蒸餾水至足量1000 g，即得淡黃色銀杏提取物納米脂質(zhì)體凝膠1000 g，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為4%。分裝于50支小管中，每支20g°
[0024]實(shí)施例3: 將白果去皮，放入組織搗碎機(jī)中粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的白果，加入料液比為1:10 (W/V)的80%石油醚，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮，并于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0025]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0026]軟膏劑的制備:取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液5ml，溶解于100ml 95%乙醇溶液中，再向其中加入三乙醇胺50ml，加溫至70°C。將石蠟300g、硬脂酸300g、丙二醇100ml分別加入攪拌融化，補(bǔ)蒸餾水至足量1000 g，攪拌均勻至膏狀，即得淡黃色銀杏提取物納米脂質(zhì)體軟膏1000g，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為0.5%。分裝于50支小管中，每支20 g0
[0027]實(shí)施例4:
將銀杏葉剪碎，放入粉碎機(jī)中將其粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的銀杏葉，加入料液比為1:6 (W/V)的80%乙醇，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮，并于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0028]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0029]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液0.1ml，按實(shí)施例3軟膏劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體軟膏l(xiāng)OOOg，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為0.01%。分裝于50支小管中，每支20 g。
[0030]實(shí)施例5:
將銀杏葉剪碎，放入粉碎機(jī)中將其粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的銀杏葉，加入料液比為1:6 (W/V)的蒸餾水，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。濃縮上清液，于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0031]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0032]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液300ml，按實(shí)施例1酊劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體酊劑1000 ml，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為30%。分裝于50支小管中，每支 20 ml ο
[0033]實(shí)施例6:
將銀杏葉剪碎，放入粉碎機(jī)中將其粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的銀杏葉，加入料液比為1:6 (W/V)的石油醚，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，離心(5000轉(zhuǎn)/分，15分鐘)，取上清液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮上清液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮，并于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺黃色浸膏，溶于醇，不溶于水。
[0034]按實(shí)施例1銀杏提 取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0035]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液20ml，按實(shí)施例2凝膠劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體凝膠1000 g，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為2%。分裝于50支小管中，每支20 g0
[0036]實(shí)施例7:
將銀杏果外種皮剝離下來，曬干，用粉碎機(jī)將其粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的銀杏外種皮，加入料液比為1:6 (W/V)的80%乙醇，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，用抽濾器抽濾，收集濾液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮。于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。
[0037]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0038]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液400ml，按實(shí)施例1酊劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體酊劑1000ml，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為40%。分裝于50支小管中，每支 20 ml ο
[0039]實(shí)施例8:
將銀杏果外種皮剝離下來，曬干，用粉碎機(jī)將其粉碎。準(zhǔn)確稱取一定量經(jīng)粉碎的銀杏外種皮，加入料液比為1:6 (W/V)的80%石油醚，在水浴溫度60°C下，攪拌浸提2次，每次提取時間4小時。浸提結(jié)束后，用抽濾器抽濾，收集濾液。用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液，條件為溫度55°C，壓強(qiáng)0.008-0.009MPa，減壓濃縮。于60°C真空干燥，得銀杏提取物浸膏，性狀為:淺褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。[0040]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0041]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液200ml，按實(shí)施例1酊劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體酊劑1000 ml，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為20%。分裝于50支小管中，每支 20 ml ο
[0042]實(shí)施例9:
按實(shí)施例1銀杏提取物浸膏制備工藝制備銀杏提取物浸膏。
[0043]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0044]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液1ml，按實(shí)施例3軟膏劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體軟膏1000g，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為0.1%。分裝于50支小管中，每支 20 g。
[0045]實(shí)施例10:
按實(shí)施例4銀杏提取物浸膏制備工藝制備銀杏提取物浸膏。
[0046]按實(shí)施例1銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液。
[0047]取上述銀杏提取物納米脂質(zhì)體懸液IOml，按實(shí)施例2凝膠劑制備工藝制備銀杏提取物納米脂質(zhì)體凝膠1000g，銀杏提取物納米脂質(zhì)體含量為1%。分裝于50支小管中，每支20 g0
[0048]用以上方法制成的銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑，進(jìn)行相關(guān)的藥理、局部刺激性實(shí)驗(yàn)和臨床試用試驗(yàn)。下面是本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):
對大鼠足跖部汗腺分泌的影響:大鼠30只，隨機(jī)分3組:正常對照組、銀杏提取物外用制劑對照組、本發(fā)明銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑組，每組10只。正常對照組各只大鼠足部分別外涂無菌生理鹽水；銀杏提取物外用制劑對照組各只大鼠足部分別外涂銀杏提取物外用制劑；本發(fā)明組各只大鼠足部分別外涂本發(fā)明銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑；每天I次，連續(xù)7天。末次涂抹后24小時處死大鼠，齊踝關(guān)節(jié)處截?cái)嚯p后肢，取下雙跖部肉墊皮膚和皮下組織2-3塊，按常規(guī)方法固定、脫水、包埋、切片、HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠足跖汗腺上皮細(xì)胞內(nèi)的變化。空泡發(fā)生百分率=空泡汗腺數(shù)/觀察汗腺數(shù)X 100%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。結(jié)果表明，與正常對照組相比，本發(fā)明銀杏提取物納米脂質(zhì)體外用制劑能明顯降低大鼠足跖部汗腺空泡發(fā)生率，對汗腺具有明顯的抑制作用；且作用顯著優(yōu)于銀杏提取物外用制劑對照組。
[0049]表1.對大鼠足跖部汗腺分泌的影響
【權(quán)利要求】
1.銀杏提取物納米脂質(zhì)體在制備防治臭汗癥、多汗癥的外用制劑中的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，所述臭汗癥為腋部、足部、會陰部臭汗癥。
3.如權(quán)利要求1所述的銀杏提取物納米脂質(zhì)體，所述銀杏提取物可通過化學(xué)分離方法，從銀杏的葉、果、外種皮、根莖部位的提取物中得到，提取溶劑為乙醇、水、乙醚、石油醚有機(jī)溶劑；或?qū)︺y杏葉、果、外種皮、根莖提取加工產(chǎn)物在提取加工過程中剩余的廢料中重新回收；所述銀杏提取物納米脂質(zhì)體，通過采用薄膜超聲一高壓均質(zhì)法制備。
4.如權(quán)利要求1所述的外用制劑，為含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體的治療臭汗癥的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑；以及包含銀杏提取物納米脂質(zhì)體和任何物質(zhì)組合用于治療臭汗癥的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑；其特征是，所述制劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的外用劑型，為液體制劑、膏霜劑、凝膠劑、粉劑、膜劑、洗劑、氣霧噴霧劑、透皮吸收制劑、皮下注射劑。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑，其特征是，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.0Ol — 80%O
6.如權(quán)利要求4所述的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑，其特征是，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.001 — 30%O
7.如權(quán)利要求4所 述的藥物、化妝品或消毒劑外用制劑，其特征是，含有銀杏提取物納米脂質(zhì)體0.5 - 20%。
【文檔編號】A61K36/16GK103751229SQ201310409145
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2013年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月11日
【發(fā)明者】雷紅, 王青 申請人:王青