專利名稱：一種手術(shù)用防粘連膜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及手術(shù)用防粘連膜技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種手術(shù)用防粘連膜的制備方法。
技術(shù)背景外科手術(shù)中，在縫合傷口之前，醫(yī)生一般會(huì)將一層生物膜放在動(dòng)過手術(shù)的組織與器官之間，可以防止組織與器官發(fā)生粘連。該膜可生物降解，在病人體內(nèi)存留7 10天，然后開始分解，最終會(huì)被完全吸收消失。
透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,簡稱HA,又稱玻璃酸)是廣泛存在于人和動(dòng)物體內(nèi)的一種天然物質(zhì)，由葡萄糖醛酸和乙酰氨基己糖組成雙糖單位聚合而成的一種高分子黏多糖，無種屬差異性，具有良好的生物相容性。目前以HA為主要材料的防粘連產(chǎn)品大多數(shù)是天然HA，以溶液或凝膠制劑為主，這些產(chǎn)品降解吸收迅速(I 2 d)，機(jī)械強(qiáng)度差，易溶于水，在臨床應(yīng)用于防粘連時(shí)可能會(huì)隨病人體位改變而流動(dòng)，難以在局部形成較高的濃度。因此，在傷口愈合所需時(shí)間內(nèi)，無法發(fā)揮生物屏障的作用，限制了它的應(yīng)用。采用其他原料制備的防粘連產(chǎn)品亦各具利弊聚乳酸防粘連膜強(qiáng)度較低，柔韌性較差，使用時(shí)常需要裁剪和縫針固定，對(duì)較深病灶使用不方便；殼聚糖膜與機(jī)體黏附性差，活性的保持時(shí)間較短，植入前期易出現(xiàn)輕度炎癥反應(yīng)和異物反應(yīng)，降解速度不易控制；膠原蛋白止血效果明顯，但防粘連效果差，且可能引起嚴(yán)重的致敏反應(yīng)；纖維素是外源物質(zhì)，成膜性好、具有局部促愈合和止血功效，但人體內(nèi)并無降解纖維素的酶，其只能通過體液被排出體外。
將HA進(jìn)行適當(dāng)程度的交聯(lián)制成防粘連膜，能夠使其分子結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，水溶性相對(duì)減弱，粘彈性和力學(xué)強(qiáng)度增強(qiáng)，不改變生物相容性，可生物降解，安全，無免疫原性，對(duì)酸、 堿、熱、自由基和透明質(zhì)酸酶的降解作用有更強(qiáng)的抵抗力，其中，利用不同官能團(tuán)實(shí)現(xiàn)的多重交聯(lián)實(shí)現(xiàn)了透明質(zhì)酸的高度交聯(lián)，改進(jìn)了其生物穩(wěn)定性。與未交聯(lián)的HA膜相比，在體內(nèi)的存留時(shí)間明顯延長，粘連預(yù)防作用明顯提高。同時(shí)，可以通過控制交聯(lián)的程度，調(diào)控交聯(lián) HA膜在體內(nèi)存留的時(shí)間，滿足多種手術(shù)的要求。
公開號(hào)為CN102380121A的發(fā)明申請(qǐng)，公開了降解可控的醫(yī)用防粘連膜材料的制備方法采用混合膜液一微波一成膜一交聯(lián)一除堿的工藝，即透明質(zhì)酸、魔芋葡甘聚糖干粉、乳酸和去離子水混合攪拌均勻后微波加熱，200目篩過濾除雜，脫泡。流延成型并烘干成膜，然后將成型的膜浸泡在氨水與無水乙醇的混合溶液中交聯(lián)3 8天，在濃度759Γ99. 7%乙醇中漂洗3次，經(jīng)自然風(fēng)干成膜。該技術(shù)所用材料簡單，步驟較為繁瑣，尤其交聯(lián)時(shí)間較長， 不利于工業(yè)化生產(chǎn)。
公開號(hào)為CN1200 951C的發(fā)明專利中提到多重交聯(lián)HA技術(shù)，利用兩種或多種選自羥基、羧基和氨基的官能團(tuán)與透明質(zhì)酸交聯(lián)，采用戊二醛、碳化二亞胺、丁二醇二縮水甘油基醚等為交聯(lián)劑，專利中提到的制膜方法為1% HA室溫下流延4天得到HA膜，隨后將膜懸浮于CHCl3溶液/酸性或堿性溶液/1，2，7，8- 二環(huán)氧基辛烷或戊二醛交聯(lián)劑的混合物中室溫交聯(lián)24 h，再加入一定交聯(lián)劑室溫放置24 h完成二次交聯(lián)；或是通過將O.1 g HA溶于 O. 25 N NaOH溶液或O. 25 N HCl溶液以獲得10%或2. 5%的HA溶液，加入交聯(lián)劑，第一次交聯(lián)反應(yīng)室溫下48 h或72 h，第二次交聯(lián)反應(yīng)室溫下24 h，純化后37°C干燥成膜。該技術(shù)交聯(lián)時(shí)間較長，而且制備的膜劑僅采用了 HA，雖然采用了多重交聯(lián)的方法，但由于HA本身特性，往往會(huì)在傷口未愈合之前而降解掉，無法完全起到防粘連的效果，也無止血作用。
公開號(hào)為CN1970094A公開了透明質(zhì)酸-幾丁聚糖生物膜的制備方法，以透明質(zhì)酸、羧甲基殼聚糖、聚乙烯醇、丁二醇雙縮水甘油醚等為原料制備生物膜。丁二醇雙縮水甘油醚為交聯(lián)劑。固形物與丁二醇雙縮水甘油醚的摩爾質(zhì)量比為40:1。該發(fā)明中生物膜的主要成分之一幾丁聚糖為動(dòng)物源性物質(zhì)，有免疫原性，可能會(huì)引起嚴(yán)重的致敏反應(yīng)；另一主要原料聚乙烯醇為有機(jī)化合物，對(duì)眼睛和皮膚有刺激作用
發(fā)明內(nèi)容
為了解決以上防粘連膜交聯(lián)技術(shù)中存在的制備時(shí)間長，得到的交聯(lián)膜防粘連效果差， 降解速度或快或慢，無法滿足臨床要求的問題，本發(fā)明提供了一種交聯(lián)時(shí)間短，防粘連效果好，降解速率適中，具有較合適的吸水率和斷裂力的手術(shù)用防粘連膜的制備方法。
本發(fā)明是通過以下措施實(shí)現(xiàn)的一種手術(shù)用防粘連膜的制備方法，包括以下步驟(1)將透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素溶于去離子水中， 采用O. 25 N NaOH調(diào)節(jié)pH值10 12，得堿性溶液；(2)向堿性溶液中加入1，4-丁二醇二縮水甘油醚，攪拌均勻，40 50°C反應(yīng)；(3)調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值至2 5，倒入模具中流延成型，40 50°C反應(yīng)，并干燥成膜；透明質(zhì)酸鈉的分子量為500 kD 3000 kD，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的分子量為90 kD^1300 kD;透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量比為1:0. 25 2，1，4-丁二醇二縮水甘油醚的加入量占透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素總質(zhì)量的2 10%。
所述的制備方法，透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量比為1: 1，1，4- 丁二醇二縮水甘油醚的加入量占透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素總質(zhì)量的5%，透明質(zhì)酸鈉的分子量為500 kD 3000 kD，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的分子量為90 kD 1300 kD。
所述的制備方法，透明質(zhì)酸鈉的質(zhì)量濃度為0. 59Γ5. 0%，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量濃度為0. 259Γ4. 0%。
所述的制備方法，膜成型后 ，加入去離子水中浸泡8 10 h，干燥。
本發(fā)明制備的交聯(lián)膜植入人體后，具有生物屏障的作用，可將手術(shù)創(chuàng)面和周圍組織有效隔離，起到立體網(wǎng)絡(luò)阻隔的屏障作用，阻礙外源性組織細(xì)胞與損傷部位接觸，降低相鄰組織表面發(fā)生粘連的傾向；不會(huì)流入吻合口，不影響創(chuàng)面的正常愈合；不會(huì)因引流而排除體外；不會(huì)因體液漂移離開創(chuàng)面。以透明質(zhì)酸鈉和纖維素為主要成分，雙重交聯(lián)膜的分子間結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，水溶性相對(duì)減弱，粘彈性和力學(xué)強(qiáng)度增強(qiáng)，生物相容性好，可生物降解，安全，無免疫原性。
本發(fā)明的有益效果(I)本發(fā)明采用較低濃度的透明質(zhì)酸鈉和纖維素衍生物，加入特定種類的交聯(lián)劑進(jìn)行雙重交聯(lián)，采用流延干燥的方式成膜，得到的膜安全性極高，具有良好的生物相容性、優(yōu)異的防粘連、止血、促進(jìn)愈合、抗炎的功能，同時(shí)該膜具有適宜可調(diào)的體內(nèi)降解時(shí)間，適用范圍更廣；(2)本發(fā)明增加純化步驟，除去未反應(yīng)的透明質(zhì)酸鈉、纖維素和交聯(lián)劑等物質(zhì)，提高膜純度；(3)本發(fā)明成本低，工藝周期短，污染小，耗能低，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
具體實(shí)施方式
為了更好的理解本發(fā)明，下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1 :(1)將分子量為3000kD的透明質(zhì)酸鈉和90 kD的羥乙基纖維素溶于去離子水中，配制成透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素濃度均為1. 0%的溶液,使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為10，得堿性溶液；(2)向堿性溶液中加入1，4_丁二醇二縮水甘油醚，其與固形物質(zhì)量比為1:20，攪拌均勻，分別在25°C、45°C、65°C環(huán)境中反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為2 h ；(3)加入醋酸將溶液pH值調(diào)至2，充分?jǐn)嚢杈鶆蛎摎夂蟮谷肽＞咧辛餮映尚停謩e在 25 °C、45 °C、65 °C環(huán)境下反應(yīng)，干燥成膜。
(4)將膜置于去離子水中純化8 h，37°C下干燥至恒重即得雙重交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉膜。
在25°C下反應(yīng)得到的雙交聯(lián)薄膜交聯(lián)度小、遇水迅速膨脹，機(jī)械強(qiáng)度??；65°C下透明質(zhì)酸性質(zhì)不穩(wěn)定，易被降解，所得雙交聯(lián)薄膜不穩(wěn)定，很快被降解，見表1:表I反應(yīng)溫度對(duì)交聯(lián)反應(yīng)的影響Immmmi■賴戰(zhàn)if.pH a 水率 i 力(H)ItifIifcaiifc_m..... * Α ι)1Iii I I2012-5:::Wz,3055 9S!2III20
C!OI82mm1/1 Mt暴2(11I5C102薄賺神獲鮮*吸水率中m2為交聯(lián)膜吸水飽和后的重量，IIi1為交聯(lián)膜干燥至恒重時(shí)的重量實(shí)施例2 (1)將分子量為1700kD的透明質(zhì)酸鈉和200 kD的羥乙基纖維素溶于去離子水中，配制成透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素質(zhì)量濃度均為1. 0%的溶液,使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為11，得堿性溶液；(2)向堿性溶液中加入1，4_丁二醇二縮水甘油醚，加入量見表2，攪拌均勻，45°C環(huán)境中反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為2 h ；(3)加入醋酸將溶液pH值調(diào)至4，充分?jǐn)嚢杈鶆蛎摎夂蟮谷肽＞咧辛餮映尚停?5°C環(huán)境下反應(yīng)，干燥成膜。
(4)將膜置于去離子水中純化8 h，37°C下干燥至恒重即得雙重交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉膜。
當(dāng)固形物與交聯(lián)劑質(zhì)量比為20:1時(shí)，所獲得的薄膜物理性能最好，具有適宜的吸水率和柔韌性，見表2 :表2固形物與交聯(lián)劑質(zhì)量比對(duì)交聯(lián)反應(yīng)的影響mmmmz IfifMlft國臟與嫌 IlIiftSi I pH Ims (_Λ ι)_(N)ImRffDC1A43/15014<C I I!410 311263/13d I45Γ I 1148218.00DCM-31/1201451 I 1148 0205DC1A-41/110145C I 114SO21.95*吸水率中m2為交聯(lián)膜吸水飽和后的重量，Iii1為交聯(lián)膜干燥至恒重時(shí)的重量實(shí)施例3 (1)將分子量為1500kD的透明質(zhì)酸鈉和90 kD的羥乙基纖維素溶于去離子水中，配制成透明質(zhì)酸鈉質(zhì)量濃度為1. 0%,輕乙基纖維素質(zhì)量濃度為O. 25% 4· 0%的溶液,使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為12，得堿性溶液；(2)向堿性溶液中加入環(huán)氧化合物交聯(lián)劑1，4_丁二醇二縮水甘油醚，其與固形物的質(zhì)量比均為1:20，攪拌均勻，45°C反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為2 h ；(3)加入醋酸將溶液pH值調(diào)至3，充分?jǐn)嚢杈鶆蛎摎夂蟮谷肽＞咧辛餮映尚停?5°C反應(yīng)，干燥至形成膜。
(4)將膜置于去離子水中純化10 h，室溫下干燥至恒重即得雙重交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉膜。
隨著羥乙基纖維素加入量的遞增，薄膜機(jī)械強(qiáng)度出現(xiàn)先高后低的鐘罩型趨勢(shì)，當(dāng)透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素質(zhì)量比為1:1時(shí)，薄膜柔韌性最佳，具備適宜吸水率，在防止粘連的同時(shí)，還可以起到止血的作用，見表3 :表3透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素比對(duì)交聯(lián)反應(yīng)的影響透明乙 1物 3 f,H僅噪本事rnmmti_Kfi(H)-1nI50-:C12314 25S 525D-CEAW2 5 12312 SuM 575DCttA 夂 34β20 JSfC1239 6717S50DCHA ^-4m20 12B 9ιIS 3WΙμ Λ*-52 5<fC12Zr> 0716 775DCHA*-61.-,220 15-fC12J4 S414 02dDCEA1/420 I`SOC1254 0213D(i5*吸水率中m2為交聯(lián)膜吸水飽和后的重量，Iii1為交聯(lián)膜干燥至恒重時(shí)的重量實(shí)施例4 (I)將分子量為2040 kD的透明質(zhì)酸鈉和120 kD的羥乙基纖維素溶于去離子水中，配制成透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素質(zhì)量濃度均為1. 0%的溶液,分別使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) PH值為8 12，得堿性溶液；(2)加入環(huán)氧化合物交聯(lián)劑1，4_丁二醇二縮水甘油醚，其與固形物的質(zhì)量比均為 1:20，攪拌均勻，45 °C反應(yīng)；(3)樣品在堿性條件下45°C反應(yīng)2h后，加入醋酸將溶液pH值調(diào)至2 5，充分?jǐn)嚢杈鶆蛎摎夂蟮谷肽＞咧辛餮映尚停?5°C反應(yīng)，干燥至形成膜。
(4)將膜置于純化水中純化10 h，室溫下干燥至恒重即得雙重交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉膜。
當(dāng)堿性反應(yīng)時(shí)，環(huán)境pH值為1(Γ12時(shí)均可獲得機(jī)械強(qiáng)度和柔韌性較好的薄膜；酸性反應(yīng)時(shí)，環(huán)境PH值2飛時(shí)均可獲得機(jī)械強(qiáng)度和柔韌性較好的薄膜。其中，當(dāng)堿性pH值為 12，酸性pH值為3時(shí)獲得理化性能最佳的薄膜，當(dāng)環(huán)境pH值超過2 12這個(gè)范圍時(shí)，羥乙基纖維素不穩(wěn)定，易被降解，如表4、5 表4堿性反應(yīng)pH值對(duì)于透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素交聯(lián)反應(yīng)HA膜的影響
權(quán)利要求
1.一種手術(shù)用防粘連膜的制備方法，其特征是包括以下步驟(1)將透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素溶于去離子水中， 配制成溶液，調(diào)節(jié)pH值1(Γ12，得堿性溶液；(2)向堿性溶液中加入1，4-丁二醇二縮水甘油醚，攪拌均勻，40 50°C反應(yīng)；(3)調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值至2 5，倒入模具中流延成型，40 50°C反應(yīng)，并干燥成膜；透明質(zhì)酸鈉的分子量為500 kD 3000 kD，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的分子量為90 kD^1300 kD;透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量比為1:0. 25 2，1，4-丁二醇二縮水甘油醚的加入量占透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素總質(zhì)量的2 10%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量比為1: 1，1，4- 丁二醇二縮水甘油醚的加入量占透明質(zhì)酸鈉和羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素總質(zhì)量的5%，透明質(zhì)酸鈉的分子量為580 kD 3000 kD，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的分子量為90 kD 720 kD。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于透明質(zhì)酸鈉的質(zhì)量濃度為 O. 59Γ5. 0%，羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素的質(zhì)量濃度為O. 25% 4. 0%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于膜成型后，去離子水中純化8 10 h，干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及手術(shù)用防粘連膜技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種手術(shù)用防粘連膜的制備方法，包括以下步驟將透明質(zhì)酸鈉與羥乙基纖維素或羥丙基纖維素或羧甲基纖維素溶于去離子水中，配制成溶液，調(diào)節(jié)pH值10~12，得堿性溶液；向堿性溶液中加入1,4-丁二醇二縮水甘油醚，攪拌均勻，40～50℃反應(yīng)；調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值至2~5，倒入模具中流延成型，40～50℃反應(yīng)，并干燥成膜。該發(fā)明顯著提高了交聯(lián)膜的防粘連作用、柔韌性和成膜效果。得到的膜具有良好的生物相容性、優(yōu)異的防粘連、止血、促進(jìn)愈合、抗炎的功能，同時(shí)該膜具有適宜可調(diào)的降解時(shí)間、適用范圍更廣。
文檔編號(hào)A61L31/16GK103055353SQ20131002085
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2013年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月21日
發(fā)明者郭學(xué)平, 劉建建, 馮曉毅, 石艷麗, 李超, 張燕, 耿鳳 申請(qǐng)人:華熙福瑞達(dá)生物醫(yī)藥有限公司