專利名稱：癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種藥物制劑的制備方法，尤其是涉及一種癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康和生命的疑難疾患，居疾病死亡率之首?；瘜W(xué)療法在腫瘤治療中占較大比例，近40年來發(fā)展很快，療效不斷提高，但目前的抗癌藥物大多存在水溶性差、對(duì)腫瘤組織的選擇性差、療效低、毒性大、使用單一藥物治療易產(chǎn)生多藥耐藥性等缺點(diǎn)，限制了臨床應(yīng)用，并難以實(shí)現(xiàn)劑型的多樣化。增加疏水藥物的水溶性、克服耐藥性具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義和研究?jī)r(jià)值，是醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域亟待解決的問題。為了增加抗癌效果并減小毒副作用，全球許多科學(xué)家都競(jìng)相研發(fā)最新型的納米藥物載體材料和技術(shù)，致力于把疏水性藥物通過某些載體包裹以對(duì)其進(jìn)行增溶。近年來，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，各種新型的藥物載體層出不窮，其制備工藝逐步完善，作用機(jī)制進(jìn)一步闡明、劑型逐步改善、毒性和免疫原性大幅降低，特別是大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明大多數(shù)的藥物載體可以提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性、減小藥物副作用、減小劑量。盡管藥物載體發(fā)展迅速，且具備了許多優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)，其臨床應(yīng)用并不像預(yù)期的那樣廣泛，主要原因在于載體的引入極大的降低了載藥量、載體的存在給機(jī)體增加了額外的代謝負(fù)擔(dān)、載體的合成成本高且耗時(shí)，更重要的是，具有協(xié)同治療效果的多組分藥物很難同時(shí)且定量成比例的進(jìn)入同一劑型，使得具有最佳治療效果的納米多藥體系無法精確的控制制備。另外，載體基藥物在體液環(huán)境中的分布和穩(wěn)定存在也面臨著極大的挑戰(zhàn)。隨著癌癥診斷和治療業(yè)的發(fā)展，制備高載藥量、尺寸均一且比例可控的多組分藥物協(xié)同體系成為必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法；該方法是用模板法輔助制備各種疏水抗癌藥物的多藥協(xié)同納米載藥體系，改變制備條件可以得到不同配方、形貌和尺寸的納米多藥載藥體系，所制備的納米多藥載藥體系具有高的載藥量、良好的穩(wěn)定性、安全性、更低的毒副作用和優(yōu)異的抗癌活性。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明一種癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，包括如下步驟采用陽(yáng)極氧化法制備AAO模板(即多孔陽(yáng)極氧化鋁模板)，并對(duì)其進(jìn)行表面改性，改變表面的親溶劑性質(zhì)；把改性模板放置到多種抗癌藥物的混合溶液中，在常壓或減壓條件下輔助制備納米藥物；用酸或堿溶解除去模板，得到單分散且比例、形貌可控的多藥納米結(jié)構(gòu)；清洗后得到純的單分散納米藥物；合成功能化的表面活性劑分子，同時(shí)引入靶向單元；用合成的表面活性劑對(duì)納米藥物進(jìn)行功能化；除去多余的表面活性劑并進(jìn)行后續(xù)的穩(wěn)定性和生物學(xué)測(cè) 試。
具體步驟如下I)制備AAO模板；2)納米顆粒的制備將兩種以上具有協(xié)同效應(yīng)的疏水藥物加入到有機(jī)溶劑中，配制成濃度為I毫摩爾/升溶液至飽和溶液，得到藥物溶液^fAAO表面改性后浸泡在藥物溶液中> 5分鐘,取出硬模板晾干,重復(fù)浸泡和晾干步驟> 10次；3)去除模板用O. l-10mol/L的Na0H、5wt%_50wt%的H3PO4或磷酸+鉻酸混合酸溶解去除模板；4)收獲納米顆粒用水清洗去模板后的納米藥物體系，除去反應(yīng)副產(chǎn)物，得到單分散的納米藥物；5)表面活性劑的合成以末端帶氨基的聚乙二醇(以后簡(jiǎn)稱PEG)為親水端，含有18個(gè)碳鏈長(zhǎng)度的馬來酸酐(簡(jiǎn)稱PMHC18)的兩親性表面活性劑；作為疏水端，通過-NH2和-COOH的縮合反應(yīng)，制備PEG-PMHC18的兩親性表面活性劑；6)載藥體系的制備取納米藥物溶于水中，制得納米藥物水溶液；取步驟5)制得的表面活性劑溶于水中，制成表面活性劑水溶液；將納米藥物水溶液和表面活性劑水溶液混合，使兩個(gè)體系混合均勻， 通過超聲、震蕩或機(jī)械攪拌使得兩者通過疏水相互作用、靜電作用和/或范德華力作用實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定包裹(即納米藥物的功能化)，制得多藥載藥體系。優(yōu)選地，所述PEG的分子量范圍為2000-20000。本發(fā)明可以通過載藥體系的體外釋放及生物學(xué)表征數(shù)碼照片、電子顯微鏡、動(dòng)態(tài)光散射儀和紫外-可見分光光度法測(cè)定了載藥體系的穩(wěn)定性，并測(cè)定載藥體系的體外釋放行為、細(xì)胞內(nèi)吞、體外和體內(nèi)毒性等，來驗(yàn)證這本發(fā)明的方法的有效性。優(yōu)選地，步驟I)中，制備AAO模板的條件如下取純度> 99. 999%的鋁片并對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理，電解液為5wt%的硫酸、磷酸或草酸溶液；加入適量乙醇調(diào)控模板的制備過程；氧化電壓180V，氧化溫度15°C，氧化時(shí)間為7小時(shí)。優(yōu)選地，所述預(yù)處理包括退火、去油潰、拋光和清洗步驟。優(yōu)選地，步驟2)中，所述兩種以上具有協(xié)同效應(yīng)的疏水藥物選自下列物質(zhì)中的兩種以上的物質(zhì)紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、秋水仙堿、長(zhǎng)春新堿、甲氨蝶呤、他莫西芬、替尼泊苷、順鉬、6-巰基嘌呤。優(yōu)選地，步驟2)中，所述有機(jī)溶劑選自下列物質(zhì)中的一種或幾種乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜。選擇有機(jī)溶劑時(shí)，應(yīng)當(dāng)是所選藥物分子的良溶劑；也即藥物分子在有機(jī)溶劑中溶解度高。 優(yōu)選地，步驟2 )中，所述AAO表面改性是指將AAO置于在下列物質(zhì)中的一種或多種中進(jìn)行超聲處理8-12分鐘水、乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜中，且表面改性最后選擇的溶劑與藥物溶液中的有機(jī)溶劑相同。優(yōu)選地，步驟4)中，除去反應(yīng)副產(chǎn)物的方法是通過高速離心后棄去上層清液；所述高速離心的轉(zhuǎn)速為4000-24800轉(zhuǎn)/分鐘。優(yōu)選地，步驟6)中，所述納米藥物水溶液的濃度為10-1000umol/L。優(yōu)選地，步驟6)中，所述表面活性劑水溶液的濃度為0. 1-lOOmg/mL。優(yōu)選地，步驟6)中，所述納米藥物水溶液表面活性劑水溶液體積比為1:10-10:1。
本發(fā)明具有如下有益效果(I)實(shí)驗(yàn)條件溫和，操作簡(jiǎn)單，不需要使用大量的毒性溶劑和添加劑，不需要復(fù)雜的合成和制備過程；(2)制備時(shí)間短，效率高；(3)原材料來源廣泛、成本低廉,無毒安全；(4)形貌和尺寸均勻可調(diào)且易于控制(其中納米顆粒的粒徑為10_200nm，納米棒和納米管的直徑10-200nm，長(zhǎng)度500nm-100 μ m)，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)；(5)載藥量高(大于90%);(6)生物相容好，動(dòng)物體內(nèi)血液循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)，大大提高藥物的生物利用率；(7)該方法應(yīng)用面廣，適用于各種疏水藥物。因此，本發(fā)明是一種操作簡(jiǎn)單、成本低、產(chǎn)率高、納米藥物組分和比例可調(diào)、形貌可控、尺寸小、粒徑分布窄、對(duì)環(huán)境無污染的納米藥物制備方法，為新一代高載藥量的多藥制劑的研制及應(yīng)用研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)與技術(shù)保障，可用于癌癥診斷和治療領(lǐng)域，具有廣泛的應(yīng)用前景。


下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)的說明圖1 :空白AAO模板的掃描電子顯微鏡(SEM)圖片(a.正面圖，b.側(cè)面圖)；圖2 =AAO模板法制備的吉非替尼(GET)和10-羥基喜樹堿(HCPT) (1:1)納米顆粒的SEM圖片； 圖3 =GET和HCPT (1:1)納米多藥釋放體系的細(xì)胞內(nèi)吞過程(激光共聚焦熒光顯微鏡照片a. 30min, b. lh, c. 2h, d. 3h)；圖4 GET和HCPT (1:1)納米多藥釋放體系的細(xì)胞毒性研究(納米多藥與納米單藥培養(yǎng)不同時(shí)間對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷效果的MTT測(cè)試a. 24h, b. 48h)；圖5 =PEG-PMHC18和FA_PEG_PMHC18的生物相容性研究圖；圖6 =AAO模板法制備GET和HCPT (1:1)多藥載藥體系形貌調(diào)控過程的SEM圖片Ca.納米顆粒，b.納米顆粒和納米棒的混合體系，c.納米棒，d.納米顆粒和納米管混合體系);圖7 =AAO模板法制備的紫杉醇(PTX)和替尼泊苷(TEN) (2:3)納米顆粒的SEM圖片。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1模板法制備單分散性GET和HCPT (摩爾比1:1)納米多藥載藥體系的方法，它包括如下步驟I)制備AAO模板用高純鋁片(99. 999%)作為原料，丙酮溶液中超聲lOmin，除去表面污染物，然后在IOV電壓下，高氯酸/乙醇(1:4，V/V)溶液中電解30min，清除表面的氧化物，得到光亮的鋁片，以鋁片為陽(yáng)極，鉬片為陰極，在180V電壓下，5%H3P04+C2H50H(1:3，V/V)為電解液，15° C電解7小時(shí)，CuCl2溶液除去Al基底，10%H3P04溶液除掉阻擋層，得到兩端開口的模板，如圖1所示；
2)多藥納米顆粒的制備選擇兩種疏水抗癌藥物吉非替尼(簡(jiǎn)稱GET)和10-羥基喜樹堿(簡(jiǎn)稱HCPT)，在N，N- 二甲基甲酰胺(簡(jiǎn)稱DMF)中配制成30mM/L的混合溶液，并精確控制兩種藥物的摩爾比為1:1 ;將AAO模板依次在水-乙醇-丙酮-四氫呋喃-DMF中超聲IOmin處理，處理后的AAO模板在藥物混合溶液中浸泡-晾干，重復(fù)該操作10次；3)去除模板用1M/L的2_5mL的NaOH溶解2小時(shí)徹底除去AAO模板；4)純化納米顆粒用去離子水清洗去除模板后的混合溶液體系,高速離心后棄去上層清液，重復(fù)水洗5次得到純的單分散藥物納米顆粒；5)合成表面活性劑以末端為氨基的PEG-5000 (即分子量為5000的PEG)為親水端，含有18個(gè)碳鏈長(zhǎng)度的馬來酸酐作為疏水端，通過-NH2和-COOH的縮合反應(yīng)，制備PEG-PMHC18的兩親性表面活性劑；6)藥物釋放體系的制備取lmLGET+HCPT (摩爾比1:1)納米顆粒溶液(50uM/L)，加入200uL PEG-PMHC18的水溶液(lmg/mL)，攪拌30min使其穩(wěn)定包裹；7)藥物釋放體系的穩(wěn)定性表征所制備的功能化多藥釋放體系在生理緩沖液中室溫放置6個(gè)月，動(dòng)態(tài)光散射法和紫外可見吸光光度法測(cè)定了體系的儲(chǔ)存穩(wěn)定性；8)細(xì)胞內(nèi)吞過程激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試納米多藥隨時(shí)間變化的進(jìn)細(xì)胞過程;9)療效表征MTT比色法測(cè)試不同劑型對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷效果，小鼠腫瘤治療實(shí)驗(yàn)表征新劑型的體內(nèi)治療效果。經(jīng)檢測(cè)，本實(shí)施制得的納米藥物的尺寸為30-40納米，如圖2所示，所制備的納米藥物的載藥量為90% ;靜 置6個(gè)月后保持穩(wěn)定。圖3所示為激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試本實(shí)施例制備的GET和HCPT (1:1)納米多藥釋放體系的細(xì)胞內(nèi)吞過程，結(jié)果表明該多藥納米顆粒體系可以被腫瘤細(xì)胞有效且快速內(nèi)吞。采用MTT比色法測(cè)試不同劑型對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷效果，如圖4所示，結(jié)果表明納米顆粒體系具有比分子態(tài)更強(qiáng)的治療效果，且納米多藥具有比納米單藥更強(qiáng)的治療效果。PEG分子無毒，具有良好的安全性；圖5所示為生物相容性研究結(jié)果，可以看出，細(xì)胞在200ug/mL的表面活性劑中培養(yǎng)時(shí)仍然能保持95%以上的存活率，說明本實(shí)施例制備的多藥協(xié)同納米顆粒釋放體系具有良好的生物相容性。實(shí)施例2模板法制備單分散性GET和HCPT (不同比例)納米多藥載藥體系的方法，它包括如下步驟I)制備AAO模板與實(shí)施例1相同；2)制備比例可調(diào)的多藥納米顆粒選擇兩種疏水抗癌藥物GET和HCPT，在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中配制成30mM/L的混合溶液，并精確控制兩種藥物的摩爾比為1:9，2:8，3:7，4:6，5:5，6:4，7:3，8:2或9:1，將八八0模板依次在水-乙醇-丙酮-四氫呋喃DMF中超聲IOmin處理，處理后的AAO模板在藥物混合溶液中浸泡-晾干，重復(fù)該操作10次；3 )去除模板與實(shí)施例1相同；4)純化納米顆粒與實(shí)施例1相同；
5)合成表面活性劑與實(shí)施例1相同；6)藥物釋放體系的制備取ImL上述不同比例的GET+HCPT納米顆粒溶液(lOOOuM/L)，加入IOmL PEG-PMHC18的水溶液(O. lmg/mL)，攪拌30min使其穩(wěn)定包裹；7)藥物釋放體系的穩(wěn)定性表征與實(shí)施例1相同；8)生物學(xué)測(cè)試激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試納米多藥釋放體系的進(jìn)細(xì)胞過程；MTT比色法測(cè)試不同劑型的體外殺傷效果；小鼠腫瘤模型表征新劑型的體內(nèi)治療效果。經(jīng)檢測(cè)，本實(shí)施制得的納米藥物的尺寸為30-50納米，所制備的納米藥物的載藥量為91-93% ;靜置6個(gè)月后保持穩(wěn)定；具有優(yōu)異的抗癌活性。實(shí)施例3模板法制備單分散性不同形貌GET和HCPT (摩爾比為1:1)納米多藥載藥體系的方法，它包括如下步驟I)制備AAO模板與實(shí)施例1相同；2)制備不同形貌的納米多藥選擇兩種疏水抗癌藥物GET和HCPT，在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中配制成15，30，60mM/L的混合溶液，并精確控制兩種藥物的摩爾比為1: 1，將AAO模板依次在水-乙醇-丙酮-四氫呋喃-DMF中超聲IOmin處理，處理后的AAO模板在藥物混合溶液中浸泡一晾干，調(diào)整每次浸泡時(shí)間為5，10, 30min,重復(fù)該操作15次；3 )去除模板與實(shí)施例1相同；4)純化納米多藥與實(shí)施例1相同；5)合成表面活性劑與`實(shí)施例1相同；6 )藥物釋放體系的制備取ImL的GET+HCPT納米多藥溶液(500uM/L)，加入100uLPEG-PMHC18的水溶液(100mg/mL)，超聲30min使其穩(wěn)定包裹；7)藥物釋放體系的穩(wěn)定性表征與實(shí)施例1相同，并在表征手段中增加了電子顯微鏡和數(shù)碼照片的結(jié)果；8)生物學(xué)測(cè)試激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試納米多藥釋放體系的進(jìn)細(xì)胞過程；MTT比色法測(cè)試不同劑型的體外殺傷效果；小鼠腫瘤模型表征新劑型的體內(nèi)治療效果。經(jīng)檢測(cè)，本實(shí)施制得的藥物納米顆粒的直徑為100納米，藥物納米棒的直徑為190-200納米，長(zhǎng)度l-2um，如圖6所示，所制備的納米藥物的載藥量為90%;靜置6個(gè)月后保持穩(wěn)定；具有優(yōu)異的抗癌活性。實(shí)施例4模板法制備單分散性紫杉醇(PTX)和替尼泊苷(TEN)(摩爾比為2:3)納米多藥載藥體系的方法，它包括如下步驟 I)制備AAO模板與實(shí)施例1相同；2)制備比例精確的納米多藥選擇兩種疏水抗癌藥物PTX和TEN，在四氫呋喃(THF沖配制成20mM/L的混合溶液，并精確控制兩種藥物的摩爾比為2: 3，將AAO模板依次在水-乙醇-丙酮-四氫呋喃中超聲IOmin處理，處理后的AAO模板在藥物混合溶液中浸泡-晾干，調(diào)整每次浸泡時(shí)間為IOmin,重復(fù)該操作15次；3 )去除模板用5wt%的2_5mL的H3PO4溶解4小時(shí)徹底除去AAO模板；4)純化納米多藥與實(shí)施例1相同；5)合成表面活性劑與實(shí)施例1相同；
6)藥物釋放體系的制備取lmLPTX+TEN多藥納米顆粒溶液(10uM/L)，加入200uLPEG-PMHC18的水溶液(lmg/mL)，攪拌30min使其穩(wěn)定包裹；7)藥物釋放體系的穩(wěn)定性表征與實(shí)施例1相同；8)生物學(xué)測(cè)試激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試納米多藥釋放體系的進(jìn)細(xì)胞過程；MTT比色法測(cè)試不同劑型的體外殺傷效果；小鼠腫瘤模型表征新劑型的體內(nèi)治療效果。經(jīng)檢測(cè)，本實(shí)施制得的納米藥物的尺寸為70-80納米，如圖7所示，所制備的納米藥物的載藥量為93% ;靜置6個(gè)月后保持穩(wěn)定；具有優(yōu)異的抗癌活性。實(shí)施例5模板法制備單分散性甲氨蝶呤(MTX)和他莫西芬(TAM)(摩爾比為1:1)納米多藥載藥體系的方法，它包括如下步驟I)制備AAO模板與實(shí)施例1相同； 2)制備比例精確的納米多藥選擇兩種疏水抗癌藥物MTX和TAM，在二甲基亞砜(DMSO)中配制成30mM/L的混合溶液，并精確控制兩種藥物的摩爾比為1: 1，將AAO模板依次在水-乙醇-丙酮-四氫呋喃-二甲基亞砜中超聲IOmin處理,處理后的AAO模板在藥物混合溶液中浸泡一晾干，調(diào)整每次浸泡時(shí)間為5min,重復(fù)該操作30次；3)去除模板用10wt%的2_5mL的H3PO4溶解4小時(shí)徹底除去AAO模板；4)純化納米多藥與實(shí)施例1相同；5)合成表面活性劑與實(shí)施例1相同；6 )藥物釋放體系的制備取lmLMTX+TAM多藥納米顆粒溶液(50uM/L)，加入250uLPEG-PMHC18的水溶液(lmg/mL)，超聲30min使其穩(wěn)定包裹；7)藥物釋放體系的穩(wěn)定性表征與實(shí)施例1相同，并在表征手段中增加了電子顯微鏡和數(shù)碼照片的結(jié)果；8)生物學(xué)測(cè)試激光共聚焦熒光顯微鏡測(cè)試納米多藥釋放體系的進(jìn)細(xì)胞過程；MTT比色法測(cè)試不同劑型的體外殺傷效果；小鼠腫瘤模型表征新劑型的體內(nèi)治療效果。經(jīng)檢測(cè)，本實(shí)施制得的納米藥物的尺寸為190納米，所制備的納米藥物的載藥量為90% ;靜置6個(gè)月后保持穩(wěn)定；具有優(yōu)異的抗癌活性。顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。
權(quán)利要求
1.癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于，包括如下步驟1)制備AAO模板；2)納米顆粒的制備將兩種以上具有協(xié)同效應(yīng)的疏水藥物加入到有機(jī)溶劑中，配制成濃度為I毫摩爾/升溶液至飽和溶液，得到藥物溶液^fAAO表面改性后浸泡在藥物溶液中 ^ 5分鐘，取出硬模板晾干，重復(fù)浸泡和晾干步驟> 10次；3)去除模板用O.l-10mol/L的Na0H、5wt%-50wt%的H3PO4或磷酸+鉻酸混合酸溶解去除模板；4)收獲納米顆粒用水清洗去模板后的納米藥物，除去反應(yīng)副產(chǎn)物，得到單分散的納米藥物；5)表面活性劑的合成以末端為氨基的PEG為親水端，含有18個(gè)碳鏈長(zhǎng)度的馬來酸酐作為疏水端，通過-NH2和-COOH的縮合反應(yīng)，制備PEG-PMHC18 ；6)載藥體系的制備取納米藥物溶于水中，制得納米藥物水溶液；取步驟5)制得的表面活性劑溶于水中，制成表面活性劑水溶液；將納米藥物水溶液和表面活性劑水溶液混合， 使兩個(gè)體系混合均勻，通過超聲、震蕩或機(jī)械攪拌使得表面活性劑對(duì)納米藥物進(jìn)行穩(wěn)定包裹，制得廣品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟I) 中，制備AAO模板的條件如下取純度> 99. 999%的鋁片并對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理，電解液為5wt% 的硫酸、磷酸或草酸溶液；加入適量乙醇調(diào)控模板的制備過程；氧化電壓180V，氧化溫度 15°C，氧化時(shí)間為7小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，所述預(yù)處理包括退火、去油潰、拋光和清洗步驟。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟2) 中，所述兩種以上具有協(xié)同效應(yīng)的疏水藥物選自下列物質(zhì)中的兩種以上的物質(zhì)紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、秋水仙堿、長(zhǎng)春新堿、甲氨蝶呤、他莫西芬、替尼泊苷、順鉬、6_巰基嘌呤。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟2) 中，所述有機(jī)溶劑選自下列物質(zhì)中的一種或幾種乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、 三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟2) 中，所述AAO表面改性是指將AAO置于在下列物質(zhì)中的一種或多種中進(jìn)行超聲處理8-12分鐘水、乙醇、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、三氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜中，且表面改性最后選擇的溶劑與藥物溶液中的有機(jī)溶劑相同。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟4)中，除去反應(yīng)副產(chǎn)物的方法是通過高速離心后棄去上層清液；所述高速離心的轉(zhuǎn)速為 4000-24800 轉(zhuǎn) / 分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟6) 中，所述納米藥物水溶液的濃度為lO-lOOOumol/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟6) 中，所述表面活性劑水溶液的濃度為0. 1-lOOmg/mL。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述納米多藥載藥體系的制備方法，其特征在于優(yōu)選地，步驟6)中，所述納米藥`物水溶液表面活性劑水溶液體積比為1:10-10:1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種癌癥治療中納米多藥載藥體系的制備方法，包括如下步驟采用陽(yáng)極氧化法制備AAO模板，并對(duì)其進(jìn)行表面改性，改變表面的親溶劑性質(zhì)；把改性模板放置到多種抗癌藥物的混合溶液中，在常壓或減壓條件下輔助制備納米藥物；用酸或堿溶解除去模板，得到單分散且比例、形貌可控的多藥納米結(jié)構(gòu)；清洗后得到純的單分散納米藥物；合成功能化的表面活性劑分子，同時(shí)引入靶向單元；用合成的表面活性劑對(duì)納米藥物進(jìn)行功能化；本發(fā)明方法是用模板法輔助制備各種疏水抗癌藥物的多藥協(xié)同納米結(jié)構(gòu)，改變制備條件可以得到不同配方、形貌和尺寸的納米藥物，所制備的納米藥物具有高的載藥量、良好的穩(wěn)定性、安全性、更低的毒副作用和優(yōu)異的抗癌活性。
文檔編號(hào)A61K45/00GK103041393SQ20131001524
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2013年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月16日
發(fā)明者張曉宏, 李亞楠, 歐雪梅 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院理化技術(shù)研究所