用于體重減輕飲食之后的體重穩(wěn)定的植物蛻皮激素的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及植物蛻皮激素,其可用于在先前已進(jìn)行低熱量體重減輕飲食的肥胖哺乳動(dòng)物中避免體重增加。植物蛻皮激素有利地添加到食物組合物中。根據(jù)本發(fā)明,所述植物蛻皮激素可來(lái)自植物,例如藜麥。
【專(zhuān)利說(shuō)明】用于體重減輕飲食之后的體重穩(wěn)定的植物蛻皮激素
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物蛻皮激素(純的形式或是包含在提取物中),用于體重減輕飲食之后的體重穩(wěn)定。
[0002]更具體地,本發(fā)明使得可在先前已進(jìn)行體重減輕飲食的肥胖哺乳動(dòng)物中避免體重增加。
【背景技術(shù)】
[0003]目前,超重和肥胖是在全世界穩(wěn)定增長(zhǎng)的病理生理狀態(tài)。在歐洲和美國(guó),當(dāng)個(gè)體的體重指數(shù)(BMI)大于25時(shí),認(rèn)為他或她超重。當(dāng)個(gè)體的BMI大于30時(shí),則認(rèn)為他或她肥胖。
[0004]這種生理失調(diào)可能是多種健康問(wèn)題的來(lái)源。例如,代謝綜合征是經(jīng)常與超重相關(guān)的生理紊亂。當(dāng)人具有與代謝綜合征相關(guān)的以下五項(xiàng)臨床體征中的至少三項(xiàng)時(shí),就認(rèn)為他或她患有代謝綜合征(Isomaa等,2001):內(nèi)臟或腹部肥胖、高甘油三酯血癥、致動(dòng)脈粥樣化的血脂異常(atherogenic dyslipidemia)、高血壓和高血糖。肥胖本身還提高了發(fā)生2型糖尿病(或成年型糖尿病)和心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)(Rexrode等,1998)。
[0005]用于使肥胖哺乳動(dòng)物減輕體重并減少身體脂肪的一種方法是堅(jiān)持低熱量飲食(其可與藥物和/或膳食補(bǔ)充劑組合)以及有規(guī)律的體力活動(dòng)。然而,在最初的體重減輕階段之后,通常會(huì)觀察到低熱量飲食個(gè)體的體重恢復(fù)(Ulen等,2008)。這種現(xiàn)象稱為“反彈效應(yīng)(rebound effect),,。
[0006]已開(kāi)發(fā)了多種膳食補(bǔ)充劑和功能性食品來(lái)促進(jìn)超重哺乳動(dòng)物的體重減輕(Saper等,2004)并防止糖尿病(MCWorther,2001)和心血管疾病的發(fā)病。目前市場(chǎng)上的大多數(shù)飲食產(chǎn)品對(duì)腹部肥胖不夠有效,并且在一些情況下,還被發(fā)現(xiàn)是有毒的(Pittler等,2005)。此外,其缺乏防止低熱量飲食一定時(shí)間段之后的反彈效應(yīng)的功效。
[0007]因此必須鑒定出已存在于哺乳動(dòng)物飲食中的新天然分子,從而開(kāi)發(fā)出無(wú)毒的并且對(duì)身體脂肪表現(xiàn)出長(zhǎng)期功效的成分和功能食品。
[0008]植物蛻皮激素是植物來(lái)源的蛻皮留類(lèi)(ecdysteroid)。它們是屬于三萜家族的天然分子并且在植物界中相對(duì)豐富,可見(jiàn)于5%的野生植物中(Bdithori和Pongrdics, 2005)。
[0009]如本 申請(qǐng)人:的專(zhuān)利FR2924346中所述,已知植物蛻皮激素(特別是20-羥基蛻皮激素)減少促肥胖高熱量飲食的哺乳動(dòng)物中身體脂肪的增加。
[0010]此外,所述分子具有抗氧化特性(Kuzmenko等,2001)并且沒(méi)有毒性(Ogawa等,1974)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0011]本發(fā)明人發(fā)現(xiàn),肥胖的哺乳動(dòng)物攝入植物蛻皮激素可減少由低熱量飲食導(dǎo)致的最初體重減輕階段之后的體重恢復(fù)。
[0012]更具體地,用植物蛻皮激素治療的個(gè)體在稱為穩(wěn)定階段的階段過(guò)程(在這期間對(duì)照組恢復(fù)體重)中穩(wěn)定其體重,或者甚至繼續(xù)減輕體重。[0013]此外,在該穩(wěn)定階段期間,與對(duì)照組中的個(gè)體相比,用植物蛻皮激素治療的個(gè)體具有更小的脂肪細(xì)胞尺寸。與對(duì)照組中的個(gè)體相比,他們還具有更低的血液胰島素水平和更高的胰島素敏感性。
[0014]因此,本發(fā)明提出實(shí)施植物蛻皮激素(特別是20-羥基蛻皮激素)以防止低熱量體重減輕飲食的肥胖哺乳動(dòng)物的體重恢復(fù)。
[0015]優(yōu)選地,植物蛻皮激素還用于在低熱量體重減輕飲食之后的穩(wěn)定階段期間穩(wěn)定或者甚至繼續(xù)減小脂肪細(xì)胞的直徑。
[0016]優(yōu)選地,植物蛻皮激素還用于穩(wěn)定因先前的低熱量體重減輕飲食而改善的胰島素敏感性。因此,除了其在治療肥胖中的作用之外,植物蛻皮激素在治療糖尿病特別是2型糖尿病中也具有前景。
[0017]所使用的植物蛻皮激素可通過(guò)從植物中提取來(lái)獲得。也可使用通過(guò)半合成制備的蛻皮激素。
[0018]植物蛻皮激素優(yōu)選地選自20-羥基蛻皮激素、羅漢松留酮A、24_表羅漢松甾酮A(epimakisterone A) >24(28)-去氫羅漢松甾酮A、20,26_ 二輕基脫皮激素以及這些組分中兩種或更多種的組合。
[0019]植物蛻皮激素可以為純的形式,或者包含在或多或少地富集了的植物提取物中。有利地,根據(jù)本發(fā)明實(shí)施的植物蛻皮激素為富集了植物蛻皮激素的植物提取物的形式,所述提取物包含按重量計(jì)至少I(mǎi) %的植物蛻皮激素。優(yōu)選地,所述提取物包含按重量計(jì)I %至7%的植物蛻皮激素,更優(yōu)選1.5%至3 %,并且甚至更優(yōu)選2%的植物蛻皮激素。
[0020]本發(fā)明提取物所來(lái)源自的食用植物有利地選自藜科(chenopodiacae),特別是藜麥(quinoa)和菠菜(Findeisen, 2004)。藥用植物也可用于開(kāi)發(fā)富集了植物脫皮激素的提取物。
[0021]優(yōu)選地,本發(fā)明富集了植物蛻皮激素的植物提取物來(lái)自藜麥。藜麥?zhǔn)歉缓参锿懫ぜに氐目墒秤脗喂任?Pseudo-cereal) (Zhu等,2001 ;Dini等,2005)。因此可通過(guò)以下方式對(duì)食物進(jìn)行補(bǔ)充:通過(guò)攝入富集了植物蛻皮激素的藜麥提取物,通過(guò)將所述提取物引入食物(例如奶制品或飲料)中,或者通過(guò)以膳食補(bǔ)充劑(例如以膠囊劑的形式)來(lái)食用所述提取物。
[0022]目前藜麥被認(rèn)為是最富含植物蛻皮激素的食用植物。藜麥種子包含植物蛻皮激素的混合物(Zhu等,2001)。所述植物蛻皮激素在藜麥種子的外殼中尤其豐富。例如,一份60克的藜麥種子(干重)提供15毫克至25毫克的20-羥基蛻皮激素。
[0023]根據(jù)本發(fā)明實(shí)施的植物蛻皮激素有利地為可經(jīng)口施用的組合物的形式。
[0024]組合物意指例如食品,如飲料、奶制品或其他。當(dāng)然,所述組合物可以是藥物組合物,例如以丸劑形式使用因此包含精確劑量的植物蛻皮激素的藥物組合物。
[0025]有利地,植物脫皮激素以0.3mg/kg體重/天至2.0mg/kg體重/天,優(yōu)選0.5mg/kg/天的速率經(jīng)口施用。
[0026]本發(fā)明的另一個(gè)目的是用于制備富集了一種或更多種植物蛻皮激素的藜麥提取物的方法,所述方法包括以下步驟:
[0027]-對(duì)藜麥種子進(jìn)行水提?。?br>
[0028]-對(duì)該水性提取物進(jìn)行固/液分離并離心;[0029]-加熱上清液以使蛋白質(zhì)沉淀;
[0030]-通過(guò)色譜法純化上清液以使其植物蛻皮激素富集。
[0031]本發(fā)明還涉及由上述方法產(chǎn)生的藜麥提取物。如上所述,所述提取物可有利地用于在低熱量體重減輕飲食的肥胖哺乳動(dòng)物中避免體重恢復(fù)。
【專(zhuān)利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0032]圖1A、圖1B:表示低熱量飲食的肥胖個(gè)體的體重變化的圖;
[0033]圖2A、圖2B:表示低熱量飲食的肥胖個(gè)體的脂肪細(xì)胞直徑變化的圖;
[0034]圖3A、圖3B:表示低熱量飲食的肥胖個(gè)體的胰島素水平變化的圖;
[0035]圖4A、圖4B: 表示低熱量飲食的肥胖個(gè)體的胰島素敏感性變化的圖;
[0036]圖5:根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的組合物中存在的植物蛻皮激素的化學(xué)式。
[0037]發(fā)明詳述
[0038]在本發(fā)明中,提出了以純化分子的形式或者通過(guò)富集了植物蛻皮激素的植物提取物提供一定劑量的植物蛻皮激素,從而防止低熱量體重減輕飲食的肥胖哺乳動(dòng)物的體重恢復(fù)(稱為“反彈效應(yīng)”)。
[0039]根據(jù)本發(fā)明,可以以植物提取物(例如藜麥,例如摻入到加入個(gè)體日常飲食的食物中)的形式提供所述劑量的植物蛻皮激素。富集至按重量計(jì)高達(dá)2%植物蛻皮激素的I克藜麥中包含20毫克的植物蛻皮激素。為了從藜麥種子中獲得相同量的植物蛻皮激素,必須攝入50克未加工的藜麥種子(011^等,2005;1(111^1111等,2011)。另外,與產(chǎn)生藜麥提取物的藜麥種子相比,本發(fā)明的藜麥提取物可包含多出高達(dá)藜麥50倍的植物蛻皮激素。
[0040]1-用于制備富集了植物蛻皮激素的藜麥提取物的方法的實(shí)施例(提取物A)
[0041 ] 首先研磨藜麥種子以將粉與從種子麩皮分開(kāi)。然后通過(guò)向400kg麩中添加4,000L進(jìn)行提取。使水性提取物發(fā)生固/液分離,然后進(jìn)行離心。對(duì)所得上清液進(jìn)行90°C的加熱以使蛋白質(zhì)沉淀。然后通過(guò)食品樹(shù)脂柱純化水性提取物以使其植物蛻皮激素富集。然后在加入一點(diǎn)麥芽糖糊精之后通過(guò)噴霧干燥使乙醇洗脫物干燥,適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)為含量為以重量計(jì)2±0.2%的20-羥基蛻皮激素(20E)。
[0042]這樣的順序提取使得可從提取物中除去皂苷和大部分糖,所述皂苷在藜麥種子中是豐富的(Muir等,2002)并且會(huì)在所述提取物中產(chǎn)生苦味。
[0043]所獲得的提取物包含植物蛻皮激素的混合物,其中的85 %至90 %是20-羥基蛻皮激素。其余部分包含其他非常相似的植物蛻皮激素,例如羅漢松留酮A、24-表羅漢松甾酮A、24 (28)-去氫羅漢松甾酮A、20,26-二羥基蛻皮激素(Kumpun等,2011)。圖5中示出了這些組分的結(jié)構(gòu)。
[0044]可作為本發(fā)明一部分使用的與提取物A相似的提取物特別地以名私Quinolia?出售。
[0045]I1-提取物A對(duì)低熱暈飲食六周之后穩(wěn)定飲食六周的肥胖個(gè)體的作用的雙盲臨床試駘
[0046]述
[0047]作為雙盲臨床試驗(yàn)的一部分,對(duì)60名超重和肥胖的志愿者(包含BMI范圍為27至38的18名男性和42名女性)研究了提取物A的作用。使志愿者進(jìn)行六周的低熱量飲食,女性為1200千卡路里,男性為1500千卡路里。低熱量飲食之后為六周的穩(wěn)定飲食,其具有比低熱量飲食高20%的卡路里。在低熱量階段和穩(wěn)定階段開(kāi)始和結(jié)束時(shí)的訪視期間測(cè)量參數(shù)例如胰島素水平、體重變化、脂肪細(xì)胞直徑和肌肉強(qiáng)度。
[0048]將對(duì)象分為兩組。第一組(“提取物A”組)在整個(gè)測(cè)試持續(xù)時(shí)間中每天以三次給藥接受六個(gè)提取物A膠囊,包含總計(jì)40mg的植物蛻皮激素。
[0049]第二個(gè)對(duì)照組(“安慰劑”組)每天以三次給藥接受六個(gè)安慰劑膠囊,維持相同的持續(xù)時(shí)間。
[0050]在治療開(kāi)始時(shí)(WO)、第六周飲食結(jié)束時(shí)(W6)和第十二周飲食結(jié)束時(shí)(W12)進(jìn)行測(cè)量。
[0051]體重減輕飲食和穩(wěn)定飲食期間體重變化的測(cè)暈
[0052]基于體重變化研究了提取物A在低熱量飲食期間的作用(圖1A和圖1B)。
[0053]“安慰劑”組和“提取物A”組顯示在飲食的第一階段(稱為體重減輕階段)期間各自的體重減輕為4.05kg和3.86kg。
[0054]在飲食的第二階段(稱為穩(wěn)定階段)期間,“提取物A”組繼續(xù)減輕體重(-0.483kg),而“安慰劑”組表現(xiàn)出+0.504kg的平均增加。
[0055]所測(cè)試個(gè)體中相對(duì)體重變化的研究示出,在“提取物A”組中僅有10%的個(gè)體反彈(0.05kg/天至0.1kg/天的增加),相比之下“安慰劑”組為28%。
[0056]同一“提取物A”組中20%的個(gè)體的體重以0.06kg/天至0.15kg/天減輕,而在“安慰劑”組中僅有10%的個(gè)體落入該類(lèi)別中。
[0057]體重減輕飲食和穩(wěn)定飲食期間脂肪細(xì)胞肓徑的測(cè)暈
[0058]基于脂肪細(xì)胞直徑變化研究了提取物A在低熱量飲食期間的作用(圖2A和2B)。
[0059]在體重減輕階段期間,平均脂肪細(xì)胞直徑在“提取物A”組(-10.94 μ m)和“安慰劑”組(-8.80 μ m)中均減小。
[0060]在穩(wěn)定階段期間,平均直徑繼續(xù)下降,在“提取物A”組(-9.25 μ m)與“安慰劑”組(-5.99 μ m)之間具有顯著差異。
[0061]將該結(jié)果與“提取物A”組在穩(wěn)定階段期間更大的身體脂肪減少結(jié)合起來(lái)。實(shí)際上,在穩(wěn)定階段期間身體脂肪的減少對(duì)于“提取物A”組為-0.74kg,而對(duì)于“安慰劑”組僅為-0.33kg。
_2] 體重減輕飲食和穩(wěn)定飲食期間胰島素水平和胰島素抗性的測(cè)暈
[0063]基于胰島素水平(圖3A和圖3B)和胰島素抗性(圖4A和圖4B)的變化研究了提取物A在低熱量飲食期間的作用。HOMA-1R(胰島素抗性的穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估,圖4A和圖4B)指數(shù)是胰島素抗性的指標(biāo)。
[0064]在體重減輕階段期間,“提取物A”組(-18.90pmol/L)和“安慰劑”組(-12.60pmol/L)組中的血液胰島素水平下降。在穩(wěn)定階段期間,“安慰劑”組中的胰島素水平回升(7.69pmol/L),而“提取物A”組中的胰島素水平穩(wěn)定。用提取物A進(jìn)行治療使得可在穩(wěn)定階段穩(wěn)定血液胰島素水平并且在整個(gè)治療中使血液胰島素水平比安慰劑降低得更為顯著。
[0065]在體重減輕階段期間,兩組中用HOMA-1R指數(shù)衡量的胰島素抗性均下降。在穩(wěn)定階段期間,“提取物A”組中的胰島素抗性保持恒定,而在“安慰劑”組中顯著回升。
[0066]結(jié)論[0067]施用提取物A使得目的對(duì)象可避免低熱量體重減輕飲食的第二階段(稱為穩(wěn)定階段)期間的體重恢復(fù)。
[0068]此外,施用提取物A使身體脂肪和平均脂肪細(xì)胞直徑在穩(wěn)定階段期間能夠更顯著地下降。
[0069]最后,施用提取物A使得可在該穩(wěn)定階段期間降低胰島素水平并維持由低熱量飲食所帶來(lái)的胰島素敏感性改善。
[0070]參考文獻(xiàn)
[0071]Bathori M, Pongracz Z.2005.Phytoecdysteroids-from isolation to theireffects on humans.Current Medicinal Chemistryl2,153-172.[0072]Dini I,Tenore GC, Dini A.2005.Nutritional and antinutritionalcomposition of Kancolla seeds:An interesting and underexploited andine foodplant.Food Chemistry,92,125-132.[0073]Findeisen E.2004.Ecdysteroids in Human Food (Ecdysteroide in dermenschlichenNahrung).PhD thesis, University of Marburg, Germany.[0074]Isomaa B,Almgren P,Tuomi T,F(xiàn)orsen B,Lahtii K,Nissen M,Taskinen MR,GroopL 2001.Cardiovascular morbidity and mortality associated with the metabolicsyndrome.Diabetes Care24 (4),683-689.[0075]Kumpun SiMaria AiCrouzet C, Evrard-Todeschi NiGirault JP, Lafont R.201LEcdysteroids from Chenopodium quinoaWilld., an ancient Andean crop of highnutritioual value, Food Chemistryl25,1226-1234.[0076]Kuzmenko AIiNiki EiNoguchi N.2001.New functions of 20-hyd roxyecdysonein lipid peroxidation.Journal of Oleo Science50,497-506.[0077]McWorther LS.2001.Biological complememtary therapies:a focus onbotanical products in diabetes.Diabetes Spectruml4,199-208.[0078]Ogawa S,Nishimoto N,Matsuda H.1974.Pharmacology of ecdysones invertebrates.1n !Invertebrate Endocrinology and Hormonal Heterophylly(Burdette,W.J.ed.) Springer, New York.341-344.[0079]Pittler MH, Schmidt K, Ernst E.2005.Adverse events of herbal foodsupplememts for body weight reduction !systematic review.0besity Review6,93-111.[0080]Rexrode K, Carey V, Hennekens CH, Walters EE, Colditz GA, Stampfer MJ,Willet WC, Manson JE.1998.Abdominal adiposity and coronary heart disease inwomen.JAMA280,1843-1848.[0081]Saper RB, Eisenberg DM,Phillips RS.2004.Common dietary supplememts forweightloss.American Family Physician70 (9),1731-1738.[0082]Ulen CG, Huizinga M,Beech B,Elasy TA.2008.Weight regain prevention.Clinical Diabetes26(3),100-113.[0083]Zhu N,Kikusaki H,Vastano BC, Nakatani N,Karwe MV, Rosen RT, Ho CT.2001.Ecdysteroids of quinoa seeds (ChenopodiumquinoaWilld.).Journal of Agriculturaland Food Chemistry 49,2576-2578.
【權(quán)利要求】
1.植物蛻皮激素,其用于防止低熱量體重減輕飲食之后哺乳動(dòng)物中的體重恢復(fù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物蛻皮激素,其用于穩(wěn)定低熱量體重減輕飲食之后脂肪細(xì)胞的直徑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的植物蛻皮激素,其用于穩(wěn)定先前通過(guò)低熱量體重減輕飲食而改善的胰島素敏感性。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的植物蛻皮激素,使得其選自20-羥基蛻皮激素、羅漢松甾酮A、24-表羅漢松甾酮A、24 (28)-去氫羅漢松甾酮A、20,26- 二羥基蛻皮激素以及這些組分中兩種或更多種的組合。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的植物蛻皮激素,其以植物提取物的形式提供。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的植物蛻皮激素,使得所述提取物包含按重量計(jì)至少1%的植物蛻皮激素。
7.根據(jù)權(quán)利要求5至6中任一項(xiàng)所述的植物蛻皮激素,使得所述植物提取物來(lái)自藜麥。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的植物蛻皮激素,其摻入可經(jīng)口施用的組合物中。
9.一種用于制備富集了一種或更多種植物蛻皮激素的藜麥提取物的方法,所述方法包括以下步驟: -對(duì)藜麥種子進(jìn)行水提?。? -對(duì)該水性提取物進(jìn)行固/液分離并離心; -加熱上清液以使蛋白質(zhì)沉淀; -通過(guò)色譜法純化所述上清液以使其植物蛻皮激素富集。
【文檔編號(hào)】A61K36/21GK103957727SQ201280055214
【公開(kāi)日】2014年7月30日 申請(qǐng)日期:2012年11月12日 優(yōu)先權(quán)日:2011年11月10日
【發(fā)明者】勒內(nèi)·拉豐, 卡里納·克萊門(mén)特, 薩爾瓦·里茲卡拉, 斯坦尼斯拉斯·韋耶, 安妮-索菲·富科, 瓦利·迪奧 申請(qǐng)人:比奧菲蒂斯研究所簡(jiǎn)單股份有限公司, 皮埃爾與瑪麗·居里大學(xué)