專利名稱：用于治療在外科切除術(shù)后殘留在組織中的微小殘余腫瘤的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及電穿孔系統(tǒng)、裝置以及利用這種裝置來治療腫瘤周圍部位的組織的方法。更具體地，本發(fā)明涉及通過用電穿孔的脈沖和抗癌劑治療明顯的非癌性組織來減少腫瘤塊的體積(debulking tumor mass)、不損害(sparing)腫瘤周圍的組織、以及降低腫瘤塊尺寸和復(fù)發(fā)率。
背景技術(shù)：
以下描述包括可有利于理解本發(fā)明的信息。然而，并不是承認，任何這樣的信息對于要求保護的本發(fā)明而言是現(xiàn)有技術(shù)或與本發(fā)明有關(guān)，或任何明確或間接地提及的出版物是現(xiàn)有技術(shù)。在工業(yè)化國家中，除血管疾病之外，癌癥是死亡的最常見原因。傳統(tǒng)上公認的用于治療癌癥和腫瘤(其包括單個相對輪廓分明的組織塊(tissue mass))的方案(paradigm)包括通常與外科切除聯(lián)合使用的放療和化療。在外科切除術(shù)是一種選擇的情況下，外科手術(shù)通常是最有效的治療形式。然而，外科治療的效果取決于惡性組織的完全去除，該惡性組織包括主腫瘤塊以及經(jīng)常存在于主腫瘤(main tumor)附近的分支和微轉(zhuǎn)移。當去除主腫瘤時，外科醫(yī)生還試圖通過切除腫瘤周圍的明顯正常組織來消除這樣的局部或區(qū)域微轉(zhuǎn)移。這種組織稱作“邊緣組織”或簡單地稱作“邊緣”。在何種程度上去除邊緣組織取決于外科醫(yī)生的判斷。通常，整個腫瘤周圍O. 5-2cm的邊緣是可以接受的。然而，對于侵襲性腫瘤，更廣泛的切除并不罕見。甚至是在仔細切除腫瘤和邊緣以后，大多數(shù)類型的腫瘤還是會以10-40%的頻率復(fù)發(fā)。復(fù)發(fā)率取決于多種因素，包括腫瘤大小、腫瘤的類型和位置、患者的狀況等。為了降低復(fù)發(fā)率，外科手術(shù)后通常會進行放療和/或化療。盡管進行這些后續(xù)治療(secondary treatment),但復(fù)發(fā)率仍然令人不安地較高。除外科手術(shù)和放射以外，還使用局部腫瘤控制的其他方法。這些方法包括射頻(RF)消融、光動力學(xué)療法(TOT)、冷凍療法(CRYO)、化放療(CR)、近程治療(BT)、直流電療法(GT)，以及其他方法。外科手術(shù)、RF、PDT、CRY0以及CR依賴于腫瘤和邊緣組織的完全去除或破壞，而放射、BT、以及GT留下或多或少的完整的經(jīng)治療的正常組織，雖然輻射和BT會引起嚴重的瘢痕、纖維化以及血管和神經(jīng)損傷。在任何情況下，健康組織的去除、瘢痕、以及身體(物理)損傷可以導(dǎo)致顯著的損形和顯著的身體部位和/或其功能的生理用途(physicaluse)的喪失。例如，大多數(shù)以上列出的目前用于破壞或去除腫瘤塊的外科手術(shù)的輔助方法會引起對腫瘤周圍的正常組織的非特異性損傷。在腫瘤塊的切除可以導(dǎo)致必須從器官去除腫瘤處的功能完全減弱(debilitating)，其中上述器官包括舌、聲帶、直腸、唇、陰莖、或?qū)е旅娌拷M織的精細肌肉(fine muscle)和視覺結(jié)構(gòu)的完全減弱。為了避免上述損形并保持功能以及確保從腫瘤周圍的組織清除上述癌細胞，本發(fā)明提供了外科手術(shù)的輔助方法或新輔助方法，因為在腫瘤學(xué)領(lǐng)域仍然需要不損害(sparing)相鄰于腫瘤的明顯健康組織并減小腫瘤塊、腫瘤的生長，以及復(fù)發(fā)率的裝置和方
法，O

發(fā)明內(nèi)容
在第一種實施方式中，本發(fā)明包括一種降低組織中癌細胞生長的復(fù)發(fā)的概率的方法。在一種優(yōu)選實施方式中，該方法包括向所述組織的細胞提供電能的電穿孔脈沖和藥物。在一種相關(guān)的實施方式中，優(yōu)選在電穿孔脈沖前立即向組織提供藥物或同時向組織提供藥物?！ぴ诘诙N實施方式中，本發(fā)明包括一種在外科切除術(shù)后治療殘留在組織中的殘余癌細胞的方法。優(yōu)選地，本發(fā)明提供了通過使得微小的結(jié)節(jié)(nodule)或其他形式的癌性組織在電穿孔電場中經(jīng)受到藥物的處理來控制癌癥的進一步擴散。在一種相關(guān)的實施方式中，這樣的治療可以是外科手術(shù)的輔助方法，因為它可以在腫瘤去除之前或以后施用。在一些情況下，尤其是在癌細胞還未形成為纖維塊(fibixnis mass)的情況下，不可以采用任何手術(shù)程序。在這樣的情況下，EP治療提供了一種減小腫瘤塊并終止或延遲癌細胞在組織中的進一步生長的方法。在一種進一步相關(guān)的實施方式中，本發(fā)明的方法提供了較大腫瘤塊的減積術(shù)(或減積治療，debulking)，其中通過抗癌劑(如博來霉素)的作用，來‘軟化’腫瘤組織，以便更容易從周圍的健康或正常組織去除腫瘤塊。在第三種實施方式中，本發(fā)明的方法減少了在切除腫瘤時必須去除的腫瘤部位周圍的正常組織(即“邊緣”組織)的量，從而不損害正常組織并因此在更大程度上保留組織功能和外觀。在其他的實施方式中，本發(fā)明提供了一種器械，其能夠在需要時并以容易操作的方式為切除腫瘤周圍的組織提供所述電穿孔能量脈沖。在相關(guān)的實施方式中，本發(fā)明的裝置用于給予抗癌劑以及給予足以在邊緣區(qū)域引起組織電穿孔的電場。下文提供了本發(fā)明裝置的另外的實施方式。根據(jù)以下附圖、詳細描述、以及所附權(quán)利要求，本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點將是顯而易見的。


本專利或申請文件包括至少一幅彩色附圖。在提出要求并支付必要的費用以后，美國專利商標局將提供本專利或?qū)＠暾埑霭嫖锏木哂胁噬綀D的副本。圖I是示出了傷口強度的圖表，其是通過愈合中的皮膚樣本的斷裂點(breakingpoint)而測得，其中對該愈合中的皮膚樣本在體內(nèi)進行下述處理單獨用鹽水、鹽水加電穿孔、單獨用博來霉素、以及博來霉素加電穿孔。在這些實驗中還處理了下層脂肪(underlying fat)和肌肉組織。圖2A-F是三色染色組織的顯微照片，其示出了(A)未處理的切開后第二天的組織與下述組織之間的對比(B)切開后第二天的用鹽水加電穿孔處理的組織；(C)在第二周鹽水加電穿孔處理；(D)在第二周博來霉素加電穿孔處理；(E)在第三周鹽水加電穿孔處理；以及(F)在第三周博來霉素加電穿孔處理。圖3A-D是在三周后，皮膚切口處的膠原沉積的染色(三色)顯微照片。圖3A和圖3C分別是博來霉素和鹽水處理的皮膚組織的明場像，而圖3B和圖3C是分別示出博來霉素和鹽水處理的皮膚組織的偏振光圖像。圖4A-D是示出切開后第三周的肌肉組織樣本的顯微照片；(A)單獨用鹽水，(B)鹽水加電穿孔，(C)單獨用博來霉素，以及(D)博來霉素加電穿孔。圖5是本發(fā)明的裝置的一種實施方式的橫斷面圖，其示出了一種包括手柄的實施方式，該手柄包括用來升高和降低活塞陣列的指輪(或壓輪，thumb wheel)，其中活塞推動通過電極針(electrode needle)的物質(zhì)的裝載或分配。圖6示出了本發(fā)明的一種實施方式的分解圖。 圖7是本發(fā)明的裝置的一種實施方式的橫斷面圖，其中活塞是由螺桿來推動的，而螺桿是通過殼體50的順時針方向(升高活塞)和逆時針方向(降低活塞)旋轉(zhuǎn)加以驅(qū)動的。圖8A和B是本發(fā)明的一種實施方式的透視圖，其中殼體50的旋轉(zhuǎn)將往復(fù)地驅(qū)動活塞陣列。圖A示出具有托盤20的實施方式而圖B則示出沒有托盤20的實施方式的主體。圖9是透視圖，其示出了本發(fā)明的一種借助于翼形螺母來推動活塞陣列的實施方式。圖10示出了來自基體22下側(cè)的多個電極針的陣列的一個實例。圖11A、B、C、以及D是示出了具有腫瘤(A)、具有在完全切除腫瘤前外科暴露的腫瘤(B)、具有在腫瘤切除后但在假(sham)EP處理前的開放性傷口床(open wound bed) (C)、以及具有在治療3周后的外科/治療部位(D)的試驗動物的第2組同齡組動物的照片。對于此第2組，沒有進行電穿孔，并且即使已完全切除腫瘤，腫瘤仍然復(fù)發(fā)。圖12A、B、C、以及D是示出了具有腫瘤(A)、具有在完全切除腫瘤前外科暴露的腫瘤(B)、具有在腫瘤切除后但在用EP進行治療前的開放性傷口床(C)、以及在治療3周后的外科/治療部位(D)的試驗動物的第I組同齡組動物的照片。如用博來霉素-EP治療所觀察到的，在治療部位沒有腫瘤復(fù)發(fā)。圖13A、B、以及C是示出了具有腫瘤(A);部分腫瘤切除以后⑶；以及具有在治療3周后的外科/治療部位(C)的試驗動物的第7組同齡組動物的照片。即使僅部分地切除腫瘤，小鼠在第3周也未顯示任何腫瘤復(fù)發(fā)。圖14A、B、以及C是示出了具有腫瘤(A)、部分腫瘤切除后(B)、以及具有在治療3周后的外科/治療部位(C)的試驗動物的第4組同齡組動物的照片。在沒有進行EPT的情況下，腫瘤繼續(xù)生長。圖15示出了表V中所列數(shù)據(jù)的柱狀圖。PTE是指部分腫瘤切除，CTE是指完全腫瘤切除，Bi. V.是指靜脈內(nèi)給予試驗動物的博來霉素，EP是指電穿孔，i. t. B是指瘤內(nèi)給予的博來霉素，以及PEP是指局部電穿孔。
具體實施方式
如本領(lǐng)域技術(shù)人員會明了的，以下描述詳細描述了本發(fā)明的某些優(yōu)選實施方式，因此其僅是說明性的而并非描述本發(fā)明的實際范圍。在詳細描述本發(fā)明以前，應(yīng)當明了，本發(fā)明并不限于所描述的特定的裝置安排、系統(tǒng)，以及方法，因為這些可以變化。還應(yīng)當明了，本文所使用的術(shù)語僅是為了描述特定的實施方式，而不是用來限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求所限定。概沭電穿孔療法(EPT)，也稱作電化學(xué)療法(ECT)，是一種用來治療局部癌性病變和腫瘤塊的方法。該方法包括瘤內(nèi)或靜脈內(nèi)給予某些化療藥物，最常用博來霉素。在大多數(shù)情況下，電穿孔(EP)是通過插入針電極陣列并將從這些電極發(fā)射出來的脈沖電場直接遞送至腫瘤細胞塊來實施的。脈沖參數(shù)通常在以下范圍內(nèi)場強200-2000V/cm ;脈沖長度O. 1-10. Oms ;脈沖數(shù)2-20 ;以及脈沖頻率l_5Hz。施加上述電場會導(dǎo)致腫瘤細胞膜的透性化，這使抗癌藥物可以進入細胞，并且與在沒有電穿孔的條件下所觀測到的情況相比，由于藥物的攝取而引起高達5000倍的細胞毒性。研究表明，EPT可有效抵抗動物的許多類型的 實體腫瘤以及人類的若干類型的腫瘤。事實上，目前若干臨床研究正在進行中，包括評價EPT用于治療頭頸部鱗狀細胞癌的安全性和效力的III期研究。然而，這種治療研究并沒有被設(shè)計為或用來治療或試驗EPT對與癌細胞共同存在的非癌性邊緣組織的影響。在用于局部和區(qū)域腫瘤控制的許多方法中，EPT有點獨特，因為它對正常組織的損害遠小于對惡性組織的損害。動物和人的體外和體內(nèi)研究的結(jié)果表明，借助于凋亡和壞死機制，使用如博來霉素之類的藥物的EPT可有效地破壞大多數(shù)腫瘤，而對腫瘤周圍的正常組織僅引起較小的作用(炎癥、少量壞死)，特別是當博來霉素的濃度、劑量、以及脈沖參數(shù)在適當?shù)姆秶鷥?nèi)時。通常可經(jīng)受(amenable)治療的腫瘤周圍的邊緣組織包括但不限于以下器官，包括乳房、前列腺、舌、陰莖、唇(陰唇)、直腸、聲帶、肝、頭頸部鱗狀細胞癌(SCCHN)、皮膚的和其他腫瘤。無論腫瘤塊是否已經(jīng)被切除都可以對這樣的組織進行EPT。在這樣的癌癥中，通過以在很大程度上不受損地進行愈合并且可以消除微小轉(zhuǎn)移和會引起局部復(fù)發(fā)的延伸到組織中的腫瘤分支的方式來治療組織將顯著有利于患者。正如相對于本發(fā)明的方法也是可理解的，具有諸如博來霉素的藥劑的電穿孔治療可提供在靶向癌細胞中的可測量的選擇性的程度。這種方法學(xué)還與用具有抵抗特定疾病狀態(tài)的比活(specificactivities)的其他藥劑進行的治療有關(guān),如高度局部化的(localized)傳染病和其他疾病狀態(tài)(其中存在感染或病變組織的病灶)，其中藥劑可以靶向于被感染的或病變的細胞或細胞團(group of cell)以破壞受到侵襲的細胞。在這樣的情況下,上述細胞和周圍組織的電穿孔將使藥劑達到受感染或病變細胞中的期望的靶標，而且對未感染或正常細胞沒有有害影響(如經(jīng)驗上所觀察到的)。異常和正常細胞的不同應(yīng)答的分子和細胞機制目前是未知的。另外，本發(fā)明的方法和裝置適用于癌細胞的部位分布對于外科手術(shù)不容易修復(fù)的區(qū)域的疾病狀態(tài)。例如，可以以與治療邊緣組織床相同的方式，用本發(fā)明的裝置來治療包含微小或局灶性疾病部位的面部皮膚組織，這樣的方式導(dǎo)致引起的瘢痕顯著小于(少于)由外科手術(shù)引起的瘢痕。因此，本發(fā)明的方法可以用作外科手術(shù)的輔助方法或甚至是新輔助方法。具體地說，可以連通周圍正常組織一起對腫瘤塊的細胞進行電穿孔，從而提供一種使腫瘤塊減小體積(debulking)的方法，提供一種阻止、終止或以另外的方式降低病變細胞的生長和/或復(fù)發(fā)率的機制。在這樣的情況下，可以在EPT之前或之后去除腫瘤組織，或甚至可以在EPT之后允許不切除腫瘤組織，在這樣的情況下，藥劑(如博來霉素)的效應(yīng)將通過凋亡和/或壞死機制使得細胞死亡并軟化腫瘤細胞塊(tumor cell mass),接著進一步壞死。附近的正常組織將在很大程度上保持不受侵襲。通常，用EPT治療腫瘤包括I單位/ccm待治療組織的博來霉素劑量，以4單位/ml的濃度瘤內(nèi)注射 。產(chǎn)生脈沖場以使得通常以6個分離的4Hz脈沖施加該場，每一個在6個不同的場方向，每一個具有IOOusec持續(xù)時間，以200和2000V/cm之間任一點，但通常在600和1500V/cm之間，更經(jīng)常在600和1400V/cm之間，以及甚至更經(jīng)常在1200_1300V/cm之間的額定場強穿過腫瘤塊。增加博來霉素劑量或濃度以及增加電穿孔脈沖的強度超過標準參數(shù)可以導(dǎo)致對正常組織的更嚴重的影響。在非常高的場強和/或脈沖長度下，EP本身(即，例如，沒有博來霉素)可以誘導(dǎo)不可逆的細胞膜變質(zhì)，導(dǎo)致落入有效電場內(nèi)的腫瘤以及正常細胞組織的破壞。在進一步相關(guān)的實施方式中，當注射DNA作為治療藥劑時(如在美國專利6，528,315中所陳述的，其以引用方式結(jié)合于本文)，可以利用l-600V/cm之間的脈沖場強來操作用于實施本發(fā)明的方法的裝置本身。在這樣的實施方式中，DNA理想地編碼對于待治療的包含腫瘤的組織具有治療性抗癌效應(yīng)的多肽。對于其他藥劑，包括基因、蛋白質(zhì)、細胞因子、趨化因子、類固醇、抗體、RNAi、以及反義核酸，可以使用同樣高的脈沖參數(shù)(即，例如，800-1500V/cm或，可替換地，l-600V/cm,更優(yōu)選200至600V/cm,以及進一步更優(yōu)選400_600V/cm)。進一步預(yù)料到,可以使用這些和任何其他藥劑，其中這樣的藥劑可促進傷口愈合而并不促進惡性細胞的生長。就在EPT中使用上述藥劑而言，可以使用低至50V/cm的低端場強以在含有微小病變和病變細胞的組織內(nèi)對細胞進行電穿孔，其中所述組織還未形成異常的組織塊。如前所述，在一種實施方式中，本發(fā)明的癌癥療法的理論基礎(chǔ)涉及外科切除腫瘤塊(‘減積術(shù)’)以降低患者的生物壓力，外科消除邊緣組織以根除微轉(zhuǎn)移和侵入的腫瘤組織，并用放療和/或化療來控制腫瘤的局部、區(qū)域和全身擴散。雖然外科切除腫瘤本身通常可解除患者的病痛，沒有嚴重的后遺癥，但隨后的邊緣切除、放療和化療步驟對于患者可能是非常有害的。這些治療會嚴重影響生理和機械功能、外觀、生活質(zhì)量以及最終結(jié)果。因此，理想的是，將腫瘤的外科切除與一種治療方法結(jié)合，該治療方法(a)比目前的方法更有效地防止由于微轉(zhuǎn)移和侵襲性腫瘤組織導(dǎo)致的腫瘤復(fù)發(fā)，以及(b)使周圍邊緣組織的損失降至最小。在本發(fā)明中，提供了 EPT作為外科輔助方法或新輔助方法的新用途，以減小腫瘤塊、防止腫瘤復(fù)發(fā)、并使需要切除的邊緣組織降至最少或二者?，F(xiàn)在開始描述本發(fā)明的方法，本發(fā)明目的是提供了一種用來在切除的癌細胞部位周圍的正常組織中降低腫瘤復(fù)發(fā)的概率的新方法。換言之，本發(fā)明的方法包括治療癌細胞部位周圍的組織“邊緣”，這樣的癌細胞通常形成在不同(distinct)組織部位。在一種優(yōu)選實施方式中，本發(fā)明的方法可以減少必須連同腫瘤以及其癌細胞一起被切除的組織的量并使放療或化療變得多余。該方法包括將電能的電穿孔脈沖施加于腫瘤部位周圍的組織。除了施加電穿孔脈沖外，該方法進一步包括提供(優(yōu)先在電脈沖以前或同時)一種包含抗癌藥物的制劑(formulation)。在一種優(yōu)選實施方式中，上述藥物包括生物活性分子。例如,該藥物可以包括編碼可表達的多肽的核酸，如，在表達性載體中并且包括用于細胞因子或趨化因子、抗體、或酶的基因序列的核酸。另一個實例包括反義DNA或RNA、或干擾RNA(RNAi)?？商鎿Q地，該藥物可以包括多肽或有機分子，如細胞因子、趨化因子、抗體、順鉬或博來霉素、或任何具有抗癌活性的其他分子。此外，上述披露的任何化合物可以以制劑的形式給藥，其中所述制劑可以包括本領(lǐng)域公知的藥用鹽、緩沖劑以及其他賦形劑的任何組合(如在本領(lǐng)域公知的)。例如，對于核酸的制劑可以包括例如所述核酸和聚谷氨酸(聚-L-谷氨酸)，如在美國專利7，173，116中所描述的，其全部內(nèi)容以引用方式結(jié)合于本文。在一種進一步的實施方式中，本發(fā)明的方法包括利用能夠?qū)㈦姶┛酌}沖施加于腫瘤部位的局部區(qū)域的裝置來施加上述電穿孔脈沖。在一種優(yōu)選實施方式中，這樣的裝置可以包括細長針狀電極的陣列。取決于所需要的電脈沖的強度以及取決于抗癌劑的遞送方式，可替換的實施方式可以使用短的非穿透性電極或半穿透性微針電極。在這樣的實施方式中，該裝置將被設(shè)計為不需要活塞和遞送針。代之以，可以利用僅包括電極陣列的電穿孔裝置來實施該治療方法，這種陣列包括非穿透性或半穿透性電極。在這樣的情況下，將通過獨立的裝置(如注射器)來遞送藥物。在一種進一步優(yōu)選的實施方式中，關(guān)于本發(fā)明裝置的任何物理構(gòu)造，在治療過程的實施中，電極可相對于待治療的組織加以定位以產(chǎn)生具有足以在特定區(qū)域和深度內(nèi)電穿孔所述組織中的細胞的場強和能量的電場。通常，該裝置將被定位以將電穿孔脈沖傳遞至腫瘤切除部位周圍(三維)的預(yù)選擇邊緣組織內(nèi)的所有組織。取決于切除腫瘤的大小和電極陣列的大小，可以通過完整地施加一次電穿孔脈沖來電穿孔·周圍的邊緣組織，或通過定位和重新定位電極陣列以將腫瘤部位邊緣組織完全包圍在電穿孔能量場中而需要多次施加電穿孔脈沖。在一些實施方式中，電極可以作為將要通過電穿孔進入細胞的藥劑的遞送針，而在其他實施方式中，對組織給予藥劑可以獨立于電極在組織中的給予/定位。另外，為了確保本發(fā)明的方法能夠?qū)⒔】档姆前┬越M織暴露于電穿孔脈沖而并未顯著損害所述健康組織，對在暴露于電穿孔脈沖后的開放性創(chuàng)傷周圍的健康組織的恢復(fù)特性進行了研究。如下文所披露的，用電穿孔脈沖、或電穿孔脈沖和抗癌劑對健康組織的治療對于治療區(qū)域的細胞并沒有可測量的顯著影響，并且愈合的開放性創(chuàng)傷類似于未經(jīng)治療的和/或正常的組織。因為可以使健康組織暴露于電穿孔脈沖而沒有顯著的損害，所以在腫瘤周圍的組織的治療中使用電穿孔使得外科醫(yī)生達到切除健康組織的更窄的邊緣的目的成為可能。一般治療過稈本發(fā)明的方法的一種實施方式是治療外科傷口邊緣，或更一般地是腫瘤的邊緣，并且在該方法中(a)與具有或沒有后續(xù)治療的常規(guī)外科腫瘤和邊緣切除術(shù)相比，實現(xiàn)優(yōu)異的復(fù)發(fā)率(即，較小頻率的復(fù)發(fā))；(b)降低或消除對外科切除邊緣組織的需要，同時保持與傳統(tǒng)外科邊緣切除相同或更好的復(fù)發(fā)率，因而保護功能組織；以及(C)減少或消除外科腫瘤切除術(shù)(有或沒有邊緣切除)以后對放療或化療的需要，同時保持與傳統(tǒng)的外科邊緣切除和后續(xù)治療(如放療以及化療)相同的或優(yōu)異的復(fù)發(fā)率。以下實施例是用來舉例說明而不是限制本發(fā)明。雖然它們是可以使用的那些實施例的代表，但可以可替換地使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他過程。實施例I用電穿孔脈沖和/或抗癌劑治療開放件創(chuàng)傷周圍的明顯健康組織為了在包括大部分正常組織的開放性創(chuàng)傷區(qū)域成功地使用電穿孔，我們進行了一系列的實驗以表明可以實施正常組織的電穿孔(有或沒有抗癌劑)而不會對皮膚、皮下以及肌肉組織中的愈合過程產(chǎn)生顯著影響。在此實驗中，在分為1-6組的8只豬試驗動物的每只的背肌中形成18個經(jīng)皮切口。在第1-5研究組中，形成縱向切口，而在第6組中切口方向橫向于肌纖維的縱向。在每個切口部位,不進行任何注射,注射生理鹽水、或注射溶液中的博來霉素，以使得注射物位于Icm的深度并且三次注射彼此間隔1cm，在每個切口的每一側(cè)有一個注射物(彼此在3cm內(nèi))并且一個注射物在切口中心。使用了博來霉素(一種抗癌劑)，其中每次注射包括
O.125ml (4單位/ml鹽水)。然后利用直徑為O. 5cm的6針電極陣列(每個脈沖的額定場強是1，233V/cm)借助于來自脈沖發(fā)生器的雙極脈沖(530V，每個脈沖100 μ sec)對切口進行處理。具體地說，在外科手術(shù)前，使得8只雄性Yorkshire/Hampshire雜交豬(40_50kg)適應(yīng)環(huán)境5-7天。利用無菌手術(shù)標記物(surgical marker)在背上標記切口位置。每個切口是5cm長并在肌肉中的深度為5_。在第1-5組中的所有動物均接受18個縱向切口，而在第6組中的動物接受橫向切口，與表I 一致。每個研究組包括24個切口。表I
權(quán)利要求
1.一種用于治療哺乳動物組織的系統(tǒng)，所述哺乳動物組織包括位于相鄰和/或靠近腫瘤部位的細胞，所述系統(tǒng)包括 (a)電穿孔裝置；以及 (b)治療性物質(zhì)， 其特征在于，所述裝置包括至少一個使用短的非穿透性電極或半穿透性微針電極的多電極的陣列，以在陣列的所選電極之間提供一系列電脈沖的遞送，當所述電極定位在使用所述電穿孔裝置的所述組織中時，所述電極能夠?qū)⒘黧w體積從至少一個可變?nèi)莘e的容器中引至所述組織，其中，可以以預(yù)定方式進一步為所述電極供能，所述預(yù)定方式選自由為單電極對供能、為相反電極對供能、順序地為所述電極的選定部分供能、以及同時為所述電極的選定部分供能組成的組。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的系統(tǒng)，其中，所述治療性物質(zhì)選自由博來霉素、順鉬、多肽、抗體、RNAi、反義核酸、編碼治療活性多肽的可表達基因、趨化因子、以及細胞因子組成的組。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的系統(tǒng)，其中，將所述治療性物質(zhì)通過靜脈內(nèi)或瘤內(nèi)遞送到所述哺乳動物組織中。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的系統(tǒng)，其中，所述RNAi、反義核酸、以及可表達基因是在聚-L-谷氨酸溶液中配制的。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的系統(tǒng)，其中，所述腫瘤細胞選自由皮膚組織中的癌細胞、位于哺乳動物的頭部或頸部的癌細胞、以及黑色素瘤細胞組成的組。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的系統(tǒng)，其中，所述電穿孔裝置將電穿孔的電脈沖施加于所述組織，所述電穿孔的電脈沖包括具有額定場強的脈沖，其中所述額定場強選自由1500V/cm、1200V/cm、在800和1500V/cm之間、在200和800V/cm之間組成的組。
7.一種用于治療哺乳動物中切除腫瘤部位周圍的組織床的裝置，包括 (a)主體基體，包括多個孔的陣列； (b)使用短的非穿透性電極或半穿透性微針電極的多個電極的陣列，所述多個電極的陣列以幾何陣列定位，以在陣列的所選電極之間提供一系列電脈沖的遞送； (C)多個隔室的陣列，所述隔室能夠容納流體介質(zhì)并與所述腔流體連通； (d)多個活塞的陣列，其中每一個適合于所述隔室并能夠可滑動地可調(diào)節(jié)定位于所述隔室中； (e)致動器，用于可滑動地調(diào)節(jié)所述活塞的位置；以及 (f)電能源，可連接于所述電極，用于將電穿孔的電脈沖賦予所述電極。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置，其中，所述致動器是指輪。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置，其中，所述致動器是翼形螺母。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置，其中，所述致動器是電動機。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的裝置，其中，所述致動器是螺桿傳動的。
全文摘要
本發(fā)明涉及對癌性腫瘤部位周圍的明顯正常組織進行治療以降低癌性組織部位上及附近的癌癥復(fù)發(fā)的概率，以及減少通常連同腫瘤一起被切除的明顯健康組織的量，從而通過消除或延遲腫瘤復(fù)發(fā)以及不損害正常組織來獲得其功能并避免不必要的損形，從而為癌癥患者提供顯著的益處。
文檔編號A61N1/32GK102921102SQ20121039769
公開日2013年2月13日 申請日期2007年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月3日
發(fā)明者保羅·戈德法布, 戴爾特墨·拉布塞 申請人:基因特倫尼克斯公司