專利名稱：枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于枸杞葉總黃酮提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種以枸杞葉為原料提取的枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法。二、技術(shù)背景枸杞)是爺科枸杞屬的多年生植物,分布于我國西北地區(qū)。枸杞葉俗稱天精草，在傳統(tǒng)中(藏)藥中主要具有補(bǔ)腎生精、養(yǎng)肝、明目安神等作用，《本草綱目》中稱枸杞葉“有除煩益志補(bǔ)五勞七傷，壯心氣，除熱毒，散瘡腫，除風(fēng)明目”之功效。據(jù)研究，枸杞葉的活性成分與枸杞果實(shí)基本一致，而且在某些營養(yǎng)元素上甚至超過枸杞果實(shí)。枸杞葉總黃酮提取物的藥理性質(zhì)的報(bào)道較少?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的枸杞葉總黃酮提取物的藥理活性僅僅停留在抗氧化活性的水平上。鄒耀洪等分離出了枸杞葉中的5種黃酮類化合 物，分別為5，7，3’-三羥基-6，4’，5’-三甲氧基黃酮、金合歡素(4’-甲氧基-5，7-二羥基黃酮)、金合歡素-7-0-a-L-鼠李糖基(I— 6)-β-D-葡萄糖苷、木犀草素(5，7，3’，4’ -四羥基黃酮)和蘆丁，這5種黃酮類化合物中木犀草素抗氧化的活性較強(qiáng)，優(yōu)于合成類抗氧化劑3，5-二叔丁基-4-羥基甲基苯(分析測試學(xué)報(bào)，2002，21 (I) : 76-78)。目前枸杞葉僅用于枸杞茶使用，尚未發(fā)現(xiàn)采用枸杞葉為原料提取枸杞葉總黃酮技術(shù)的有關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種以枸杞葉為原料提取枸杞葉總黃酮提取物和制備方法，把枸杞葉中的最有經(jīng)濟(jì)和藥用價(jià)值的枸杞葉總黃酮提取物提取出來，使過去被人們忽視的甚至遺棄的枸杞葉變廢為寶，大大地發(fā)揮枸杞葉的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。技術(shù)方案為本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來的，其制備方法是以枸杞葉作原料，采用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物作提取溶劑進(jìn)行提取。提取制備過程包括用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶劑，以枸杞葉或其粉末提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉或其粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏進(jìn)行分離純化得枸杞葉總黃酮提取物。分離純化方法有三種，它們分別為①采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物；②采用吸附樹脂對浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物；③用無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。上述分離純化的方法可單獨(dú)應(yīng)用得枸杞葉總黃酮提取物，也可任意組合應(yīng)用得枸杞葉總黃酮提取物。上述方法所得的枸杞葉總黃酮提取物中黃酮類化合物的質(zhì)量之和可為提取物總質(zhì)量的1-100%，其它物質(zhì)為非黃酮類化合物，這些總黃酮化合物，可以通過進(jìn)一步純化技術(shù)進(jìn)行分離得到，這些純化方法對本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是不言自明的。本發(fā)明的原料枸杞葉或其粉末是干凈的干燥枸杞葉，或是干凈的干燥枸杞葉經(jīng)粉碎后的粉末，統(tǒng)稱為枸杞葉或其粉末。因枸杞葉總黃酮提取物它易溶于水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物的有機(jī)溶劑中，故采用上述這些溶劑作提取溶劑進(jìn)行提取。無機(jī)酸如鹽酸、硝酸、硫酸、碳酸、硅酸……，以及它們二至多種的混合物均可。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)枸杞葉中含有總黃酮類化合物，它采用科學(xué)合理的提取方法獲得了具有十分顯著經(jīng)濟(jì)效益的具有降血糖、降血脂和降血壓活性的枸杞葉總黃酮提取物，一方面可以給有以上病癥的病人新的治療選擇，一方面對深入開發(fā)枸杞葉資源具有重要意義；2、本發(fā)明提供的制備方法具有工序少，操作簡便，生產(chǎn)周期短而且可以除去原料中的殘留重金屬；3、本發(fā)明提供的枸杞葉總黃酮提取物具有治療 和/或預(yù)防糖尿病、高血脂和高血壓的功能，資源得到高效充分利用，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益十分顯著。四、具體實(shí)施方案
實(shí)施例I:本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用水作提取溶劑，以枸杞葉提取溶劑水為1:5的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉和提取溶劑水進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬至枸杞葉中的枸杞葉總黃酮提取物全部提取后，過濾去渣、濃縮提取液得浸膏，然后對浸膏
采用丙酮作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，對萃取液回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過真空干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例2 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水35%的甲醇作提取溶劑，以枸杞葉提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉中的枸杞葉總黃酮提取物全部提取后、過濾去渣，把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后對浸膏采用乙酸乙酯作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，對萃取液回收溶劑后，經(jīng)過噴霧干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例3 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水率為75%的乙酸乙酯作提取溶劑，以枸杞葉粉末提取溶劑為I: 30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉粉末中的枸杞葉總黃酮提取物全部提取后、過濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后對浸膏采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇各為三分之一的混合物作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，對萃取液回收溶劑后，經(jīng)過冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物產(chǎn)品。實(shí)施例4 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是以枸杞葉粉末作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8 2的體積比配比混合作提取溶劑，以枸杞葉粉末提取溶劑為1:20的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉粉末和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉粉末中的枸杞葉總黃酮提取物提取干凈后、過濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏采用吸附樹脂進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用I倍柱體積的水、5倍柱體積的乙醇體積濃度為1%的乙醇水溶液洗滌，再用3倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為99%的乙醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。實(shí)施例5 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來的，其制備方法是以枸杞葉和枸杞葉粉末的混合物為原料，用不含水的甲醇、丙酮以4:6體積比配比的混合物作提取溶劑，以枸杞葉和枸杞葉粉末提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉和枸杞葉粉末和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉粉末中的枸杞葉總黃酮提取物提取干凈后、過濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)溶劑得浸膏，然后對浸膏采用吸附樹脂進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用5倍柱體積的水、O. 5倍柱體積的乙醇體積濃度為99%的乙醇水溶液洗滌，再用10倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為1%的乙醇水溶液洗脫,濃縮,并將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
實(shí)施例6 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制得的，其制備方法是用含水35%的甲醇作提取溶劑，以枸杞葉提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉中的枸杞葉總黃酮提取物全部提取后、過濾去渣，把提取液進(jìn)行濃縮回收溶劑得浸膏，然后用鹽酸的無機(jī)酸將浸膏的pH值調(diào)至O. 1，在0°C下靜置，再分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。實(shí)施例7 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是以枸杞葉粉末作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8 2的體積比配比混合作提取溶劑，以枸杞葉粉末提取溶劑為1:20的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉粉末和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉粉末中的枸杞葉總黃酮提取物提取干凈后、過濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏用硝酸和硫酸以I :1體積比配比的混合無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至3，在42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。實(shí)施例8 :本發(fā)明的枸杞葉總黃酮提取物是采用如下制備方法制備而來的，其制備方法是以枸杞葉和枸杞葉粉末的混合物為原料，用不含水的甲醇、丙酮以4:6體積比配比的混合物作提取溶劑，以枸杞葉和枸杞葉粉末提取溶劑為1:10的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉和枸杞葉粉末和提取溶劑混合，再經(jīng)浸泡、回流提取至枸杞葉粉末中的枸杞葉總黃酮提取物提取干凈后、過濾去渣、把提取液進(jìn)行濃縮回收有機(jī)溶劑得浸膏，然后用碳酸的無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至I. 3，在25°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
權(quán)利要求
1.一種枸杞葉總黃酮提取物的制備方法，其特征是以枸杞葉作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶劑，以枸杞葉或其粉末提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉或其粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏進(jìn)行分離純化得枸杞葉總黃酮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的枸杞葉總黃酮提取物的制備方法，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的枸杞葉總黃酮提取物的制備方法，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用吸附樹脂對浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的枸杞葉總黃酮提取物的制備方法，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是用無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
5.一種枸杞葉總黃酮提取物，其特征是它由如下制備方法制備而來，其制備方法是以枸杞葉作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶劑，以枸杞葉或其粉末提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉或其粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏進(jìn)行分離純化得枸杞葉總黃酮提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的枸杞葉總黃酮提取物，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作溶劑對浸膏進(jìn)行萃取，回收有機(jī)溶劑后，經(jīng)過真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥再去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的枸杞葉總黃酮提取物，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是采用吸附樹脂對浸膏進(jìn)行柱層析，上柱過程中任意選擇黃酮類顯色劑檢測流出液以確定樹脂是否吸附飽和，前后兩次各用1-5倍柱體積的水、O. 5-5倍柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗滌，再用3-10倍樹脂柱體積的乙醇體積濃度為1-99%的乙醇水溶液洗脫，濃縮，并將濃縮液進(jìn)行真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的枸杞葉總黃酮提取物的，其特征是對浸膏進(jìn)行分離純化的方法是用無機(jī)酸將浸膏的PH值調(diào)至O. 1-3，在O—42°C下靜置，分離沉淀物并干燥沉淀物去除殘余的水和溶劑得枸杞葉總黃酮提取物。
全文摘要
本發(fā)明屬于枸杞葉總黃酮提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提取枸杞葉總黃酮提取物及其制備方法。枸杞葉總黃酮提取物是用如下方法制得，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液體有機(jī)化合物之一種或幾種的混合物作提取溶劑，以枸杞葉或其粉末提取溶劑為1:5-30的重量比進(jìn)行配比，把配比后的枸杞葉或其粉末和提取溶劑進(jìn)行混合，再經(jīng)浸泡、煎熬或回流提取、過濾去渣、濃縮回收有機(jī)試劑得浸膏，然后對浸膏進(jìn)行分離純化得枸杞葉總黃酮提取物。優(yōu)點(diǎn)是首次發(fā)現(xiàn)枸杞葉中含有總黃酮類化合物，它采用科學(xué)合理的提取方法獲得了具有十分顯著經(jīng)濟(jì)效益的枸杞葉總黃酮提取物。
文檔編號A61P3/10GK102836280SQ20121034195
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月17日
發(fā)明者梅麗娟, 江磊, 于瑞濤, 陶艷鐸, 陶德喜 申請人:青海紅鼎生物工程有限公司