硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途
【專利摘要】本發(fā)明屬藥物制藥領(lǐng)域，涉及硫化氫及其供體硫氫化鈉在制藥中新的藥用用途，尤其涉及硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途。本發(fā)明采用外源性硫化氫及其供體硫氫化鈉NaHS用于胰島素增敏和對II型糖尿病降血糖及增高胰島素水平的試驗(yàn)，經(jīng)骨骼肌和脂肪細(xì)胞與胰島素抵抗的相關(guān)性試驗(yàn)，糖尿病胰島素抵抗的動物模型進(jìn)行胰島素耐量實(shí)驗(yàn)，葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn)，糖尿病胰島素抵抗的動物模型試驗(yàn)以及給予NaHS干預(yù)動物實(shí)驗(yàn)等，結(jié)果顯示：NaHS可以在胰島素存在的情況下起到促進(jìn)葡萄糖攝取的作用，顯示了增強(qiáng)胰島素的作用。本發(fā)明的硫化氫及其供體硫氫化鈉可作為胰島素增敏劑和對Ⅱ型糖尿病降血糖及增高胰島素水平的藥物。
【專利說明】硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬藥物制藥領(lǐng)域，涉及硫化氫及其供體硫氫化鈉在制藥中新的藥用用途，尤其涉及硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途。本發(fā)明的硫化氫及其供體硫氫化鈉可作為胰島素增敏劑和對II型糖尿病降血糖及增高胰島素水平的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)有技術(shù)公開了硫化氫(H2S)是人體內(nèi)半胱氨酸的代謝產(chǎn)物，其在人體內(nèi)的含量很低約為20~50 μ mol/L,且不易人為控制，文獻(xiàn)還報(bào)道H2S是一種參與調(diào)控心血管活動的新型內(nèi)源性氣體分子，具有促進(jìn)心血管疾病血管新生的用途。
[0003]統(tǒng)計(jì)報(bào)道，目前，糖尿病在我國人群發(fā)病率為1_2%，老年人中可高達(dá)12%。根據(jù)國際糖尿病專家委員會修改的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，空腹血糖診斷標(biāo)準(zhǔn)為> 126mg/ml,糖尿病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，2型糖尿病(大多數(shù)為老年糖尿病)的病人顯著增加，對人類健康的危害也將更大。
[0004]目前，臨床對2型糖尿病的治療，一般采用飲食結(jié)合降糖藥物治療作為基本方法。口服降血糖藥物主要用西藥治療，但是，實(shí)踐顯示，西藥對糖尿病病人的心血管及肝、腎等均有不良副作用，并且對于多種并發(fā)癥者不宜使用。多年來，國內(nèi)外內(nèi)分泌、糖尿病專家、學(xué)者從諸多方面探討治療糖尿病的各種方法和藥物。人們期盼有更安全、有效、且無副作用的新的治療藥物早日問世。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的的目的是提供硫化氫(H2S)及其供體硫氫化鈉(NaHS)在制藥中的新用途。尤其涉及硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途。本發(fā)明的硫化氫及其供體硫氫化鈉可作為胰島素增敏劑和對II型糖尿病降血糖及增高胰島素水平的藥物。
[0006]本發(fā)明采用外源性硫化氫及其供體硫氫化鈉NaHS用于胰島素增敏和對II型糖尿病降血糖及增高胰島素水平的試驗(yàn)，包括:骨骼肌和脂肪細(xì)胞與胰島素抵抗的相關(guān)性試驗(yàn)，糖尿病胰島素抵抗的動物模型進(jìn)行胰島素耐量實(shí)驗(yàn)，葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn)，糖尿病胰島素抵抗的動物模型試驗(yàn)以及給予NaHS干預(yù)動物實(shí)驗(yàn)等，結(jié)果顯示=NaHS可以在胰島素存在的情況下起到促進(jìn)葡萄糖攝取的作用，提示NaHS可以增強(qiáng)胰島素的作用，硫化氫及其供體硫氫化鈉可作為胰島素增敏劑；
[0007]通過骨骼肌和脂肪細(xì)胞與胰島素抵抗的相關(guān)性試驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)，NaHS在對培養(yǎng)細(xì)胞基本無毒的安全濃度范圍內(nèi)顯著增加胰島素刺激下的骨骼肌和脂肪細(xì)胞葡萄糖的代謝；
[0008]通過糖尿病胰島素抵抗的動物模型進(jìn)行胰島素耐量實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示小劑量的H2S可以增加GK大鼠的胰島素敏感性；
[0009]通過葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),NaHS在對培養(yǎng)細(xì)胞基本無毒的安全濃度范圍內(nèi)顯著增加胰島素刺激下的骨骼肌和脂肪細(xì)胞葡萄糖的代謝；硫化氫對于脂肪細(xì)胞正常和模型細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)的葡萄糖攝取都有促進(jìn)作用，但對于骨骼肌細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)的葡萄糖攝取沒有影響；
[0010]通過糖尿病胰島素抵抗的動物模型試驗(yàn)，結(jié)果顯示，硫化氫及其供體硫氫化鈉對II型糖尿病具有降血糖及胰島素增敏作用，可以增高胰島素水平；
[0011]通過慢性給予NaHS動物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，慢性給予NaHS可減少GK大鼠腎臟中ROS的表達(dá)以及可減少GK大鼠腎臟中發(fā)生新月體病變的腎小球數(shù)量，表明硫化氫及其供體硫氫化鈉對糖尿病引起的腎臟損傷具有保護(hù)作用，即具有防治糖尿病腎臟病發(fā)征的作用，還可以減少腎臟的氧化應(yīng)激。
[0012]實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，本發(fā)明所述的硫化氫及其供體硫氫化鈉NaHS可作為胰島素增敏劑，和通過降血糖及胰島素增敏作用，可以增高胰島素水平，作為治療II型糖尿病藥物，所述的硫化氫及其供體硫氫化鈉對糖尿病引起的腎臟損傷具有保護(hù)作用，可防治糖尿病腎臟病發(fā)征的作用，還可以減少腎臟的氧化應(yīng)激。
[0013]本發(fā)明的H2S及其供體NaHS的優(yōu)點(diǎn)有:
[0014]1、硫化氫及其供體硫氫化鈉可作為胰島素增敏劑；
[0015]2、硫化氫及其供體硫氫化鈉對II型糖尿病具有降血糖及胰島素增敏作用，可以增高胰島素水平；
[0016]3、硫化氫及其供體硫氫化鈉對糖尿病引起的腎臟損傷具有保護(hù)作用，即具有防治糖尿病腎臟病發(fā)征的作用，還可以減少腎臟的氧化應(yīng)激。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0017]圖1.不同濃度的NaHS (0_200 μ mol/L)孵育骨骼肌細(xì)胞24小時(shí)后，對胰島素刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0018]圖2.不同濃度的NaHS (0_200 μ mol/L)孵育脂肪細(xì)胞24小時(shí)后，對胰島素刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0019]圖3.不同濃度的NaHS(0_200 μ mol/L)孵育胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞24小時(shí)后，對胰島素刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0020]圖4.不同濃度的NaHS (0_200 μ mol/L)孵育胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞24小時(shí)后，對胰島素刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0021]圖5.對照組和NaHS (50 μ mol/L)低糖(5.5mmol/L)孵育胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞24小時(shí)后,對不同濃度胰島素(0-100nmol/L)刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0022]圖6.對照組和NaHS (50 μ mol/L)低糖(5.5mmol/L)孵育胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞24小時(shí)后,對不同濃度胰島素(0-100nmol/L)刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0023]圖7.對照組和NaHS (50 μ mol/L)高糖(25mmol/L)孵育胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞24小時(shí)后,對不同濃度胰島素(0-100nmol/L)刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0024]圖8.對照組和NaHS (50 μ mol/L)高糖(25mmol/L)孵育胰島素抵抗的脂肪細(xì)胞24小時(shí)后,對不同濃度胰島素(0-100nmol/L)刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響。
[0025]圖9.腹腔注射胰島素后(0.75U/kg)，G`K大鼠血糖的時(shí)間變化曲線。
[0026]圖10.腹腔注射胰島素后(0.75U/kg)，Wistar大鼠血糖的時(shí)間變化曲線。
[0027]圖11.腹腔注射胰島素后(0.40U/kg), Wistar大鼠血糖的時(shí)間變化曲線。[0028]圖12.NaHS給藥10周期間GK大鼠和Wistar大鼠慢性空腹血糖變化。
[0029]圖13.GK大鼠慢性給藥8周后糖耐量實(shí)驗(yàn)
[0030]圖14.Wistar大鼠慢性給藥8周后糖耐量實(shí)驗(yàn)
[0031]圖15.GK大鼠慢性給藥8周后胰島素水平變化
[0032]圖16.慢性給藥10周后，GK大鼠的腎臟內(nèi)ROS表達(dá)和發(fā)生新月體病變的腎小球數(shù)量。
【具體實(shí)施方式】
[0033]實(shí)施例1硫化氫及其供體硫氫化鈉作為胰島素增敏劑試驗(yàn)
[0034]不同濃度的NaHS (1_200 μ mol/L)孵育24小時(shí)后，對于正常的骨骼肌細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)下的葡萄糖攝取沒有影響，檢測了在胰島素存在的情況下NaHS對于骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取有沒有作用，檢測不同濃度的NaHS (0-200 μ mol/L)孵育葡萄糖(5.5 μ mol/L)和胰島素(lOOnmol/L)抵抗的骨骼肌細(xì)胞24小時(shí)后，對胰島素刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響，結(jié)果顯示(如圖1所示)，NaHS在25、50和100 μ mol/L的濃度均顯著增加3H-脫氧葡萄糖攝取，NaHS促進(jìn)葡萄糖攝取的最佳濃度為100 μ mol/L,與對照組相比增加超過I倍，為
2.06±0.29(P < 0.01)，25和50 μ mol/L的NaHS分別增加葡萄糖攝取率到1.54±0.08和
1.72±0.32 ;結(jié)果表明NaHS可以在胰島素存在的情況下起到促進(jìn)葡萄糖攝取的作用，提示NaHS可以增強(qiáng)胰島素的作用，即胰島素增敏作用；
[0035]不同濃度的NaHSjW(OjOOymoVL)孵育24小時(shí)后，對于正常的脂肪細(xì)胞胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取沒有影響，提示NaHS對于脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取起作用可能不通過胰島素；不同濃度的NaHS，從(0-200 μ mo I /L )孵育24小時(shí)后，進(jìn)行葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示(如圖2所示)，硫化氫對于正常的脂肪細(xì)胞胰島素存在狀態(tài)下的葡萄糖攝取有明顯促進(jìn)作用，NaHS在25、50和100 μ mol/L的濃度均顯著增加3H-脫氧葡萄糖攝取，與骨骼肌細(xì)胞不同，NaHS促進(jìn)脂肪細(xì)胞葡萄糖攝取的最佳濃度為50 μ mol/L,為對照組的1.54倍；
[0036]結(jié)果表明，脂肪組織在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)中的起的作用遠(yuǎn)小于骨骼肌組織，骨骼肌組織參與全身葡萄糖攝取的75%，NaHS有效濃度所引起的脂肪細(xì)胞3H-脫氧葡萄糖攝取的增加的幅度遠(yuǎn)小于骨骼肌細(xì)胞。
[0037]胰島素敏感性在II型糖尿病中嚴(yán)重受損，我們在正常的骨骼肌成肌細(xì)胞上觀察到硫化氫能增加胰島素存在時(shí)的葡萄糖攝取，但對基礎(chǔ)狀態(tài)的葡萄糖攝取沒有影響。這種結(jié)果提示我們硫化氫可能有一定的胰島素增敏作用。
[0038]依據(jù)糖尿病時(shí)胰島素抵抗患者體內(nèi)普遍存在高胰島素或/和高血糖的病理特點(diǎn)，本實(shí)施例中根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在正常培養(yǎng)骨骼肌細(xì)胞的基礎(chǔ)上，用高濃度胰島素高糖的環(huán)境誘導(dǎo)培養(yǎng)骨骼肌細(xì)胞，建立胰島素抵抗的細(xì)胞模型(IR模型)，并通過3H-脫氧葡萄糖攝取試驗(yàn)進(jìn)行鑒定，檢測基礎(chǔ)狀態(tài)和胰島素刺激狀態(tài)下硫化氫對胰島素抵抗的細(xì)胞的葡萄糖攝取的作用。
[0039]其中包括，
[0040]建立胰島素抵抗的細(xì)胞模型，以模型組(IR)的葡萄糖攝取量作為攝取基值，各組分別與之相比作為各自葡萄糖攝取率，結(jié)果顯示，NaHS孵育24小時(shí)后對于IR模型骨骼肌細(xì)胞的基礎(chǔ)葡萄糖攝取沒有影響，這與正常細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)的結(jié)果一致，提示NaHS起作用依賴于胰島素的存在；
[0041]進(jìn)一步研究在胰島素存在情況下NaHS對于IR模型的細(xì)胞葡萄糖攝取的作用，結(jié)果顯不，
[0042]在胰島素刺激(100nmol/L)的情況下，NaHS在25、50和100 μ mol/L的濃度均顯著增加IR模型L6細(xì)胞的3H-脫氧葡萄糖攝取(如圖3所示)，其中50和100 μ mol/L的NaHS對于IR細(xì)胞的作用相近，而且在IR模型細(xì)胞中NaHS有效濃度引起的葡萄糖攝取的增加程度明顯小于正常細(xì)胞，25、50和100 μ mol/L的NaHS分別增加葡萄糖攝取到1.61 ±0.57、
1.72±0.53和1.56±0.36倍，說明NaHS在病理狀態(tài)下可以起到促進(jìn)葡萄糖攝取的作用；
[0043]不同濃度的NaHS，從0_200 μ mol/L孵育24小時(shí)后，對于正常的脂肪細(xì)胞胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取沒有影響，25 μ mol/L的NaHS與對照相比，葡萄糖攝取率有增加，提示NaHS對于脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取起作用可能不通過胰島素；
[0044]不同濃度的NaHS，從0_200 μ mol/L孵育24小時(shí)后，進(jìn)行葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)，硫化氫對于正常的脂肪細(xì)胞胰島素存在狀態(tài)下的葡萄糖攝取有明顯促進(jìn)作用，NaHS在25、50和100 μ mol/L的濃度均顯著增加3H-脫氧葡萄糖攝取，與骨骼肌細(xì)胞不同，NaHS促進(jìn)脂肪細(xì)胞葡萄糖攝取的最佳濃度為50 μ mol/L,為對照組的1.54倍；
[0045]不同濃度的NaHS，從0-200 μ mol/L孵育24小時(shí)后，對于IR模型脂肪細(xì)胞胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取沒有影響，50 μ mol/L的NaHS與對照相比，葡萄糖攝取率略有增加；
[0046]細(xì)胞經(jīng)高糖高胰島素聯(lián)合誘導(dǎo)培養(yǎng)建立胰島素抵抗的細(xì)胞模型，以模型組(IR)的葡萄糖攝取量作為攝取基值，各組分別與之相比作為各自葡萄糖攝取率(如圖4所示)，NaHS孵育24小時(shí)后對于IR模型的脂肪細(xì)胞胰島素刺激下的葡萄糖攝取有促進(jìn)作用，與正常的脂肪細(xì)胞的結(jié)果一致，NaHS促進(jìn)IR模型脂肪細(xì)胞葡萄糖攝取的最佳濃度是50 μ mol/L,為對照組的 2.02±0.86 倍，25 和 100 μ mol/L 的 NaHS 增加到 1.75±0.68 和 1.56±0.44 倍。
[0047]本實(shí)施例中檢測了硫化氫對不同濃度胰島素(O-lOOnmol/L)刺激狀態(tài)下葡萄糖攝取的影響，結(jié)果顯示，
[0048]對照組和NaHS (50 μ mol/L)處理組低糖(5.5mmol/L)孵育胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞(如圖5所示)和脂肪細(xì)胞(如圖6所示)24小時(shí)后，胰島素濃度為10和lOOnmol/L時(shí)，NaHS處理組與對照相比，葡萄糖攝取有明顯增加，其中0、1和5nmol/L時(shí)無顯著差異；
[0049]對照組和NaHS (50 μ mol/L)處理組高糖(25mmol/L)孵育胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞(如圖7所示)和脂肪細(xì)胞(如圖8所示)24小時(shí)后，胰島素濃度為10和lOOnmol/L時(shí)，NaHS處理組與對照相比，葡萄糖攝取有明顯增加，其中0、1和5nmol/L時(shí)無顯著差異；
[0050]實(shí)施例2骨骼肌和脂肪細(xì)胞與胰島素抵抗的相關(guān)性試驗(yàn)
[0051]本實(shí)施例中采用現(xiàn)有技術(shù)中廣泛應(yīng)用的胰島素抵抗及糖尿病細(xì)胞:其中，骨骼肌成肌細(xì)胞株是Yaffe從大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物中分離得到的，在一定的培養(yǎng)條件下可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維；脂肪細(xì)胞株來源于小鼠胚胎成纖維細(xì)胞，經(jīng)克隆擴(kuò)增成為前脂肪細(xì)胞系，再經(jīng)特定的分化劑誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞；
[0052]I)細(xì)胞水平胰島素敏感性的評價(jià)
[0053]利用細(xì)胞對同位素標(biāo)記的葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)，評價(jià)細(xì)胞對胰島素刺激的葡萄糖攝取和利用能力，從而評價(jià)胰島素的敏感性，判斷胰島素抵抗是否存在；[0054]葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn):通過測定處理24小時(shí)后培養(yǎng)基中的糖濃度計(jì)算糖消耗的量，評判細(xì)胞攝取糖的能力，以反映細(xì)胞的葡萄糖代謝情況，因此，本實(shí)施例結(jié)合葡萄糖消耗和葡萄糖攝取的結(jié)果綜合評價(jià)硫化氫對骨骼肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的胰島素敏感性的影響，其中，包括生理和病理狀態(tài)下硫化氫對骨骼肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取的作用；
[0055]( 1)建立胰島素抵抗細(xì)胞模型
[0056]用高糖高胰島素的方法建立胰島素抵抗細(xì)胞模型，以模擬胰島素抵抗患者體內(nèi)高血糖高胰島素血癥的病理環(huán)境，其中，分化的脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞肌管采用高濃度胰島素及高糖誘導(dǎo)培養(yǎng)24h，再以3H-脫氧葡萄糖攝取試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證；
[0057]實(shí)驗(yàn)中以MTT法監(jiān)測各藥物有效成分在不同濃度時(shí)對脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞活力的影響，結(jié)果顯示，NaHS濃度為10到200 μ mol/L時(shí)對細(xì)胞活力無明顯影響，濃度大于500 μ mol/L后對細(xì)胞有一定的毒性,本實(shí)施例確定之后的葡萄糖消耗和葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)所用濃度為10到200 μ mol/L。
[0058]葡萄糖消耗實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，NaHS在對培養(yǎng)細(xì)胞基本無毒的安全濃度范圍內(nèi)顯著增加胰島素刺激下的骨骼肌和脂肪細(xì)胞葡萄糖的代謝；
[0059]正常和胰島素抵抗模型細(xì)胞的3H-脫氧葡萄糖攝取試驗(yàn)結(jié)果顯示，模型細(xì)胞葡萄糖攝取能力在基礎(chǔ)和胰島素刺激狀態(tài)下與正常細(xì)胞相比都有明顯下降，高濃度葡萄糖高濃度胰島素能明顯抑制葡萄糖的攝?。?br> [0060]藥物干預(yù)結(jié)果顯示，硫化氫對于脂肪細(xì)胞正常和模型細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)的葡萄糖攝取均有促進(jìn)作用，但對于骨骼肌細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)的葡萄糖攝取沒有影響；在胰島素存在時(shí)，NaHS可顯著增加脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞的葡萄糖攝取，且這種作用在正常和胰島素抵抗模型細(xì)胞中都存在；結(jié)果提示，硫化氫對骨骼肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的作用機(jī)制可能有所不同。
[0061]實(shí)施例3硫化氫及其供體硫氫化鈉對II型糖尿病的降血糖及胰島素增敏作用
[0062]選擇2月齡的GK大鼠作為本實(shí)施例糖尿病胰島素抵抗的動物模型；
[0063]常規(guī)進(jìn)行胰島素耐量試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在慢性給藥的大鼠腹腔注射一定量胰島素之后60分鐘，GK大鼠NaHS 30 μ mol/kg組的血糖下降的比例明顯大于對照組(如圖9所示)，Wistar大鼠NaHS 60 μ mol/kg組的血糖下降的比例明顯大于對照組(如圖10所示)；胰島素敏感性實(shí)驗(yàn)，采用低濃度的胰島素(0.4U/kg)饑餓4小時(shí)Wistar大鼠，NaHS60 μ mol/kg組與對照組比較有明顯下降(如圖11所示)，結(jié)果表明，小劑量的H2S可以增加GK大鼠的胰島素敏感性；
[0064]在NaHS給藥后2、4、6周分別檢測GK糖尿病大鼠的空腹血糖含量(如圖12所示)，給藥4周后小劑量NaHS (30 μ mol/kg)即表現(xiàn)出降血糖效應(yīng)，與對照組相比有明顯差別，表明低濃度H2S能降低GK糖尿病大鼠的空腹血糖。
[0065]糖耐量試驗(yàn)示各組GK大鼠在糖負(fù)荷后各時(shí)間點(diǎn)的血糖均顯著高于Wistar組，說明GK大鼠糖耐量降低(如圖13所示)，在腹腔注射葡萄糖30分鐘和90分鐘時(shí)，NaHS給藥低劑量組的大鼠的血糖濃度明顯低于對照組；糖負(fù)荷后30和90分鐘NaHS 30 μ mol/kg組的血糖值比對照組顯著降低，說明NaHS使糖耐量增高；
[0066]在腹腔注射葡萄糖30分鐘時(shí)NaHS低劑量組(30和60 μ mol/kg)與對照組血糖值具有顯著性差異(如圖14所示)，在腹腔注射葡萄糖60分鐘時(shí)NaHS 60 μ mol/kg組與對照組血糖值具有顯著性差異，表明H2S對Wistar大鼠糖尿病葡萄糖耐量有影響；[0067]低濃度NaHS (30 μ mol/kg/d)可以改善GK大鼠的胰島素抵抗，降低空腹血糖(FBG)，增加葡萄糖耐量，而大劑量NaHS (120 μ mol/kg/d)則加重了 GK大鼠的胰島素抵抗，空腹血糖升高，葡萄糖耐量降低，結(jié)果表明H2S對于體內(nèi)的胰島素抵抗有雙重調(diào)節(jié)作用。
[0068]實(shí)施例4硫化氫及其供體硫氫化鈉對糖尿病引起的腎臟損傷的保護(hù)作用
[0069]按常規(guī)方法慢性給予NaHS不同濃度(30、60和120 μ mol/L) 10周后，觀察GK大鼠腎臟內(nèi)ROS的表達(dá)，結(jié)果顯示(如圖16A所示):GK大鼠對照組腎臟內(nèi)ROS表達(dá)明顯高于Wistar大鼠；GK大鼠用藥組與GK大鼠對照組比較，NaHS不同濃度(30、60和120 μ mol/L)均能明顯減少腎臟內(nèi)ROS的表達(dá)，并成一定的濃度依賴性(如圖16C4所示)；
[0070]慢性給予NaHS不同濃度(30、60和120 μ mol/L) 10周后，腎臟切片，用PAS染色，結(jié)果顯示，GK大鼠對照組與Wistar大鼠相比腎小球的系膜基質(zhì)重度增生，形成結(jié)節(jié)狀硬化，呈同心圓狀排列，即 Kimmelstiel-Wilson 結(jié)節(jié)(Kimmelstie 1-ffilson nodule),給予 NaHS不同濃度(30、60和120 μ mol/L) 10周后(如圖16B和D所示)，增生的腎小球數(shù)量與GK對照組比較明顯減少，表明慢性給予NaHS可減少GK大鼠腎臟中發(fā)生新月體病變的腎小球數(shù)量，硫化氫及其供體 硫氫化鈉對糖尿病引起的腎臟損傷有保護(hù)作用。
【權(quán)利要求】
1.硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備治療糖尿病藥物中的用途。
2.按權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的糖尿病是II型糖尿病。
3.按權(quán)利要求1或2所述的用途，其中硫化氫及其供體硫氫化鈉用于II型糖尿病降血糖和增聞膜島素水平。
4.硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備胰島素增敏劑中的用途。
5.硫化氫及其供體硫氫化鈉在制備防治糖尿病引起的腎臟損傷藥物中的用途。
6.按權(quán)利要求5所述的用途，其中所述的糖尿病引起的腎臟損傷是II型糖尿病引起的腎臟并發(fā)癥。
7.按權(quán)利要求5所述的用途，其中硫化氫及其供體硫氫化鈉用于減少腎臟的氧化應(yīng) 激。
【文檔編號】A61P5/50GK103622992SQ201210307009
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2012年8月26日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月26日
【發(fā)明者】朱依純, 薛蓉, 郝丹丹, 孫計(jì)萍, 李文文, 趙曼曼, 李杏輝, 陳瑩 申請人:復(fù)旦大學(xué)