專利名稱：褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種褐藻多糖硫酸酯新用途，即褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途。
背景技術(shù)：
在現(xiàn)有技術(shù)中，慢性阻塞性肺病簡稱慢阻肺(COPD)，它包括慢性支氣管炎(老慢支)、和肺氣腫等疾病。其病理特征為肺部氣流的慢性阻塞，影響正常呼吸，最后導(dǎo)致呼吸衰竭。常見癥狀為反復(fù)的咳嗽；喘息，不能正常吸氣和喘氣。目前中國約有4000萬慢阻肺患 者，每分鐘就有5個人死于慢阻肺，所以稱之為不動聲色的“殺手”。COPD主要是由有害顆?；驓怏w(最常見的是來自吸煙)引起的，其引發(fā)肺中的異常炎性應(yīng)答。COPD的天然進程表征為被稱作急性加重的癥狀的偶然性突然惡化，多數(shù)是由于感染或空氣污染引起的。目前COPD無治愈性療法，被證明減少死亡率的唯一措施是停止吸煙和補充氧?？梢酝ㄟ^使用支氣管擴張劑、例如β 2激動劑和/或抗膽堿能劑控制C0PD。β 2激動劑刺激β2受體，抗膽堿能劑則阻遏來自膽堿能神經(jīng)的刺激，二者都是松馳氣道附近的平滑肌、增大氣流的藥物。有數(shù)種β2激動劑可用舒喘寧或舒喘靈和特布他林是廣泛使用的短效β2激動劑，其迅速提供COPD癥狀的緩解。長效β2激動劑(LABA)例如沙美特羅和福莫特羅用作維持治療。異丙托品(IpratiOpium)是最廣泛使用的短效抗膽堿能處方藥。在COPD中，抗膽堿能劑似乎優(yōu)于β 2激動劑，然而β 2激動劑和抗膽堿能劑二者都不具有抗炎作用，并且它們不阻斷COPD的進展。褐藻多糖硫酸酯又名巖藻多糖(英文名稱fucoidan)，是存在于海洋褐藻或海洋無脊椎動物中的一大類由巖藻糖組成的硫酸化多糖，具有抗凝血、抗腫瘤、抗血栓等多種生物活性?，F(xiàn)在人們對褐藻多糖硫酸酯的組成有較為清晰的了解，它是一類化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜的多糖。褐藻多糖硫酸酯化學(xué)結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，不同褐藻中分離到的多糖組分及結(jié)構(gòu)有很大差異。到目前為止，對來源于墨角藻iFucus vesi culosus )和泡葉藻(Ascophyllumflot/ios )的褐藻多糖硫酸酯的結(jié)構(gòu)研究最多，墨角藻褐藻多糖硫酸酯主要以α (I —3)糖苷鍵連接，硫酸化主要發(fā)生在C4位。對泡葉藻褐藻多糖硫酸酯的多項研究都表明其中存在大量的α (I —3)和α (I —4)糖苷鍵。此外還有幾種褐藻巖藻多糖的結(jié)構(gòu)被報道。昆布(Mcklonia褐藻多糖硫酸酯主要為α (I — 3)連接,硫酸化在C4位。來源于板管嚴(yán)iCladosiphon okamuranusimHGhorda的褐藻多糖硫酸酯主鏈均為α(1 — 3)的巖藻糖，硫酸化在C4位，而且，二者均有少量的2-0-乙?；Ｒ延卸嗥墨I公開了褐藻多糖硫酸酯的制備方法及其制藥用途。日本專利昭46-2248采用十六烷氯化吡啶或十六烷三甲基溴化銨與褐藻多糖硫酸酯反應(yīng)成季胺鹽復(fù)合物，再利用該復(fù)合物對鹽的溶解度差異，用乙醇、甲醇和離子交換樹脂處理，純化除去褐藻膠、中性多糖和其它雜質(zhì)，而得到比較純化的褐藻多糖硫酸酸酯。CN1129109A則公開了由干海帶浸泡、數(shù)次過濾、二次乙醇提取、一次乙醇洗滌、配合調(diào)節(jié)PH范圍等的堿凝析法。CN1344565A則公開了另一種制備方法，包括原料預(yù)處理、控溫攪拌浸提、離心、濃縮、乙醇沉淀、無水乙醇脫水等步驟。CN1517356A則將巖藻聚糖硫酸酯配制成水溶液，加入過氧化氫、次氯酸或亞硝酸及其鹽，將所得混合溶液加熱，用截留分子量3000-5000的膜超濾，得到巖藻聚糖硫酸酯低聚糖。CN1560086A則公開了一種高硫酸根含量巖藻聚糖硫酸酯的制備方法，用熱水或酸水浸提褐藻，制得含褐藻聚糖硫酸酯的提取液，將該提取液濃縮至多糖的重量百分?jǐn)?shù)為2-10%，調(diào)PH5-8，加入殼聚糖溶液攪拌，離心或過濾收集沉淀，將沉淀用于5-10倍鹽溶液提取2-4次，離心或過濾收集清液，將該清液透析或超濾脫鹽。CN1616494A以天然海藻硫酸多糖為原料，將海藻硫酸糖溶液中加入抗壞血酸和過氧化氫，控制反應(yīng)溫度，恒溫降解時間為O. 5-3hr，再透析或超濾，減壓濃縮，制得4-100KDa的低分子量海藻硫酸多糖產(chǎn)物。另外，CN1670028A、CN1392160A、CN1197674A也分別公開了采用絮凝等方法制備海藻多糖。在本發(fā)明中，以上發(fā)明公開的內(nèi)容均被全文引入本文作為參考。 褐藻多糖硫酸酯最早被發(fā)現(xiàn)具有抗凝血活性，近二十年來陸續(xù)公開了褐藻多糖硫酸酯具有抗病毒、提高免疫力、抗腫瘤、降血糖、抗輻射等活性，在治療肝病、胃病有應(yīng)用。大量的公開資料表明褐藻多糖硫酸酯的生物活性與其結(jié)構(gòu)特征密切相關(guān)。由于不同來源的褐藻多糖硫酸酯其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)特征差異非常大，其生物活性有很大的差異。例如與墨角藻褐藻多糖硫酸酯相比，海帶褐藻多糖硫酸酯具有更高的抗血小板聚集作用，而抗凝血性很弱(Zhu et al, Thrombosis Research, 2010, 125: 419 - 426),褐藻多糖硫酸酯的抗凝血和抗補體活性與其單糖組成、硫酸基含量、分子量大學(xué)、主鏈連接方式、支鏈、取代基團等因素密切相關(guān)。但尚未有文獻表明褐藻多糖硫酸酯在預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病方面的用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對上述不足而提供一種褐藻多糖硫酸酯的又一新用途，對慢性阻塞性肺病有療效的褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途。所述的慢性阻塞性肺病為慢性支氣管炎或肺氣腫，包括但不限于。褐藻多糖硫酸酯分子量范圍為1000 2000000，優(yōu)選為優(yōu)選是5000 200000。褐藻多糖硫酸酯的巖藻糖含量為25-45%，硫酸基含量為25-50%。褐藻多糖硫酸酯來源于海帶、馬尾藻、裙帶菜、羊棲菜、鼠尾藻、海黍子、昆布、泡葉藻或墨角藻中的一種或多種。優(yōu)選來源于海帶。褐藻多糖硫酸酯為注射劑、口服制劑、鼻腔給藥制劑或局部給藥制劑。所述藥物含有褐藻多糖硫酸酯和藥學(xué)可接受的輔料。我們通過對不同褐藻多糖硫酸酯在治療慢阻肺的比較研究，發(fā)現(xiàn)一種高硫酸化褐藻多糖硫酸酯，即巖藻半乳聚糖硫酸酯，具有意想不到的良好治療效果，是本發(fā)明優(yōu)選藥物。該巖藻半乳聚糖硫酸酯的結(jié)構(gòu)特征為以-4- a -L-Fuc-C I — 3)- a -L-Fuc-( I-3)-a-L-Fuc-C I — 3)- α -L-Fuc-C I-殘基形成主鏈，平均每4個糖殘基含有一個支鏈，支鏈由a -L-Fuc(I-或者β -D-Gla- (I — 6) - β -D-Gla- (I-組成；硫酸基連接在巖藻糖的2或/和4位以及半乳糖的3或/和4位上。藥物劑型不限于此，按上述藥用原料與制藥上常用的藥用載體，如賦形劑或輔料可以混合制成注射液、凍干粉針劑、噴鼻劑、注射微球、脂質(zhì)體、片劑、膠囊劑、水劑、散劑、糊齊U、噴霧劑、顆粒劑、軟膠囊、滴丸劑、凝膠劑、貼片、膏劑等，其中優(yōu)選注射液、凍干粉針劑、膠囊劑和噴鼻劑或其它制藥行業(yè)上常規(guī)制劑。本發(fā)明的優(yōu)點是1、首次發(fā)現(xiàn)褐藻多糖硫酸酯對慢性阻塞性肺病具有良好的治療作用，褐藻多糖硫酸酯屬于多糖類物質(zhì)，來源于海洋褐藻，其中很多褐藻如海帶、裙帶菜、羊棲菜等都是食用海藻，本身具有增強免疫功能等活性，毒副作用小，安全性好。可以用于制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病的藥物和保健品。2、通過對不同褐藻多糖硫酸酯治療慢性阻塞性肺病活性的比較研究，首次發(fā)現(xiàn)高硫酸化的褐藻多糖硫酸酯組分(巖藻半乳聚糖硫酸酯)對慢性阻塞性肺病具有意想不到的良好治療作用，是本發(fā)明優(yōu)選藥物。經(jīng)動物實驗表 明，褐藻多糖硫酸酯對慢性阻塞性肺病具有良好的預(yù)防和治療作用，能夠緩解慢性阻塞性肺病病程的發(fā)展，具有顯著的療效。下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方式作進一步詳細(xì)描述。


圖I是海帶褐藻多糖硫酸酯分級組分Fl (從上到下)的IR圖。圖2是海帶褐藻多糖硫酸酯分級組分F2 (從上到下)的IR圖。圖3是海帶褐藻多糖硫酸酯分級組分F3 (從上到下)的IR圖。
具體實施例方式實施例I :海帶(Zaffiiaaria)褐藻多糖硫酸酯及分級組分的制備
(I)將5kg海帶除去泥沙，加入100L O. IM的鹽酸室溫攪拌提取3小時，提取液過濾后，藻渣用100L O. IM鹽酸重復(fù)提取I次，過濾，合并兩次提取的濾液，用堿調(diào)濾液pH至5-7，用硅藻土過濾，濾液超濾，濃縮，加入濃縮液4倍體積量的無水乙醇沉淀，沉淀用無水乙醇洗滌，真空干燥，得到褐藻多糖硫酸酯FPS 602 g。(2)取上述得到的海帶褐藻多糖硫酸酯溶于水，配成濃度為2. 5%的水溶液，上樣到以 DEAE-Sepharose-CL_6B 為載體柱層析,依次用 O. 5 mol/L NaCl> I. O mol/L NaCl 和2. Omol/L NaCl溶液線性梯度洗脫，收集各洗脫液，分別透析、凍干。其中由O. 5 mol/L NaCl洗脫得到褐藻多糖硫酸酯分級組分F1，I. O mol/L NaCl洗脫得到褐藻多糖硫酸酯分級組分F2；2. 0mol/L NaCl洗脫得到褐藻多糖硫酸酯分級組分F3。分別對三個分級組分進行化學(xué)組分分析，單糖比例分析，硫酸根含量，分子量和紅外分析，結(jié)果見表I和表2以及參見圖I、圖2、圖3。表I海帶褐藻多糖硫酸酯FPS及分級組分FI、F2、F3的化學(xué)組分
權(quán)利要求
1.褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述的慢性阻塞性肺病為慢性支氣管炎或肺氣腫。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酷分子量范圍為1000 2000000。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯的巖藻糖含量為25-45%，硫酸基含量為25-50%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯來源于海帶、馬尾藻、裙帶菜、羊棲菜、鼠尾藻、海黍子、昆布、泡葉藻或墨角藻中的ー種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酯為注射劑、ロ服制劑、鼻腔給藥制劑或局部給藥制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于所述藥物含有褐藻多糖硫酸酯和藥學(xué)可接受的輔料。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于褐藻多糖硫酸酷分子量范圍為5000 200000。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種褐藻多糖硫酸酯新用途，即褐藻多糖硫酸酯在制備預(yù)防和治療慢性阻塞性肺病藥物中的用途。褐藻多糖硫酸酯的巖藻糖含量大于29%，硫酸基含量大于30%。褐藻多糖硫酸酯系從海洋褐藻包括海帶、裙帶菜、馬尾藻、鼠尾藻、全緣馬尾藻、羊棲菜、硇洲馬尾藻、海黍子、海蒿子等褐藻中提取得到的硫酸多糖，經(jīng)動物實驗表明，對慢性阻塞性肺病具有良好的預(yù)防和治療作用，能夠緩解慢性阻塞性肺病病程的發(fā)展，具有顯著的療效。
文檔編號A61P11/00GK102764266SQ20121026662
公開日2012年11月7日 申請日期2012年7月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月30日
發(fā)明者張全斌, 張弘 申請人:吉林省輝南長龍生化藥業(yè)股份有限公司