專利名稱：一種制劑在制備調(diào)節(jié)膽固醇藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的涉及一種 制劑用于制造調(diào)節(jié)膽固醇水平的藥物的用途。
背景技術(shù)：
血液中的膽固醇水平是病人脂質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。使用膽固醇降低療法可以在治療一些疾病時(比如動脈粥樣硬化、缺血性心臟病等)使心血管發(fā)病的死亡率降低30-40%。血液中膽固醇的水平與冠狀動脈疾病之間存在著直接的聯(lián)系。已知的調(diào)節(jié)膽固醇藥物是建立在植物藥物的基礎(chǔ)上。其中含有伸筋草(Licopodium)、碘化金(Aurum iodatum)、碳酸鋇(Barium carbonicum)、大蒜種子(Alliumsativum)(見俄羅斯聯(lián)邦專利證書Ns 2162333，Mn K A 61 K 35/78，2001年I月27日公布)，使用C12稀釋時用同樣的比例。該藥物是順勢療法藥劑的混合體，每一種藥劑按照自己的功效被用于其中，包括治療肺動脈高壓、動脈粥樣硬化、慢性肝病、尿路結(jié)石、肥胖等疾病的藥劑。使用該復(fù)方藥物替代了以往的多種藥物一起服用，那樣通常會掩蓋患者在治療過程中的反應(yīng)，最終導(dǎo)致干擾制定出合理的治療方案。已知該藥物具有調(diào)節(jié)膽固醇的作用，是植物藥劑(見俄羅斯聯(lián)邦專利證書Na 2152221, Mn K A61 K 35/78，2000年7月10日公布)，含有豬毛菜的干萃取物作為活性成分。使用以豬毛菜為基礎(chǔ)的植物藥劑等同于使用各種不同的化合物，因為在專利證書的描述中已經(jīng)指出，該藥物的活性成分中包括了黃酮類化合物、多糖、類胡蘿卜素、留醇、皂甙、脂類化合物、氨基酸、各種微量元素。該藥物中含有的多種成分等同于同時服用多種藥物，正如上面提到的一樣，同時服用多種藥物不能夠清晰地反映出治療效果。除此之外，該藥物中活性成分的含量在0. 25-99. 9% (重量)，這也是低水平藥劑標(biāo)準(zhǔn)。已知的調(diào)節(jié)膽固醇水平的化學(xué)藥劑主要是煙酸及其衍生物、膽汁酸螯合物、纖維素酸的衍生物(貝特類)(見《內(nèi)臟器官疾病治療/實踐指導(dǎo)資料》，作者A. H.奧克洛科夫，明斯克市，最高學(xué)府出版社，維捷布斯科市，白俄羅斯醫(yī)學(xué)書籍出版社-1996年，第三卷，第一部分，19-41頁)。但是使用煙酸會導(dǎo)致一些副作用，比如破壞肝功能、加重慢性胃炎、胃潰瘍，還可能造成血糖升高、皮膚充血，以及血液中的尿酸水平升高。使用螯合物進行治療時會產(chǎn)生以下副作用，比如嘔吐、脹氣、便秘、腹瀉。還有可能使甘油三酯水平升高，以及破壞吸收脂溶性維生素(A、D、K)和葉酸。使用貝特類(比如非諾貝特、吉非貝齊等)的副作用是造成肌肉損傷、膽道結(jié)石，還可能引發(fā)白細胞減少癥、血小板減少癥、貧血。使用np06yK0Ji會造成室性心律失常、消化不良、肝功能惡化。與申請藥物最為相近的降膽固醇藥物是洛伐他汀(同義詞雷克拉等)，該藥物可以調(diào)節(jié)代謝，含有化學(xué)活性成分以及目標(biāo)添加劑(見《俄羅斯藥物制劑手冊》，莫斯科，阿斯特拉制藥服務(wù)出版社，2000年，B -364- B -365頁)?；钚猿煞质撬☆愃幬铮衃IS-(Ia(R*)，3a，7運，83 (2S*，4S*)，8a ￠11,2,3,7，8，8a，8 二甲基3. 7六氫，2-(四氫)_4_羥基_6_氧代-2H-吡喃_2基。藥物的作用是抑制膽固醇的合成。當(dāng)洛伐他汀進入機體之后代謝形成3 -羥基，它是3羥基-3甲基輔酶A還原酶的競爭抑制劑。藥物中的目標(biāo)添加劑中含有乳糖、膠化淀粉、微晶體纖維素、丁基氫氧苯甲醚、靛藍(E132)、硬脂酸鎂。使用他汀類藥物的不足之處在于需要長期使用，其中也包括洛伐他汀。除此之外，使用他汀類藥物還可能對肝臟、肌肉、胃腸道造成負面影響，以及引起睡眠障礙和頭痛。反復(fù)使用這種藥物還會降低療效(快速抗藥反應(yīng))(見Cromwell ff. C. ZiajkaP. E. Development of tachyphylaxis among patientstaking HMG CoA reductaseinhibitors. /Am J. Cardiol 2000 ;86 :1123-1127//翻譯文章刊登在 CONSILIUM medicum雜志上，2001年，第三卷，N2 2，P. M.葉拉金翻譯，《得到3羥基-3甲基輔酶A還原酶抑制劑的患者的快速抗藥反應(yīng)發(fā)展》)。另外，他汀類藥物屬于排他性生命素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制劑在制備調(diào)節(jié)膽固醇藥物中的應(yīng)用，申請人通過實驗發(fā)現(xiàn)這種應(yīng)用可以有效的實現(xiàn)使血液中的膽固醇水平恢復(fù)正常，而且沒有毒性作用，也不會引起機體的抗藥性。具體的，本發(fā)明所述的應(yīng)用是通過如下實現(xiàn)的一種制劑在制備調(diào)節(jié)膽固醇藥物中的應(yīng)用，其中所述制劑含有化學(xué)活性成份和目標(biāo)添加劑，所述活性成份是36. 5-40%濃度的甲醛水溶液，所述目標(biāo)添加劑是0. 85-0. 95%的等滲氯化鈉溶液，其中甲醛水溶液的重量份數(shù)為2-6，等滲氯化鈉溶液的重量份數(shù)為994_998o本領(lǐng)域技術(shù)人員公知，針對血液中膽固醇失調(diào)這一具體的病癥，臨床上以膽固醇水平為依據(jù)對其有諸多分類，在本發(fā)明中，所述的應(yīng)用尤其指的是下述情況所述調(diào)節(jié)膽固醇藥物為治療中度膽固醇血癥的藥物；所述調(diào)節(jié)膽固醇藥物為治療重度膽固醇血癥的藥物。進一步的，本發(fā)明公開了所述制劑的制備方法，包括將2-6重量份數(shù)的36. 5-40%濃度的甲醛水溶液添加到994-998重量份數(shù)的等滲氯化鈉溶液中獲得濃度為0. 07-0. 24%的甲醛溶液的步驟。本發(fā)明的另一個目的是制造出生理接收的膽固醇調(diào)節(jié)藥物，所述藥物沒有毒副作用，也不會引起機體的抗藥性。為了解決這些問題，該藥物的活性成分中含有36. 5-40%濃度的甲醛水溶液，作為目標(biāo)添加劑該藥物中含有注射濃度為0. 85-0. 95%的等滲氯化鈉溶液，以下是重量關(guān)系、
36. 5-40%濃度的甲醛水溶液 2-6濃度為0. 85-0. 95 %的等滲氯化鈉溶液 994-998在發(fā)明人已知的專利和科技信息中沒有依靠提高受體親和力來調(diào)節(jié)膽固醇水平的藥物。已經(jīng)知道，甲醒是細胞代謝的自然產(chǎn)物(見Hunter B. K. et al. Formaldehydemetabolism by Escherichia coli. Carbon and solvent deuterium incorporation intoglycerol,I,2-propanediol and 1,3-propanediol. //Biochemistry. -1985. -v. 24. No 15.-p. 4148-4155)。甲醛在醇、氨基酸中的真核生物的物質(zhì)交換過程中形成，它有時形成在自由狀態(tài)的細胞中，有時和其它代謝物相關(guān)聯(lián)，首先是四氫葉酸和谷胱甘肽。目前已知可以把甲醛作為免疫調(diào)節(jié)劑使用(見俄羅斯聯(lián)邦專利證書Ns 2077882，Mn K A 61 K 31/115，1997年4月27日公布)。 對膽固醇水平的調(diào)節(jié)作用機制建立在發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的甲醛的功能之上，包括超標(biāo)準(zhǔn)突變機制，該機制導(dǎo)致調(diào)節(jié)膽固醇水平的受體親和力提高。我們通過實驗證明，在生物體外注入甲醛會導(dǎo)致生長轉(zhuǎn)化因子水平降低，從而引起細胞凋亡或者程序性細胞死亡。細胞凋亡參與到了心臟冠狀動脈的粥樣硬化發(fā)病機制中(見《細胞凋亡在動脈粥樣硬化、心肌缺血、心力衰竭發(fā)展中的作用/心力衰竭》，作者r.M.斯托洛扎科夫，A. B.烏捷舍夫，2000年，第一卷，Ns 4)。在動脈粥樣硬化的發(fā)病機制中的一個重要觀點被認為是內(nèi)皮細胞的功能被破壞。目前人們理解的內(nèi)皮細胞功能障礙是神經(jīng)遞質(zhì)之間不平衡，這種神經(jīng)遞質(zhì)可以保證所有的內(nèi)皮依賴過程處于正常狀態(tài)(見《內(nèi)皮細胞的臨床意義與修正》，作者fl. B.切爾卡伸，-htt:/www. Cardiolog. ru),這其中也包括屬于徹底硬化的細胞因子的生長轉(zhuǎn)化因子(見Cooper M. E. , Rumbler Y. , KomersR. et. al. _Diabets. _1994. _ No 43. _P. 1221_1228)。這樣一來，凋亡的細胞不只是血管壁的異常細胞，還有其它組織的細胞，包括肝臟細胞、甲狀腺細胞、腎上腺細胞。最終恢復(fù)器官功能，包括恢復(fù)可以保障分裂脂質(zhì)的酶的活性，以及使血蛋白的物理化學(xué)狀態(tài)處于正常水平，最終使血液中的膽固醇水平趨于正常。甲醛水溶液是一種透明無色的液體，有獨特的刺鼻氣味，可以在任何對比關(guān)系的情況下與水和酒精混溶。甲醛屬于醛類的代表，是具有刺激氣味的無色氣體，分子量是30. 03，在氣溫是20攝氏度時密度為0. 815，熔點是92攝氏度，沸點是19. 2攝氏度。甲醛可以很好地溶于水和酒精，很容易聚合，聚合過程中在水環(huán)境里會形成多聚甲醛，在非水環(huán)境中(丁烷、己烷)會形成聚甲醛。注射用等滲氯化鈉溶液是有咸味的無色透明液體，無菌溶液。氯化鈉是立方晶體或者是白色的晶體粉末，有咸味，無氣味，溶于水(I 3)。該申請藥物是透明的無色液體，無氣味，略有咸味。該藥物按以下方式進行制作。取濃度是36. 5-40%的醫(yī)用甲醛溶液重量部分的2-6，添加到無菌的濃度為0. 85-0. 95%的氯化鈉注射溶液中，重量部分的998-994，直到獲得濃度為0. 07-0. 24%的甲醛溶液。該藥物需要在陰暗處保存，溫度保持在15-35攝氏度。
具體實施方式
示例I :取0. 2毫升濃度為37%的醫(yī)用甲醛溶液，將其加入到99. 8毫升的濃度為0.9% (或者0.95%)的無菌氯化鈉等滲溶液中。仔細混合溶液混合物，最終得到藥物中的甲醛濃度是0. 074% (重量百分比)。示例2 :取0. 6毫升濃度為37%的醫(yī)用甲醛溶液，將其加入到99. 4毫升的濃度為0.9% (或者0.95%)的無菌氯化鈉等滲溶液中。仔細混合溶液混合物，最終得到藥物中的甲醛濃度是0. 222% (重量百分比)。示例3 :取0. 6毫升濃度為40%的醫(yī)用甲醛溶液，按照上面“示例2”中的描述制作藥物。甲醛的最終濃度是0.24% (重量百分比)。示例4 :取3毫升濃度為40%的醫(yī)用甲醛溶液，將其加入到997毫升的濃度為0.95%的無菌氯化鈉等滲溶液中。仔細混合溶液混合物，最終得到藥物中的甲醛濃度是0. 12% (重量百分比)。
為了證明該申請藥物不具有毒性作用，在老鼠身上進行了實驗。在實驗中使用了 56只重量在18-24克的遠親繁殖的雌雄兩性的ICR老鼠。老鼠在標(biāo)準(zhǔn)條件的動物飼養(yǎng)場生活，老鼠處于同樣的飼養(yǎng)條件之下，按照規(guī)定的食譜進食，自由飲水進食。從給老鼠注射完藥劑之后，對老鼠進行了 14晝夜的觀察。對它們的整體狀況、運動活力、行為、對刺激的反應(yīng)、反射進行了評估。在整個實驗過程中需要不斷地為老鼠稱重，試驗中規(guī)定了所需食物和水的重量。對在研究過程中死亡的老鼠進行了解剖，對它們的內(nèi)臟器官進行了評估，確定了相對系數(shù)(大腦、肝臟、心臟、脾臟、腎臟、腎上腺、睪丸、卵巢)。觀察期過后存活下來的老鼠被用頸椎脫位法殺死，進行了解剖，并且評估了老鼠內(nèi)臟器官狀態(tài)的宏觀病理改變。用Litchield和Wilcoxon概率分析方法確定了毒性指標(biāo)。將含有0. 2毫升的濃度為37%的甲醛溶液和99. 8毫升的濃度為0. 9%的氯化鈉溶液的藥劑，一次性按照5毫升/公斤，25毫升/公斤和50毫升/公斤的劑量進行肌肉注射。在整個觀察過程中對老鼠進行了三次稱重(分別是注射后的第1、7、14晝夜)。研究結(jié)果顯示，在以5. 0毫升/公斤的劑量進行藥劑注射之后，沒有發(fā)現(xiàn)老鼠在整體狀況和行為上的任何變化。在整個觀察期內(nèi)沒有老鼠死亡。所有老鼠體重增加的動態(tài)值都在標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。雄性老鼠和雌性老鼠在整體狀況和行為上沒有區(qū)別。在給老鼠注射了 25毫升/公斤劑量的藥劑之后，也發(fā)現(xiàn)了接近上述的場景。不論是雄性老鼠，還是雌性老鼠，整體狀況、行為、進食進水、體重增長動態(tài)值都處在標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。在注射了劑量為50. 0毫升/公斤藥劑的老鼠中出現(xiàn)了短暫的(一分鐘以內(nèi))輕微興奮，在這之后老鼠的狀態(tài)恢復(fù)正常，在其它老鼠實驗組中沒有明顯的不同。在觀察期結(jié)束后(14晝夜)用頸椎脫落方法將老鼠殺死，進行了解剖和內(nèi)臟器官的宏觀評估，在這之后把老鼠的內(nèi)臟清除，進行稱重，并確定內(nèi)臟器官的相對指數(shù)。研究確定，在所有實驗組中的器官的相對重量沒有區(qū)別，都處于標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。沒有發(fā)現(xiàn)局部反應(yīng)(滲透、充血、脫毛等)。按照成藥制劑濃度的十倍劑量進行了注射試驗，也即是說藥劑中含有2毫升濃度為37%的甲醛溶液和98毫升的濃度為0. 9%的氯化鈉溶液。
對ICR的老鼠(雄性和雌性)進行了劑量分別為6、12. 5、25毫升/公斤肌肉藥劑注射。在注射之后的頭5-6個鐘頭發(fā)現(xiàn)老鼠出現(xiàn)了中度的興奮抑制和反應(yīng)抑制。逐漸增加了呼吸頻率，并且心跳加快。但是在注射藥劑之后的第一個晝夜中沒有出現(xiàn)老鼠死亡。在注射藥劑之后的第四個晝夜，一只老鼠由于呼吸停止而死亡，這只老鼠被注射了 25毫升/公斤劑量的藥劑。所有的實驗老鼠在注射藥劑之后都出現(xiàn)了肌肉硬結(jié)的局部反應(yīng)。實驗結(jié)束時，在給老鼠進行注射的皮膚表面開始脫毛，這里形成了密集滲透。研究表明，最初的藥劑毒性劑量沒有實質(zhì)影響到老鼠的體重增長。這些指標(biāo)在雄性和雌性老鼠中沒有超出所允許的范圍。在實驗的最后老鼠被殺死，進行了宏觀研究，它們的內(nèi)臟器官被稱重，并且計算出 了相對系數(shù)。實驗結(jié)果表明，兩性老鼠在被注射了 10倍于治療劑量的藥劑之后，在實驗結(jié)束時，其大腦、心臟、肝臟、脾臟、腎臟、腎上腺、睪丸(卵巢)的相對重量與老鼠的正常值沒有實質(zhì)性區(qū)別。這樣一來，獲得的結(jié)果表明，申請的藥劑具有很低的毒性。治療方法如下。肌肉注射，劑量為5毫升，間隔7、21、30、60天。膽固醇水平的研究樣本是早晨從病人尺靜脈中采集的靜脈血樣本。根據(jù)赫爾辛基宣言的要求、國際道德標(biāo)準(zhǔn)、人體試驗的質(zhì)量與計劃科學(xué)標(biāo)準(zhǔn)、白俄羅斯共和國衛(wèi)生法、白俄羅斯共和國衛(wèi)生部2000年8月18日下達的第254號文件《關(guān)于藥物制劑的臨床試驗》，在白俄羅斯共和國國家傳染病院(明斯克市)進行了該藥劑的臨床試驗。在藥物開始作用之后，經(jīng)過7、28、35、65天確定了治療效果。膽固醇的標(biāo)準(zhǔn)水平是
5.2毫摩/升以內(nèi)(見《內(nèi)臟器官疾病治療/實踐指導(dǎo)資料》，作者A. H.奧克洛科夫，明斯克市，最高學(xué)府出版社，維捷布斯科市，白俄羅斯醫(yī)學(xué)書籍出版社-1996年，第三卷，第一部分，19-41頁)，臨界水平是5. 2-6. 2毫摩/升，超過6. 2毫摩/升屬于高水平。膽固醇水平的修正結(jié)果顯示在表格I中表格I :修正效果(n = 20人)
權(quán)利要求
1.一種制劑在制備調(diào)節(jié)膽固醇藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述制劑含有化學(xué)活性成份和目標(biāo)添加劑，所述活性成份是36. 5-40%濃度的甲醛水溶液，所述目標(biāo)添加劑是0.85-0. 95%的等滲氯化鈉溶液，其中甲醛水溶液的重量份數(shù)為2-6，等滲氯化鈉溶液的重量份數(shù)為994-998。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述調(diào)節(jié)膽固醇藥物為治療中度膽固醇血癥的藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述調(diào)節(jié)膽固醇藥物為治療重度膽固醇血癥的藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述制劑的制備方法包括將2-6重量份數(shù) 的36. 5-40%濃度的甲醛水溶液添加到994-998重量份數(shù)的等滲氯化鈉溶液中獲得濃度為0.07-0. 24%的甲醛溶液的步驟。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制劑在制備調(diào)節(jié)膽固醇藥物中的應(yīng)用，所述制劑含有化學(xué)活性成份和目標(biāo)添加劑，所述活性成份是36.5-40％濃度的甲醛水溶液，所述目標(biāo)添加劑是0.85-0.95％的等滲氯化鈉溶液，其中甲醛水溶液的重量份數(shù)為2-6，等滲氯化鈉溶液的重量份數(shù)為994-998。
文檔編號A61K31/115GK102727472SQ20121018015
公開日2012年10月17日 申請日期2008年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月4日
發(fā)明者亞歷山大·尼古拉耶維奇·紹欣, 弗拉季斯拉夫·尼古拉耶維奇·拉斯卡維, 謝爾蓋·伊萬諾維奇·伊萬年科 申請人:亞歷山大·尼古拉耶維奇·紹欣, 弗拉季斯拉夫·尼古拉耶維奇·拉斯卡維, 謝爾蓋·伊萬諾維奇·伊萬年科