專利名稱：一種復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種抗高血壓藥物芹菜素的新劑型，特別涉及一種復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物。
背景技術(shù)：
芹菜素的化學(xué)結(jié)構(gòu)為4，5，7_三羥黃酮，其4，5，7 位置的三個(gè)羥基和C2C3雙鍵決定了其獨(dú)特的藥理學(xué)效應(yīng)和生物學(xué)特性。芹菜素來源傘形科植物旱芹(Apiumgraveolens var. dulce)葉；卷柏科卷柏(Selaginella tamariscina)全草；柏科圓柏(Sabina chinensis)葉。Zhang等發(fā)現(xiàn)，芹菜素在濃度大于I時(shí)對(duì)由高K引起去除內(nèi)皮細(xì)胞的小鼠主動(dòng)脈環(huán)收縮有明顯松弛作用[IC5tl為(12.0±1. I) μΜ]。苯腎上腺素對(duì)無論有無內(nèi)皮細(xì)胞的離體主動(dòng)脈環(huán)都有穩(wěn)定的收縮作用，芹菜素以劑量(I 12.5μΜ)依賴方式對(duì)由苯腎上腺素引起的主動(dòng)脈環(huán)收縮產(chǎn)生松弛作用，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞完整的主動(dòng)脈環(huán)松弛作用的IC5tl為(3. 7±0. 5)，對(duì)去除內(nèi)皮細(xì)胞的主動(dòng)脈環(huán)松弛作用的IC5tl為(8. 2+0. 9) OM，撤除芹菜素后苯腎上腺素引起的收縮作用可以完全恢復(fù)。芹菜素還以劑量依賴方式抑制由12，13-二丁酸佛波醇引起去除內(nèi)皮細(xì)胞的主動(dòng)脈環(huán)收縮[IC5tl為(34.6±1.2)]。在加入芹菜素30min后，由乙酰膽堿引起的血管松弛明顯加強(qiáng)[5μΜ芹菜素的IC5o為(O. 12±0.07)μΜ，
2.5μ M芹菜素的IC5tl為(0.68±0.24)]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，芹菜素抑制由苯腎上腺素和高K引起的血管收縮，而對(duì)佛波醇引起血管收縮的舒張作用較弱。芹菜素可能不影響蛋白激酶C介導(dǎo)的血管收縮作用，而是誘導(dǎo)生成某種內(nèi)皮細(xì)胞源性刺激因子，從而產(chǎn)生內(nèi)皮細(xì)胞依賴的血管松弛作用。經(jīng)研究，芹菜素有保護(hù)心臟的作用以及治療帕金森氏癥的功效?，F(xiàn)代芹菜品種是從原產(chǎn)地中海沼澤地區(qū)的野生種馴化而來。野生芹菜的莖，葉含蛋白質(zhì)成分，遠(yuǎn)超過栽培品種的芹菜。野生芹菜首先被應(yīng)用在醫(yī)學(xué)上，在公元前九世紀(jì)荷馬史詩〈〈奧德賽》中首次提至IJ。中國(guó)人是在公元七世紀(jì)，從尼泊爾統(tǒng)治者送來的禮品中得到了芹菜這種植物。然而，直至中世紀(jì)，芹菜才作為蔬菜廣泛食用。大約在十八世紀(jì)在歐洲開始被用作生蔬菜食用，十九世紀(jì)初引到美國(guó)。中華大地的芹菜分為旱芹和水芹。旱芹生于旱地；水芹營(yíng)養(yǎng)豐富，清香撲鼻。旱芹口感較差，但藥用功能較強(qiáng)，如脾胃虛弱。芹菜應(yīng)盡可能的食用葉子，因?yàn)槿~子中礦物質(zhì)、維生素的含量，明顯的較葉柄中的含量要豐富的多。葉柄含水份高，熱量低(17千卡/IOOg);種子含蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、鈣、磷、鎂、鉀、鐵和鋅，熱量高(392千卡/100克)。芹菜中還含有芹菜元，佛手苷內(nèi)酯、糖類、有機(jī)酸等，含有的揮發(fā)油中有一種α-芹子烯，對(duì)人腦中樞神經(jīng)有安定和抗痙攣?zhàn)饔?；揮發(fā)油中另一種叫丁基苯酸是旱芹菜特殊氣味的來源。水芹中含有多種游離氨基酸、芳香油、甘露糖及多種維生素，常食不但可增進(jìn)食欲，還有促進(jìn)血液循環(huán)和健腦作用。芹菜在歐美，認(rèn)為可消除水腫，因?yàn)槌粤饲鄄擞欣蜃饔?。芹菜中有重要成分芹菜元，又叫芹菜素，能降壓和影響中樞神?jīng)。關(guān)于降壓機(jī)制，初步認(rèn)為是透過頭動(dòng)脈體和主動(dòng)脈弓的化學(xué)感受器的反射作用而引起的。血管灌輸試驗(yàn)，證明芹菜元還有一定的擴(kuò)張末梢血管的作用，這與降壓作用也有一定關(guān)系。灌胃芹菜元700mg/kg能明顯降低大鼠癲癇發(fā)作的程度和次數(shù)，延長(zhǎng)潛伏期。腦形態(tài)學(xué)研究，芹菜元對(duì)大腦頂葉皮層細(xì)胞，膠質(zhì)細(xì)胞，和小腦細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。芹菜元能對(duì)抗小鼠腹腔注射震顫素引起的中樞性震顫。大鼠口服芹菜元能對(duì)抗可卡因引起的興奮。現(xiàn)在市場(chǎng)上已有如芹菜素混懸液劑的降壓藥物，雖然口服后能從胃腸道吸收，但吸收速度慢、吸收不完全，另外片劑中藥物的溶出速率慢，生物利用度差，再加上芹菜素本身作用緩慢，使得芹菜素的藥效無法迅速得到利用。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷與不足，本發(fā)明的目的在于提供一種分布均勻，穩(wěn)定性好，生物利用度高，療效顯著的復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物。實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其粒徑在20. I 59. 7nm之間，平均粒徑為42. 7nm。各原料及其質(zhì)量百分比為
芹菜素1% 15%
表面活性劑5% 35%
助表面活性劑I % 20%
油1% 20%
茺蔚子水取物O. 5% 10%
決明子水取物O. 5 % 10 %
其余成分為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100%。以正常大鼠在給藥前后血壓變化情況，觀察茺蔚子的降壓作用?？瞻讓?duì)照組給予相應(yīng)量的蒸餾水，陽性對(duì)照組給予硝苯吡啶O. 003g/kg ;實(shí)驗(yàn)組給予茺蔚子醇提液的乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物，劑量為O. 216 g/ mL ;灌胃給藥，連續(xù)10 d;采用頸動(dòng)脈插管法，分別觀察并記錄最后I次給藥后10、20、30、45、60 min時(shí)的血壓變化。結(jié)果茺蔚子水層對(duì)正常大鼠有明顯降壓作用(P <0.05)，正丁醇層、乙酸乙酯層、乙醚層均可使正常大鼠收縮壓降低(P >0.05)，對(duì)舒張壓無明顯影響，但有一定降低趨勢(shì)。結(jié)論茺蔚子水溶性成分對(duì)正常大鼠降壓作用明顯，水層中主要含生物堿類成分，生物堿可能是茺蔚子降壓作用的主要化學(xué)成分。決明子為豆科一年生草本植物決明或小決明的干燥成熟種子。降壓作用決明子水浸液、醇-水浸液、醇浸液對(duì)麻醉犬、貓、兔等皆有降壓作用。在慢性實(shí)驗(yàn)中，煎劑每日2g(生藥)/kg，無降壓作用。決明子注射液O. 05g/100g體重靜脈注入可使自發(fā)遺傳性高血壓大鼠收縮壓明顯降低，同時(shí)也使舒張壓顯著降低，其降壓效果、降壓幅度、作用時(shí)間均優(yōu)于靜脈注射利血平O. 3mg/kg組大鼠。對(duì)高脂血癥的影響含7%決明子的高脂飲料喂養(yǎng)小鼠2星期，決明子不能影響血清總膽固醇(TC)水平，但能明顯升高血清高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)含量及提高HDL-C/TC比值，即明顯改善體內(nèi)膽固醇的分布狀況，而有利于預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化。決明子散有降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血漿總膽固醇和三酰甘油(甘油三酯)的作用，使之分別比模型組降低29%和73%，還能降低肝中三酰甘油和抑制血小板聚集的作用，其值分別比模型組降低49%和59%。有資料證明決明中蒽醌類化合物具有降血脂作用。本復(fù)方納米乳所述的表面活性劑用非離子表面活性劑聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40),蓖麻油聚氧乙烯醚 40 (EL40)、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物。這些表面活性劑對(duì)人體低毒、安全、無刺激。所述的油是大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯(IPM)或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物。安全、無毒。為了達(dá)到更好的效果，本發(fā)明在上述表面活性劑中加入助表面活性劑無水乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200 (PEG200)、聚乙二醇400 (PEG400)或聚乙二醇600(PEG600 )中的任意一種，或幾種的混合物。本發(fā)明中助表面活性劑在復(fù)方芹菜素納米乳的構(gòu)建中同樣是很好的藥物助溶劑，本發(fā)明在藥物中加入刺激性小的助表面如乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇或聚乙二醇200，聚乙二醇400，聚乙二醇600，除了助溶作用外，助表面活性劑主要是為了調(diào)整表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)，使得油水界面張力進(jìn)一步降低，增大界膜的油水性和剛性。助表面活性劑摻入到界面膜中，促進(jìn)曲率半徑很小膜的形成，擴(kuò)大復(fù)方芹菜素納米乳的乳區(qū)面積。本發(fā)明的復(fù)方芹菜素納米乳，一方面極大的提高了芹菜素的溶解度，減少了藥物在體內(nèi)的首過效應(yīng)，促進(jìn)藥物的胃腸道吸收。芹菜素在水中極難溶解，使藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)及吸收變得困難，納米乳基質(zhì)為芹菜素提供了良好的溶解環(huán)境?？诜r(shí)可經(jīng)淋巴吸收，克服首過效應(yīng)和分子通過胃腸道時(shí)的屏障；另一方面通過復(fù)配茺蔚子水提物及決明子水提物，使得本藥物降壓更平穩(wěn)，效果更持久。本發(fā)明的復(fù)方芹菜素納米乳與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)
I.本發(fā)明的芹菜素抗高血壓納米乳的藥物粒徑在20. I 59. 7nm之間，平均粒徑為42. 7nm，是將芹菜素溶于油相，加入表面活性劑和助表面活性劑，用溶解茺蔚子水提物及決明子水提物的蒸餾水滴定到均勻、透明的納米乳體系。形成的復(fù)方芹菜素納米乳含芹菜素達(dá) 6. 1%。2.本發(fā)明的芹菜素抗高血壓納米乳分布均勻，體系透明、穩(wěn)定性好，有較低的表面張力，油包水型納米乳具有良好的流動(dòng)性。3.本發(fā)明的芹菜素抗高血壓納米乳給藥后迅速被網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬，使藥物迅速起效，并維持恒定的血藥濃度及藥理效應(yīng)，提高藥物的生物利用度，減少藥物的用量和使用次數(shù)。4.本發(fā)明的芹菜素抗高血壓納米乳通過中西藥結(jié)合，發(fā)揮兩者優(yōu)點(diǎn)，一方面降壓迅速、起效快，另一剛面藥效穩(wěn)定、作用持久，符合高效安全的治療標(biāo)準(zhǔn)。5.本發(fā)明的療菜素抗高血壓納米乳藥效穩(wěn)定,生耗能低。6.本發(fā)明制成納米乳后可制成口服液直接服用、也可經(jīng)膠囊包封或經(jīng)凍干粉技術(shù)
等處理。


圖I為本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳電鏡照片。圖2為本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳粒徑分析曲線圖。
具體實(shí)施例方式發(fā)明人給出具體制備方法實(shí)施例及使用藥效試驗(yàn)來進(jìn)一步說明本發(fā)明藥物的效
果O試驗(yàn)例I本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物粒徑大小分析
本發(fā)明的最優(yōu)配比經(jīng)透射電子顯微鏡檢測(cè)(圖1)，液滴呈類球形，分散性好，無粘連；經(jīng)馬爾文粒度分析儀檢測(cè)(圖2)其直徑分布在20. I 59. Ixm之間，平均粒徑為42. 7nm。
試驗(yàn)例2本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物穩(wěn)定性分析
通過以下離心試驗(yàn)、光穩(wěn)定性試驗(yàn)、溫度穩(wěn)定性試驗(yàn)等觀察本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的穩(wěn)定性，觀察本發(fā)明是否有分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。I.高速離心試驗(yàn)
取適量制備好的本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物于離心管中，以10 000r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min，離心試驗(yàn)后，本發(fā)明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物依然保持離心前的澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。2.光穩(wěn)定性試驗(yàn)
將適量制備好的復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置于正常光照條件下10(1，分別于1(1、2(1、4(1、6(1、8(1、10(1取樣觀察。結(jié)果表明復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物每份樣品均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。3.溫度穩(wěn)定性試驗(yàn)
將適量制備好的復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明玻璃瓶中，密封，放置于4°C、室溫(25°C)和40°C三中溫度條件下留樣考察各30d，每隔5d取樣觀察。結(jié)果表明，復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物在此三種溫度條件下均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。4.長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)
將3批納米乳密封于棕色玻璃瓶?jī)?nèi)，置于(25±2)°C、相對(duì)濕度(60±5)%條件下12個(gè)月，分別于0、3、6、9和12個(gè)月時(shí)取樣，考察納米乳的性狀及含量變化，并參考文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)分析方法，計(jì)算復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的有效期。試驗(yàn)結(jié)果表明在長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下，復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的外觀一直保持澄明、均一，未見分層、色變、絮凝和破乳等現(xiàn)象；體系中的芹菜素含量隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸降低，其含量一時(shí)間變化曲線提供的線性回歸方程，計(jì)算出復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的有效期為34. 14個(gè)月。試驗(yàn)例3大鼠尾部測(cè)壓法測(cè)定復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物的藥效(與市售芹菜素混懸液對(duì)比)
SHR大鼠3只隨機(jī)分為3組，每組10只，分別設(shè)為SHR陽性對(duì)照組、芹菜素混懸液組、復(fù)方芹菜素納米乳組分別給予芹菜素混懸液、復(fù)方芹菜素納米乳各20 mg/kg*d，溶于飲水中，均從飲水中給藥，I次/d，連續(xù)14周。WKY6只為正常對(duì)照組，對(duì)照組不給藥物，飲水不
限。、
測(cè)量各組大鼠尾動(dòng)脈血壓。鼠齡為6周時(shí)(即用藥前)測(cè)壓I次，鼠齡7周(用藥后I周)測(cè)壓I次，以后每隔兩周測(cè)I次血壓，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。結(jié)果見表I。表I各組大鼠SBP的比較(x±s，n=6)_
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其特征在于，其原料及其質(zhì)量百分比為 芹菜素1% 15% 表面活性劑5% 35% 助表面活性劑I % 20%油1% 20% 茺蔚子水取物O. 5% 10% 決明子水取物O. 5 % 10 % 其余成分為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100% ； 所述的表面活性劑為聚氧乙烯醚-40氫化蓖麻油，蓖麻油聚氧乙烯醚40、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或任意一種與span80的混合物； 所述的油為大豆油、菜籽油、三乙酸甘油酯、棕櫚酸異辛酯、油酸、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯或乙酸乙酯等可食用油類中的任意一種或幾種的混合物； 所述的助表面活性劑為無水乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇200、聚乙二醇400或聚乙二醇600中的任意一種，或幾種的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其特征在于，該藥的粒徑介于20. I 59. 7nm之間。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)方芹菜素納米乳抗高血壓藥物，其原料及其質(zhì)量百分比為芹菜素1％～15％、表面活性劑5％～35％、助表面活性劑1％～20％，油1％～20％，茺蔚子水提物0.5％～10％，決明子水提物0.5％～10％，其余成分為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為100％。本納米乳乳滴顆粒小、分布均勻、粘度小、流動(dòng)性好。芹菜素制備成納米乳劑型后，明顯增加了透過血腦屏障的能力、顯著提高了原藥的生物利用度，延長(zhǎng)了藥物的半衰期，減少給藥次數(shù)；納米乳提高了芹菜素的藥物溶解及滲透能力，增加芹菜素的穩(wěn)定性；而且與茺蔚子和決明子的水提物復(fù)配后，具有明顯的協(xié)同作用，藥物療效發(fā)揮更加充分。
文檔編號(hào)A61K9/107GK102631405SQ20121014280
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月10日
發(fā)明者孫江宏, 曹統(tǒng), 歐陽五慶, 步國(guó)花 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)