專利名稱：外用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含吡咯并喹啉醌(以下有時(shí)簡稱為“PQQ”)或其生理上可接受的鹽、以及EDTA或其生理上可接受的鹽，被用作化妝品、準(zhǔn)藥物或藥物的外用組合物。
背景技術(shù)：
弾性蛋白在生物體內(nèi)，廣泛分布于韌帶、血管壁、肺、皮膚的真皮以及關(guān)節(jié)等需要伸縮性的器官。弾性蛋白起到對(duì)這些器官的組織賦予彈性的作用，在皮膚中為了保持弾力或緊致等而發(fā)揮大的作用。已知彈性蛋白由于老化、紫外線、活性氧或壓力等而其量緩慢減少。已知在皮膚中，由于彈性蛋白減少而緩慢喪失皮膚的彈性，產(chǎn)生皺紋或松弛，成為老化的ー個(gè)大原因。 作為分解而使彈性蛋白減少的彈性蛋白酶中、與存在于皮膚的真皮基質(zhì)中的彈性蛋白的分解有關(guān)的彈性蛋白酶，已知來自嗜中性粒細(xì)胞的彈性蛋白酶和來自成纖維細(xì)胞的弾性蛋白酶，其中，已知來自成纖維細(xì)胞的弾性蛋白酶對(duì)構(gòu)成與皮膚的彈性維持相關(guān)的彈性纖維的弾性蛋白進(jìn)行分解。因此，預(yù)測通過抑制其活性，能得到高的抗皺紋效果。其中，若在化妝品、藥物或食品等的組合物中混入金屬，則不僅由于金屬的種類而有害，而且不能保持例如利用羧基こ烯基聚合物等制備的洗液(lotion)狀、乳液狀或凝膠狀的組合物的性狀。因此,這些組合物中經(jīng)常配合有作為螯合劑的EDTA。此外，已知EDTA對(duì)彈性蛋白酶活性具有抑制作用(專利文獻(xiàn)I)，有時(shí)作為抗老化的活性成分添加到這些組合物中。此外，PQQ存在于動(dòng)物、植物和微生物等廣泛的生物界中，作為獲得能量所必需的氧化還原的輔酶發(fā)揮作用。已知PQQ具有很多生理活性，能期待作為藥物、化妝品或食品的有效成分的應(yīng)用。作為這種生理活性，已知活性氧及自由基的除去作用、細(xì)胞增殖促進(jìn)作用、紫外線吸收作用、神經(jīng)生長因子產(chǎn)生促進(jìn)作用、腦機(jī)能改善作用、生發(fā)作用、顔色改善作用、黑色素產(chǎn)生抑制及美白作用、線粒體活化作用以及抗疲勞作用等。專利文獻(xiàn)I :日本特開2006-298812號(hào)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供包含吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(以下有時(shí)簡稱為“其鹽”)、以及EDTA或其鹽，具有優(yōu)異的弾性蛋白酶活性抑制作用的外用組合物。 本發(fā)明人為了解決上述課題進(jìn)行研究，得到以下發(fā)現(xiàn)。(i)PQQ或其鹽具有彈性蛋白酶活性抑制作用。(ii)若在包含EDTA或其鹽的組合物中配合PQQ或其鹽，則不能得到能從各成分具有的弾性蛋白酶活性抑制作用預(yù)測程度的弾性蛋白酶活性抑制作用。反而EDTA或其鹽的弾性蛋白酶活性抑制作用衰減。(iii)在包含EDTA或其鹽以及PQQ或其鹽的組合物中進(jìn)而配合選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，使該含羥基化合物的含量相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份為5重量份以上，從而能有效地發(fā)揮EDTA或其鹽以及PQQ或其鹽分別具有的弾性蛋白酶活性抑制作用。本發(fā)明是基于上述發(fā)現(xiàn)而完成的，提供以下的外用組合物。第I項(xiàng).ー種外用組合物，包含(a)吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽、(b)EDTA或其生理上可接受的鹽、以及(c)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a) I重量份，含羥基化合物(c)的含量為5重量份以上。第2項(xiàng).如第I項(xiàng)所述的外用組合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a) I重量份，含有O. 00001 500重量份的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。第3項(xiàng).如第I項(xiàng)或第2項(xiàng)所述的外用組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有 O. 00001 10重量％的吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a)。第4項(xiàng).如第I項(xiàng) 第3項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的外用組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O. 0001 3重量％的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。第5項(xiàng).如第I項(xiàng) 第4項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的外用組合物，上述含羥基化合物(c)為選自由丙ニ醇、1，3_ 丁ニ醇、ー縮ニ丙ニ醇、甘油、異戊ニ醇、雙甘油、こニ醇單甲醚和ニ甘醇單こ醚構(gòu)成的組中的至少ー種。第6項(xiàng).如第I項(xiàng) 第5項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的外用組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O. 01 97重量％的上述含羥基化合物(C)。第7項(xiàng).ー種抑制方法，通過在包含(a)吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽以及(b) EDTA或其生理上可接受的鹽的組合物中添加(c)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，抑制(a)成分與(b)成分混合導(dǎo)致的(a)成分的弾性蛋白酶活性抑制作用的降低、或者(a)成分與(b)成分混合導(dǎo)致的(b)成分的弾性蛋白酶活性抑制作用的降低。第8項(xiàng).如第7項(xiàng)所述的方法，添加有(C)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物之后的上述組合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a) I重量份，含有O. 00001 500重量份的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。第9項(xiàng).如第7項(xiàng)或第8項(xiàng)所述的方法，添加有(C)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物之后的上述組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O. 00001 10重量％的吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a)。第10項(xiàng).如第7項(xiàng) 第9項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的方法，添加有(C)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物之后的上述組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O. 0001 3重量％的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。第11項(xiàng).如第7項(xiàng) 第10項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的方法，上述含羥基化合物(C)為選自由丙ニ醇、1，3-丁ニ醇、ー縮ニ丙ニ醇、甘油、異戊ニ醇、雙甘油、こニ醇單甲醚和ニ甘醇單こ醚構(gòu)成的組中的至少ー種。
第12項(xiàng).如第7項(xiàng) 第11項(xiàng)中的任意一項(xiàng)所述的方法，將上述含羥基化合物(C)以相對(duì)于添加有(c)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物之后的上述組合物的總量的濃度為O. 01 97重量％的方式添加到上述組合物中。由于PQQ或其鹽具有多種藥理活性，能期待作為化妝品、藥物或準(zhǔn)藥物的活性成分來使用。此外，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，PQQ或其鹽具有弾性蛋白酶活性抑制作用，是對(duì)彈性蛋白的減少所導(dǎo)致的皺紋或松弛等的預(yù)防或改善有用的成分。另ー方面，EDTA或其鹽有時(shí)欲以螯合劑形式配合到化妝品、藥物或準(zhǔn)藥物中。此夕卜，已知具有弾性蛋白酶活性抑制作用，還有時(shí)為了皺紋或松弛等的預(yù)防或改 善來添加。因此，還有時(shí)欲將PQQ或其鹽和EDTA或其鹽一起配合到它們的外用組合物中，此時(shí)，能期待組合有兩者的弾性蛋白酶活性抑制作用的優(yōu)異效果。然而，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在配合有PQQ或其鹽和EDTA或其鹽的組合物中，得不到能由各成分的弾性蛋白酶活性抑制作用預(yù)測的相加效應(yīng)。此外發(fā)現(xiàn)，與単獨(dú)EDTA或其鹽的情況相比，弾性蛋白酶活性抑制作用反而變?nèi)?。本發(fā)明的組合物，除了 PQQ或其鹽以及EDTA或其鹽之外，包含選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，該含羥基化合物的含量為5重量份以上，由此能有效地發(fā)揮PQQ或其鹽以及EDTA或其鹽分別具有的弾性蛋白酶活性抑制作用。其中，能有效地發(fā)揮來自成纖維細(xì)胞的弾性蛋白酶活性抑制作用。由此，可以有效地提高皮膚的彈力，對(duì)皮膚賦予緊致或光澤，預(yù)防或改善皮膚的松弛、皺紋、皮膚粗糙或灰暗。


圖I為表示通過PQQ或其鹽與EDTA或其鹽的并用，弾性蛋白酶活性抑制作用降低的圖。圖2為表示通過ニ元醇醚添加，彈性蛋白酶活性抑制作用恢復(fù)的圖。圖3為表示通過多元醇或ニ元醇醚添加，彈性蛋白酶活性抑制作用恢復(fù)的圖。
具體實(shí)施例方式以下對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說明。本發(fā)明的外用組合物包含(a)PQQ或其鹽、(b) EDTA或其鹽、以及(C)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，相對(duì)于PQQ或其鹽(a) I重量份，含羥基化合物(C)的含量為5重量份以上。PQQ或其鹽PQQ存在于動(dòng)物、植物和微生物等多種生物體內(nèi)，因此可以從各種生物中提取。此外，PQQ可以購入市售品。作為PQQ的鹽，可以舉出鈉鹽和鉀鹽等堿金屬鹽，鈣鹽和鎂鹽等堿土類金屬鹽等。鹽中，優(yōu)選為鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和鎂鹽。相對(duì)于組合物的總量，組合物中的PQQ或其鹽的含量優(yōu)選為O. 00001重量％以上，更優(yōu)選為O. OOOl重量％以上，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 001重量％以上。此外，優(yōu)選為10重量％以下，更優(yōu)選為5重量％以下，進(jìn)ー步更優(yōu)選為I重量％以下。若在上述范圍內(nèi)，則以化妝品、準(zhǔn)藥物或藥物外用劑的通常用量就能充分得到PQQ或其鹽的生理活性。此外，若在上述范圍內(nèi)，則在制劑中的溶解性良好，此外作為外用組合物的制劑也形成優(yōu)異的制劑。此外，相對(duì)于組合物 的總量，組合物中的PQQ或其鹽的含量例如優(yōu)選為O. 00001 10重量％，更優(yōu)選為O. 0001 5重量％，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 001 I重量％。EDTA 或其鹽作為EDTA的鹽，可以舉出EDTA的Na鹽(2Na鹽、3Na鹽和4Na鹽)、K鹽(2K鹽、3K鹽和4K鹽)以及Ca.Na鹽(Ca*2Na鹽)等。它們還可以為水合物。其中，從螯合化作用高的方面考慮，優(yōu)選為EDTA的鹽，更優(yōu)選為EDTA的Na鹽和K鹽。EDTA或其鹽可以単獨(dú)使用一種或組合使用兩種以上。相對(duì)于組合物的總量，本發(fā)明的外用組合物中的EDTA或其鹽的含量優(yōu)選為O. 0001重量％以上，更優(yōu)選為O. 001重量％以上，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 01重量％以上。此外，優(yōu)選為3重量％以下，更優(yōu)選為I重量％以下，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 5重量％以下。相對(duì)于組合物的總量，本發(fā)明的外用組合物中的EDTA或其鹽的含量例如優(yōu)選為O. 0001 3重量％，更優(yōu)選為O. 001 I重量％，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 01 O. 5重量％。若EDTA或其鹽的含量在上述范圍內(nèi)，則能充分得到弾性蛋白酶活性抑制作用、螯合化作用的同時(shí)，形成不易產(chǎn)生對(duì)皮膚的刺激的組合物。此外，對(duì)于EDTA或其鹽的含量相對(duì)于PQQ或其鹽的含量的比率，相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，優(yōu)選為O. 00001重量份以上，更優(yōu)選為O. 0001重量份以上，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 001重量份以上。此外，優(yōu)選為500重量份以下，更優(yōu)選為100重量份以下，進(jìn)ー步更優(yōu)選為10重量份以下。對(duì)于EDTA或其鹽的含量相對(duì)于PQQ或其鹽的含量的比率，相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，例如優(yōu)選為O. 00001 500重量份，更優(yōu)選為O. 0001 100重量份，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 001 10重量份。若EDTA或其鹽的含量相對(duì)于PQQ或其鹽的含量的比率在上述范圍內(nèi)，則能充分得到弾性蛋白酶活性抑制作用和螯合化作用的同時(shí)，形成不易產(chǎn)生對(duì)皮膚的刺激的組合物。多元醇本發(fā)明的組合物含有多元醇作為含羥基化合物時(shí)，使用碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇。具體地說，可以舉出こニ醇、丙ニ醇、1，3_丙ニ醇(三亞甲基ニ醇)、1，2_ 丁ニ醇、1，3- 丁ニ醇、2，3- 丁ニ醇、1，4- 丁ニ醇(四亞甲基ニ醇)、2_ 丁烯-1，4- ニ醇、1，5-戊ニ醇(五亞甲基ニ醇)、1，2-戊ニ醇、異戊ニ醇(異戊基ニ醇)、己ニ醇和ー縮ニ丙ニ醇等ニ元醇，甘油和三羥甲基丙烷等三元醇，雙甘油、季戊四醇和1，2，6_己三醇等四元醇等。其中，優(yōu)選為丙ニ醇、1，3_ 丁ニ醇、ー縮ニ丙ニ醇、甘油、異戊ニ醇和雙甘油，更優(yōu)選為丙ニ醇、1，3-丁ニ醇、甘油和雙甘油。ニ元醇醚本發(fā)明的組合物含有ニ元醇醚作為含羥基化合物時(shí)，作為ニ元醇醚，具體地說，可以舉出こニ醇單甲醚、こニ醇單こ醚和こニ醇單丙醚等こニ醇類的ニ元醇醚，
ニ甘醇單甲醚、ニ甘醇單こ醚和ニ甘醇單丙醚等ニ甘醇類的ニ元醇醚，丙ニ醇單こ醚和丙ニ醇單丙醚等丙ニ醇類的ニ元醇醚，以及一縮ニ丙ニ醇單こ醚和ー縮ニ丙ニ醇單丙醚等ー縮ニ丙ニ醇類的ニ元醇醚等。其中，優(yōu)選為こニ醇類以及ニ甘醇類的ニ元醇醚，更優(yōu)選為こニ醇單甲醚和ニ甘醇單こ醚，特別優(yōu)選為ニ甘醇單こ醚。選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的含羥基化合物可以單獨(dú)使用一種或組合使用兩種以上。
_3] 多元醇· ニ元醇醚的含量相對(duì)于組合物的總量，選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元 醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物在組合物中的含量優(yōu)選為O. 01重量％以上，更優(yōu)選為O. I重量％以上,進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 5重量％以上。若在上述范圍內(nèi)，則能有效地發(fā)揮PQQ或其鹽以及EDTA或其鹽具有的彈性蛋白酶活性抑制作用。此外，相對(duì)于組合物的總量，組合物中的上述含羥基化合物的含量優(yōu)選為97重量％以下，更優(yōu)選為50重量％以下，進(jìn)ー步更優(yōu)選為30重量％以下。若在上述范圍內(nèi)，則形成良好使用感的組合物。此外，相對(duì)于組合物的總量，組合物中的上述含羥基化合物的含量例如優(yōu)選為O. 01 97重量％，更優(yōu)選為O. I 50重量％，進(jìn)ー步更優(yōu)選為O. 5 30重量％。多元醇· ニ元醇醚相對(duì)于PQQ或其鹽的比率相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物的總量為5重量份以上即可。此外，優(yōu)選為10重量份以上，更優(yōu)選為20重量份以上。若在上述范圍內(nèi)，則能有效地發(fā)揮PQQ或其鹽以及EDTA或其鹽具有的弾性蛋白酶活性抑制作用。此外，對(duì)上述含羥基化合物的總量不特別限制，然而相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，優(yōu)選為800重量份以下，更優(yōu)選為500重量份以下，進(jìn)ー步更優(yōu)選為300重量份以下。若在上述范圍內(nèi)，則能有效地發(fā)揮PQQ或其鹽以及EDTA或其鹽具有的彈性蛋白酶活性抑制作用，此外能得到良好的使用感。相對(duì)于PQQ或其鹽I重量份，選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物的總量例如優(yōu)選為5重量份 800重量份，更優(yōu)選為10 500重量份，進(jìn)ー步更優(yōu)選為20 300重量份。制劑形杰本發(fā)明的外用組合物可以將PQQ或其鹽、EDTA或其鹽以及上述多元醇和/或ニ元醇醚與藥物、準(zhǔn)藥物或化妝品中通常使用的基劑或載體以及根據(jù)需要的添加劑一起混合，從而可以形成藥物、準(zhǔn)藥物或化妝品用的皮膚外用組合物。對(duì)藥物用的皮膚外用組合物的形態(tài)不特別限定，可以舉出例如液體劑、懸浮劑、乳齊U、霜?jiǎng)?、軟膏劑、凝膠劑、搽劑、洗劑和氣霧劑等。這些制劑可以根據(jù)第15次修改日本藥典制劑總則中記載的方法等進(jìn)行制備。其中，優(yōu)選為液體劑、懸浮劑、乳剤、霜?jiǎng)?、軟膏劑、凝膠劑、洗劑和氣霧劑，更優(yōu)選為霜?jiǎng)?、乳劑和凝膠劑。形成準(zhǔn)藥物或化妝品用的皮膚外用組合物時(shí)，可以形成與上述藥物相同的形態(tài)。除此之外，可以舉出粘著劑和使藥液浸滲到無紡布中而成的片狀制劑等。其中，優(yōu)選為液體劑、懸浮劑、乳劑、霜?jiǎng)?、軟膏劑、凝膠劑、洗劑和片狀制劑，更優(yōu)選為霜?jiǎng)?、乳劑和凝膠劑。如霜?jiǎng)┖腿閯┠菢樱杏托曰鶆┖退曰鶆r(shí)，可以為W/0型或0/W型，優(yōu)選為
0/W 型。不含有水的基劑的情況下，優(yōu)選為軟膏劑以及含有上述說明的多元醇和/或ニ元醇醚作為基劑的液體劑。作為形成準(zhǔn)藥物或化妝品用的皮膚外用組合物時(shí)的用途，具體地說，可以舉出例如化妝水、乳液、凝膠、乳霜、美容液、防曬用化妝品、面膜、護(hù)膚膜、護(hù)手霜、潤膚露和潤膚霜等基礎(chǔ)化妝品，洗面奶、卸妝品、剃須劑、沐浴液、洗發(fā)水、護(hù)發(fā)素和護(hù)理液(treatment)等洗滌用化妝品，潤唇膏和ロ紅等ロ唇用化妝品，粉底和睫毛膏等彩妝化妝品，脫毛劑以及沐浴劑等。
基劑或載體作為基劑或載體，可以舉出例如液體石蠟、角鯊?fù)椤⒎彩苛?、膠態(tài)烴(液體石臘和聚こ烯的復(fù)合軟膏基質(zhì)(プラスチベース)等)、地蠟、α-烯經(jīng)低聚物和輕質(zhì)液體石蠟等烴，甲基聚硅氧烷、交聯(lián)型甲基聚硅氧烷、高聚甲基聚硅氧烷、環(huán)狀硅氧烷、烷基改性硅氧烷、交聯(lián)型烷基改性硅氧烷、氨基改性硅氧烷、聚醚改性硅氧烷、聚甘油改性硅氧烷、交聯(lián)型聚醚改性硅氧烷、交聯(lián)型烷基聚醚改性硅氧烷、硅氧烷·烷基鏈共改性聚醚改性硅氧烷、硅氧烷·烷基鏈共改性聚甘油改性硅氧烷、聚醚改性支鏈硅氧烷、聚甘油改性支鏈硅氧烷、丙烯酸硅、苯基改性硅氧烷和硅氧烷樹脂等硅油，鯨蠟醇、十六醇十八醇混合物、硬脂醇和二十ニ烷醇等高級(jí)醇，膽留醇、植物留醇和植物留醇羥基硬脂酸酯等留醇類，霍霍巴油、繡線菊籽油、向日葵油、葡萄籽油、椿油、角鯊?fù)?、牛油果油和米胚芽油等植物油，羊毛脂、大西洋胄胸鯛油、角鯊?fù)楹婉R油等動(dòng)物油，こ基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、陽離子化瓜爾膠和こ?；该髻|(zhì)酸等天然高分子衍生物，聚こ烯吡咯烷酮、羧基こ烯基聚合物和丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯共聚物等合成高分子，角叉菜膠、海藻酸、纖維素、瓜爾膠、榲槨籽、糊精、茱萸烷膠和透明質(zhì)酸等天然高分子，聚こ烯醇縮丁醛，聚こニ醇，ニ嚅烷，丁ニ醇己ニ酸聚酷，肉豆蘧酸異丙酷、肉豆蘧酸辛基十二烷基酯、棕櫚酸異丙酯、棕櫚酸鯨蠟酯、異壬酸異壬酯、四(2-こ基己酸)季戊四醇酯、霍霍巴油和三(辛酸/癸酸)甘油酯等酯類，糊精和麥芽糊精等多糖類，こ醇和異丙醇等低級(jí)醇，上述說明的碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇，上述說明的ニ元醇醚，琥珀酸、こ醇酸、葡糖酸和檸檬酸等有機(jī)酸，以及水等水性基劑等。
其中，優(yōu)選多元醇、高級(jí)醇、烴、酯類、硅油和有機(jī)酸，更優(yōu)選為多元醇。作為本發(fā)明組合物的優(yōu)選例子，可以舉出含有上述說明的多元醇作為基劑的液體劑、洗劑、霜?jiǎng)?、凝膠劑和乳劑?；鶆┗蜉d體可以單獨(dú)使用ー種或者組合使用兩種以上。添加劑本發(fā)明的外用組合物中，在不損害本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，可以添加藥物、準(zhǔn)藥物或化妝品中可添加的公知的添加剤，可以添加例如抗氧化劑、表面活性剤、增稠劑、保存劑、PH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、抗刺激劑、防腐剤、著色劑、香料和珠光劑等。作為抗氧化劑，可以舉出例如ニ丁基羥基甲苯、丁基羥基茴香醚、山梨酸、亞硫酸鈉、抗壞血酸、抗壞血酸衍生物、生育酚、生育酚衍生物、異抗壞血酸和L-半胱氨酸鹽酸鹽坐寸O作為表面活性剤，可以舉出例如脫水山梨糖醇單異硬脂酸酷、脫水山梨糖醇單月桂酸酷、脫水山梨糖醇單棕櫚酸酯、脫水山梨糖醇單硬脂酸酷、脫水山梨糖醇五(2-こ基己酸)雙甘油酯和脫水山梨糖醇四(2-こ基己酸)雙甘油酯等脫水山梨糖醇脂肪酸酯類，丙ニ醇單硬脂酸酯等丙ニ醇脂肪酸酯類，聚氧こ烯氫化蓖麻油40 (HC0-40)、聚氧こ烯氫化蓖麻油50(HC0-50)、聚氧こ烯氫化蓖麻油60(HC0-60)和聚氧こ烯氫化蓖麻油80等氫化蓖麻油衍生物，聚氧こ烯(20)脫水山梨糖醇單月桂酸酷(聚山梨醇酯20)、聚氧こ烯(20)脫水山梨糖醇單硬脂酸酯(聚山梨醇酯60)、聚氧こ烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯(聚山梨醇酷80)和聚氧こ烯(20)脫水山梨糖醇異硬脂酸酯等聚氧こ烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯類，聚氧こ烯單椰油脂肪酸甘油酷，甘油烷基醚，烷基葡萄糖苷，聚氧こ烯鯨蠟基醚等聚氧化烯烷基醚，硬脂胺和油胺等胺類，聚氧こ烯·甲基聚硅氧烷共聚物、月桂基PEG-9聚ニ甲基硅氧基こ基聚ニ甲基硅氧烷和PEG-9聚ニ甲基硅氧基こ基聚ニ甲基硅氧烷等硅氧烷類表面活性劑，磷脂、莎梵婷(Surfactin)和皂角苷等天然表面活性剤，硬脂酸ニこ基氨基こ基酰胺和硬脂酸ニこ基氨基丙基酰胺等脂肪酰胺胺，三月桂基胺、ニ甲基硬脂基胺和ニ -2-こ基己基胺等烷基胺，硬脂酸ニ甲基氨基丙基酰胺和月桂基羥基磺基甜菜堿等甜菜堿類兩性表面活性劑等。作為增稠劑，可以舉出例如瓜爾膠、槐豆膠、角叉菜膠、透明質(zhì)酸、黃原膠、聚こ烯醇、聚こ烯基吡咯烷酮、羧基こ烯基聚合物、丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯共聚物、聚こニ醇、膨潤土、海藻酸、聚こ烯ニ醇、軟骨素硫酸鈉、甲基纖維素、こ基纖維素、羥こ基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素和羧こ基纖維素等纖維素類增稠劑等。作為防腐劑或保存劑，可以舉出例如苯甲酸、苯甲酸鈉、脫氫こ酸、脫氫こ酸鈉、對(duì)羥基苯甲酸異丁酯、對(duì)羥基苯甲酸異丙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酷、對(duì)羥基苯甲酸こ酷、對(duì)羥基苯甲酸丙酷、對(duì)羥基苯甲酸芐酯、對(duì)羥基苯甲酸甲酷、苯氧基こ醇、苯甲醇、氯丁醇、山梨酸及其鹽、葡糖酸氯己定、烷烴ニ醇和甘油脂肪酸酷等。作為pH調(diào)節(jié)劑，可以舉出例如無機(jī)酸(鹽酸和硫酸等)、有機(jī)酸(乳酸、乳酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、琥珀酸和琥珀酸鈉等)、無機(jī)堿(氫氧化鉀和氫氧化鈉等)以及有機(jī)堿(三こ醇胺、ニ異丙醇胺和三異丙醇胺等)等。作為穩(wěn)定劑，可以舉出例如聚丙烯酸鈉、ニ丁基羥基甲苯和丁基羥基茴香醚等。作為抗刺激劑，可以舉出例如甘草提取物和海藻酸鈉等。添加劑可以単獨(dú)使用ー種或者組合使用兩種以上。其它的活件成分本發(fā)明的外用組合物在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，可以包含其它有效成分。作為有效成分的具體例，可以舉出例如保濕成分、抗炎成分、抗菌成分、維生素類、肽或其衍生物、氨基酸或其衍生物、細(xì)胞賦活成分、抗老化成分、促進(jìn)血液循環(huán)成分、角質(zhì)軟化成分、美白成分、收斂成分和紫外線防御成分等。
作為保濕成分，可以舉出例如甘油、1，3-丁ニ醇、丙ニ醇、聚こニ醇和雙甘油海藻糖等多元醇，透明質(zhì)酸鈉、肝素類似物質(zhì)、軟骨素硫酸鈉、膠原、弾性蛋白、角蛋白、甲殼質(zhì)和脫こ酰殼多糖等高分子化合物，甘氨酸、天冬氨酸和精氨酸等氨基酸，乳酸鈉、尿素和吡咯烷酮羧酸鈉等天然保濕因子，神經(jīng)酰胺、膽留醇和磷脂等脂質(zhì)，春黃菊提取物、北美金縷梅提取物、茶提取物和紫蘇提取物等植物提取物等。作為抗炎成分，可以舉出例如來源于植物(例如聚合草)的成分，尿囊素、甘草酸或其衍生物、氧化鋅、鹽酸吡哆醇、生育酚こ酸酷、水楊酸或其衍生物以及ε -氨基己酸等。作為抗菌或殺菌成分，可以舉出例如氯己啶、水楊酸、苯扎氯銨、利凡諾、碘、間苯ニ酚、こ醇、芐索氯銨、阿達(dá)帕林、過氧化苯甲酰、克林達(dá)霉素、甲酚、葡萄糖酸及其衍生物、聚維酮碘、碘化鉀、碘、異丙基甲基苯酚、三氯卡班、三氯生、感光素101號(hào)、感光素201號(hào)、對(duì)羥基苯甲酸酷、苯氧基こ醇、1，2-戊ニ醇、烷烴ニ醇、甘油脂肪酸酷、壬ニ酸、鹽酸烷基ニ氨基甘氨酸、葡糖酸氯己定和堆苯酚磺酸鋅等。作為維生素類，可以舉出例如視黃醇、視黃醇こ酸酯和視黃醇棕櫚酸酯等視黃醇衍生物、視黃醛、視黃酸、視黃酸甲酷、視黃酸こ酷、視黃醇視黃酸酷、d- δ -生育酚視黃酸酷、α -生育酚視黃酸酯和β -生育酚視黃酸酯等維生素A類，dl- α -生育酚、dl- α -生育 酚こ酸酷、dl- α -生育酚琥珀酸酷和dl- α -生育酚琥珀酸鈣等維生素E類，核黃素、黃素單核苷酸、黃素腺嘌呤二核苷酸、核黃素丁酸酷、核黃素四丁酸酷、核黃素5’ -磷酸酯鈉和核黃素四煙酸酯等維生素Β2類，dl-α -生育酚煙酸酷、煙酸苯甲酷、煙酸甲酷、煙酸β - 丁氧基こ酯和煙酸1-(4-甲基苯基)こ酯等煙酸類，抗壞血酸原-A、抗壞血酸硬脂酸酷、抗壞血酸棕櫚酸酯和L-抗壞血酸ニ棕櫚酸酯等維生素C類，甲基橙皮苷、麥角骨化醇和膽鈣骨化醇等維生素D類，葉綠醌和法呢醌等維生素K類，ニ苯甲酰硫胺素、ニ苯甲酰硫胺素鹽酸鹽、硫胺素鹽酸鹽、硫胺素鯨蠟基鹽酸鹽、硫胺素硫氰酸鹽、硫胺素月桂基鹽酸鹽、硫胺素硝酸鹽、硫胺素單磷酸鹽、硫胺素賴氨酸鹽、硫胺素三磷酸鹽、硫胺素單磷酸酯磷酸鹽、硫胺素單磷酸酯、硫胺素ニ磷酸酯、硫胺素ニ磷酸酯鹽酸鹽、硫胺素三磷酸酯和硫胺素三磷酸酯單磷酸鹽等維生素B I類，鹽酸吡哆醇、こ酸吡哆醇、鹽酸吡哆醛、5’-磷酸吡哆醛和鹽酸吡哆胺等維生素B6類、氰鈷胺、羥鈷胺和脫氧腺苷鈷胺等維生素B 12類，葉酸和蝶酰谷氨酸等葉酸類，煙酸和煙酰胺等煙酸類，泛酸、泛酸鈣、泛醇(panthenol)、D-泛酰巰基こ胺、D-泛硫こ胺、輔酶A和泛醇こ醚等泛酸類，生物素和生物胞素等生物素類，抗壞血酸、抗壞血酸鈉、脫氫抗壞血酸、抗壞血酸磷酸酯鈉和抗壞血酸磷酸酯鎂等抗壞血酸衍生物的維生素C類，以及Y-谷維醇、肉堿、阿魏酸、α-硫辛酸和乳清酸等維生素樣作用因子等。作為肽或其衍生物，可以舉出例如角蛋白分解肽、水解角蛋白、膠原、來自魚的膠原、缺端膠原、明膠、弾性蛋白、弾性蛋白分解肽、膠原分解肽、水解膠原、羥丙基氯化銨水解膠原、弾性蛋白分解肽、貝殼硬蛋白分解肽、水解貝殼硬蛋白、乳蛋白分解肽、水解乳蛋白、月桂酰水解乳蛋白鈉、大豆蛋白分解肽、水解大豆蛋白、小麥蛋白、小麥蛋白分解肽、水解小麥蛋白、酪蛋白分解肽以及酰化肽(棕櫚酰低聚肽、棕櫚?；咫暮妥貦磅；碾牡?等。作為氨基酸或其衍生物，可以舉出例如甜菜堿(三甲基甘氨酸)、脯氨酸、羥脯氨酸、精氨酸、賴氨酸、絲氨酸、氨基こ酸、丙氨酸、苯基丙氨酸、β -丙氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、組氨酸、?；撬?、Y-氨基丁酸、Y-氨基-β-羥基丁酸、肉毒堿、肌肽和肌酸等。作為細(xì)胞賦活成分，可以舉出例如Y-氨基丁酸和ε -氨基己酸等氨基酸類，視黃醇、硫胺、核黃素、鹽酸吡哆醇和泛酸類等維生素類，こ醇酸和乳酸等α-羥基酸類，單寧，類黃酮，皂角苷，尿囊素和感光素301號(hào)等。
作為抗老化成分，可以舉出例如潘氨酸、激動(dòng)素、熊果酸、姜黃提取物、鞘氨醇衍生物、硅、硅酸、N-甲基-L-絲氨酸和甲羥戊酸內(nèi)酯等。作為促進(jìn)血液循環(huán)作用成分，可以舉出例如來源于植物(例如人參、明日葉、山金車、銀杏、茴香、藍(lán)萼香茶菜(ヱンメイソウ)、オランダカシ、洋甘菊、羅馬洋甘菊、胡蘿卜、龍膽、牛蒡、稻、山楂、香 、銳刺山楂、歐洲刺柏、川；、日本猜牙菜、百里香、丁香、陳皮、當(dāng)歸、桃仁、橘皮、胡蘿卜、大蒜、假葉樹、葡萄、牡丹、七葉樹、香蜂草、柚子、薏苡仁、迷迭香、玫瑰果、陳皮、當(dāng)歸、橘皮、桃、杏、核桃或玉米)的成分以及葡糖基橙皮苷等。作為角質(zhì)軟化成分，可以舉出例如尿素、水楊酸、こ醇酸、果酸、植酸和碘等。作為美白成分，可以舉出例如抗壞血酸及其衍生物、熊果苷、生育酚和凝血酸等。作為收斂成分，可以舉出例如對(duì)苯酚磺酸鋅、氧化鋅、薄荷醇和こ醇等。
作為紫外線防御成分，可以舉出例如對(duì)甲氧基肉桂酸2-こ基己酷、2-[4_( ニこ氨基)-2-輕基苯甲?；鵠苯甲酸己酷、2,4,6-三[4-(2-こ基己氧羰基)苯胺基]-1,3,5-三嗪、叔丁基甲氧基ニ苯甲?；淄?、ニ亞芐基氧代咪唑烷丙酸こ基己酷、こ基己基三嗪酮、對(duì)氨基苯甲酸及其衍生物、對(duì)ニ甲基氨基苯甲酸辛酷、水楊酸こニ醇酯、ニ羥基ニ苯甲酮、氧化鈦和氧化鋅等。其它的有效成分可以單獨(dú)使用一種或組合使用兩種以上。使用方法本發(fā)明的外用組合物根據(jù)使用對(duì)象的皮膚的狀態(tài)、年齡或性別等不同而不同，然而例如若為以下的方法即可。即，對(duì)皮膚I天數(shù)次(例如I 5次、優(yōu)選I 3次)涂布適量(例如O. 05 5g)即可。此外，PQQ或其鹽的I天用量例如以O(shè). 0005 O. 05g、優(yōu)選O. 001 O. 02g、更優(yōu)選O. 002 O. Olg來涂布組合物即可。此外，涂布時(shí)間例如為I 6個(gè)月、優(yōu)選3 6個(gè)月即可。本發(fā)明的外用組合物可以適用于具有皮膚的松弛、皺紋、皮膚粗糙或灰暗的人。此夕卜，可以適用于期待PQQ或其鹽的生理活性，具有各種皮膚疾病或皮膚問題的人。此外，為了預(yù)防皮膚問題，具有正常皮膚的人也成為適合的使用対象。甚它本發(fā)明包含ー種抑制方法，通過在包含(a) PQQ或其鹽以及(b) EDTA或其鹽的組合物中添加(c)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，抑制(a)成分與(b)成分混合導(dǎo)致的(a)成分的弾性蛋白酶活性抑制作用的降低、或者(a)成分與(b)成分混合導(dǎo)致的(b)成分的弾性蛋白酶活性抑制作用的降低。該方法中的(a)成分、(b)成分和(C)成分的具體例，(a)成分、(b)成分和(c)成分的優(yōu)選例，(a)成分、(b)成分和(C)成分的用量，(a)成分、(b)成分和(C)成分的使用比率，組合物中可以含有的基劑或載體，組合物中可以含有的添加劑，組合物中可以含有的其它有效成分以及組合物的制劑形態(tài)等如對(duì)本發(fā)明的外用組合物說明所述。[實(shí)施例]以下舉出實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體的說明，但是本發(fā)明不被這些實(shí)施例所限定。(I)弾性蛋白酶活性抑制效果的試驗(yàn)方法
如下所述對(duì)來自人成纖維細(xì)胞的彈性蛋白酶活性抑制率進(jìn)行試驗(yàn)。使用含有10%胎牛血清的極限必需培養(yǎng)基(DMEM)將來自正常成人的皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF、クラボゥ社制)以2X IO4細(xì)胞/孔的密度接種到細(xì)胞培養(yǎng)用的96孔微孔板(Corning)，在37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。除去培養(yǎng)上清后，添加50 μ I的O. 5%Triton X-100水溶液，使用在室溫下靜置30分鐘的液體作為粗酶液。向各孔內(nèi)的粗酶液(50 μ I)中添加溶解有EDTA · 2Na (和光純藥エ業(yè))、PQQ · 2Na等ー種或兩種以上的成分的O. IM Tris鹽酸緩沖液(pH8. O)溶液50 μ I。進(jìn)ー步地，將包含I. 5mM的PMSF和5mM的弾性蛋白酶合成基質(zhì)琥珀酰-丙氨酰-丙氨酰-丙氨酰-對(duì)硝基苯胺(ぺプチド研究所制)的O. IM Tris鹽酸緩沖溶液(pH 8. O) 100 μ I添加到各孔內(nèi)，使孔內(nèi)總量為200μ 1，在37°C下于暗處靜置2小吋。使用吸光光度計(jì)對(duì)來自成纖維細(xì)胞的弾性蛋白酶水解產(chǎn)生的對(duì)硝基苯胺形成的405nm的吸光度進(jìn)行測定。 未添加受試藥劑(僅緩沖液)時(shí)的吸光度的值設(shè)為C’，添加受試藥劑時(shí)的吸光度的值設(shè)為S’，由下式算出弾性蛋白酶抑制率。來自成纖維細(xì)胞的弾性蛋白酶抑制率) = (1_(S’ /C’ )) XlOO(2)由于PQQ或其鹽.與EDTA或其鹽.的并用導(dǎo)致的弾性蛋白_活性抑制作用的降低制備下述表I所示組成的試驗(yàn)液，如(I)所述算出弾性蛋白酶活性抑制率。參考例I的EDTA-2Na的彈性蛋白酶活性抑制率為100時(shí)的相對(duì)值如表I和圖I的㈧、⑶。[表I]
權(quán)利要求
1.ー種外用組合物，包含(a)吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽、(b)EDTA或其生理上可接受的鹽、以及(c)選自由碳原子數(shù)為2 6、羥基數(shù)為2 4的多元醇和ニ元醇醚構(gòu)成的組中的至少ー種含羥基化合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a) I重量份，含羥基化合物(c)的含量為5重量份以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的外用組合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a) I重量份，含有O. OOOOl 500重量份的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的外用組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O.00001 10重量％的吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a)。
4.根據(jù)權(quán)利要求I 3中的任意一項(xiàng)所述的外用組合物，相對(duì)于組合物的總量，含有O.0001 3重量％的EDTA或其生理上可接受的鹽(b)。
5.根據(jù)權(quán)利要求I 4中的任意一項(xiàng)所述的外用組合物，上述含羥基化合物(c)為選自由丙ニ醇、1，3-丁ニ醇、ー縮ニ丙ニ醇、甘油、異戊ニ醇、雙甘油、こニ醇單甲醚和ニ甘醇單こ醚構(gòu)成的組中的至少ー種。
全文摘要
本發(fā)明提供一種外用組合物，包含(a)吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽、(b)EDTA或其生理上可接受的鹽、以及(c)選自由碳原子數(shù)為2～6、羥基數(shù)為2～4的多元醇和二元醇醚構(gòu)成的組中的至少一種含羥基化合物，相對(duì)于吡咯并喹啉醌或其生理上可接受的鹽(a)1重量份，含羥基化合物(c)的含量為5重量份以上。
文檔編號(hào)A61K31/4745GK102688155SQ201210068430
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月23日
發(fā)明者辻雅夫 申請(qǐng)人:日本樂敦制藥株式會(huì)社