專利名稱：牛樟芝萃取濃縮物及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種牛樟芝萃取濃縮方法及其萃取濃縮物，特別涉及一種用以提升有效抑制癌細(xì)胞活性成分的牛樟芝萃取濃縮方法及其牛樟芝萃取濃縮物。
背景技術(shù)：
牛樟芝(Antrodia cinnamomea)是中國(guó)臺(tái)灣特有真菌,屬真菌分類學(xué)中擔(dān)子菌亞門(mén)(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、非裙菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科(Polyporaceae)、薄孔菌屬(Antrodia)的多年生菌類,僅生長(zhǎng)于中國(guó)臺(tái)灣特有牛樟樹(shù)(Cinnamomum kanehirai)的中空芯材內(nèi)壁，其子實(shí)體為一年生至多年生，呈鮮紅色、橘紅色或淡肉桂色，具有樟樹(shù)香氣。牛樟芝是具有廣泛生理活性的藥用真菌，其具有治療癌癥、提高免疫力、抗氧化、消炎及抗菌等功能，牛樟芝包含有三職類化合物(Tritepeenoids)、多醣體(Poly-saccharides)及β-葡聚糖(β-glucan)等,其中，該三職類化合物為牛樟芝所含有用以抑制癌細(xì)胞的主要活性成分，然而，由于牛樟芝中的三萜類化合物含量極低，粗略估計(jì)三萜類化合物僅占牛樟芝子實(shí)體中重量百分比不到3%，因此，萃取或分離該牛樟芝中的三萜類化合物并不容易，欲獲取牛樟芝三萜類成分時(shí)，僅能將牛樟芝子實(shí)體磨粉打錠服用，以直接攝取牛樟芝子實(shí)體所含有三萜類化合物，避免三萜類化合物因萃取或分離的操作步驟而流失。請(qǐng)參照中國(guó)臺(tái)灣公告第1352612號(hào)“分段式樟芝萃取方法”專利，如圖1所示，提供一種提高牛樟芝萃取物中的特定生理活性成分含量的樟芝萃取方法，包含:有機(jī)萃取步驟S91，是將樟芝干燥顆粒浸泡于酒精溶液中，并得到有機(jī)萃取溶液及經(jīng)有機(jī)萃取后的樟芝萃余物，以及水溶性萃取步驟 S92，是將該樟芝萃余物浸泡于酸性水溶液中，從而得到水溶性萃取溶液，分別將該有機(jī)萃取溶液及該水溶性萃取溶液冷凍干燥后，獲得有機(jī)萃取物及水溶性萃取物，其包含有較高含量的多醣體或β-葡聚糖。然而，該專利案所揭示的樟芝萃取方法，是提高該兩種萃取物中多醣體或β -葡聚糖含量，該專利案仍無(wú)法用以分離其他如三萜類化合物的特定生理活性成分，以提供特定生理活性成分的攝取。由上述可知，因牛樟芝所含生理活性成分種類繁多且各成分含量低，故不易以現(xiàn)有技術(shù)的萃取方法獲得其特定生理活性成分，也無(wú)法對(duì)現(xiàn)有萃取方法所獲得的萃取物加以分離或純化。此外，現(xiàn)有萃取方法或上述專利案所揭示的萃取方法都是對(duì)牛樟芝進(jìn)行批次式萃取，其所獲得萃取物中的特定生理活性成分含量有限，因此無(wú)法應(yīng)用于工業(yè)化連續(xù)式大規(guī)模生產(chǎn)的作業(yè)程序，使得萃取牛樟芝制作成本高，且萃取或分離的效率低。因此，有必要提供一種改良的牛樟芝萃取濃縮方法，能夠依照使用者需求來(lái)提供特定生理活性成份。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)不足之處，本發(fā)明目的是提供一種改良的牛樟芝萃取濃縮方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷。本發(fā)明的主要目的是提供一種牛樟芝萃取濃縮方法，能夠?qū)⑴Ｕ林ポ腿∫褐械奶囟ㄉ砘钚猿煞诌M(jìn)行分離及濃縮。此外，該牛樟芝萃取濃縮方法能夠以連續(xù)式進(jìn)料方式，將牛樟芝萃取液中的特定生理活性成分進(jìn)行濃縮者。為了達(dá)到前述發(fā)明目的，本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮方法包括如下步驟:(1)萃取步驟，將牛樟芝樣品置于萃取溶劑中共同形成牛樟芝萃取液，以使牛樟芝中抑制癌細(xì)胞的活性成分溶于所述牛樟芝萃取液中；以及(2)濃縮步驟，采用模擬移動(dòng)床，將所述牛樟芝萃取液中亨利常數(shù)為2.8以上的組份通過(guò)碳18固體吸附劑分離并濃縮。優(yōu)選地，所述亨利常數(shù)為2.8以上的組份包含具有抑制癌細(xì)胞特性的活性成分。優(yōu)選地，在濃縮步驟后，得到牛樟芝萃取濃縮液，所述亨利常數(shù)為2.8以上的組份占所述牛樟芝萃取濃縮液的重量百分比50%以上。優(yōu)選地，所述碳18固體吸附劑為SUPELCO Ascentis C18管柱。優(yōu)選地，所述移動(dòng)相為含有0.05%醋酸的去離子水與甲醇所組成的水溶液。優(yōu)選地，所述牛樟芝樣品為牛樟芝的子實(shí)體或菌絲體。優(yōu)選地，所述牛樟芝樣品為小于5毫米見(jiàn)方的顆粒。本發(fā)明的另一目的是提供一種通過(guò)所述牛樟芝萃取濃縮方法獲得的牛樟芝萃取濃縮物，所述牛樟芝萃取濃縮物包 括有效抑制癌細(xì)胞的生理活性成分。優(yōu)選地，所述牛樟芝萃取濃縮物包括通過(guò)碳18固體吸附劑的亨利常數(shù)為2.8以上的組份。優(yōu)選地，所述亨利常數(shù)2.8以上的組份包含抑制癌細(xì)胞特性的活性成分。優(yōu)選地，所述癌細(xì)胞為肺癌細(xì)胞或肝癌細(xì)胞。因此，本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮方法能夠?qū)⑴Ｕ林ポ腿∫褐械奶囟ㄉ砘钚猿煞址蛛x，以達(dá)到有效分離不同生理活性的功效。此外，本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮方法能夠通過(guò)模擬移動(dòng)床以連續(xù)式進(jìn)料方式，從牛樟芝萃取液中獲得較高含量的生理活性成分，以達(dá)到工業(yè)化量產(chǎn)的功效。本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮物包含有效抑制癌細(xì)胞的生理活性成分，其含量能夠達(dá)到50%以上，具有提高抑制癌細(xì)胞存活率的功效。


圖1是現(xiàn)有技術(shù)牛樟芝萃取方法的步驟方塊圖；圖2是本發(fā)明牛樟芝萃取濃縮方法的步驟方塊圖(一)；圖3是本發(fā)明實(shí)施例超臨界二氧化碳萃取裝置示意圖；圖4是本發(fā)明實(shí)施例第Al-1至A1-12組的牛樟芝萃取物產(chǎn)率折線圖；圖5是本發(fā)明實(shí)施例第Al-1至A1-12組的HPLC層析圖；圖6是本發(fā)明實(shí)施例第Al-1至A1-12組中亨利常數(shù)為2.8以上的組份A百分率；圖7是本發(fā)明實(shí)施例第BI及B2組的HPLC層析圖；圖8是本發(fā)明實(shí)施例三區(qū)域模擬移動(dòng)床的管柱配置示意圖；圖9是三角理論的純化條件示意圖；圖10是本發(fā)明實(shí)施例第BI組的第一出料口 Oa及第二出料口 Oy濃縮物HPLC層析圖11是本發(fā)明實(shí)施例第BI組的第一出料口 Oa濃縮物的各成分所占重量百分比的XY散布圖；圖12是本發(fā)明實(shí)施例第BI組的第二出料口 Oy濃縮物的各成分所占重量百分比的XY散布圖；圖13是本發(fā)明實(shí)施例第B2組的第一出料口 Oa及第二出料口 Oy濃縮物HPLC層析圖；圖14是本發(fā)明實(shí)施例第B2組的第一出料口 Oa濃縮物的各成分所占重量百分比的XY散布圖；圖15是本發(fā)明實(shí)施例第B2組的第二出料口 Oy濃縮物的各成分所占重量百分比的XY散布圖。附圖標(biāo)記說(shuō)明如下:本發(fā)明中:萃取步驟S1、濃縮步驟S2、二氧化碳儲(chǔ)槽1、輔溶劑儲(chǔ)槽2、萃取槽3、背壓閥4、溫度調(diào)節(jié)器5、氣液分離槽6、液泵7、閥門(mén)8、吸附管柱9、a區(qū)域a、β區(qū)域β、Y區(qū)域Y、管柱C、第一出料口 Oa、進(jìn)料口 1、第二出料口 0γ?，F(xiàn)有技術(shù)中:有機(jī)萃取步驟S91、水溶性萃取步驟S92。
具體實(shí)施例方式為使審查員能進(jìn)一步了解本發(fā)明的結(jié)構(gòu)、特征及其他目的，現(xiàn)結(jié)合所附較佳實(shí)施例附以附圖詳細(xì)說(shuō)明如下，本附圖 所說(shuō)明的實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，并非限定本發(fā)明。本發(fā)明提供的牛樟芝萃取濃縮方法，能夠萃取及濃縮牛樟芝中不同生理活性成分，獲得至少一種牛樟芝萃取濃縮物，所述牛樟芝萃取濃縮物中包含有效抑制癌細(xì)胞的活性成分。舉例說(shuō)明，所述牛樟芝萃取濃縮物可以包含有亨利常數(shù)為2.8以上的組份Α，所述組分A具有抑制癌細(xì)胞的活性成分。本發(fā)明所指的“牛樟芝”是不限定野生采集或人工培育方式獲得的子實(shí)體或菌絲體，其中，人工培育方式可以選擇將牛樟芝菌絲體以固態(tài)發(fā)酵或液態(tài)發(fā)酵方式培養(yǎng)，以獲得菌絲體。本發(fā)明所指的“萃取”，是將牛樟芝子實(shí)體或菌絲體中的活性成分溶于萃取溶劑的程序。本發(fā)明所指的“濃縮”，是將含有牛樟芝活性成分的萃取液，經(jīng)由模擬移動(dòng)床(Simulated Moving Bed,簡(jiǎn)稱SMB),并根據(jù)所述牛樟芝活性成分的極性特性(亨利常數(shù)H)，將所述牛樟芝的活性成分分離并濃縮的程序，例如分離牛樟芝中具有抑制癌細(xì)胞特性的活性成分。本發(fā)明所指的“組份”，是指通過(guò)特定固定相及移動(dòng)相的層析管柱或模擬移動(dòng)床，將牛樟芝萃取物中不同極性特性的成分進(jìn)行層析，所述極性特性以亨利常數(shù)作為判斷依據(jù)，根據(jù)不同滯留時(shí)間的層析區(qū)段所得到的一群特定極性的成分，統(tǒng)稱為一個(gè)組份。請(qǐng)參照?qǐng)D2所示，本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮方法包括萃取步驟SI及濃縮步驟S2。本發(fā)明的萃取步驟SI，將牛樟芝樣品置于萃取溶劑中共同形成牛樟芝萃取液，使所述牛樟芝中抑制癌細(xì)胞的活性成分溶于所述牛樟芝萃取液中。所述牛樟芝可以選擇為子實(shí)體或菌絲體，優(yōu)選將牛樟芝的子實(shí)體或菌絲體干燥至含水量低于10%以下，進(jìn)一步優(yōu)選將所述牛樟芝子實(shí)體或菌絲體破碎成較小顆粒，例如小于5毫米見(jiàn)方的顆粒，以增進(jìn)萃取步驟SI的萃取效率。本實(shí)施例的牛樟芝是由喬本生醫(yī)股份有限公司所提供的牛樟芝子實(shí)體。該萃取步驟SI的萃取溶劑，根據(jù)所欲萃取成分的極性特性來(lái)選擇，所述萃取溶劑可以為水、有機(jī)溶劑或超臨界流體，其中所述有機(jī)溶劑及超臨界流體利于萃取極性特性較低的活性成分，水則是利于萃取極性特性較高的活性成分。本實(shí)施例選擇親有機(jī)性(或低極性)的超臨界流體，特別是超臨界態(tài)二氧化碳流體做為萃取溶劑。舉例說(shuō)明，本發(fā)明該萃取步驟SI的第一實(shí)施例選擇超臨界流體萃取法，提供一個(gè)如圖3所示的超臨界二氧化碳萃取裝置(超臨界二氧化碳萃取設(shè)備，NATEX)，所述裝置包括二氧化碳儲(chǔ)槽I及一個(gè)輔溶劑儲(chǔ)槽2，分別與一個(gè)萃取槽3連通，以一個(gè)背壓閥4調(diào)節(jié)該萃取槽3的內(nèi)部壓力，另以多個(gè)溫度調(diào)節(jié)器5調(diào)控所述超臨界二氧化碳萃取裝置的內(nèi)部溫度，使通入該萃取槽3的二氧化碳能夠在達(dá)到臨界壓力及臨界溫度時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)槌R界流體以進(jìn)行萃取，該萃取槽3與一個(gè)氣液分離槽6連通，以供減壓時(shí)回復(fù)成氣態(tài)的二氧化碳流入，并且回收至該二氧化碳儲(chǔ)槽1，其中，所述超臨界二氧化碳萃取裝置中設(shè)有多個(gè)液泵7及多個(gè)閥門(mén)8，以調(diào)控所述二氧化碳或輔溶劑于在所述超臨界二氧化碳萃取裝置的流動(dòng)，該二氧化碳儲(chǔ)槽I及該氣液分離槽6之間優(yōu)選包含一個(gè)吸附管柱9，以去除二氧化碳?xì)怏w內(nèi)的雜質(zhì)。具體地說(shuō)，二氧化碳?xì)怏w以大于臨界壓力72巴(Bar)，及大于臨界溫度31.1°C以上的條件，即可形成超臨界二氧化碳流體，優(yōu)選壓力為300 400bar，溫度為32 50°C的條件下所形成的超臨界二氧化碳流體進(jìn)行萃?。怀R界流體萃取法亦可混合輔溶劑，幫助改變超臨界流體的物化特性，增進(jìn)萃取效率。更具體地說(shuō)，本發(fā)明該萃取步驟SI的第一實(shí)施例取105公克的牛樟芝子實(shí)體，破碎成顆粒大小約為5毫 米見(jiàn)方的顆粒，置于該萃取槽3中，設(shè)定該萃取槽3的內(nèi)部壓力為350bar，內(nèi)部溫度為50°C，輔溶劑為95%乙醇，并以每分鐘3毫升的速率進(jìn)料，自所述輔溶劑進(jìn)料之時(shí)起算第30、60、90、120、150、180、210、240、270、300、330及360分鐘，分別收取各時(shí)點(diǎn)的牛樟芝萃取液(依序?yàn)榈贏l至A12組)，由于牛樟芝萃取液呈膏狀，其中仍包含有95%乙醇，本實(shí)施例另以溫度設(shè)定為30 35°C烘箱將膏狀牛樟芝萃取液中的乙醇去除，以便進(jìn)行后續(xù)的濃縮步驟S2。通過(guò)超臨界二氧化碳流體萃取，不僅能夠簡(jiǎn)化有機(jī)溶劑萃取法的溶劑成本及操作步驟，以超臨界二氧化碳流體完成萃取后，以減壓方式就能夠?qū)⑴Ｕ林ポ腿∫褐械幕钚猿煞峙c萃取溶劑完全分離而不會(huì)殘留萃取溶劑，因此可以減低后續(xù)濃縮處理的成本；此外，當(dāng)二氧化碳形成超臨界流體型態(tài)，具親有機(jī)性(或低極性)，故對(duì)于萃取低極性成分而言，具有良好萃取效率。將本發(fā)明該萃取步驟SI的第一實(shí)施例在不同萃取時(shí)間所獲得的牛樟芝萃取液干燥后，獲得一個(gè)牛樟芝萃取物秤重，以計(jì)算所述牛樟芝萃取物的產(chǎn)率。請(qǐng)參照?qǐng)D4所示，為本發(fā)明所述萃取步驟SI的第一實(shí)施例的牛樟芝萃取物產(chǎn)率折線圖，隨著萃取時(shí)間的增力口，所述牛樟芝萃取物的產(chǎn)率亦隨之增加，待萃取至第210分鐘時(shí)，所述萃取物的產(chǎn)率達(dá)到28%并趨于穩(wěn)定。請(qǐng)參照?qǐng)D5所示，為本發(fā)明該萃取步驟SI的第一實(shí)施例在不同萃取時(shí)間(O 360分鐘，分別為第Al至A12組)所獲得的牛樟芝萃取物，分別以HPLC層析管柱(SUPELCOAscentis C18管柱，其內(nèi)徑4.6mm，長(zhǎng)度為15cm)結(jié)合分光光度計(jì)(L_245roiode ArrayDetector)，測(cè)量所述牛樟芝萃取物經(jīng)層析后在波長(zhǎng)240 260nm的吸光強(qiáng)度，并以所述吸光強(qiáng)度所繪制的折線圖，對(duì)特定滯留時(shí)間內(nèi)的面積積分，以推算所述牛樟芝萃取物中亨利常數(shù)為2.8以上的組份A百分率，其中，該組份A為屬于滯留時(shí)間超過(guò)8分鐘，其包含有抑制癌細(xì)胞的活性成分。請(qǐng)參照?qǐng)D6所示，為分析第Al至A12組所獲得的萃取物中，其所占亨利常數(shù)為2.8以上的組份A百分率，在萃取時(shí)間為O 120分鐘時(shí)，可以獲得較多含量的組份A，且該組份A占所述牛樟芝萃取物重量百分比40%以上。此外，本發(fā)明該萃取步驟SI的第二實(shí)施例為選擇以乙醇進(jìn)行萃取，取干燥的牛樟芝子實(shí)體破碎至2毫米見(jiàn)方左右，取0.2公克的破碎子實(shí)體置于10毫升乙醇中，于溫度40°C下進(jìn)行超音波震蕩90分鐘后，將牛樟芝萃取物以抽氣過(guò)濾方式去除，獲得牛樟芝萃取液，再將所述牛樟芝萃取液進(jìn)行真空干燥，獲得牛樟芝萃取物，并以所述牛樟芝萃取物進(jìn)行后續(xù)的濃縮步驟S2。分別將該萃取步驟SI的第一實(shí)施例(萃取時(shí)間為90分鐘)及第二實(shí)施例所獲得的牛樟芝萃取物以甲醇溶解后，以HPLC層析管柱(SUPELCO Ascentis C18管柱，其內(nèi)徑
4.6mm,長(zhǎng)度為15cm)結(jié)合分光光度計(jì)(L-2455 Diode Array Detector),測(cè)量所述牛樟芝萃取物經(jīng)HPLC層析后在波長(zhǎng)240 260nm的吸光強(qiáng)度，并與本發(fā)明該萃取步驟SI的第一實(shí)施例的牛樟芝萃取物比較其圖譜。請(qǐng)參照?qǐng)D7，第BI組為乙醇萃取的牛樟芝萃取物HPLC層析圖譜，而第B2組為超臨界二氧化碳流體萃取的牛樟芝萃取物HPLC層析圖，由此可知，以乙醇輔以超音波震蕩萃取而得的牛樟芝萃取物，或以超臨界二氧化碳流體萃取的牛樟芝萃取物的組成大致相同，部分組份的萃取量略有不同，特別是指以超臨界二氧化碳流體所獲得低極性物質(zhì)(滯留時(shí)間大于8分鐘以上)的含量較高。本發(fā)明的萃取步驟SI不限于以有機(jī)溶劑或超臨界流體萃取牛樟芝的生理活性成分，而優(yōu)選以超臨界二氧化碳流體萃取亨利常數(shù)為2.8以上的組份，能夠達(dá)到提高活性成分萃取量的功效，又可避免在完成萃取后不會(huì)有溶劑殘留的問(wèn)題。本發(fā)明的濃縮步驟S2，采用模擬移動(dòng)床將所述牛樟芝萃取液中的亨利常數(shù)為2.8以上的組份A通過(guò)碳18固體吸附劑分離并濃縮。更詳細(xì)地說(shuō)，所述亨利常數(shù)為2.8以上的組份A為具有低極性特性的成分，相對(duì)而言，所述牛樟芝萃取物中另外包含亨利常數(shù)為2.8以下的組份B，其為具有高極性特性的成分。本發(fā)明的濃縮步驟S2為不限于由水、有機(jī)溶劑或超臨界流體萃取所獲得的牛樟芝萃取液，并能夠依照所欲萃取組份的不同極性從所述牛樟芝萃取液中分離并濃縮，特別是通過(guò)模擬移動(dòng)床進(jìn)行分離及濃縮，達(dá)到節(jié)省現(xiàn)有技術(shù)中用以分離牛樟芝活性成分的方法的成本，更能夠以工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)的連續(xù)式操作方法，達(dá)到更高的分離效率。本發(fā)明該濃縮 步驟S2的較佳實(shí)施例，是提供如圖8所示的模擬移動(dòng)床作為一種連續(xù)進(jìn)料式的純化平臺(tái)，對(duì)牛樟芝萃取液中不同亨利常數(shù)的成份進(jìn)行群組分離；本實(shí)施例優(yōu)選是將該萃取步驟SI的牛樟芝萃取液先進(jìn)行干燥，獲得牛樟芝萃取物后，再以適當(dāng)?shù)囊苿?dòng)相溶液將所述牛樟芝萃取物溶解，以進(jìn)行該濃縮步驟S2。
本實(shí)施例模擬移動(dòng)床的固定相(Stationary phase,簡(jiǎn)稱SP)選擇與低極性物質(zhì)具有吸附性的碳18管柱，本實(shí)施例的移動(dòng)相(Mobile phase，簡(jiǎn)稱MP)是用以溶解牛樟芝萃取物，本實(shí)施例的移動(dòng)相選擇水及甲醇的混合液，所述水含有0.05%的醋酸，以所述移動(dòng)相溶解所述牛樟芝萃取物，所述水及甲醇的重量比例較佳優(yōu)選為20: 80至40: 60，所述水及甲醇更佳進(jìn)一步優(yōu)選的重量比例為22: 78，使所述移動(dòng)相的選擇因子(Selectivefactor)為大于1.3，能夠更有效地分離出不同極性特性的組份A及組份B。本實(shí)施例的模擬移動(dòng)床優(yōu)選包含至少三個(gè)分離區(qū)域，其依序?yàn)棣?、β及Y區(qū)域，其中所述ct區(qū)域的后端設(shè)有一個(gè)第一出料口 Oa (稱作Extract outlet),所述Y區(qū)域的后端設(shè)有一個(gè)第二出料口 Oy (稱作Raffinate outlet),該進(jìn)料口 IQ^tFeed inlet)則設(shè)于所述β及Y區(qū)域之間。所述三個(gè)分離區(qū)域α、β及Y系分別由二個(gè)管柱c組成，所述三個(gè)分離區(qū)域的管柱c相互連通，該管柱c內(nèi)系填充固定相，特別地所述固定相的顆粒間具有孔隙供移動(dòng)相通過(guò)，并使所述移動(dòng)相朝同一方向依序流經(jīng)所述α、β及Υ區(qū)域的管柱c內(nèi)，所述固定相則系以一個(gè)進(jìn)料口切換裝置于進(jìn)料口切換時(shí)間Tsw后改變?cè)撨M(jìn)料口 I在所述三個(gè)分離區(qū)域的相對(duì)位置，使所述固定相相對(duì)所述移動(dòng)相朝另一方向模擬移動(dòng)。根據(jù)模擬移動(dòng)床的三角理論，所欲分離組份包括:亨利常數(shù)為2.8以上的組份A及亨利常數(shù)為2.8以下的組份B，各三個(gè)分離區(qū)域α、β及Y中，所述組份A的凈質(zhì)量通量Fa及所述組份B的凈質(zhì)量通量Fb符合表I的條件，使所述組份A往所述區(qū)域α移動(dòng)，所述組份B往所述區(qū)域Y移動(dòng)，且所述三個(gè)分離區(qū)域α、β及Y的流速比值η (各分離區(qū)域α、β及Y的流速比值分別為ηα、η0及 )與所欲分離組份的極性(即組份A的亨利常數(shù)為Ha，組份B的亨利常數(shù)為Hb)相關(guān)，各流速比值na、ne及~應(yīng)符合如表I及圖9中斜線區(qū)域的條件，其中，各組份的亨利常數(shù)H系根據(jù)公式I計(jì)算而得，TO為不被固定相吸附的物質(zhì)流經(jīng)管柱的滯留時(shí)間(TO= 1.71)，Tr為欲分離組份的滯留時(shí)間，ε為本實(shí)施例所使用管柱的孔隙度(0.412)。
權(quán)利要求
1.一種牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述牛樟芝萃取濃縮方法包括如下步驟 (1)萃取步驟，將牛樟芝樣品置于萃取溶劑中共同形成牛樟芝萃取液，以使牛樟芝中抑制癌細(xì)胞的活性成分溶于所述牛樟芝萃取液中；以及 (2)濃縮步驟，采用模擬移動(dòng)床，將所述牛樟芝萃取液中亨利常數(shù)為2.8以上的組份通過(guò)碳18固體吸附劑分離并濃縮。
2.如權(quán)利要求I所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述亨利常數(shù)為2.8以上的組份包含具有抑制癌細(xì)胞特性的活性成分。
3.如權(quán)利要求I所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，在濃縮步驟后，得到牛樟芝萃取濃縮液，所述亨利常數(shù)為2. 8以上的組份占所述牛樟芝萃取濃縮液的重量百分比50%以上。
4.如權(quán)利要求I所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述碳18固體吸附劑為SUPELCO Ascentis C18 管柱。
5.如權(quán)利要求4所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述移動(dòng)相為含有O.05%醋酸的去離子水與甲醇所組成的水溶液。
6.如權(quán)利要求I所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述牛樟芝樣品為牛樟芝的子實(shí)體或菌絲體。
7.如權(quán)利要求I或6所述的牛樟芝萃取濃縮方法，其特征在于，所述牛樟芝樣品為小于5毫米見(jiàn)方的顆粒。
8.—種通過(guò)如權(quán)利要求I所述的方法獲得的牛樟芝萃取濃縮物，其特征在于，所述牛樟芝萃取濃縮物包括通過(guò)碳18固體吸附劑的亨利常數(shù)為2. 8以上的組份。
9.如權(quán)利要求8所述的牛樟芝萃取濃縮物，其特征在于，所述亨利常數(shù)2.8以上的組份包含抑制癌細(xì)胞特性的活性成分。
10.如權(quán)利要求9所述的牛樟芝萃取濃縮物，其特征在于，所述癌細(xì)胞為肺癌細(xì)胞或肝癌細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明提供一種牛樟芝萃取濃縮方法和牛樟芝萃取濃縮物，所述牛樟芝萃取濃縮方法包括萃取步驟，將牛樟芝樣品置于萃取溶劑中共同形成牛樟芝萃取液，以使牛樟芝中抑制癌細(xì)胞的活性成分溶于所述牛樟芝萃取液中；以及濃縮步驟，采用模擬移動(dòng)床，將所述牛樟芝萃取液中亨利常數(shù)為2.8以上的組份通過(guò)碳18固體吸附劑分離并濃縮。通過(guò)本發(fā)明的牛樟芝萃取濃縮方法，不僅能夠?qū)⑻囟ㄉ砘钚缘某煞莘蛛x及濃縮，并可以符合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)方式制備各所述組份的濃縮物，同時(shí)達(dá)到降低生產(chǎn)成本的功效。
文檔編號(hào)A61K36/06GK103251658SQ20121003910
公開(kāi)日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2012年2月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月21日
發(fā)明者梁明在, 黃喬志, 黃介緯, 蕭怡婷, 顏椿益 申請(qǐng)人:喬本生醫(yī)股份有限公司