專利名稱：顆粒狀醫(yī)藥組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及在顆粒狀載體組合物中內包有藥物的、能夠作為藥物傳遞系統(tǒng)(DDS)利用的顆粒狀醫(yī)藥組合物。
背景技術：
利用蛋白質或核酸這樣的生物體高分子的生物醫(yī)藥品，與利用低分子化合物的以往型的醫(yī)藥品相比，容易被酶分解或被免疫系統(tǒng)排除。從提高生物體內的生物醫(yī)藥品的穩(wěn)定性的觀點，專利文獻I 3公開了在由脂質雙層膜構成的脂質體中內包有生物體高分子的 DDS?，F(xiàn)有技術文獻
專利文獻專利文獻I :國際公開第2001 / 034115號小冊子專利文獻2 :國際公開第1998 / 58630號小冊子專利文獻3 :國際公開第2005 / 092389號小冊子

發(fā)明內容
發(fā)明所要解決的課題在專利文獻I 3中記載的以往型的DDS中，通過以脂質雙層膜保護作為藥物的生物體高分子，能夠提高生物體內的藥物的穩(wěn)定性，但藥物難以從載體放出。而且，這樣的以往型的DDS由于其粒徑的大小和構成脂質雙層膜的脂質所具有的電荷，容易被肺、肝臟和脾臟這樣的網狀內皮系統(tǒng)捕捉，因此在到達給藥對象物以前，有時從血液中被除去。以由具有疏水性聚合物鏈段和親水性聚合物鏈段的嵌段共聚物單元所構成的高分子膠束作為載體的DDS，與使用脂質體的以往型的DDS相比，能夠將DDS顆粒大幅度小型化(例如，平均粒徑IOOnm以下)。但是，以這樣的高分子膠束作為載體的DDS，如后述的比較例所示，由于將生物體高分子保持在DDS顆粒內的作用過弱，仍然有難以對給藥對象物適當輸送藥物的情況。另外，在這樣的DDS中，在制造后的存儲期間中也有藥物從載體脫離的情況。本發(fā)明的發(fā)明人進行了防止顆粒外周面帶有能夠吸引帶電性物質的電荷的高分子膠束DDS的開發(fā)(日本特愿2009 - 200681)。這樣的DDS雖然能夠防止能夠導致妨礙向給藥對象物的藥物搬運的生物體分子向載體表面的附著，但從更長期地保持藥物的觀點出發(fā)，仍有能夠改善的余地。用于解決課題的方法本發(fā)明在于提供一種顆粒狀醫(yī)藥組合物，其含有具有疏水性聚合物鏈段和親水性聚合物鏈段的嵌段共聚物單元、藥物、帶有與藥物的電荷相反的電荷的帶電脂質，上述藥物至少含有選自蛋白質或核酸中的生物體高分子，多個上述嵌段共聚物單元以上述疏水性聚合物鏈段朝向內側且上述親水性聚合物鏈段朝向外側的狀態(tài)配置為放射狀，上述帶電脂質以吸引在上述疏水性聚合物鏈段側的狀態(tài)配置，上述藥物存在于比上述疏水性聚合物鏈段更靠近顆粒的內側，由此防止該藥物向顆粒外的脫落。發(fā)明的效果根據本發(fā)明，能夠提高適于DDS的醫(yī)藥組合物的藥物的封入穩(wěn)定性。這樣的醫(yī)藥組合物，與以往型的DDS相比，能夠更可靠地輸送藥物。特別是在用于對于到達耗時的向給藥對象物的藥物送達中是有用的。


[圖I]圖I(a)和圖I (b)是用于說明本發(fā)明的醫(yī)藥組合物的代表性結構的圖。[圖2]圖2(a)和圖2 (b)是用于說明由凍結操作造成的顆粒內的藥物分布的變 化的圖。[圖3]圖3(a)和圖3 (b)是表示醫(yī)藥組合物的封入穩(wěn)定性評價的結果的圖。[圖4]圖4(a)和圖4 (b)是表示醫(yī)藥組合物的血液中滯留性評價的結果的圖。
具體實施例方式在以下的說明中，為了容易地理解本發(fā)明，參照圖I和圖2。但是，圖I和圖2均為示意圖，本發(fā)明在任何意義上，都不限定于這些圖。在圖I和圖2中，表示了帶電脂質為陽離子性脂質、藥物為陰離子性藥物的情況，但本發(fā)明不限于這樣的方式。在圖I (a)中表示本發(fā)明的顆粒狀醫(yī)藥組合物(以下，有時簡稱為“醫(yī)藥組合物”)的代表性結構。醫(yī)藥組合物I含有嵌段共聚物單元2、帶電脂質3和藥物4。在圖I (b)中放大表示了嵌段共聚物單元2。嵌段共聚物單元2具有親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b，以疏水性聚合物鏈段2b朝向內側且親水性聚合物鏈段2a朝向外側的狀態(tài)，在醫(yī)藥組合物I內呈放射狀配置。帶電脂質3帶有與藥物4的電荷相反的電荷，以吸引在疏水性聚合物鏈段2b側的狀態(tài)配置。在本發(fā)明的醫(yī)藥組合物I中，如圖I (a)所示，藥物存在于疏水性聚合物鏈段2b內側。此外，這并不是要限定于醫(yī)藥組合物I中所內包的全部藥物4局部存在于疏水性聚合物鏈段2b內側的狀態(tài)，并沒有排除一部分藥物4存在于疏水性聚合物鏈段2b外側的狀態(tài)。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物I通過使藥物4存在于該位置，可以防止藥物4的泄露，換而言之處于藥物4的封入穩(wěn)定性提高的狀態(tài)。醫(yī)藥組合物1，例如，能夠通過對處于藥物被內包于疏水性聚合物鏈段2b外側的區(qū)域的狀態(tài)的醫(yī)藥組合物前體，實施凍結操作而形成。此外，如后所述，醫(yī)藥組合物前體I'能夠通過公知的方法使藥物內包于載體組合物而容易地形成。在圖2 (a)中表示了凍結操作前的醫(yī)藥組合物前體I"中顆粒內的藥物4分布，在圖2(b)中表示了凍結操作后的醫(yī)藥組合物I中顆粒內的藥物4分布。如圖2 (a)所示，在醫(yī)藥組合物前體I'中，若實施凍結操作，比疏水性聚合物鏈段2b存在于顆粒外側的藥物4，就向著顆粒內側移動，如圖2 (b)所示，可以得到存在于疏水性聚合物鏈段2b內側的醫(yī)藥組合物I。這樣，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物1，能夠通過將在醫(yī)藥組合物前體I'中配置在疏水性聚合物鏈段2b的外側的藥物4經過凍結操作使其向疏水性聚合物鏈段2b的內側移動而形成。這樣得到的藥物移動產生的原因尚未確定，但可以認為是由于構成載體組合物的嵌段共聚物2和帶電脂質3的配置通過凍結操作被打亂，經過隨之產生的間隙，藥物4容納在顆粒的更內部。凍結操作至少進行I次即可，但優(yōu)選實施2次以上。通過重復凍結操作，能夠促進藥物4向顆粒內部的容納。作為凍結操作，只要是凍結干燥操作和凍結熔融操作這樣的、伴隨規(guī)定的組合物的凍結的操作即可。凍結干燥操作包括凍結組合物的工序(凍結工序A)和將凍結組合物干燥的工序(干燥工序)。凍結工序A能夠通過將組合物在一 200°C以上、優(yōu)選在一 100°C以上，另外在一10°C以下、優(yōu)選在一 20°C以下的溫度，保持I小時以上、優(yōu)選5小時以上，另外保持72小時以下、優(yōu)選24小時以下來實施。干燥工序能夠通過將凍結組合物的氣氛氣壓力減壓為真空狀態(tài)(例如15Pa以下)，誘導水分的升華而實施。從促進該升華的觀點出發(fā)，可以使減壓中的氣氛氣溫度階段性或連續(xù)地升溫至高于凍結工序的溫度，例如一 20°C以上、或例如一 10°C以上。升溫時的氣氛氣溫度的上限可以為25°C左右。干燥工序的時間能夠設定為5小時以上，優(yōu)選設定為20小時以上。干燥工序時間的上限沒有特別限制，可以為例如100小時。由于經過凍結干燥操作得到的醫(yī)藥組合物I處于干燥狀態(tài)，因此可以使其再溶解在水這樣的公知的溶劑中使用。 凍結熔融操作包括與凍結工序A同樣操作的凍結組合物的工序，和將凍結的組合物熔融的工序(熔融工序)。熔融工序能夠通過將組合物在4°C以上、優(yōu)選在10°C以上，另外在40°C以下、優(yōu)選在30°C以下的溫度保持30分鐘以上、優(yōu)選I小時以上，另外保持24小時以下、優(yōu)選5小時以下而實施。藥物4存在于疏水性聚合物鏈段2b內側的狀態(tài)，例如，能夠根據醫(yī)藥組合物I的Zeta電位的絕對值高于具有與該醫(yī)藥組合物I相同組成但不經過凍結操作形成的藥物內包顆粒的Zeta電位的絕對值的現(xiàn)象來確定。這是由于若實施凍結操作則藥物4向著顆粒的更內側移動而離開顆粒的外表面，從而醫(yī)藥組合物I的Zeta電位的絕對值中帶電脂質3的影響增加的緣故。在本說明書中，帶電脂質3是指在生理pH (例如，pH7. 4)的水性介質中具有多于正電荷的負電荷的陰離子性脂質、和該水性介質中具有多于負電荷的正電荷的陽離子性脂質。因此，在本說明書中，關于具有陽離子性基團和陰離子性基團的所謂的兩性帶電脂質，按照上述基準進行處理。帶電脂質3通過靜電結合在醫(yī)藥組合物I內保持藥物4。帶電脂質3只要至少在醫(yī)藥組合物I的存儲環(huán)境下，帶有與藥物的電荷相反的電荷即可。帶電脂質3和藥物4優(yōu)選在以血液中為代表的生理環(huán)境下(例如，PH7. 4)也帶有相反的電荷。根據下面的機理，帶電脂質3以吸引在疏水性聚合物鏈段2b側的狀態(tài)配置。作為本發(fā)明的醫(yī)藥組合物I的原材料的載體組合物，例如，能夠通過包括在水溶液中懸濁嵌段共聚物單元2和帶電脂質3的工序形成。嵌段共聚物單元2的疏水性聚合物鏈段2b由于為疏水性，因此在水溶液中不擴散而凝集存在。親水性聚合物鏈段2a可以在水溶液中擴散自由地運動。因此，嵌段共聚物單元2在水溶液中配置為疏水性聚合物鏈段2b朝向內側、親水性聚合物鏈段2a朝向外側的放射狀。而且，帶電脂質由于疏水性強，與水和親水性聚合物鏈段2a相比，與疏水性聚合物鏈段2b的親和性高，因此被吸引在疏水性聚合物鏈段2b偵U。這樣，帶電脂質3就遠離載體組合物的外周面而配置。而且，即使經過后述的凍結操作，帶電脂質3也維持在吸引在疏水性聚合物鏈段2b側的狀態(tài)。
本發(fā)明的醫(yī)藥組合物I由于帶電脂質3被吸引在疏水性聚合物鏈段2b側而配置，因此處于防止醫(yī)藥組合物I的外周面帶有能夠吸引帶有與帶電脂質3相反電荷的帶電性物質(例如,血液中的蛋白質)的電荷的狀態(tài)。這樣的狀態(tài),例如，能夠通過從醫(yī)藥組合物I測定的Zeta電位的絕對值處于規(guī)定值以下的范圍來確定。更具體而言，對于醫(yī)藥組合物1，希望Zeta電位的絕對值為15mV以下，優(yōu)選為12mV以下，更優(yōu)選為6mV以下，特別優(yōu)選為3mV以下。通過在pH為7. 4的IOmM的HEPES緩沖溶液中，以載體組合物和醫(yī)藥組合物I中所含有的帶電脂質的總量為每I毫升的該緩沖溶液為0. Img的方式添加來測定Zeta電位。嵌段共聚物單元相對于帶電脂質3的比例，以重量比表示，希望為I. 0以上，優(yōu)選為1.5以上，更優(yōu)選為2.0以上，還希望為50以下，優(yōu)選為20以下，更優(yōu)選為10以下。越提高該比例，越能夠降低醫(yī)藥組合物I的Zeta電位的絕對值。另一方面，帶電脂質3的比例越高，越能夠更積極地將藥物攝入顆粒內，因此，如上所述，該比例希望限制在50以下。脂質可以為單純脂質、復合脂質和衍生脂質中的任意種，能夠例示磷脂、甘油糖月旨、鞘糖脂、鞘氨醇類和留醇類。更具體而言，作為陽離子性脂質，例如，可以列舉1，2-二油?；?3-三甲基銨基丙烷(DOTAP)、N-(2, 3- 二油烯基氧基丙烷_1_基)-N，N，N-三甲基氯 化銨(D0TMA)、2，3- 二油烯基氧基-N-[2-(精胺甲酰胺)乙基]-N，N- 二甲基-I-丙基三氟乙酸銨(DOSPA)、1，2- 二十四烷基氧基丙基-3- 二甲基羥基乙基溴化銨(DMRIE)、1，2- 二肉豆蘧基氧基丙基-3-二甲基羥基乙基溴化銨(D0RIE)、3P-[N-(N' N' -二甲基氨基乙基)氨基甲?；鵠膽固醇(DC-Chol)。作為陰離子性脂質，例如，可以列舉心磷脂、二?；字＝z氨酸、二酰基磷脂酸、N-琥珀?；字Ｒ掖及?N-琥珀?；鵓E)、磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酰乙二醇、膽固醇琥珀酸酯。醫(yī)藥組合物I能夠含有2種以上的帶電脂質3。親水性聚合物鏈段2a優(yōu)選為源自由聚乙二醇或聚氧乙烯構成的水溶性聚合物的鏈段。親水性聚合物鏈段2a的分子量希望為2，500Da以上，優(yōu)選為5，OOODa以上，更優(yōu)選為8，OOODa以上，另外希望為200，OOODa以下，優(yōu)選為20，OOODa以下，更優(yōu)選為15，OOODa以下。疏水性聚合物鏈段2b優(yōu)選為源自聚氨基酸鏈的鏈段。這樣的聚氨基酸鏈能夠在醫(yī)藥組合物I中其一部分或全部形成a螺旋。因此，帶電脂質3以吸引在聚氨基酸鏈的a螺旋部分的狀態(tài)，換而言之以分散在a螺旋部分的周邊的狀態(tài)配置。疏水性聚合物鏈段2b的重復單元數希望為10個以上，優(yōu)選為20個以上，另外希望為200個以下，優(yōu)選為100個以下，更優(yōu)選為60個以下。從降低醫(yī)藥組合物I的Zeta電位的絕對值的觀點出發(fā)，換而言之從減少醫(yī)藥組合物I的表面電荷的(接近中性)觀點，在嵌段共聚物單元2中，優(yōu)選使得親水性聚合物鏈段2a的大小(分子量)大于疏水性聚合物鏈段2b的大小(重復單元數)。親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b也可以具有支鏈結構。例如，也可以為對于一條鏈段結合有2條以上的鏈段的狀態(tài)。親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b只要是能夠防止醫(yī)藥組合物I的顆粒外周面帶有能夠吸引帶電性物質的電荷的程度，也可以還含有以氨基和羧基為代表的帶電性的取代基。親水性聚合物鏈段2a和疏水性聚合物鏈段2b能夠使用使主鏈的末端之間經過共價鍵結合得到的鏈段。更具體而言，作為嵌段共聚物單元2，能夠例示下面的通式(I)和通式(II)所示的化合物。醫(yī)藥組合物I也可以由2種以上的嵌段共聚物單元2形成。
權利要求
1.一種顆粒狀醫(yī)藥組合物，其特征在于 含有具有疏水性聚合物鏈段和親水性聚合物鏈段的嵌段共聚物單元、藥物、帶有與藥物的電荷相反的電荷的帶電脂質， 所述藥物至少含有選自蛋白質和核酸中的生物體高分子， 多個所述嵌段共聚物單元以所述疏水性聚合物鏈段朝向內側并且所述親水性聚合物鏈段朝向外側的狀態(tài)配置為放射狀，所述帶電脂質以吸引在所述疏水性聚合物鏈段側的狀態(tài)配置，所述藥物存在于比所述疏水性聚合物鏈段更靠顆粒的內側，由此防止該藥物向顆粒外脫落。
2.如權利要求I所述的顆粒狀醫(yī)藥組合物，其特征在于 所述疏水性聚合物鏈段為源自聚氨基酸鏈的鏈段。
3.如權利要求2所述的顆粒狀醫(yī)藥組合物，其特征在于· 所述聚氨基酸鏈的一部分或全部形成為a螺旋。
4.如權利要求3所述的顆粒狀醫(yī)藥組合物，其特征在于 所述帶電脂質分散于所述a螺旋的周圍。
全文摘要
本發(fā)明提高了藥物傳遞系統(tǒng)中適合的顆粒狀醫(yī)藥組合物的藥物封入穩(wěn)定性。顆粒狀醫(yī)藥組合物(1)含有以疏水性聚合物鏈段(2b)朝向內側且親水性聚合物鏈段(2a)朝向外側的狀態(tài)配置為放射狀的嵌段共聚物單元(2)、含有生物體高分子的藥物(4)、和帶有與藥物(4)的電荷相反電荷的帶電脂質(3)，該帶電脂質(3)以吸引在疏水性聚合物鏈段(2b)側的狀態(tài)配置，藥物(3)配置在疏水性聚合物鏈段(2b)的內側。根據該醫(yī)藥組合物(1)，能夠顯著防止藥物(4)向顆粒外的脫落。
文檔編號A61K9/19GK102753151SQ20118000906
公開日2012年10月24日 申請日期2011年2月14日 優(yōu)先權日2010年2月12日
發(fā)明者加藤泰己, 石井篤史 申請人:那野伽利阿株式會社