專利名稱：干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗病毒藥物的組合物及其在制備治療病毒性肺炎藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
病毒性肺炎是一種嬰幼兒時期的常見病，嚴(yán)重危害嬰幼兒的生命健康。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，超過90%的嬰幼兒在2歲以前感染過病毒性肺炎，其中80%以上病例在1歲以內(nèi)，發(fā)病高峰年齡為2-6個月，1-6個月可見較重病例。嬰幼兒因感染病毒性肺炎造成的死亡在發(fā)達(dá)國家為0.5% _2.0%，在發(fā)展中國家可達(dá)7%，在我國更是嬰幼兒死亡的首要原因。此外，病毒性肺炎的傳染性和再感染性很強(qiáng)，有報道表明家庭成員間可發(fā)生相繼感染，已感染嬰幼兒在10年內(nèi)再感染發(fā)生率高達(dá)65%。引起病毒性肺炎的病毒主要是腺病毒(adenovirus，ADV)和呼吸道合胞病毒 (respiratory syncytial virus, RSV)，其次是、流感病毒(influenza virus, IFV)禾口副、流
(parainfluenzavirus, PIV)，(cytomegalovirus, CMV) 疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、腸道病毒(enterovirus，EV)、人類偏肺病毒(hMPV) 等。由于這些病毒極易發(fā)生變異，加之在病毒感染后容易誘發(fā)進(jìn)一步的細(xì)菌感染，從而給患兒造成混合感染和并發(fā)癥，因此嬰幼兒病毒性肺炎很難實(shí)現(xiàn)全面的特異防治，臨床上缺乏有效的藥物治療。化學(xué)藥物是目前治療病毒性肺炎的最主要藥物，原因是臨床使用時間最長，可迅速清除感染病毒；但化學(xué)藥物治療病毒性肺炎的缺點(diǎn)是停藥后病情容易反彈，不能調(diào)節(jié)和提高患兒機(jī)體免疫力對抗病毒，且在長期使用過程中容易產(chǎn)生耐藥性。目前臨床上治療病毒性肺炎的化學(xué)藥物主要有利巴韋林、更昔洛韋、奧司他韋、阿糖腺苷、金剛烷胺等。例如美國專利US 5，290, 540公開了利巴韋林用于治療病毒性肺炎的方法。中藥對病毒性肺炎的治療在近年的研究使用日益廣泛，這源于中藥藥性的溫和持久，并兼具免疫調(diào)節(jié)作用。但中藥治療病毒性肺炎周期長，且中藥在很大程度上并不適宜于嬰幼兒使用。另外中藥治療的長期安全性問題也是一個不容忽視的問題。目前有報道臨床研究用于病毒性肺炎治療的中藥主要有大青葉、板藍(lán)根、銀花、連翹、射干、黃芩、黃連、麻黃、苦杏仁等。例如中國專利CN 03131642.5公開了一種治療小兒病毒性肺炎的清肺口服液制劑，其由麻黃、生石膏、苦杏仁、葶藶子、桑白皮、前胡、僵蠶、丹參、虎杖、拳參等中草藥組成。又如中國專利CN 02138175. 5公開了一種治療小兒病毒性肺炎的藥物組合物，其由麻黃、苦杏仁、石膏、甘草、前胡、僵蠶、丹參、虎杖、拳參、葶藶子、桑白皮十一味中藥組成。伴隨著生物技術(shù)藥物的迅猛發(fā)展，近年來越來越多的研究關(guān)注生物技術(shù)藥物對病毒性肺炎的治療，其中使用的生物技術(shù)藥物包括干擾素、白細(xì)胞介素、人血丙種球蛋白、胸腺肽、特異性抗病毒抗體等，尤其以干擾素使用的報道最多。生物技術(shù)藥物，尤其是干擾素用于病毒性肺炎的治療，作用持久，可調(diào)節(jié)和提高患兒機(jī)體免疫力對抗病毒，不易產(chǎn)生耐藥性，安全性更高。例如中國專利CN03147580.9公開了一種治療病毒性肺炎的重組人干擾素 α噴霧劑，其由重組人干擾素α原液配以適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑、粘膜吸收促進(jìn)劑、抑菌劑等制成，pH 值在 5. 0-8. 0。但是由于前述患兒在感染病毒性肺炎后容易進(jìn)一步誘發(fā)細(xì)菌性感染，從而給患兒造成混合感染和并發(fā)癥，因此單獨(dú)使用一種藥物治療嬰幼兒病毒性肺炎的臨床效果并不理想，產(chǎn)生了聯(lián)合用藥或兩種以上藥物有效成分的藥物組合物用于病毒性肺炎的治療。例如 《中國實(shí)用醫(yī)藥》2009年3月第4卷第9期144-145頁發(fā)表的文章“干擾素聯(lián)合利巴韋林治療小兒病毒性肺炎30例療效觀察”報道了干擾素聯(lián)合利巴韋林治療小兒病毒性肺炎的療效，表明聯(lián)合用藥組治療有效率為96. 7%，而單獨(dú)使用利巴韋林的對照組的有效率只有 76. 6%，兩者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性差異。但聯(lián)合用藥或組合物用藥用于病毒性肺炎的研究目前還不夠系統(tǒng)，且研究種類還較少，因此研究成果還不適于在臨床上的規(guī)?；茝V應(yīng)用。在治療病毒性肺炎的藥物遞送系統(tǒng)方面，霧化吸入劑是一種近年來在臨床上發(fā)展起來的新的給藥劑型。所謂霧化吸入劑，是指將藥液經(jīng)過霧化變成藥霧，經(jīng)吸入達(dá)呼吸系統(tǒng)靶部位起治療作用的劑型。霧化吸入劑的給藥必須借助一定的霧化吸入裝置，包括壓縮霧化器、超聲霧化器等。由于霧化吸入劑給藥后不經(jīng)過吸收可直接作用于呼吸系統(tǒng)病變部位， 從而相比其他劑型有明顯更高的生物利用度與藥效，因此霧化吸入劑已逐漸成為臨床上治療小兒病毒性肺炎的首選劑型。此外，硫酸特布他林是一種臨床上治療肺部疾病的常見藥物，已有文獻(xiàn)報道硫酸特布他林與抗病毒化學(xué)藥物聯(lián)合使用用于嬰幼兒肺炎治療，例如《中國醫(yī)藥指南》2010年第 8卷第M期53-M頁發(fā)表的文章“布地奈德和硫酸特布他林霧化吸入佐治嬰幼兒喘息性支氣管肺炎的臨床觀察”報道了硫酸特布他林聯(lián)合布地奈德治療嬰幼兒肺炎的療效，治療組較對照組在喘憋緩解天數(shù)、咳嗽緩解天數(shù)、喘鳴音消失天數(shù)、平均住院天數(shù)等指標(biāo)上均有明顯減少。但現(xiàn)有技術(shù)中未見有干擾素α與硫酸特布他林聯(lián)合使用治療病毒性肺炎的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的是提供一種干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑，以用于嬰幼兒病毒性肺炎的治療，進(jìn)一步提高治療效果。在基礎(chǔ)的實(shí)施方案中，本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸特布他林與適宜量的可藥用輔料。霧化吸入劑的制備可選擇本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，甚至是與注射液相類似的方法。但無論霧化吸入劑的組成，還是霧化吸入劑的制備均要充分考慮干擾素α與硫酸特布他林的穩(wěn)定性，尤其是干擾素α的熱穩(wěn)定性、PH穩(wěn)定性和硫酸特布他林的化學(xué)穩(wěn)定性。例如，輔料中應(yīng)含有有利于干擾素α與硫酸特布他林穩(wěn)定的緩沖溶液體系，這樣的緩沖溶液體系的PH應(yīng)該在5. 0-8. 0之間，這樣的緩沖溶液體系包括但不局限于磷酸鹽緩沖溶液體系、枸櫞酸鹽緩沖溶液體系；應(yīng)含有干擾素α活性保護(hù)劑，以防止干擾素α活性在長期儲存過程中降低或喪失，這樣的保護(hù)劑包括但不局限于各種氨基酸、白蛋白和多元醇類物質(zhì)，例如白蛋白、甘露醇、海藻糖、右旋糖酐。另外輔料中還優(yōu)選含有滲透壓調(diào)節(jié)劑， 以將溶液的滲透壓調(diào)節(jié)到與身體內(nèi)基本等滲，這樣的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括但不局限于NaCl、甘露醇；優(yōu)選含有防止干擾素α、硫酸特布他林和其他輔料沉淀和吸附的促溶劑，這樣的促溶劑包括但不局限于吐溫-80 ；優(yōu)選含有防止藥物制劑染菌的防腐劑，這樣的防腐劑包括但不局限于苯扎氯銨、尼泊金酯、苯甲醇等。在霧化吸入劑的制備過程中，優(yōu)選將難溶性輔料先用更加適宜的方法溶解后再和已經(jīng)溶解的干擾素α、硫酸特布他林及其他輔料混合。制備過程中應(yīng)快速混合，注意避免 ΡΗ、溫度等的急劇變化，從而引起藥物活性成分干擾素α、硫酸特布他林的生物失活和/或化學(xué)降解。由于在藥物活性成分干擾素α、硫酸特布他林和輔料混合后，藥物活性成分之間， 輔料之間，以及每一藥物活性成分和輔料之間有可能會發(fā)生相互作用，引起藥物活性成分的生物失活和/或化學(xué)降解，從而降低霧化吸入劑的臨床使用效果，甚至給霧化吸入劑的臨床使用帶來安全性問題，所以需要對混合得到的霧化吸入劑進(jìn)行必要的檢測，以確認(rèn)這樣的生物失活和/或化學(xué)降解不存在或很少存在。所述的霧化吸入劑的必要的檢測手段包括但不局限于外觀檢測(觀察干擾素α、硫酸特布他林和輔料混合后是否有顏色的變化、 氣體的出現(xiàn)和/或沉淀的產(chǎn)生)、ρΗ檢測、干擾素α生物活性檢測、干擾素α含量檢測、干擾素α分子量檢測、干擾素α N末端序列檢測、干擾素α C末端序列檢測、干擾素α氨基酸組成分析檢測、硫酸特布他林含量檢測、硫酸特布他林純度檢測等。優(yōu)選進(jìn)行干擾素α 活性檢測、干擾素α分子量檢測、硫酸特布他林純度和含量檢測。干擾素α活性檢測優(yōu)選采用《中國藥典2010版(三部)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法。干擾素α分子量檢測應(yīng)采用質(zhì)譜法而不是電泳法，因?yàn)橘|(zhì)譜法可以檢測到干擾素α氨基酸序列上的微小變化(干擾素α序列上幾個氨基酸的降解或替換就會導(dǎo)致干擾素α分子量的變化，從而可被質(zhì)譜檢測檢測到)，而電泳法的靈敏度則達(dá)不到。硫酸特布他林純度/含量檢測優(yōu)選采用《中國藥典2010版(二部)》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)反相HPLC法，因?yàn)檫@樣的方法可以保證檢出硫酸特布他林可能的降解產(chǎn)物，也可使硫酸特布他林與輔料在檢測中能充分分離，從而防止輔料對硫酸特布他林含量檢測的影響。為了確定某一保留時間的色譜峰是硫酸特布他林降解產(chǎn)物峰還是可溶性輔料成分峰，可以在相同的色譜條件下上各可溶性輔料對照品，通過保留時間比對進(jìn)行確定。根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知常識，在采用HPLC法對硫酸特布他林進(jìn)行含量檢測時， 需要在HPLC填料柱上分別上同體積不同濃度的硫酸特布他林對照品或同濃度不同體積的硫酸特布他林對照品以繪制工作曲線。在上述各種檢測中，如果需要進(jìn)行溶解處理，但應(yīng)采用溫和的條件防止溶解過程中干擾素α、硫酸特布他林生物失活和/或化學(xué)降解；為了消除可能存在的沉淀物對檢測的影響，需要對沉淀物進(jìn)行過濾或離心處理；為了消除大分子干擾素α對小分子硫酸特布他林純度/含量檢測的影響，可以用超濾法除去溶液中的干擾素α ；為了消除小分子可溶性物質(zhì)對干擾素α檢測的影響，可以用超濾、透析等方法除去溶液中的小分子物質(zhì)。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑單次給藥劑量中含有2. 5-30 μ g的干擾素α與0. 5-2mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑單次給藥劑量中含有10-20 μ g的干擾素α與1-1. 5mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑中的干擾素α是干擾素ah、干擾素2b和干擾素a Ib中的一種或以任意比例混合的幾種。在一種優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑中的干擾素α是干擾素a lb。本發(fā)明的另一個目的是提供干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑在制備治療病毒性肺炎藥物中的應(yīng)用。利用本發(fā)明的霧化吸入劑治療病毒性肺炎，可較單獨(dú)使用干擾素α或硫酸特布他林治療病毒性肺炎取得明顯更好的治療效果。


圖1是硫酸特布他林對照品上DIKMA Platisil C18反相高效液相色譜柱 (4. 6X250mm)后獲得的色譜圖。
具體實(shí)施例方式通過如下的實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不局限于如下的實(shí)施例。實(shí)施例1 干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑的制備按如下表1的方法制備干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑。其中“安福隆”(商品名)為天津華立達(dá)生物工程有限公司生產(chǎn)的規(guī)格為50 μ g/ml/支的重組人干擾素 α 2b注射液；“因特芬”(商品名)為沈陽三生制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的規(guī)格為50μ g/ml/ 支的重組人干擾素α 2α注射液；“運(yùn)德素”(商品名)為北京三元基因工程有限公司生產(chǎn)的規(guī)格為50 μ g/ml/支的重組人干擾素α Ib注射液，“博利康尼”(商品名)為阿斯利康生產(chǎn)的規(guī)格為5mg/anl/支的硫酸特布他林霧化液；“PBS”為含有0. 15mol/L NaCl的25mmol/ L磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(pH7.0)。以上各商品名在后續(xù)實(shí)施例中如無特別指出， 含義與本實(shí)施例中的含義相同。表1干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑的制備
權(quán)利要求
1.干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑，其特征是所述的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸特布他林與適宜量的可藥用輔料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是單次給藥劑量中含有2.5-30 μ g的干擾素α，0. 5-2mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的霧化吸入劑，其特征是單次給藥劑量中含有10-20μ g的干擾素α，1-1. 5mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含干擾素α活性保護(hù)劑，選自白蛋白、甘露醇、海藻糖、右旋糖酐中的一種或幾種的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含滲透壓調(diào)節(jié)劑，選自NaCl、甘露醇中的一種或兩種的組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的可藥用輔料包含防腐劑，選自苯扎氯銨、尼泊金酯、苯甲醇中的一種或幾種的組合。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的霧化吸入劑，其特征是所述的干擾素α是干擾素ah、干擾素2b和干擾素a Ib中的一種或以任意比例混合的幾種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的霧化吸入劑，其特征是所述的干擾素α是干擾素alb。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8之一所述的霧化吸入劑在制備治療病毒性肺炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于抗病毒藥物的組合物領(lǐng)域，涉及干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑。所述的霧化吸入劑含有治療有效量的干擾素α、硫酸特布他林與適宜量的可藥用輔料；優(yōu)選單次給藥劑量中含有2.5-30μg的干擾素α，0.5-2mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料；更優(yōu)選單次給藥劑量中含有10-20μg的干擾素α，1-1.5mg的硫酸特布他林，以及適宜量的可藥用輔料。用本發(fā)明的干擾素α與硫酸特布他林的霧化吸入劑治療病毒性肺炎，可較單獨(dú)使用干擾素α或硫酸特布他林治療明顯提高療效。
文檔編號A61P11/00GK102416167SQ201110407570
公開日2012年4月18日 申請日期2011年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月8日
發(fā)明者劉金毅, 周敏毅, 宋文進(jìn), 徐晨, 李潔, 程永慶 申請人:北京三元基因工程有限公司, 北京畢艾歐科技發(fā)展有限責(zé)任公司