專利名稱：重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物制品領(lǐng)域。特別是涉及一種重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠及其制備方法。
背景技術(shù)：
皮膚是機(jī)體避免遭受感染和脫水的重要屏障，嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒燙傷以及某些疾病例如糖尿病引起的皮膚潰瘍會給患者帶來身體和精神上的巨大影響。因此，對皮膚創(chuàng)面的修復(fù)是醫(yī)藥領(lǐng)域十分關(guān)注的問題。自上世紀(jì)末開始，已對創(chuàng)傷后的組織修復(fù)過程、發(fā)生機(jī)制和治療等進(jìn)行了多種研究，其中，分子生物學(xué)的迅速發(fā)展以及各學(xué)科之間的相互交叉影響，使創(chuàng)傷修復(fù)與組織再生等水平得到不斷提升。目前，已構(gòu)建了多種促進(jìn)肉芽組織生長、血管化和再上皮化的基因， 例如表皮細(xì)胞因子、堿性成纖維細(xì)胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子等。已發(fā)現(xiàn)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic fibroblast growth factor，簡寫為 bFGF)在體內(nèi)可參與多種組織的創(chuàng)傷修復(fù)過程，是重要的創(chuàng)傷愈合因子之一，它能誘導(dǎo)微血管的形成、發(fā)育和分化，同時直接刺激成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白合成，以形成膠原纖維，增加創(chuàng)面的抗張力強(qiáng)度，并促進(jìn)真皮細(xì)胞的移行、分裂、分化，以完成皮膚的修復(fù)過程， 并能促進(jìn)皮膚軟骨組織、骨組織和神經(jīng)組織損傷修復(fù)和肢體再生。大量基礎(chǔ)研究和臨床試驗證實，bFGF對燒傷、外傷及各種慢性難愈合創(chuàng)面具有顯著的促修復(fù)作用，并且安全、有效、 無不良反應(yīng)。重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Recombinant bovine basic fibroblast growth factor，簡寫為rb-bFGF)是由含有高效表達(dá)牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子基因的大腸桿菌，經(jīng)發(fā)酵、分離和高度純化后得到的活性因子。rb-bFGF可促進(jìn)創(chuàng)面愈合，用于燒傷創(chuàng)面(包括淺II度、深I(lǐng)I度、肉芽創(chuàng)面)、慢性創(chuàng)面(包括體表慢性潰瘍等)和新鮮創(chuàng)面(包括外傷、供皮區(qū)創(chuàng)面、手術(shù)傷等)。中國專利申請200510036465(申請人為南海朗肽制藥有限公司)公開了一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠劑，其由重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子原液和可藥用輔料組成，其中可藥用輔料選自卡波姆940NF、透明質(zhì)酸鈉、海藻糖、甘露醇、右旋糖酐40、 肝素鈉。中國專利申請200510009218(申請人為北京雙鷺立醫(yī)藥科技有限公司)公開了一種重組人堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠劑，其凝膠基質(zhì)包括增稠劑(選自重量百分比為 0. 1-10%的羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙二醇、卡波姆、甲殼胺)、保濕劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、PH調(diào)節(jié)劑和水。但是，上述公開的兩種凝膠劑中均使用了種類多、用量大的輔料，給生產(chǎn)過程和制劑穩(wěn)定性帶來不可預(yù)料的困難。因此，需要開發(fā)一種rb-bFGF的凝膠劑，其不僅使用的輔料簡單，并且具有較好的穩(wěn)定性和釋放效果
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題對現(xiàn)有的bFGF凝膠劑進(jìn)行改進(jìn)，提供一種經(jīng)濟(jì)實用、穩(wěn)定性好的重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠及其制備方法。本發(fā)明的發(fā)明目的通過以下的實施方式來實現(xiàn)。一種重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠，其特征在于所述凝膠的組分及用量為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子10000-30000IU ；蛋白保護(hù)劑0.5-2. 5mg;凝膠基質(zhì)10-30mg;pH調(diào)節(jié)劑適量；注射用水加至5ml;其中，所述的蛋白保護(hù)劑選自人血白蛋白、甘露醇和聚乙二醇，優(yōu)選人血白蛋白； 所述的凝膠基質(zhì)選自羥丙基甲基纖維素和卡波姆，優(yōu)選羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸；在一個優(yōu)選的實施方式中，重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠的組分及用量為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子21000IU ；蛋白保護(hù)劑1.5mg;凝膠基質(zhì)20mg ；pH調(diào)節(jié)劑適量；注射用水加至5ml ；其中，所述的蛋白保護(hù)劑為人血白蛋白；所述的凝膠基質(zhì)為羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸；上述重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠的制備方法包含以下步驟(1)將凝膠基質(zhì)用適量注射用水溶脹，調(diào)pH值使形成透明凝膠，然后在121°C熱壓滅菌，冷卻后備用；(2)將重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子和蛋白保護(hù)劑溶于適量的注射用水中，用 0.22 um濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟⑴得到的透明凝膠和步驟(2)得到的溶液混合均勻，分裝即得。優(yōu)選的，制備方法為(1)將10_30mg凝膠基質(zhì)用適量注射用水溶脹，調(diào)pH值使形成透明凝膠，然后在 121°C熱壓滅菌，冷卻后備用；(2)將10000-30000IU重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子和0. 2-2. 5mg蛋白保護(hù)劑溶于適量的注射用水中，用0. 22 μ m濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟⑴得到的透明凝膠和步驟⑵得到的溶液混合均勻，分裝即得。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下的優(yōu)點和效果①本發(fā)明凝膠劑中的輔料種類少、用量低，減少了配伍禁忌和輔料可能給人體帶來的危害；
②本發(fā)明的凝膠劑釋藥速度適中、作用持久，能更加有效地促進(jìn)創(chuàng)面愈合；③本發(fā)明凝膠劑使用方便、經(jīng)濟(jì)實用，增加了病人的依從性。
具體實施例方式下面結(jié)合本發(fā)明較佳的實施例做進(jìn)一步的說明，這些實施例應(yīng)理解為不會限制本發(fā)明的實施范圍，其變型及等同方式均被涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實施例1 處方
重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子2100000IU; 人血白蛋白1.5 g; 卡波姆20g;
氫氧化鈉適量；
注射用水加至5000 ml;_
共制1000支具體制備方法為將卡波姆和用適量注射用水溶脹，調(diào)pH值使形成透明凝膠，然后在121°C熱壓滅菌，冷卻后備用；將重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子和人血白蛋白溶于適量的注射用水中， 用0. 22 μ m濾膜過濾除菌；在無菌條件下將上述的透明凝膠和濾液混合均勻，分裝即得。實施例2 處方
重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子180000IU; 人血白蛋白2.0 g; 卡波姆25 g；
氫氧化鈉適量；
注射用水加至5000 g;_
共制1000支具體制備方法為將卡波姆、羥丙基甲基纖維素和用適量注射用水溶脹，調(diào)PH值使形成透明凝膠， 然后在121°C熱壓滅菌，冷卻后備用；將重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子和人血白蛋白溶于適量的注射用水中，用0. 22μπι濾膜過濾除菌；在無菌條件下將上述的透明凝膠和濾液混合均勻，分裝即得。實施例3 處方
權(quán)利要求
1.一種重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠，其特征在于所述凝膠的組分及用量為 重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子10000-30000IU ；蛋白保護(hù)劑0. 5-2. 5mg； 凝膠基質(zhì)10_30mg ； PH調(diào)節(jié)劑適量； 注射用水加至5ml ；其中，所述的蛋白保護(hù)劑選自人血白蛋白、甘露醇和聚乙二醇，所述的凝膠基質(zhì)選自羥丙基甲基纖維素和卡波姆，所述的PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠，其特征在于所述凝膠的組分及用量為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子21000IU ； 蛋白保護(hù)劑1.5mg; 凝膠基質(zhì)20. mg ； PH調(diào)節(jié)劑適量； 注射用水加至5ml ；其中，所述的蛋白保護(hù)劑為人血白蛋白；所述的凝膠基質(zhì)為羥丙基甲基纖維素和卡波姆；所述的PH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉或鹽酸；
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠的制備方法，其特征在于包含以下步驟(1)將凝膠基質(zhì)用適量注射用水溶脹，調(diào)PH值使形成透明凝膠，然后在121°C熱壓滅菌，冷卻后備用；(2)將重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子和蛋白保護(hù)劑溶于適量的注射用水中，用 0.22 um濾膜過濾除菌；(3)在無菌條件下將步驟(1)得到的透明凝膠和步驟( 得到的溶液混合均勻，分裝即
全文摘要
一種重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠及其制備方法。所述凝膠的組分及用量為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子10000-30000IU；蛋白保護(hù)劑0.5-2.5mg；凝膠基質(zhì)10-30mg；pH調(diào)節(jié)劑適量；注射用水加至5ml；該凝膠劑輔料簡單，并且能達(dá)到較好的穩(wěn)定性和釋放效果，可有效治療各種燒燙傷、外傷創(chuàng)面。
文檔編號A61K47/42GK102357242SQ20111034242
公開日2012年2月22日 申請日期2011年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月2日
發(fā)明者姜若峰, 尋新平, 朱愛堂, 藍(lán)瑄, 鄭贊順, 陳詠, 陳雄來 申請人:珠海億勝生物制藥有限公司