專利名稱：一種治療血小板減少癥的中藥組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物，具體說，是涉及一種治療血小板減少癥的中藥組合物及其制備方法和應用，屬于中藥技術領域。
背景技術：
血小板減少癥,是外周血中血小板減少(< 10萬/ii I)而導致皮膚粘膜及內臟出血的疾病，主要表現為白發(fā)性皮膚瘀點和瘀斑，粘膜出血、鼻衄和牙齦出血、口腔黏膜及舌出現紫血泡等，是臨床常見的以凝血功能障礙、出血為特點的一類疾病，重者可引起大出血，危及生命，臨床約占出血性疾病的30%。血小板減少的原因可分為(I)血小板生成減少或無效死亡包括遺傳性和獲得性兩種，獲得性血小板生成減少是由于某些因素如藥物、惡性腫瘤、感染、電離輻射等損傷造血干細胞或影響其在骨髓中增殖所致，可影響多個造血細胞系統(tǒng)，常伴有不同程度貧血、白細胞減少、骨髓巨核細胞明顯減少；(2)血小板破壞過多包括先天性和獲得性兩種。獲得性血小板破壞過多包括免疫性和非免疫性。免疫性血小板破壞過多常見的有特發(fā)性血小板減少性紫癜和藥物血小板減少。非免疫性血小板減少破壞過多包括感染、彌漫性血管內凝血、血栓性血小板減少性紫癜等；(3)血小板在脾內滯留過多最常見于脾功能亢進。血 小板減少癥的發(fā)病機制包括1)免疫性因素臨床可見嚴重肝病、紅斑狼瘡、特發(fā)性血小板減少性紫癜等免疫性疾病引起血小板減少的情況，抗體破壞血小板；2)感染性因素引起血小板減少癥的常見因素，細菌、病毒感染可直接損傷造血細胞，減少血小板生長，再生障礙性貧血、急性白血病等急性發(fā)作期常伴嚴重感染，有出血傾向，如皮膚上有瘀點、紅斑或原因不明的鼻出血等表現；3)藥物性因素因某些藥物致使周圍血液中血小板計數減少而導致的出血性疾??；4)血小板功能異常如血小板無力癥、巨大血小板綜合癥
坐寸o血小板減少癥在臨床常見兩大類免疫性血小板減少性紫癒(immunethrombocytopenic purpura, ITP)和血栓性血小板減少性紫癒(thromboticthrombocytopenic purpura, TTP)。其中，ITP是臨床所見血小板減少最常見的原因。長期以來，ITP被認為是一種原因不明的血小板減少所致的出血性疾病，因而稱之為原發(fā)性或特發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenicpurpura)。后來發(fā)現ITP患者體內存在有識別自身血小板抗原的自身抗體，自身抗體與血小板抗原的結合導致血小板壽命縮短、破壞增加和血小板數量減少,說明本病是一種與免疫反應相關的出血性疾病。在臨床中，免疫性血小板減少性紫癜(ITP)是一種較為常見的出血性疾病，估計人群中ITP的發(fā)病率為1/10000，可以發(fā)生在任何年齡階段。一般兒童多為急性型，成人多為慢性型，多發(fā)生于兒童及青年，臨床表現為皮膚出現瘀點及瘀斑，皮膚黏膜出血，重癥患者伴關節(jié)疼痛或腹痛，便血、吐血、崩潰等，嚴重者可發(fā)展為紫癜性腎炎。原發(fā)性血小板減少性紫癜是一種免疫性綜合病征，是常見的出血性疾病，特點是血循環(huán)中存在抗血小板抗體，使血小板破壞過多，引起紫癜；而骨髓中巨核細胞正?；蛟龆?幼稚化。到目前為止，西醫(yī)治療血小板減少性紫癜以腎上腺皮質激素為首選，雖然激素能升高血小板，但是激素減量或停止后，血小板又會下降；經常使用激素，對人體副作用非常大,在治療的同時還會引起如向心性肥胖、高血壓、糖尿病等疾病。其他治療方法如輸注血小板、脾臟切除等方法治療，有增加感染率，引起活動性消化性潰瘍、出血、免疫功能下降、高血糖等以及停藥后反而使癥狀加重且療效不持久等特點；采用免疫抑制劑、脾切除等常規(guī)療法，因激素的禁忌癥和副作用而使很多患者形成激素撤減綜合癥而不能根治；而免疫抑制劑的毒副作用較大，停藥后易復發(fā)，易導致骨髓抑制和誘發(fā)腫瘤的危險而不能廣泛應用。近年來，大劑量丙球沖擊，血漿置換等新療法不斷出現，但仍缺乏根本性的治療措施。而中藥用于治療出血性疾病，歷史由來已久，古書記載治療出血性疾病的中藥也有幾十種之多。但是有些中藥材治標不治本，可以在臨床上對出血癥狀有所改善，但是并不能提高血小板數量和質量。

發(fā)明內容
針對現有技術所存在的上述問題和缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種治療血小板減少癥的中藥組合物及其制備方法和應用。為實現上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案如下一種治療血小板減少癥的中藥組合物，其特征在于，由中藥材茜草與紫草按質量比為1: 3 3 :1制備而成。作為優(yōu)選方案，所述的治療血小板減少癥的中藥組合物，是由中藥材茜草與紫草按質量比為1:1制備而成。上述中藥組合物的制備方法包括如下步驟

a)茜草的提取精制取茜草藥材，用乙醇水溶液回流提取2次，每次I 3小時；合并提取液，減壓回收乙醇，得茜草浸膏；用適量水溶解所得浸膏，經大孔吸附樹脂柱(非極性或弱極性樹脂)吸附，吸附后先用去離子水洗脫雜質，再用體積分數為90%的乙醇水溶液洗脫，然后收集洗脫液，減壓回收乙醇；干燥，即得茜草提取精制物，其中茜草醌類成分大于50% ；b)紫草的提取精制將紫草藥材粉碎成粗粉，用乙醇水溶液于55 60°C浸提2次，每次I小時；合并提取液，減壓回收乙醇，得紫草稠浸膏；加入質量濃度為I 2%的氫氧化鈉水溶液，充分攪拌，使稠浸膏溶解，并使溶液顏色由紫紅色變?yōu)樗{色；靜置，抽濾，殘渣用質量濃度為I 2%的氫氧化鈉水溶液沖洗3次，濾除殘渣；再向濾液中加入鹽酸，調pH值至4. 0 5. 0 ;攪拌，析出紅色固體，靜置，用蒸餾水將沉淀洗至中性，再于50 60°C減壓干燥，即得紫草提取精制物，其中羥基萘醌總色素的含量大于60% ；c)將步驟a)制得的茜草提取精制物與步驟b)制得的紫草提取精制物混勻，即得所述的中藥組合物。所述的乙醇水溶液推薦為體積分數為75 95%的乙醇水溶液，優(yōu)選體積分數為95%的乙醇水溶液。用乙醇水溶液回流提取茜草藥材時，每次所用的乙醇水溶液的體積優(yōu)選為茜草藥材質量的8 10倍。
用乙醇水溶液浸提紫草藥材時，每次所用的乙醇水溶液的體積優(yōu)選為紫草藥材質量的8 10倍。上述中藥組合物或所述中藥組合物與藥學上可接受的藥物載體可應用于制備治療血小板減少癥的藥物制劑，尤其可應用于制備治療免疫性血小板減少癥的藥物制劑。所述的藥物制劑可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散齊U、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑；優(yōu)選口服劑型，如膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等。所述的口服劑型可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、崩解劑、著色齊U、調味劑和濕潤劑，必要時可對片劑進行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑；適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉；適宜的潤滑劑包括，例如硬脂酸鎂；適宜的藥物可接受的濕潤劑包括十二烷基硫酸鈉。本發(fā)明的以中藥茜草和紫草提取物制備的組合物，可治療血小板減少癥，具有改善出血癥狀快、穩(wěn)定性好、無毒副作用等優(yōu)點。藥理藥效學實驗結果表明不同劑量組的本發(fā)明組合物均能極顯著縮短小鼠出血及凝血時間(P < 0.01)，高、中劑量組可顯著縮短慢性ITP模型大鼠的凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)及部分凝血活酶時間(APTT) (P
<0. 05)，且高、中劑量組有極顯著升高大鼠血小板作用(P < 0. 01)。
具體實施方式
下面結合具體實施例進一步闡述本發(fā)明。這些實施例應理解為僅用于說明本發(fā)明而不是用于限制本發(fā)明的保護范圍。在閱讀了本發(fā)明記載的內容之后，本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等效變化和修飾同樣落入本發(fā)明權利要求書所限定的范圍。實施例1a)茜草的提取精制取茜草藥材300kg，用藥材質量10倍量的體積分數為95%的乙醇水溶液回流提取，每次1. 5小時，提取2次；合并提取液，減壓回收乙醇，得茜草粗浸膏；用300L水溶解該浸膏，經大孔吸附樹脂柱吸附，吸附完全后先用去離子水洗去水溶性雜質，再以8倍量體積的體積分數為90%的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇；干燥，即得茜草提取物
5.0kg，該茜草提取物為深褐色固體。參照2010版《中國藥典》茜草項下鑒別薄層鑒別方法，制備該提取物的適當溶度的供試品溶液和對照藥材溶液，并以大葉茜草素為對照品，配制對照品溶液。照薄層色譜法，吸取各樣品適量，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C )-丙酮(4 I)為展開劑，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在于對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。另以甲醇為溶劑配制該提取物至適當濃度，超聲溶解，定容至棕色量瓶中，以紫外-分光光度法在250nm波長下檢測，以大葉茜草素為對照品，測得該提取物中含茜草醌類成分為50. 11%。該提取物的水分含量為4. 78%。
b)紫草的提取精制將紫草藥材300kg粉碎成粗粉，用藥材質量10倍量的體積分數為95%的乙醇水溶液于55°C浸提，每次I小時，浸提2次；合并提取液，減壓回收乙醇至稠浸膏；加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液約600ml，充分攪拌，使稠浸膏溶解，并使溶液由紫紅色變?yōu)樗{色；靜置，抽濾，殘渣用質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液沖洗3次，濾除殘渣；再向濾液中加入濃鹽酸，調PH值約至4.0;攪拌，析出紅色固體，靜置，抽濾，用蒸餾水將沉淀洗至中性，再將所得固體在50°C減壓真空干燥，即得紫草提取物10. 0kg，該紫草提取物為紅棕色固體。參照2010版《中國藥典》紫草項下鑒別薄層鑒別方法，制備該提取物的適當濃度的供試品溶液和對照藥材溶液，以環(huán)己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5 5 0. 5 0.1)為展開劑，點樣于同一硅膠G薄層板上，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；再噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，斑點變?yōu)樗{色。另經紫外-分光光度發(fā)測定(入=516nm)，所得固體中羥基萘醌總色素的含量為74. 15%。該提取物的水分含量為4. 5%。實施例2取質量比為1:1的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物50g、紫草提取物IOOg;將二者混勻，并加入淀粉80g、糊精120g、羧甲基淀粉鈉20g,以體積分數為50%的乙醇水溶液作為粘合劑，制軟材，過14目篩制顆粒，干燥，加入適量滑石粉壓片，素片包薄膜衣，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的包衣片。實施例3取質量比為1:1的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物76. 7g、紫草提取物153. 3g ;將二者混勻，并加入加入乳糖480g，甘露醇100g，交聯PVP100g，95%乙醇適量，硬脂 酸鎂15g，壓制成片，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的固體分散片。實施例4取質量比為1: 3的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物14. 3g、紫草提取物85. 7g;將二者混勻，并按質量比為1: 2比例加入聚乙二醇4000，混勻，加熱熔融，密閉并保溫在80°C，滴入0 10°C液體石蠟中，收集滴丸，浙盡并擦去冷卻液，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的滴丸劑。實施例5取質量比為1: 2的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物100g、紫草提取物IOOg ;將二者混勻，并加入乳糖90g，硬脂酸鎂1. 5g，混勻后壓大片，將此預壓片在搖擺式顆粒機中破碎，整粒，用鋁塑復合膜分裝，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的顆粒劑。實施例6取質量比為2 I的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物40g、紫草提取物160g ;將二者混勻，并加入淀粉150g，混勻，過七號篩，裝膠囊，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的膠囊劑。實施例7將20g蜂蠟、500g大豆油加熱至約50°C，攪拌待其完全熔融，即制成蜂蠟油；再取質量比為2 I的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物100g、紫草提取物400g ;將二者混勻，并加入蜂蠟油中，攪勻；用膠體磨濕法粉碎過篩，制成油混懸劑，備用；取30(^明膠加入適量水，使之吸水膨脹，將150g甘油加熱后加入已膨脹的明膠中，攪拌加熱至熔融；將外殼膠液過濾抽氣，除去部分水分和泡沫，使用轉模式軟膠囊制造機，將調配好的內容物壓入外殼膠片，包于其中形成軟膠囊。洗去膠囊表面的油污，置于溫度為25 30°C，相對濕度為20 25%的烘箱中干燥，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的軟膠囊劑。實施例8取質量比為3 I的茜草、紫草為原料，按照本發(fā)明所述的提取精制工藝，制得茜草提取物240g、紫草提取物160g ;將二者混勻，并以水為潤濕劑制成丸，干燥，打光，即得含本發(fā)明所述的中藥組合物的濃縮丸劑。實施例9 :藥效學實驗1.材料和方法1.1實驗動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重20±2. Og ;Wistar大鼠，體重200±20g，雌雄各半。實驗動物由上海中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號為SCXK(滬)2007-0005。1. 2試驗藥品由實施例1制得的茜草提取物和紫草提取物混勻制得的本發(fā)明所述的中藥組合物。酚磺乙胺(止血 敏)蕪湖康奇制藥有限公司生產，批號20040216。生理鹽水鄭州市永和制藥有限公司生產，批號04071005。1. 3藥物的配制本發(fā)明中藥組合物生理鹽水配制，分別配制高、中、低濃度，濃度分別為0. 5g總生藥/暈升、1. Og總生藥/暈升、2. Og總生藥/暈升；酚磺乙胺生理鹽水配制，濃度為0. lmg/ml ；2.實驗方法和結果2.1出血時間的測定設定生理鹽水組(空白對照組)，止血敏組(陽性對照組)，給藥組(高、中、低)，每個處理組選取小鼠50只，稱重，隨機分成5組，每組10只。連續(xù)給藥3d，于末次給藥后Ih后取濾紙卷成與小鼠身體直徑相似的濾紙筒，一端封閉，讓小鼠鉆入；然后用剪刀剪小鼠尾尖約3mm，從出血開始按下秒表計時，每隔15s用濾紙輕點小鼠尾尖，直至無血跡或看不清血跡為止，所記時間即為出血時間，結果見表I所示。2. 2凝血時間的測定設定生理鹽水組(空白對照組)，止血敏組(陽性對照組)，給藥組(高、中、低)，每個處理組選取小鼠50只，稱重，隨機分成5組，每組10只。給藥3d后，于末次給藥Ih后，用一次性20 ii I采血管插入小鼠內眥球后靜脈叢取血，取滿20ii I血。每隔15s折斷毛細血管一小段，檢查有無血凝絲出現，記錄從采血至出現纖維蛋白絲的時間(凝血時間)，結果見表I所示。表1.出血時間和凝血時間的測定結果
權利要求
1.一種治療血小板減少癥的中藥組合物，其特征在于由中藥材茜草與紫草按質量比為1: 3 3 :1制備而成。
2.根據權利要求1所述的治療血小板減少癥的中藥組合物，其特征在于由中藥材茜草 與紫草按質量比為1:1制備而成。
3.一種權利要求1所述的治療血小板減少癥的中藥組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 a)茜草的提取精制取茜草藥材，用乙醇水溶液回流提取2次，每次I 3小時；合并提取液，減壓回收乙醇，得茜草浸膏；用適量水溶解所得浸膏，經大孔吸附樹脂柱(非極性或弱極性樹脂)吸附，吸附后先用去離子水洗脫雜質，再用體積分數為90%的乙醇水溶液洗脫，然后收集洗脫液，減壓回收乙醇；干燥，即得茜草提取精制物，其中茜草醌類成分大于50% ； b)紫草的提取精制將紫草藥材粉碎成粗粉，用乙醇水溶液于55 60°C浸提2次，每次I小時；合并提取液，減壓回收乙醇，得紫草稠浸膏；加入質量濃度為I 2%的氫氧化鈉水溶液，充分攪拌，使稠浸膏溶解，并使溶液顏色由紫紅色變?yōu)樗{色；靜置，抽濾，殘渣用質量濃度為I 2%的氫氧化鈉水溶液沖洗3次，濾除殘渣；再向濾液中加入鹽酸，調pH值至4. 0 5. 0 ;攪拌，析出紅色固體，靜置，用蒸餾水將沉淀洗至中性，再于50 60°C減壓干燥，即得紫草提取精制物，其中羥基萘醌總色素的含量大于60% ； c)將步驟a)制得的茜草提取精制物與步驟b)制得的紫草提取精制物混勻，即得所述的中藥組合物。
4.根據權利要求3所述的治療血小板減少癥的中藥組合物的制備方法，其特征在于所述的乙醇水溶液為體積分數為75 95%的乙醇水溶液。
5.根據權利要求4所述的治療血小板減少癥的中藥組合物的制備方法，其特征在于所述的乙醇水溶液為體積分數為95%的乙醇水溶液。
6.根據權利要求4所述的治療血小板減少癥的中藥組合物的制備方法，其特征在于用乙醇水溶液回流提取茜草藥材時,每次所用的乙醇水溶液的體積為茜草藥材質量的8 10倍。
7.根據權利要求4所述的治療血小板減少癥的中藥組合物的制備方法，其特征在于用乙醇水溶液浸提紫草藥材時,每次所用的乙醇水溶液的體積為紫草藥材質量的8 10倍。
8.權利要求1所述的治療血小板減少癥的中藥組合物或所述的中藥組合物與藥學上可接受的藥物載體在制備治療血小板減少癥的藥物制劑中的應用。
9.權利要求1所述的治療血小板減少癥的中藥組合物或所述的中藥組合物與藥學上可接受的藥物載體在制備治療免疫性血小板減少癥的藥物制劑中的應用。
10.根據權利要求8或9所述的應用，其特征在于所述的藥物制劑包括薄膜包衣片、固體分散片、顆粒劑、膠囊劑、軟膠囊劑、濃縮丸劑和滴丸劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療血小板減少癥的中藥組合物及其制備方法和應用。所述的中藥組合物是由中藥材茜草與紫草按質量比為1∶3～3∶1制備而成。該組合物的制備，是首先制得茜草提取精制物和紫草提取精制物，然后將兩者混勻。藥理藥效學實驗結果表明不同劑量組的本發(fā)明組合物均能極顯著縮短小鼠出血及凝血時間，高、中劑量組可顯著縮短慢性ITP模型大鼠的凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)及部分凝血活酶時間(APTT)，且高、中劑量組有極顯著升高大鼠血小板作用。因此，本發(fā)明的中藥組合物可應用于制備治療血小板減少癥的藥物制劑，尤其可應用于制備治療免疫性血小板減少癥的藥物制劑。
文檔編號A61K36/74GK103054976SQ20111032204
公開日2013年4月24日 申請日期2011年10月21日 優(yōu)先權日2011年10月21日
發(fā)明者季光, 浦益瓊, 張彤, 王冰, 李國文, 陶建生 申請人:上海中醫(yī)藥大學