專利名稱：丹參總酚酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物的制備方法，具體地說，是涉及從中藥丹參中提取丹 參總酚酸的方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，
背景技術(shù)：
丹參為唇形科植物丹參salviz miltiorrhiza Bge.的干燥根及根莖，具有活血祛 瘀、涼血消癰、除煩安神的功效?，F(xiàn)代藥理研究證實，丹參具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、增加 心肌供氧量和供血量、降低心肌耗氧量等作用。丹參主要含有水溶性和脂溶性兩大類成分。 脂溶性成分是以丹參酮為代表的醌類化合物，具有明顯的抗炎作用；水溶性成分是以原兒 茶醛為代表的酚酸類成分，是治療心血管系統(tǒng)疾病的主要成分。(富志軍等，濃縮、精制及干 燥對復(fù)方丹參提取液中水溶性成分的影響.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，22 O) :52 目前丹參的水溶性酚酸類成分多采用水提醇沉、水提后過樹脂再醇沉(中國專利 CN 1129572A)、水提醇沉后過大孔樹脂(中國專利CN 1384090A)或聚酰胺柱(中國專利CN 1242364A)、水提后先后用聚酰胺柱和大孔樹脂層析(中國專利CN1459448A)，然后減壓或 冷凍干燥等方法來獲得。但以上方法制備丹參總酚酸都存在一些問題，影響到產(chǎn)業(yè)化和成 品的得率。首先，以上方法中多數(shù)采用了水煎煮或長時間加熱(50 60°C)的方法提取，而 丹酚酸為一多元酚結(jié)構(gòu)，受熱極易氧化降解，失去療效，因而嚴(yán)重影響產(chǎn)品的質(zhì)量及療效； 其次，多數(shù)提取方法采用高濃度乙醇沉淀這一步驟，使產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)安全性大大降低，乙醇消 耗量大，生產(chǎn)成本高；第三，上述方法提取時，需要大量的濃縮水，不便于工業(yè)化大生產(chǎn)，操 作較為復(fù)雜；第四，上述方法提取得到的丹參酚酸產(chǎn)率較低，一般在2 4 %，低的產(chǎn)率亦使 工業(yè)化生產(chǎn)成本加大，帶來困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種丹參總酚酸的提取方法，本發(fā)明還提供了含有丹 參總酚酸提取物的藥物組合物。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實施a、丹參去雜質(zhì)，蒸汽軟化，切碎成飲片；b、丹參飲片，冷水浸漬，用滲漉法提取，收集滲漉液；C、滲漉液離心，取上清液通過大孔吸附樹脂，然后洗脫，先用水洗，再用乙醇洗脫， 收集乙醇洗脫液；d、洗脫液減壓濃縮、干燥即得。其中，步驟(a)中，冷水(10 25°C )浸漬時間為6 M小時，滲漉時間為12 24小時。
步驟(b)中，大孔吸附樹脂為苯乙烯型，上柱藥液中丹參酚酸B 樹脂(重量比) =1 40 50，洗脫時，水洗脫體積為樹脂的1 5倍，乙醇體積為樹脂的2 5倍，流速 控制在1 3倍體積/小時。乙醇洗脫濃度為30 95%。步驟(c)中，干燥溫度為50 70°C。優(yōu)選的是，步驟(a)中，冷水浸漬時間為6小時，滲漉時間為M小時。大孔吸附樹脂為HPD100，上柱藥液中丹參酚酸B 樹脂(重量比)=1 40，洗 脫時加水洗脫體積為樹脂的1 1. 5倍，乙醇體積為樹脂的4倍，流速控制在1 1. 5倍體 積/小時。乙醇洗脫濃度為70 95%。從工業(yè)化生產(chǎn)的角度考慮，用70%乙醇洗脫，可使 成本降低，生產(chǎn)安全。上述本發(fā)明技術(shù)方案各步驟中所有的參數(shù)，包括浸漬時間、滲漉速度和時間、大孔 樹脂型號、洗脫液體積、乙醇濃度、干燥溫度均為通過正交實驗篩選所得最佳條件。依照本發(fā)明的方法制成的丹參總酚酸，可制成任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型。如 用于口服的片劑、膠囊劑或顆粒劑等形式，用于注射的粉針劑、注射液等。也可配合其它藥 物或組分一起制成制劑使用。利用本發(fā)明方法得到的丹參總酚酸制備所需藥物的各種劑型時，可以按照藥學(xué)領(lǐng) 域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。例如利用本發(fā)明方法得到的丹參總酚酸與一種或多種藥學(xué)上可接 受的載體混合，然后制成相應(yīng)的劑型。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)勢和特點1、步驟簡單、操作方便、易于產(chǎn)業(yè)化。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)中需要大量濃縮水、 高濃度乙醇的缺陷，簡化了生產(chǎn)步驟，優(yōu)化了生產(chǎn)條件，能耗大大降低，不污染環(huán)境，使產(chǎn)業(yè) 化生產(chǎn)更容易實現(xiàn)。2、有效成分損失少，成品得率高。本發(fā)明避免了現(xiàn)有技術(shù)中因加熱和醇沉造成酚 酸有效成分的損失，穩(wěn)定性大大增加，成品得率提高，一般在5%以上，明顯高于現(xiàn)有技術(shù)所 采用的方法。3、成本低?；谏鲜鰞煞矫娴膬?yōu)點，本發(fā)明產(chǎn)業(yè)化時生產(chǎn)成本較目前采用其它方 法制備丹參總酚酸大大降低，為患者帶來了更多利益，也為社會帶來了經(jīng)濟(jì)效益。以下通過實施例的方式進(jìn)一步說明本發(fā)明的效果。
具體實施例方式實施例1從中藥丹參中提取丹參總酚酸丹參^g，蒸汽軟化。切成碎片，加去離子水25L，冷浸漬他，滲漉Mh，流速2L/h。 收集滲漉液45L，離心，上大孔吸附樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L70%乙醇洗脫， 收集乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度控制在60°C。得丹參酚酸干粉320g，成品產(chǎn)率6.4%。經(jīng) 檢測，丹酚酸B含量為71. 2 %，總酚酸含量為90. 4%。丹參酚酸B和丹參總酚酸的檢測方法(1)丹酚酸B 用HPLC法測定，檢測波長觀5歷，標(biāo)準(zhǔn)品丹酚酸B由中國藥品生物 制品檢定所提供，純度大于98%。(2)丹參總酚酸照紫外分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄VA)測定丹參 總酚酸；
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取對照品溶液(0. 05mg/ml) 1. 0、1· 5、2· 0、2· 5、3· 0ml, 甲醇-水(1 1)稀釋并定容于10ml。分別精密吸取上述兩種溶液各2ml于比色管中，分 別加入亞硝酸鈉(1-20)0. 5ml，放置5min，再加入硝酸鋁(1-10)0. 5ml，放置5min，再加入氫 氧化鈉試液5ml，搖勻，以相應(yīng)的溶劑為空白，照分光光度法在500nm波長處測定吸收度，以 吸收度為縱坐標(biāo)(y)，濃度為橫坐標(biāo)(χ)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到丹參總酚酸的計算公式y(tǒng) =9. 167x+0. 0185 (r = 0. 9991)測定法取本品10mg，精密稱定，置錐形瓶中，精密加甲醇 水(1 l)25ml，稱定重 量，超聲至完全溶解為止，放至室溫，再稱定重量，用甲醇 水(1 1)補(bǔ)足減失的重量，搖 勻，精密量取2ml稀釋至10ml，作為供試液。照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法測定吸收度值，代 入上面公式計算，即得樣品中丹參中酚酸的含量。實施例2從中藥丹參中提取丹參總酚酸丹參^g，蒸汽軟化。切成碎片，加去離子水25L，冷浸漬Mh，滲漉18h，流速2L/h。 收集滲漉液45L，離心，上大孔吸附樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L 95%乙醇洗脫， 收集乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度控制在60°C。得丹參酚酸干粉300g，成品產(chǎn)率6%。按實 施例1方法測定，丹酚酸B含量為62. 7 %，總酚酸含量為86. 4%。實施例3從中藥丹參中提取丹參總酚酸丹參^g，蒸汽軟化。切成碎片，加去離子水25L，冷浸漬12h，滲漉12h，流速2L/h。 收集滲漉液45L，離心，上大孔吸附樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L80%乙醇洗脫， 收集乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度控制在60°C。得丹參酚酸干粉275g，成品產(chǎn)率5.5%。按 實施例1方法測定，丹酚酸B含量為61. 5%，總酚酸含量為82. 5%。實施例4膠囊劑的制備丹參總酚酸提取物360g微晶硅膠10. 8g共制成1000粒取丹參總酚酸提取物與微晶硅膠過80目篩混合均勻，充填于1號膠囊中，即得，每 粒含丹參總酚酸提取物360mg。實施例5片劑的制備丹參總酚酸提取物360gPEG600070g滑石粉1.4%共制成1000片取丹參總酚酸提取物與PEG6000、滑石粉過篩混合均勻，干粉直接壓片，即得，每片 含丹參總酚酸提取物360mg。實施例6顆粒劑的制備丹參總酚酸提取物360g微晶纖維素70g滑石粉1.4%3%聚維酮乙醇溶液適量共制成500袋
取丹參總酚酸提取物與微晶纖維素混合均勻，加3%聚維酮乙醇溶液制軟材，過 18目篩制顆粒，50°C干燥30 60min，整粒，加入滑石粉，混勻，裝袋，即得，每袋含丹參總酚 酸提取物720mg。實施例7粉針劑的制備
丹參總酚酸提取物甘露醇依地酸鈣鈉注射用水
IOOg 30g 5g 5ml上述組分混合后，冷凍干燥，分裝1000支，即得注射用凍干粉。實施例8丹參總酚酸提取物對腎性高血壓大鼠血壓的影響造模方法雌雄SD大鼠，體重200 220g，實驗動物中心提供。腹腔注射戊巴比妥 30mg/kg麻醉大鼠，在大鼠左腰側(cè)行切口，將左側(cè)腎臟牽拉出，分離腎動脈起始部，用0. 2mm 銀夾夾住腎動脈，使之狹窄；并以只分離腎動脈但不用銀夾狹窄腎動脈作為對照(即假手 術(shù)大鼠)，縫合皮膚。術(shù)后每兩周測定血壓一次，血壓測定用RBP-IB大鼠血壓計(由北京中 日友好醫(yī)院研制)測定尾動脈收縮壓，每次測量時，重復(fù)三次，取平均值作為當(dāng)日血壓，術(shù) 后5周血壓大于18kPa者視為高血壓大鼠。實驗大鼠分為四組即假手術(shù)組、模型組、陽性組、丹參總酚酸提取物組(以下簡 稱丹參組)，以雷米普利(德國赫斯特公司，批號40ffi42)為陽性對照藥物，給藥劑量為 lmg/kg/d ；丹參組給藥劑量為500mg/kg/d，連續(xù)給藥4周，假手術(shù)組與模型組灌胃等體積的 生理鹽水，分別于給藥2周、4周后測定大鼠血壓值。結(jié)果如表1所示。表1丹參總酚酸提取物對腎性高血壓大鼠血壓兩影響(X士s，η = 6)
權(quán)利要求
1.一種丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，包括如下步驟，a、丹參飲片，冷水浸漬，用滲漉法提取，收集滲漉液；b、滲漉液離心，取上清液通過大孔吸附樹脂，然后洗脫，先用水洗，再用乙醇洗脫，收集 乙醇洗脫液；c、洗脫液減壓濃縮、干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟a中，冷水溫度為 10 25°C，浸漬時間為6 M小時，滲漉時間為12 M小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟a中，冷水浸漬時 間為6小時，滲漉時間為M小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟b中，大孔吸附樹 脂為苯乙烯型，上柱量丹參酚酸B 樹脂的重量比=1 40 50，洗脫時加水體積為樹脂 的1 5倍，乙醇體積為樹脂的2 5倍，流速控制在1 3倍體積/小時，乙醇洗脫濃度 為30 95%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟b中，大孔吸附樹 脂為HPD100，上柱藥液中丹參酚酸B 樹脂的重量比=1 40，洗脫時加水體積為樹脂的 1 1. 5倍，乙醇體積為樹脂的4倍，流速控制在1 1. 5倍體積/小時，乙醇洗脫濃度為 70 95%。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟b中，乙醇洗脫濃 度為70%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，步驟c中，干燥溫度為 50 70 。
8.一種丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，包括如下步驟丹參^g，蒸汽軟化；切成碎片，加去離子水25L，冷浸漬他，滲漉Mh，流速2L/h ；收集 滲漉液45L，離心，上大孔吸附樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L70%乙醇洗脫，收集 乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度控制在60°C。
9.一種丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，包括如下步驟丹參^g，蒸汽軟化；切成 碎片，加去離子水25L，冷浸漬Mh，滲漉18h，流速2L/h。收集滲漉液45L，離心，上大孔吸附 樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L 95 %乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度 控制在60°C。
10.一種丹參總酚酸的制備方法，其特征在于，包括如下步驟丹參證8，蒸汽軟化。切 成碎片，加去離子水25L，冷浸漬12h，滲漉12h，流速2L/h。收集滲漉液45L，離心，上大孔吸 附樹脂柱HPD100，用7. 5L水洗脫，再加20L80%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓干燥，溫度 控制在60°C。
全文摘要
本發(fā)明公開一種丹參總酚酸的制備方法及其用途。其制備方法為:丹參冷水浸漬后，用滲漉法提取，滲漉液通過大孔吸附樹脂吸附，洗脫，洗脫液減壓濃縮、干燥，即得丹參總酚酸。本發(fā)明方法制備丹參總酚酸具有步驟簡單、操作方便、成品得率高(一般在5%以上)、能耗少、無污染、安全性高、易于工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)勢和特點。所得的丹參總酚酸可作為防治心腦血管疾病等的藥物應(yīng)用。
文檔編號A61K36/537GK102091125SQ201110030328
公開日2011年6月15日 申請日期2005年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日
發(fā)明者付鐵軍, 李伯剛 申請人:成都地奧九泓制藥廠