專利名稱：斑蝥素囊泡及其制劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及斑蝥素囊泡及其制備方法、含有斑蝥素囊泡的制劑及其制備方法，屬于藥物制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代藥理研究，人類用斑蝥治療疾病已有2000多年的歷史，斑蝥為芫青科昆蟲南方大斑蝥或黃黑小斑蝥的干燥體。明代大醫(yī)學(xué)家李時珍在《本草綱目》巨著中稱斑蝥性味辛、寒，有大毒，有主治寒熱、鬼疰盅毒、鼠瘺、瘡疽、蝕死肌、破石癃、血積、傷人肌、治疥癬、墮胎、治瘰疬、通利水道、療淋疾、傅惡瘡瘺爛、治疝、解癤毒，治狂犬病等功效。近年來對斑蝥的研究主要集中于對其有效成分斑蝥素抗癌機制的探討、衍生物的研制和新劑型的開發(fā)方面，相繼合成了多種斑蝥素衍生物，如斑蝥酸鈉、羥基斑蝥胺、甲基斑蝥胺、去甲斑蝥素等?，F(xiàn)代臨床研究證實斑蝥在治療一些疑難雜癥方面，具有獨特的療效，如治療風(fēng)濕痛、神經(jīng)痛、梅核氣、斑禿、乳腺增生、鼻炎、傳染性疣、肝炎、癌腫等。斑蝥中含有斑蝥素、單萜烯類脂肪、樹脂、蟻酸及色素等成份，但抗癌活性成份為斑蝥素。藥理研究中發(fā)現(xiàn)，斑蝥對多種實驗動物移植性腫瘤有明顯抑制作用；斑蝥素對小鼠肉瘤-ISOHela細胞，腹水型網(wǎng)狀細胞瘤和腹水型肝癌有抑制作用，因斑蝥素干擾癌細胞中蛋白質(zhì)和核酸的合成。臨床運用中，斑蝥素及其衍生物對肝癌確有較好療效。據(jù)統(tǒng)計以斑蝥素制劑為主治療原發(fā)性肝癌中，有效率60%左右，可改善肝癌患者的臨床癥狀，延長生存期，部份病例腫塊縮小，白細胞多不下降，治療后1年生存率為12. %。也有用甲基斑蝥胺治療ΙΙ、ΙΙΙ期原發(fā)性肝癌時，半年以上生存率明顯高于5-Fu組，若將甲基斑蝥胺的單次用量增大5-10倍，半年以上生存率可得到明顯提高(由18. 9%升至57. 1% )，且未見明顯毒副作用。非離子表面活性劑囊泡(也有人稱為非離子性表面活性劑脂質(zhì)體)英文名為Non-ionic surfactant based vesicles，f^l^niosomes。禾中生齊[1 載體材料，通過自身閉合形成的雙分子層微型或多室囊泡狀載體。利用非離子表面活性劑囊泡包裹藥物可以減少藥物在達到有效部位前被破壞、延長藥物的半衰期、從而延長藥物的作用時間以及降低毒副作用，改變藥物在體內(nèi)的分布，達到被動靶向作用等，在加入適當(dāng)特殊輔料后也可以達到主動靶向的作用。與脂質(zhì)體相比，非離子表面活性劑囊泡的載體材料不含磷脂，避免了磷脂的氧化降解，生產(chǎn)和貯存皆不需特殊條件，可使工藝簡化、成本降低，是一種極有希望的新型藥物載體。由于非離子表面活性劑毒性較小，具有生物相容性和可降解性，不解離，不發(fā)生氧化水解，易大量生產(chǎn)，且可根據(jù)用途設(shè)計其結(jié)構(gòu)，因此近年來對其研究的人越來越多。囊泡技術(shù)已經(jīng)成為化學(xué)、藥學(xué)和生命科學(xué)研究領(lǐng)域中的熱點之一。斑蝥素作為中藥有效部位或成分，臨床療效顯著，但毒副作用很大，不安全，極大地限制了其在臨床的應(yīng)用，經(jīng)皮給藥外用制劑對該藥物具有獨特的優(yōu)勢，應(yīng)用新型囊泡給藥系統(tǒng)，改善藥物的透皮吸收，解決藥物在口服和注射給藥時的毒副作用，增加臨床給藥患者的順從性，將具有廣闊的應(yīng)用前景，會產(chǎn)生良好的社會效益和可觀的經(jīng)濟效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供斑蝥素囊泡及其制備方法，還有斑蝥素囊泡凝膠的制劑及其制備方法。本發(fā)明所解決的技術(shù)問題，本發(fā)明的優(yōu)點和技術(shù)優(yōu)勢為斑蝥具有攻毒蝕瘡，逐瘀散結(jié)的功效，其有效成分斑蝥素為抗癌有效成分，在治療肝癌、乳腺癌、肺癌、食管癌、結(jié)腸癌等方面有確切的療效，外用涂抹還具有促進毛發(fā)生長的功能，可用于治療脫發(fā)。資料顯示，人類用斑蝥治療疾病已有2000多年的歷史，其臨床應(yīng)用千年不衰，說明它具有顯著的療效，可謂是“毒藥猛劑善起沉疴”，但同時由于它是一味“毒藥”，治療量與中毒量接近，嚴(yán)重限制了其臨床應(yīng)用。靶向制劑是繼一代普通制劑、二代緩釋制劑和前體制劑、三代控釋制劑之后的第四代制劑。脂質(zhì)體是研究的最多靶向藥物載體，但脂質(zhì)體的性能存在如下缺點①由于其化學(xué)不穩(wěn)定性，制備及貯藏困難，藥物包裹率不高且易發(fā)生滲漏而失去靶向性；②所用原料磷脂難以純化，且易氧化變質(zhì)而降低膜流動性導(dǎo)致被包裹藥物的滲漏；③純化的磷脂價格昂貴；④生產(chǎn)中常需通惰性氣體，制備貯藏難度較大。因此，人們廣泛地研究了化學(xué)組成確定、性質(zhì)較穩(wěn)定、能構(gòu)成脂質(zhì)體樣囊泡的載體。隨著脂膜模擬化學(xué)的發(fā)展，人們在研究中發(fā)現(xiàn)，表面活性劑在水溶液可自組裝成雙層封閉結(jié)構(gòu)，和脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)類似的囊泡，殼層內(nèi)外均是親水基團，空的中心可容納水性介質(zhì)，夾在兩層親水基團中間的是疏水基團。許多表面活性劑都具有自我組裝形成囊泡結(jié)構(gòu)的能力，但由于非離子型表面活性劑毒性較小，具有生物相容性和可降解性，不解離，不發(fā)生氧化水解，易大量生產(chǎn)，且可根據(jù)用途設(shè)計其結(jié)構(gòu)，因此對其研究較為深入。非離子型表面活性劑囊泡(niosomes)也可稱為非離子型表面活性劑脂質(zhì)體(因為磷脂也是一種表面活性劑，且一直將liposomes譯為脂質(zhì)體)，它是非離子表面活性劑自身閉合形成的雙分子層微型或多室囊泡載體，與脂質(zhì)體相比，非離子型表面活性劑囊泡的載體材料不含磷脂，避免了磷脂的氧化降解，生產(chǎn)和貯存皆不需特殊條件，可使工藝簡化、成本降低，是一種極有希望的新型藥物載體。囊泡所具有的雙層膜結(jié)構(gòu)使其成為潛在的理想的體內(nèi)藥物載體，既可以攜帶水溶性藥物(如氨基酸、多肽、蛋白類藥物)，將藥物包封在微水相內(nèi)，也可以攜帶油溶性藥物，將藥物增溶在雙層膜中，與膠束、微乳液相比，囊泡體系作為藥物載體有如下特點(1)比表面大，更大的增溶量；( 雙層膜具有更強的牢固性和穩(wěn)定性；C3)可通過組成、pH、鹽來調(diào)節(jié)粒徑的大小和藥物分子的滲透率。由于組成囊泡的表面活性劑的高度化學(xué)穩(wěn)定性，囊泡比脂質(zhì)體的穩(wěn)定性要高很多，且表面活性劑又具有很好的促滲透作用，因此在經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中具有特殊的優(yōu)勢。目前，提高藥物透過皮膚角質(zhì)層的方法包括微粒載體(泡囊、類脂毫微囊等)，化學(xué)促進劑(氮酮、揮發(fā)油等)，物理促滲技術(shù)(離子導(dǎo)入、電穿孔、超聲波等)。脂質(zhì)體經(jīng)皮給藥研究已較多，但傳統(tǒng)脂質(zhì)體透皮效率并不理想，它們傾向于在皮膚角質(zhì)層表層，與皮膚發(fā)生融合而產(chǎn)生蓄積作用，無法穿透進入皮膚深層，而泡囊載體以其毒性小、刺激性小、不對皮膚造成傷害，促進各種性質(zhì)藥物(脂溶性、水溶性、大分子)穿透皮膚角質(zhì)層、可達到循環(huán)系統(tǒng)而備受注目。囊泡比脂質(zhì)體更穩(wěn)定，具有增加藥效，減少毒副作用的優(yōu)點，提供了一種可與脂質(zhì)體選擇使用的新型藥物載體。而囊泡較脂質(zhì)體的優(yōu)良經(jīng)皮滲透性能，對于中藥尤其是毒性中藥透皮靶向新型給藥系統(tǒng)的研發(fā)，具有重要意義。斑蝥具有破血消癥，功毒蝕瘡，引赤發(fā)泡的功效，用于治療癥瘕腫塊，積年頑癬，瘰疬，贅疣，癰疽不潰，惡瘡死肌等癥，療效確切，但其活性成分斑蝥素治療量和中毒量接近，嚴(yán)重限制了臨床應(yīng)用。本課題選擇囊泡作為斑蝥素經(jīng)皮給藥的新劑型，可提高局部用藥部位如皮膚、關(guān)節(jié)部位的濃度，透皮吸收后可發(fā)揮全身治療作用。根據(jù)斑蝥治療疾病的特點，由于口服或注射給藥，局部藥物物濃度不易達到，影響了治療效果。而選擇囊泡經(jīng)皮給藥，由于囊泡較脂質(zhì)體的強穿透性，易達到皮膚深層，可大大提高局部藥物的濃度，同時可在皮膚局部形成藥物貯庫，保持體內(nèi)穩(wěn)定的血藥濃度，繼續(xù)發(fā)揮全身治療作用。斑蝥素囊泡也減少了對皮膚的刺激，囊泡達到循環(huán)系統(tǒng)后，由于囊泡微粒自身的靶向性，在肝、脾部位濃度較高，可避免斑蝥素對心、腎等器官的損害，使用藥安全性大大提
尚。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案完成的
本發(fā)明斑蝥素囊泡，包括下列重量份組分
斑蝥素0. 01-10 份
非離子表面活性劑2. 5-650 份
附加劑0. 25-650 份。
進一步優(yōu)選為
斑蝥素0.05-8 份
非離子表面活性劑5-350 份
附加劑0. 25-350 份。
更進一步優(yōu)選為
斑蝥素0. 08-7 份
非離子表面活性劑20-250 份
附加劑0. 25-250 份。
所述斑蝥素還可以為斑蝥酸鈉、羥基斑蝥胺、甲基斑蝥胺、去甲斑蝥、丙烯基斑蝥胺中的--種或一種以上的混合物。
所述非離子表面活性劑包括司盤、吐溫、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、
聚甘油烷基醚、冠醚、葡萄糖烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、泊洛沙姆、蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、甘油單硬脂酸酯、聚乙二醇脂肪酸甘油酯、聚乙二醇-4-硬脂甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、聚乙二醇辛酸葵酸甘油酯、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物中一種或一種以上任意比例混合物。 附加劑可為膽固醇、膽固醇聚乙二醇聚合物、硬脂酰胺(SA)、二鯨蠟磷酸酯(DCP)、十八胺、十二烷基硫酸鈉(SDS)、聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆188 (F68)、羥丙基倍它環(huán)糊精、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、N-十六酰-L-高半胱胺酸、磷脂酰膽堿、棕櫚酸鈉、硬脂酸鈉、肉豆蔻酸鈉、月桂酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、月桂酰甲基?；撬徕c、十二烷基二甲基甜菜堿、月桂酰胺丙基甜菜堿一種或一種以上任意比例混合物，其中聚乙二醇(PEG)種類包括4000、6000、2000、400、300中的一種或一種以上。非離子表面活性劑中司盤包括司盤20、司盤40、司盤60、司盤65、司盤80、司盤85等；吐溫包括吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫80、吐溫85等；蔗糖硬脂酸酯包括蔗糖硬脂酸酯S-3、蔗糖硬脂酸酯S-7、蔗糖硬脂酸酯S-11、蔗糖硬脂酸酯S-15等；聚氧乙烯脂肪酸酯，別名賣澤(Myrij)，如聚氧乙烯40脂肪酸酯(polyoxyl40stearate)、聚氧乙烯8脂肪酸酯、聚氧乙烯50脂肪酸酯；聚氧乙烯脂肪醇醚，別名芐澤，包括81^_30、81^_35、81^_72、Brij721、西土馬哥(Cetomacrogol)、平平加 0 (Perogol 0)、埃莫爾弗(Emlphor)。本發(fā)明斑蝥素囊泡可采取乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、水化法、擠出法、機械法、PH梯度法等方法，優(yōu)選以下制備方法取非離子表面活性劑、附加劑、斑蝥素溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；另取水或磷酸鹽緩沖液，在(15-80°C )恒溫攪拌下，勻速注入上述溶液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，加水或磷酸鹽緩沖液至全量，超聲或過高壓乳勻機1-3次，過濾，灌裝或冷凍干燥，即得。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法也可以為取非離子表面活性劑、附加劑、斑蝥素溶于適量有機溶劑，減壓蒸發(fā)至干燥薄膜，真空干燥除去殘余溶媒，然后加入磷酸鹽緩沖液，(25-900C )恒溫水合，水合時間10-60分鐘，水合后超聲處理，灌裝或冷凍干燥，即得。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法還可以為將非離子表面活性劑加少量的磷酸鹽緩沖液溶解，加入已經(jīng)熔融的附加劑中，攪拌，加入斑蝥素溶液，混勻后倒入25-85°C的磷酸鹽緩沖液，水浴放置5-30分鐘，灌裝或冷凍干燥，即得。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法還可以為將非離子表面活性劑、附加劑加入適量有機溶劑溶解，溶液加入1/2有機溶劑量以下的磷酸鹽緩沖液，超聲2-20分鐘，25-65°C旋轉(zhuǎn)至膠態(tài)，再加入斑蝥素溶液，40-8(TC旋轉(zhuǎn)至干，加入磷酸鹽緩沖液，旋轉(zhuǎn)10-30分鐘，放置1-12小時，充分水合，灌裝或冷凍干燥，即得。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法還可以為取非離子表面活性劑、附加劑溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；在15-80°C恒溫攪拌下，取上述溶液勻速加入加有斑蝥素的磷酸鹽緩沖液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，加入適量的堿調(diào)節(jié)PH至7，繼續(xù)攪拌lh，灌裝或冷凍干燥，即得。其中所述的堿是指氫氧化鈉、氨水、三乙醇胺、三乙胺、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種或一種以上。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法還可以為取非離子表面活性劑、附加劑溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；在15-80°C恒溫攪拌下，取上述溶液勻速注入加有銨鹽的溶液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，通過透析或過柱除去囊泡其中的酸根離子，加入適量的斑蝥素溶液，繼續(xù)攪拌0.證，過濾，灌裝或冷凍干燥，即得。其中所述的銨鹽是指硫酸銨、碳酸銨、氯化銨、醋酸銨、磷酸二氫銨中的一種或一種以上。冷凍干燥工藝中，可添加適量的甘露醇、右旋糖酐、乳糖使凍干溶液重量比例在4% -25%之間，凍干過程中降溫速度應(yīng)在每小時5°C -6°C，在一期升華干燥階段，制品溫度應(yīng)低于共熔點，升溫速度每小時5°C左右。
本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法中附加劑根據(jù)其溶解性的不同，可溶于有機溶劑中，也可溶于水或不同類型的緩沖液中。本發(fā)明斑蝥素囊泡制備方法中磷酸鹽緩沖液也可以為硫酸銨緩沖液、三羥甲基氨基緩沖液、檸檬酸緩沖液、酒石酸緩沖液、水；有機溶劑包括無水乙醇，甲醇，丙酮，二氯甲烷、氯仿，乙醚、異戊醇、乙酸乙酯的一種或一種以上任意比例的混合物。斑蝥素囊泡可以制備為注射劑，口服液，液體膠囊等口服劑型，外用制劑等制劑，優(yōu)選外用制劑，進一步優(yōu)選凝膠、軟膏劑、貼劑等，進一步優(yōu)選為凝膠劑。斑蝥素囊泡凝膠由以下重量份組分組成斑蝥素0.01-10、非離子表面活性劑2. 5-650、附加劑0-650、增稠劑0. 1-125、保濕劑1_1200、ρΗ調(diào)節(jié)劑0-60、透皮劑0-70、防腐劑 0-300?？蓛?yōu)選為斑蝥素0. 05-8、非離子表面活性劑5-350、附加劑0. 25-350、增稠劑0. 1-100、保濕劑1-1000、pH調(diào)節(jié)劑0-50、透皮劑0-50、防腐劑0. 5-250。增稠劑可為交聯(lián)聚丙烯樹脂類，包括卡波姆941，974，934P，980，981及交聯(lián)聚丙烯樹脂不同鹽及衍生物，還可為羥丙甲基纖維素、黃原膠。保濕劑可為甘油、丙二醇、異丙醇、透明質(zhì)酸中的一種或一種以上的混合物。pH調(diào)節(jié)劑可為有機胺類如三乙醇胺、三乙胺、二乙胺，也可為氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉。透皮劑可為氮酮、薄荷醇、精油、二甲基亞砜、丙二醇、肉豆蔻異丙基酸酯、N-甲基吡咯烷酮、月桂酸聚乙二醇甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或一種以上。防腐劑可為山梨酸鉀、山梨酸、羥苯乙酯、羥苯丙酯、羥苯甲酯、苯酚中的一種或一種以上。斑蝥素囊泡凝膠的制備方法為取增稠劑、保濕劑、透皮劑、防腐劑，加入蒸餾水，pH調(diào)節(jié)劑，制成凝膠基質(zhì)，和所制
得的斑蝥素囊泡混懸液混合，攪拌均勻，即得斑蝥素囊泡凝膠。
具體實施例方式以下通過試驗例來進一步闡述本發(fā)明所述組合物的有益效果。一、抗癌1、試驗材料與方法1.1 材料:本發(fā)明斑蝥素囊泡凝膠；人肝癌SMMC-7721細胞株、小牛血清、MTT、二甲基亞砜、RPMI 1640干粉培養(yǎng)基、胰蛋白酶、PI染料。1. 2 儀器熒光倒置顯微鏡、CO2培養(yǎng)箱、Bio-Rad酶標(biāo)儀、流式細胞儀。2、方法2. 1細胞培養(yǎng)肝癌細胞加入含10%小牛血清的RPMI1640高糖培養(yǎng)基，置37°C、飽和濕度、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；細胞貼壁后用0. 25%胰酶消化，分瓶再培養(yǎng)，待進入對數(shù)生長期約為傳代后24h時，棄原培養(yǎng)液，PBS沖洗。2. 2細胞生長抑制試驗取對數(shù)生長期細胞，接種于96孔培養(yǎng)板中，在5% CO2、飽和濕度、37°C培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)24h后加入IOOul不同濃度培養(yǎng)液配制的斑蝥素囊泡凝膠，使最終濃度為10、50、lOOug/ml，每個劑量設(shè)5個復(fù)孔，繼續(xù)培養(yǎng)。分別于對、48、7池進行MTT比色試驗。酶標(biāo)儀570nm檢測吸光度A值。2. 3細胞周期和凋亡率測定取對數(shù)生長期細胞，加入不同濃度培養(yǎng)液配制的斑蝥素囊泡凝膠，使最終濃度為0、15、55、100呢/1111，繼續(xù)培養(yǎng)對11。胰酶消化后，離心棄上清后加入檸檬酸鈉緩沖液^il，室溫固定20min，再離心棄上清，依次加入1. 8ml胰酶消化液、1. 5ml胰酶抑制液和1. 5ml碘化丙啶。用流式細胞儀測定細胞周期分布和凋亡率。2. 4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用PEMS3. 1醫(yī)學(xué)統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果以I±S表示。P彡0. 05為差異
有統(tǒng)計學(xué)意義。3、結(jié)果3. 1斑蝥素囊泡凝膠對人肝癌細胞SMMC-7721的生長抑制試驗15、55、100ug/ml斑蝥素囊泡凝膠作用于人肝癌細胞SMMC-7721均明顯誘導(dǎo)其凋亡，分別作用24、48、7池后，SMMC-7721細胞受到不同程度的抑制，并呈劑量和時間依賴性。見表1。表1不同濃度斑蝥素囊泡凝膠作用于SMMC-7721細胞不同時間的存活率(％，
X土s)
權(quán)利要求
1.斑蝥素囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的斑蝥素非離子表面活性劑附加劑0. 01-10 份2. 5-650 份0. 25-650 份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的斑蝥素非離子表面活性劑附加劑0. 05-8 份5-350 份0. 25-350 份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的斑蝥素非離子表面活性劑附加劑0. 08-7 份20-250 份0. 3-300 份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為司盤、吐溫、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚甘油烷基醚、冠醚、葡萄糖烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、泊洛沙姆、蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、甘油單硬脂酸酯、聚乙二醇脂肪酸甘油酯、聚乙二醇-4-硬脂甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、聚乙二醇辛酸葵酸甘油酯、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物中一種或一種以上任意比例混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為吐溫類非離子表面活性劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為吐溫20，吐溫40，吐溫60，吐溫80，吐溫85。
7.根據(jù)權(quán)利要求4的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為聚氧乙烯脂肪酸酯類非離子表面活性劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為聚氧乙烯00)脂肪酸酯、聚氧乙烯(8)脂肪酸酯、聚氧乙烯(50)脂肪酸酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求4的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為聚氧乙烯脂肪醇醚類非離子表面活性劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為Brij30，Brij35,Brij72，Brij721，西土馬哥(Cetomacrogol)，平平加 0 (Perogol 0)，埃莫爾弗(Emlphor)。
11.根據(jù)權(quán)利要求4的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為蔗糖酯類非離子表面活性劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為蔗糖硬脂酸酯S-3、蔗糖硬脂酸酯S-7、蔗糖硬脂酸酯S-11、蔗糖硬脂酸酯S-15。
13.根據(jù)權(quán)利要求4的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為司盤類非離子表面活性劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為司盤20、司盤40、司盤60、司盤65、司盤80、司盤85。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的囊泡，其特征是，所述的非離子表面活性劑為司盤20、司盤40、司盤60、司盤80。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項的囊泡，其特征是，所述的附加劑為膽固醇、膽固醇聚乙二醇聚合物、硬脂酰胺(SA)、二鯨蠟磷酸酯(DCP)、十八胺、十二烷基硫酸鈉(SDS)、聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆188 (F68)、羥丙基倍它環(huán)糊精、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、N-十六酰-L-高半胱胺酸、磷脂酰膽堿、棕櫚酸鈉、硬脂酸鈉、肉豆蔻酸鈉、月桂酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、月桂酰甲基?；撬徕c、十二烷基二甲基甜菜堿、月桂酰胺丙基甜菜堿一種或一種以上任意比例混合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的囊泡，其特征是，所述的附加劑為膽固醇。
18.權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，取非離子表面活性劑、附加劑、斑蝥素溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；在15-80°C恒溫攪拌下，取上述溶液勻速注入磷酸鹽緩沖液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，加磷酸鹽緩沖液至全量，超聲或過高壓乳勻機1-3次，過濾，灌裝或冷凍干燥，即得。
19.權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，取非離子表面活性劑、附加劑、斑蝥素溶于適量有機溶劑，減壓蒸發(fā)至干燥薄膜，真空干燥去殘余溶媒，然后加入磷酸鹽緩沖液，25-90°C恒溫水合，水合時間10-60分鐘，水合后超聲處理，灌裝或冷凍干燥，即得。
20.權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，將非離子表面活性劑加少量的磷酸鹽緩沖液溶解，加入已經(jīng)熔融的附加劑中，攪拌，加入斑蝥素溶液，混勻后倒入25-85°C的磷酸鹽緩沖液，水浴放置5-30分鐘，灌裝或冷凍干燥，即得。
21.權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，將非離子表面活性劑、附加劑加入適量有機溶劑溶解，溶液加入1/2有機溶劑量以下的磷酸鹽緩沖液，超聲2-20分鐘，25-65°C旋轉(zhuǎn)至膠態(tài)，再加入斑蝥素溶液，40-8(TC旋轉(zhuǎn)至干，加入磷酸鹽緩沖液，旋轉(zhuǎn)10-30分鐘，放置1-12小時，充分水合，灌裝或冷凍干燥，即得。
22.根據(jù)權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，取非離子表面活性劑、附加劑溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；在15-80°C恒溫攪拌下，取上述溶液勻速加入加有斑蝥素的磷酸鹽緩沖液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，加入適量的堿調(diào)節(jié)PH至7，繼續(xù)攪拌lh，灌裝或冷凍干燥，即得。其中所述的堿是指氫氧化鈉、氨水、三乙醇胺、三乙胺、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種或一種以上。
23.根據(jù)權(quán)利要求1的囊泡的制備方法，其特征在于，取非離子表面活性劑、附加劑溶于適量有機溶劑，加熱或超聲溶解，溶液備用；在15-80°C恒溫攪拌下，取上述溶液勻速注入加有銨鹽的溶液，加完后繼續(xù)攪拌，至有機溶劑揮盡，通過透析或過柱除去囊泡其中的酸根離子，加入適量的斑蝥素溶液，繼續(xù)攪拌0.證，過濾，灌裝或冷凍干燥，即得。其中所述的銨鹽是指硫酸銨、碳酸銨、氯化銨、醋酸銨、磷酸二氫銨中的一種或一種以上。
24.根據(jù)權(quán)利要求18-23任意一項所述的囊泡的制備方法，其特征在于，附加劑根據(jù)其溶解性的不同，可溶于有機溶劑中，也可溶于水、磷酸鹽緩沖液、硫酸銨緩沖液、三羥甲基氨基緩沖液、檸檬酸緩沖液、酒石酸緩沖液中的一種；斑蝥素可溶于有機溶劑，或溶于水、磷酸鹽緩沖液、硫酸銨緩沖液、三羥甲基氨基緩沖液、檸檬酸緩沖液、酒石酸緩沖液中的一種制成斑蝥素溶液。
25.根據(jù)權(quán)利要求18-23任意一項所述的囊泡的制備方法，其特征在于，有機溶劑是指無水乙醇、甲醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿、乙醚、異戊醇、乙酸乙酯的一種或一種以上任意比例的混合物；磷酸鹽緩沖液也可以為硫酸銨緩沖液、三羥甲基氨基緩沖液、檸檬酸緩沖液、酒石酸緩沖液、水。
26.含有權(quán)利要求1的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，為口服劑型或外用制劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求沈的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，為外用制劑。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述外用制劑為凝膠劑、軟膏劑、貼劑、噴霧劑。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，為凝膠劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求四的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述凝膠劑是由下述重量份的組分組成斑蝥素0. 01-10、非離子表面活性劑2. 5-650、附加劑0_650、增稠劑0. 1_125、保濕劑1-1200、pH調(diào)節(jié)劑0-60、透皮劑0-70、防腐劑0-300。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述凝膠劑是由下述重量份的組分組成斑蝥素0. 05-8、非離子表面活性劑5-350、附加劑0. 25-350、增稠劑0. 1_100、保濕劑1-1000、pH調(diào)節(jié)劑0-50、透皮劑0-50、防腐劑0. 5-250。
32.權(quán)利要求四或30的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述增稠劑為交聯(lián)聚丙烯樹脂類、交聯(lián)聚丙烯樹脂不同種類鹽及衍生物、或羥丙甲基纖維素、黃原膠一種或一種以上混合物。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述交聯(lián)聚丙烯樹脂類增稠劑，包括卡波姆 941，974，934P，980，981。
34.根據(jù)權(quán)利要求四或30的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述保濕劑為甘油、丙二醇、異丙醇、透明質(zhì)酸中的一種或一種以上混合物。
35.根據(jù)權(quán)利要求30或31的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述pH調(diào)節(jié)劑為有機胺類，或氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述有機胺類為三乙醇胺、三乙胺、二乙胺、月桂胺。
37.根據(jù)權(quán)利要求30或31的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述透皮劑為氮酮、薄荷醇、精油、二甲基亞砜、丙二醇、肉豆蔻異丙基酸酯、N-甲基吡咯烷酮、月桂酸聚乙二醇甘油酯、聚甘油脂肪酸酯、油酸聚乙二醇甘油酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯。
38.根據(jù)權(quán)利要求30或31的斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述防腐劑可為山梨酸鉀、山梨酸、羥苯乙酯、羥苯丙酯、羥苯甲酯、苯酚中的一種或一種以上混合物。
39.權(quán)利要求30或31斑蝥素囊泡的制劑，其特征在于，所述斑蝥素囊泡凝膠的制備方法為取增稠劑、保濕劑、透皮劑、防腐劑，加入水，PH調(diào)節(jié)劑，制成凝膠基質(zhì)，和所制得的斑蝥素囊泡混懸液混合，攪拌均勻，即得斑蝥素囊泡凝膠。
40.權(quán)利要求18-23中冷凍干燥工藝中，可添加適量的甘露醇、右旋糖酐、乳糖使凍干溶液重量比例在4% -25%之間，凍干過程中降溫速度應(yīng)在每小時5°C _6°C，在一期升華干燥階段，制品溫度應(yīng)低于共熔點，升溫速度每小時5°C左右。
41.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或30或31所述的制劑，其特征在于，斑蝥素還可以是斑蝥酸鈉、羥基斑蝥胺、甲基斑蝥胺、去甲斑蝥、丙烯基斑蝥胺。
42.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或30或31所述的制劑，其特征在于，所述的制劑用于制備治療癌癥特別是肝癌藥物中的應(yīng)用。
43.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或30或31所述的制劑，其特征在于，所述的制劑具有促進毛發(fā)生長的作用，可用于治療脫發(fā)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種斑蝥素囊泡及其制備方法、含有斑蝥素囊泡的制劑及其制備方法，屬于藥物制劑領(lǐng)域。該斑蝥素囊泡由斑蝥素、非離子表面活性劑、附加劑制成。該斑蝥素囊泡優(yōu)選制備成外用凝膠劑型。斑蝥素經(jīng)皮給藥外用制劑對該藥物具有獨特的優(yōu)勢，應(yīng)用新型囊泡給藥系統(tǒng)，增加藥物的透皮吸收，增強臨床療效，可用于治療癌癥特別是肝癌，有肝靶向作用。
文檔編號A61P35/00GK102579317SQ201110003018
公開日2012年7月18日 申請日期2011年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月7日
發(fā)明者吳珍珍, 張衛(wèi)華 申請人:北京因科瑞斯醫(yī)藥科技有限公司