專利名稱：用于治療干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法以及該方法制得的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供用于治療根據(jù)國(guó)際干眼研究會(huì)報(bào)告(DEWS Report) (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法以及包含該藥劑的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供使用該藥劑治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜的損傷的方法。
背景技術(shù)：
DEWS R印ort(2007)是由70名干眼的國(guó)際專家做出的現(xiàn)今干眼知識(shí)的綜述，并且DEWS的小組委員會(huì)提供了干眼的詳細(xì)報(bào)告，包括定義和分類、流行病學(xué)、診斷和監(jiān)測(cè)、以及管理和治療。該報(bào)告公開于“The Ocular Surface, (APRIL 2007，V0L5，NO. 2pp. 65-204) ”(非專利文獻(xiàn)1，通過引用并入本文)中，且可在網(wǎng)站(www. tearfilm. org) 上瀏覽到。根據(jù)DEWS R印ort(2007)，干眼具有如下定義(參見“The Definition andClassification of Dry Eye Disease”(p75_92))干眼是對(duì)眼表面具有潛在損害的導(dǎo)致不適、視力障礙和淚膜不穩(wěn)定性的癥狀的眼淚和眼表面的多因素疾病。其伴有淚膜的滲透壓升高和眼表面的炎癥”。由于干眼被如上定義為一種多因素疾病，因而干眼的治療根據(jù)其情況和癥狀而不同。DEWS Report (2007)將干眼嚴(yán)重度分為四個(gè)級(jí)別(參見“Management and Therapyof Dry Eye Disease”(pl63_178)和表2(pl73))并提供了各種嚴(yán)重度的治療建議(參見“Management and Therapy of Dry Eye Disease，，和表 4 (pl74))。根據(jù)DEWS Report (2007)，對(duì)于干眼嚴(yán)重度I和2，存在不少推薦藥劑。但是，對(duì)于干眼嚴(yán)重度3以上、特別是例如角膜和結(jié)膜等眼表面損傷，并沒有除血清以外的其它推薦藥劑。而且，血清應(yīng)當(dāng)是來源于待治療患者的血液的(即，自體血清)，并且在對(duì)眼給予時(shí)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行適度稀釋。目前，尚不存在對(duì)于根據(jù)DEWS R印ort (2007)的干眼嚴(yán)重度3以上的干眼有效的藥劑。因此，需要建立代表根據(jù)DEWS Report (2007)的分類的干眼、特別是根據(jù)該報(bào)告的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼、尤其是角膜和結(jié)膜等眼表面損傷的的動(dòng)物模型。此外，通過將該動(dòng)物模型用于藥物篩選，可期望提供一種可用于根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上、特別是角膜和結(jié)膜等眼表面的損傷的藥物組合物。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)[非專利文獻(xiàn)]The Ocular Surface, (APRIL 2007, V0L5, NO. 2 pp. 65-204)

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法。此外，本發(fā)明的目的還在于提供治療如上定義的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥物組合物。用于解決技術(shù)問題的方法本申請(qǐng)?zhí)峁┮韵掳l(fā)明(I)用于治療根據(jù)國(guó)際干眼研究會(huì)報(bào)告(DEWS Report) (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法，其包括通過向兔眼中滴注正庚醇溶液來制作具有角膜和結(jié)膜上皮磨損的角膜和結(jié)膜損傷模型兔；和對(duì)所述模型兔的眼給予試驗(yàn)藥劑并確定所述試驗(yàn)藥劑的修復(fù)角膜組織的效果。
(2)用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥物組合物，其包含通過(I)的方法獲得的藥劑。(3)如⑵所述的藥物組合物，其中所述藥劑為人白蛋白。(4)用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥物組合物，其包含人白蛋白作為活性藥劑。(5)如⑷所述的藥物組合物，其中人白蛋白為人血清白蛋白。(6)治療干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法，其包括對(duì)患有根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的患者給予有效量的通過(I)的方法獲得的藥劑。(7)治療干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法，其包括對(duì)患有根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的患者給予有效量的人白蛋白。(8)通過(I)的方法獲得的藥劑用于制造藥物組合物的用途，所述藥物組合物用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。(9)人白蛋白用于制造藥物組合物的用途，所述藥物組合物用于治療根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。發(fā)明效果根據(jù)本申請(qǐng)，變得可以提供用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法。根據(jù)本申請(qǐng)的篩選方法所確定具有修復(fù)角膜組織的效果的藥劑可用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。進(jìn)而，根據(jù)本申請(qǐng)，變得可提供使用該藥劑治療根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法。
具體實(shí)施例方式根據(jù)DEWS Report (2007)，干眼嚴(yán)重度被如下分類(參見“Management andTherapy of Dry Eye Disease” (pl63_178)和表 2(pl73))。[表 I]干眼嚴(yán)重度分級(jí)表干眼嚴(yán)重度__I__2__3__4*
不適，嚴(yán)重度&輕度和/或在中度、間歇性重度、頻繁或重度和/或失 頻率外界壓力下或慢性、有壓持續(xù)性、無壓明和持續(xù)性
__間歇性發(fā)生力或無壓力____
視覺癥狀無或間歇性惱人和/或間惱人、慢性和持續(xù)性和/或 輕度疲勞歇性活動(dòng)受/或持續(xù)性活可能失明
_____動(dòng)受限__
結(jié)膜充血無到輕度無到輕度+/-__+/-H-
結(jié)膜染色無到輕度不定中度到顯著顯著角膜染色無到輕度不定中央顯著重度點(diǎn)狀糜 (嚴(yán)_位置)_____爛
角膜/眼淚征兆無到輕度輕度殘?jiān)z狀角膜炎絲狀角膜炎
I月形物粘液凝結(jié)粘液凝結(jié)， t眼淚歹曳渣個(gè)眼淚歹嫌，
____潰癌
眼瞼/瞼板腺 MGD不定地MGD不定地頻繁倒睫，角質(zhì)
__存在__存在___化，瞼球粘連
TFBUT(秒)____^lO__^5__立即
Schirmer 分?jǐn)?shù)不定 <10 ^5 ^2 (mm/5min)____*必須有征兆和癥狀。TBUT :熒光素眼淚分解時(shí)間。MGD:瞼板腺疾病這里的“根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷”指的是對(duì)應(yīng)于根據(jù)上述分類的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼，和/或表現(xiàn)出這種干眼的任何征兆和癥狀的角膜和結(jié)膜損傷。 此處所用的“約”在與任何數(shù)值數(shù)目使用時(shí)，指的是+/-30 %和+/-20 %，并且優(yōu)選+/_10%。本申請(qǐng)的篩選方法中所用的角膜和結(jié)膜損傷的模型兔通過向兔眼滴注正庚醇來制作。一般來說，模型兔可如下制作利用麻醉劑的肌肉注射、然后利用局部麻醉劑的眼部給藥來對(duì)兔子進(jìn)行麻醉，將正庚醇溶液滴注到兔子的一眼中，以使正庚醇溶液覆蓋角膜和球結(jié)膜，并迫使兔子眨眼。本發(fā)明中所使用的兔子的品種可以但不限于新西蘭白兔、日本白兔和荷蘭兔，其中優(yōu)選新西蘭白兔。通過肌肉注射給藥的麻醉劑可包括氯胺酮、甲苯噻嗪和美托咪定，并且優(yōu)選組合使用氯胺酮和甲苯噻嗪。用于眼部給藥的局部麻醉劑可以包括奧布卡因、利多卡因和布比卡因，并且優(yōu)選使用奧布卡因。滴注到眼中的正庚醇溶液是只含有正庚醇的溶液，或者是正庚醇和乙醇的混合液。優(yōu)選為正庚醇和乙醇的混合液，因?yàn)槠渚哂刑岣叩挠H水性并且可以容易地覆蓋眼表面和有效地導(dǎo)致?lián)p傷。正庚醇和乙醇的比例為約9 I-約7 3，優(yōu)選為約8 2。正庚醇溶液的使用量總計(jì)為約0. 01-約0. 1ml，優(yōu)選為約0. 03-約0. 05ml，并且優(yōu)選分?jǐn)?shù)次滴注(2_4次)以使正庚醇溶液有效地覆蓋角膜和球結(jié)膜。在對(duì)眼滴注正庚醇后，迫使兔子眨眼(1-5次，優(yōu)選2-4次)，并且迫使閉眼數(shù)分鐘(約0.5-約5分鐘，優(yōu)選約I-約3分鐘)。結(jié)果，發(fā)生了角膜和結(jié)膜上皮磨損。根據(jù)本發(fā)明，可制作穩(wěn)定的角膜和結(jié)膜損傷模型。
通過使用本發(fā)明的角膜和結(jié)膜損傷的模型兔來測(cè)定試驗(yàn)藥劑的修復(fù)角膜組織的效果，可以篩選對(duì)于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑。本發(fā)明的篩選方法中，眼部給藥的試驗(yàn)藥劑的頻率通常但不限于每天1-6次。為了確定試驗(yàn)藥劑在修復(fù)角膜組織方面的效力，每天眼部給藥的頻率優(yōu)選較低，并且通常優(yōu)選每天2次。試驗(yàn)藥劑眼部給藥的持續(xù)時(shí)間根據(jù)各種因素例如試驗(yàn)時(shí)機(jī)和兔子的品種而不同。通常，試驗(yàn)藥劑的效果可以在其眼部給藥開始起10天內(nèi)確定。通常，試驗(yàn)藥劑修復(fù)角膜組織的效果可以如下確定。通過在滴注正庚醇溶液之前和之后；在每天第一次給予試驗(yàn)藥劑之前；在第4、5和6天各自第二次給予試驗(yàn)藥劑之后；在最后給予試驗(yàn)藥劑后的次日用染料對(duì)眼進(jìn)行染色來觀察角膜和結(jié)膜的狀態(tài)。染色用染料可以包括熒光素、玫瑰紅和麗絲胺綠，并且優(yōu)選使用熒光素。角膜損傷程度是通過觀察和拍攝角膜染色的狀態(tài)來評(píng)分。高染色分?jǐn)?shù)代表高度角膜損傷，低染色分?jǐn)?shù)代表低度角膜損傷。可以使用任何常規(guī)的方法來評(píng)分，比如，將角膜分為五個(gè)區(qū)域(中央、上部、顳部、鼻部、下部區(qū)域)，各區(qū)域的染色強(qiáng)度用3分滿分來評(píng)分，將總分?jǐn)?shù)(滿分15)用于評(píng)價(jià)。無染色的染色強(qiáng)度評(píng)分為0分；部分染色為I ;大約三分之二的區(qū)域染色為2 ;全部染色為3。在本發(fā)明中，當(dāng)每次觀察角膜和結(jié)膜時(shí)采用試驗(yàn)藥劑進(jìn)行眼部給藥的眼部角膜損傷程度所表現(xiàn)的染色分?jǐn)?shù)與眼部施用鹽溶液的眼部角膜損傷程度所表現(xiàn)的染色分?jǐn)?shù)之間具有顯著差異時(shí)，確定為試驗(yàn)藥劑修復(fù)角膜組織的效果顯著，并且顯著性水平小于5%。顯著性差異可以通過任何合適的方法確定，例如通過Paired-Student’ s t檢驗(yàn)來確定。對(duì)于DEWS Report (2007)中干眼嚴(yán)重度為1、2或3的每種推薦藥劑，通過采用本發(fā)明中角膜和結(jié)膜損傷的模型兔子來確認(rèn)其修復(fù)角膜組織的效果。DEWS Report (2007)中推薦的對(duì)于干眼嚴(yán)重度為I和2的藥劑，例如用于干眼嚴(yán)重度為I的包括粘性組份(Hyalein. 迷你眼藥液0. 3% :Santen Pharmaceutical (Japan):日本批準(zhǔn))的配方或者包括電解液(Cationorm : :Novagali Pharma (France) :EU批準(zhǔn))的配方，和用于干眼嚴(yán)重度為2的包括消炎劑(Restasis =Allergan(US):美國(guó)批準(zhǔn))的配方，以上這些推薦的藥劑并沒有表現(xiàn)出在修復(fù)角膜組織方面的顯著效果。另一方面，對(duì)于干眼嚴(yán)重度為3所推薦的血清(人血清池Kohjin Bio(Japan))表現(xiàn)出在修復(fù)角膜組織方面的顯著效果。因此，本申請(qǐng)中通過利用具有角膜和結(jié)膜損傷的模型兔子來確定修復(fù)角膜組織效果這一方法在篩選用于治療DEWS Report (2007)中干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的有效藥劑方面是有用的。此外，通過本發(fā)明的篩選方法，顯示出人血清白蛋白在本發(fā)明的角膜和結(jié)膜損傷的模型兔中具有顯著的修復(fù)角膜組織的效果，與DEWS Report (2007)中推薦用于干眼嚴(yán)重度3的藥劑(血清)相似。因此，認(rèn)為人白蛋白可用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。本發(fā)明中，人白蛋白優(yōu)選為人血清白蛋白。只要具有通常的醫(yī)療目的用純度，則本發(fā)明中可使用任意的人血清白蛋白。特別優(yōu)選通過電泳法分析時(shí)含有80%以上的白蛋白。另外，優(yōu)選受到加熱處理以使病毒等失活。具體地，優(yōu)選市售作為藥品的人血清白蛋白。由微生物制造的重組人血清白蛋白也優(yōu)選用于本發(fā)明。使用基因重組技術(shù)制備重組人血清白蛋白的方法是本領(lǐng)域公知的。例如，制備含有編碼人血清白蛋白的基因的載體并將其導(dǎo)入宿主細(xì)胞，以使該細(xì)胞轉(zhuǎn)化。然后，選擇并培養(yǎng)產(chǎn)生人血清白蛋白的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，并從該細(xì)胞或其培養(yǎng)基中分離并純化人血清白蛋白。宿主細(xì)胞可以包括本領(lǐng)域中常用于蛋白質(zhì)生產(chǎn)的微生物，例如酵母和大腸桿菌。酵母的實(shí)例可包括屬于以下屬的酵母克魯維酵母屬、酵母屬(Saccharomyces)、畢赤酵母屬,特別優(yōu)選使用乳酸克魯維酵母、釀酒酵母、畢赤酵母。更 優(yōu)選使用乳酸克魯維酵母CBS2360菌株、釀酒酵母AH22菌株(a，his4，leu 2，can I)和畢赤酵母GTS115菌株(his4)作為宿主酵母。此處所用的術(shù)語“治療”是指任何控制癥狀的方式，包括癥狀的預(yù)防、治愈和緩解，以及癥狀發(fā)展的停止或緩解。本發(fā)明的藥物組合物可以是用于局部給藥至眼的任何劑型。特別優(yōu)選眼用溶液劑或滴眼劑。在本發(fā)明的組合物被制劑為含有人白蛋白為活性成分的眼用溶液劑的情況中，該組合物可以含有約l-1000mg/ml (0. l-100w/v% )量的人白蛋白，更優(yōu)選約IO-IOOOmg/ml (l-100w/v% ),并且特別優(yōu)選約10-250mg/ml (l-25w/v% )。該組合物中可以進(jìn)一步含有可藥用稀釋劑。此處使用的“可藥用稀釋劑”可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知用于眼用組合物的任意稀釋劑，例如水、生理鹽水、人工淚液等。本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步包含通常用于眼用組合物的各種成分，例如穩(wěn)定劑、滅菌劑、緩沖劑、等滲劑、螯合劑、PH調(diào)節(jié)劑、表面活性劑等。當(dāng)組合物制劑為眼用溶液劑或滴眼劑時(shí)，組合物的PH優(yōu)選調(diào)節(jié)為5-8。對(duì)于單次給藥，本發(fā)明的藥物組合物可以以約I-約IOOiU/眼，優(yōu)選約10-約50 Ul/眼，更優(yōu)選約30-50 U I/眼的量進(jìn)行給藥。在不同的方面，本發(fā)明提供人白蛋白用于制造藥物組合物的用途，該藥物組合物用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。在又一不同的方面，本發(fā)明提供治療根據(jù)DEWS R印ort (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法，其包括對(duì)有需要的對(duì)象給予有效量的人白蛋白。在本發(fā)明的這些方法中，人白蛋白的“有效量”是理想的治療所需的量，并且可以根據(jù)的患者癥狀、年齡、性別、體重、飲食、組合使用的其它藥物以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中技術(shù)人員所了解的各種因素而選擇最適量。除了上述因素，該有效量還可以根據(jù)人白蛋白的種類或活性而不同。在本發(fā)明的這些方法中，藥物組合物可以以約I-約IOOii I/眼，優(yōu)選約10-約50 yl/眼，且更優(yōu)選約30-50 u I/眼的量給藥約I-約20次/天，優(yōu)選1-10次/天，但這并不意欲限定本發(fā)明的范圍。本發(fā)明中所用的藥物組合物可以與其它藥物活性化合物聯(lián)合給藥，只要其不妨礙本發(fā)明的效果。該術(shù)語“聯(lián)合給藥”可以包括在給予本發(fā)明的藥物組合物之前、同時(shí)、和之后給予其它藥物活性化合物。當(dāng)其它藥物活性化合物與本發(fā)明的藥物組合物同時(shí)給藥時(shí)，本發(fā)明的組合物和其它化合物可以一起制劑為單一的劑型，或者分別制劑為不同的劑型。例如，人工淚液，硫酸多糖比如透明質(zhì)酸和硫酸軟骨素、環(huán)孢素、谷胱甘肽、黃素腺嘌呤核苷酸鈉、皮質(zhì)類固醇、四環(huán)素、維生素A(視黃醇)及其衍生物比如包括棕櫚酸視黃醇酯和乙酸視黃醇酯的維生素A酯、以及細(xì)胞生長(zhǎng)因子比如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)、成纖細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、血小板衍化生長(zhǎng)因子O3DGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-a和TGFj )和角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)可以與本發(fā)明的藥物組合物聯(lián)合給藥。
參考以下所示試驗(yàn)例進(jìn)一步說明本發(fā)明。該試驗(yàn)例不應(yīng)以任何方式用于限制本申請(qǐng)的范圍。[實(shí)施例]試驗(yàn)例I(角膜和結(jié)膜損傷模型的制作)兔子(std :NZW)通過肌肉注射氯胺酮(10mg/kg)和甲苯噻嗪(4mg/kg),然后通過眼部給予0.4%的奧布卡因(每眼兩滴)進(jìn)行麻醉。將兔子保持橫臥放置并向一只眼中滴注臨用前制備的0.04ml (0.01ml X4次)正庚醇溶液(正庚醇乙醇=8 2)，以使正庚醇溶液覆蓋角膜和球結(jié)膜。然后，迫使該兔子眨眼3次并在第三次眨眼后閉眼2分鐘。對(duì)兩只眼睛均進(jìn)行上述程序。由此，制作角膜和結(jié)膜損傷模型。(試驗(yàn)藥劑的給予)從角膜和結(jié)膜損傷模型的制作日開始，每天重復(fù)給予血清或0.3%透明質(zhì)酸鈉制齊IJ2次，給予10天。對(duì)未給予試驗(yàn)藥劑的眼以同樣的方式給予鹽水溶液。它們均以50 Ul/眼/次的體積來給予。作為血清使用時(shí)，通過過濾(MILLEX GV，PVDF，0. 22 u m，MILLIP0RE)對(duì)人血清合并物(Kohjin Bio (日本))進(jìn)行滅菌，并根據(jù)已知方法使用鹽水稀釋5倍以制備血清眼用溶液，該血清眼用溶液被用于干眼的自體血清療法。所述0. 3 %透明質(zhì)酸鈉制劑為Hyalein :迷你眼用溶液(SantenPharmaceutical(Japan))。(試驗(yàn)組)[表2]
H試驗(yàn)藥劑眼睛的數(shù)目(例數(shù))
ISi6眼(6只動(dòng)物)
—20. 3%透明質(zhì)酸鈉制劑 6眼(6只動(dòng)物)
兔子通過體重上的隨機(jī)分層分配到各組。(角膜損傷的確定)在正庚醇溶液 治療之前(試驗(yàn)藥劑初次給藥的前一天)；正庚醇溶液治療后即刻；試驗(yàn)藥劑每天第一次給予之前；試驗(yàn)藥劑在第4、5和6天各自第二次給予后；以及試驗(yàn)藥劑最終給予后一天，對(duì)角膜和結(jié)膜的狀態(tài)進(jìn)行了觀察。將2iU的I %螢光素滴入眼中，2分鐘后，通過在發(fā)光部具有鈷藍(lán)濾光鏡(FUJIFILTER BPB45)、在鏡頭之前具有黃色濾光鏡(FUJI FILTER SC52)的數(shù)碼顯微鏡(VHX-900，KEYENCE CORPORATION(日本))，對(duì)角膜和結(jié)膜的染色進(jìn)行拍照和觀察，然后對(duì)角膜損傷的程度進(jìn)行評(píng)分。對(duì)于評(píng)分，將各角膜分為5個(gè)區(qū)域(中央、上部、顳部、鼻部、下部區(qū)域)，各區(qū)域的熒光素染色強(qiáng)度以3分滿分進(jìn)行評(píng)分，將總分(滿分15分)用于評(píng)價(jià)。無染色時(shí)染色強(qiáng)度被評(píng)分為0 ;部分染色為I ;約三分之二區(qū)域的染色為2 ;全部染色為3。該I %螢光素通過將突光素鈉鹽溶于鹽水來制備。(結(jié)果)正庚醇溶液治療后的角膜的熒光素染色評(píng)分示于表3。所有動(dòng)物中，正庚醇溶液治療之前的熒光素染色的評(píng)分均為O。如表3所示，在給予了血清的眼中，在治療損傷的第4天觀察到顯著的修復(fù)角膜上皮的效果(P < 0. 05)。另外一方面，0. 3%透明質(zhì)酸鈉的給藥中未觀察到修復(fù)角膜上皮的效果。
權(quán)利要求
1.用于治療根據(jù)國(guó)際干眼研究會(huì)報(bào)告(DEWSReport) (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法，其包括通過向兔眼中滴注正庚醇溶液來制作具有角膜和結(jié)膜上皮磨損的角膜和結(jié)膜損傷模型免；和對(duì)所述模型兔的眼給予試驗(yàn)藥劑并確定所述試驗(yàn)藥劑的修復(fù)角膜組織的效果。
2.用于治療根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥物組合物，其包含通過權(quán)利要求I的方法獲得的藥劑。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其中所述藥劑為人白蛋白。
4.用于治療根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥物組合物，其包含人白蛋白作為活性藥劑。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中人白蛋白為人血清白蛋白。
6.治療干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法，其包括對(duì)患有根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的患者給予有效量的通過權(quán)利要求I的方法獲得的藥劑。
7.治療干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法，其包括對(duì)患有根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的患者給予有效量的人白蛋白。
8.通過權(quán)利要求I的方法獲得的藥劑用于制造藥物組合物的用途，所述藥物組合物用于治療根據(jù)DEWS Report (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。
9.人白蛋白用于制造藥物組合物的用途，所述藥物組合物用于治療根據(jù)DEWSReport (2007)的干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷。
全文摘要
本發(fā)明提供用于治療國(guó)際干眼研究會(huì)報(bào)告(DEWS Report)(2007)中干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的藥劑的篩選方法，以及含有該藥劑的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供采用該藥劑治療DEWS Report(2007)中干眼嚴(yán)重度為3以上的干眼和/或角膜和結(jié)膜損傷的方法。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102695954SQ20108005371
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2010年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月27日
發(fā)明者白仁田明生, 真島行彥 申請(qǐng)人:株式會(huì)社·R-技術(shù)上野