專利名稱：用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-ht3受體拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑或血清素5-HT3受體基因表達的抑制劑。
背景技術(shù)：
前庭功能障礙的介紹前庭(內(nèi)耳)功能障礙可以導致頭暈、眩暈、失衡、聽力改變、惡心、疲勞、焦慮、注意力難以集中、和其他癥狀，潛在地對人每天的功能，工作能力，與家庭和朋友的關(guān)系以及生活質(zhì)量有破壞性的影響。例如，前庭神經(jīng)炎是非神經(jīng)性眩暈的首要住院病因。由于其病因?qū)W在很大程度上是未知的，流行病學研究依據(jù)來源而變化(據(jù)信其發(fā)病率為每年100000個人中3. 5至50 個新發(fā)病例)。過去，前庭神經(jīng)的炎癥或迷路缺血被提議作為前庭神經(jīng)炎的病因。目前，傾向于病毒的原因。1型單純皰疹病毒的再激活將解釋在這種情況下眩暈危象的反復(fù)發(fā)作。前庭功能障礙還可能與老年人的大多數(shù)跌倒有關(guān)并且其預(yù)防成為了首要任務(wù)。事實上老年人跌倒占法國健康保險總預(yù)算的以上(INSEE 1990)。其在法國影響30%的 65歲以上的人和50%的80歲以上的人。老年人跌倒與2/3的65歲以上由意外導致的死亡有關(guān)，并且在隨后的時間死亡風險增加4倍。前庭功能障礙的病因?qū)W盡管前庭功能障礙的病因?qū)W基本上未知，但廣泛認可的是前庭功能障礙(也稱為前庭缺陷)構(gòu)成了一個巨大家族的與前庭器官相關(guān)的病況。這些功能障礙可以通過它們的推定來源來區(qū)分，由此可以鑒別(1)病灶性前庭功能障礙和( 非病灶性前庭功能障礙。1)病灶性前庭功能障礙是指這樣的前庭功能障礙，其中存在內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的病變或在功能障礙時程期間將出現(xiàn)內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的病變。在此情況下， 前庭功能性受損，因為使用臨床功能測試(VOR，VNG)可以觀察到這種受損。病灶性前庭功能障礙包括-其中感染累及內(nèi)耳和/或前庭神經(jīng)，誘發(fā)可逆的和/或不可逆的損害的前庭功能障礙。此組病況的一個實例是前庭神經(jīng)炎。-其中內(nèi)耳液水平受影響(內(nèi)淋巴的數(shù)量、組成和/或壓力異常)的前庭功能障礙，這些功能障礙通常在疾病時程期間發(fā)展成病變。此組病況的實例是梅尼埃病和繼發(fā)性內(nèi)淋巴積液。目前它們與耳鳴和聽力損失有關(guān)。-由前庭終器的損傷或病變誘發(fā)的前庭功能障礙。所述病況的實例是由局部缺血、 興奮性中毒、影響顳骨的創(chuàng)傷導致的眩暈。2)非病灶性前庭功能障礙是指由短暫和頻繁的反復(fù)眩暈危象所支撐的前庭功能障礙，其中觀察不到內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的病變。在此情況下，使用功能測試(V0R， VNG)評價的眩暈危象前庭功能性與健康前庭沒有差別。非病灶性前庭功能障礙包括-其中在部分內(nèi)耳內(nèi)收集到碎屑的前庭功能障礙，。這種碎屑稱為耳石，由小的碳酸鈣晶體組成并且當它們移動時，它們向大腦發(fā)出假信號。所述病況的實例是體位性眩暈。-無耳鳴或聽力損失的未知原因的反復(fù)前庭功能障礙。前庭功能性損失的評價在人類中，前庭終器的形態(tài)功能改變不能直接評價(除了可以通過IRM檢測到的大病灶以外)。目前使用間接的評價方法來評價前庭的功能損失。這些行為測試方法通常在 ENT診所/醫(yī)院處進行。這當中，我們可以提到前庭眼震電圖(vestibulonystagmography) (VNG)，使用熱或旋轉(zhuǎn)試驗對前庭眼動反射(V0I )的評價。前庭缺陷的治療目前對前庭缺陷的治療主要集中在使用前庭麻痹藥物來減少眩暈危象，同時通過使用止吐藥物限制植物性神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)。以前庭神經(jīng)炎(推定由細菌或病毒感染所引起) 為例，皮質(zhì)類固醇和抗病毒藥物是試圖限制前庭損害擴大的僅有的治療藥物。在大多數(shù)前庭缺陷中，鑒于缺少病因?qū)W，它們的作用仍處于爭論當中。例如，前庭神經(jīng)炎后的康復(fù)通常是不完全的。在對60名患者的研究中，在癥狀發(fā)作后1個月在大約90%患者中發(fā)現(xiàn)了水平半規(guī)管輕癱，并且在6個月后80%患者中發(fā)現(xiàn)水平半規(guī)管輕癱；僅在42%的患者中冷熱反應(yīng)正常?；诖瞬r的發(fā)病率，在美國每年大約4000人發(fā)生不能通過其他機制來代償?shù)膶嵸|(zhì)性和永久性前庭眼動反射單側(cè)動態(tài)缺陷。此缺陷導致視力受損和步行過程中并且尤其是在頭朝向受累耳側(cè)移動過程中的體位失衡。因此，需要防止、減少或治療病灶性前庭功能障礙的發(fā)病率和/或嚴重性的保護性或修復(fù)治療，內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的所述功能改變是由于不同來源的炎癥、病變或損傷引起的。本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，血清素5-HT3受體拮抗劑諸如奧丹西隆能夠通過保護內(nèi)耳細胞和前庭神經(jīng)免受損害或變性來預(yù)防或治療前庭病變。從Jellish等(Journal of Clinical Anesthesia 2007，9 :451-456)，已知奧丹西隆用于減少中耳外科治療后的手術(shù)后惡心或嘔吐。從Rice等(The Lancet 1995，；345 :1182-1183)還已知奧丹西隆用于治療腦干疾病諸如多發(fā)性硬化中的癥狀，例如眩暈、惡心和嘔吐。最后，從US2007^53^還已知奧丹西隆用于預(yù)防由化療誘發(fā)的惡心和嘔吐。已經(jīng)報道奧丹西隆的止吐特性是由對位于嘔吐中樞(腦干外側(cè)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu))的5-HT3血清素受體的拮抗作用所介導，該嘔吐中樞接納前庭傳入神經(jīng)、軀體傳入神經(jīng)、內(nèi)臟傳入神經(jīng)和邊緣傳入神經(jīng)(Tyers MB, Freeman AJ. Oncology, 1992,49 :263-268)。此藥理學作用阻止了通常由血清素介導的嘔吐反射。盡管奧丹西隆用于治療或預(yù)防與眩暈相關(guān)的嘔吐癥狀，但本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)其還能夠預(yù)防和/或治療前庭器官內(nèi)的直接損傷或病變。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑或血清素 5-HT3受體基因表達抑制劑。


圖1 圖示在20名患者的樣本中奧丹西隆與甲氧氯普胺相對比的臨床作用。圖示在20名患者的樣本中用奧丹西隆(8mg/j，n = 10)與甲氧氯普胺(30mg/j，n = 10)相對比治療5天的臨床效應(yīng)。兩種分子與前庭麻痹劑(vestibuloplegics)、皮質(zhì)類固醇和抗病毒藥物一起施用于懷疑有前庭神經(jīng)炎的患者。在治療(5天持續(xù)時間)后4 和1個月使用前庭眼震電圖評估前庭缺陷的發(fā)展(A)。在早期冷熱測試時，在用奧丹西隆治療的患者中， 與甲氧氯普胺相比前庭缺陷不太顯著(56. 53%對84. 38%，ρ = 0.03)。1月后，在我們的樣本中差異不顯著奧丹西隆對63. 4%甲氧氯普胺，ρ = 0.07)。在用奧丹西隆給藥的患者中首次行走的時間(B)和住院時間(C)也顯著減少。圖2 :5HT-3受體在哺乳動物前庭中的表達。(A)在斯卡爾帕神經(jīng)節(jié)(A)和前庭感覺上皮(B-D)中5HT-3A受體的免疫細胞學檢測。在A中，注意到施旺細胞和內(nèi)皮細胞沒有被標記。在B-D中，注意到感覺上皮周圍的移行細胞(大箭頭)和在少數(shù)神經(jīng)纖維(箭頭) 中特異性地表達5HT-3A受體。圖3 關(guān)于奧丹西隆對興奮性毒性(紅藻氨酸鹽)_誘發(fā)的前庭缺陷的作用的行為評價。(A)用來誘發(fā)單側(cè)病灶性前庭缺陷的試驗方案。奧丹西隆以％ig/kg經(jīng)腹膜內(nèi)注射 (ip)。KA注射后lh，測試動物的前庭行為，然后在治療組中注射奧丹西隆。對照動物不接受奧丹西隆注射。隨后，在KA注射后au6h、24h和48h時測試動物。(B)紅藻氨酸鹽誘發(fā)的前庭缺陷的行為表達。在經(jīng)鼓膜注射紅藻氨酸后，大鼠顯示強烈的興奮性毒性誘發(fā)的前庭缺陷，該前庭缺陷在48小時內(nèi)逐漸減弱。當動物用奧丹西隆治療時這種前庭缺陷減弱的時程發(fā)生改變，在M小時時前庭缺陷顯著減弱(*P = 0. 022 ；曼-懷二氏檢驗；n彡8)。隨后，由于內(nèi)源性代償機制，治療的和未治療的動物恢復(fù)至類似的前庭缺陷水平。圖4 興奮性毒性(紅藻氨酸鹽)_誘發(fā)的前庭病變的組織學評價。在KA經(jīng)鼓膜注射后2小時，其誘發(fā)感覺上皮中前庭傳入神經(jīng)的大的細胞外病灶(A)，而對側(cè)耳無病變(C)。 觀察到沿毛細胞有大的腫脹的突觸末梢，而不是典型的I型神經(jīng)盞(calyceal)和II型神經(jīng)終扣(bouton)末梢。此病變后M小時，對于使用奧丹西隆(B)和不使用奧丹西隆(D) 觀察到新的神經(jīng)盞和神經(jīng)終扣型末梢。圖5 興奮性毒性(紅藻氨酸鹽)_誘發(fā)的前庭病變的形態(tài)計量分析。經(jīng)鼓膜注射KA沒有誘發(fā)毛細胞或支持細胞的損失。相反，確定的周圍有神經(jīng)盞的I型毛細胞的數(shù)量被KA極大地和顯著地減少(P <0.001)，這通過未被確定的毛細胞數(shù)量的增加證實(P
<0. 01)。當在細胞外損傷后M小時計數(shù)時，剛確定的I型毛細胞的數(shù)量顯著增加(P
<0. 01)，但未確定的毛細胞的數(shù)量沒有顯著減少。對于奧丹西隆治療，我們觀察到在KA病變后M小時I型毛細胞數(shù)量的顯著增加(P < 0.01)。奧丹西隆治療顯著地減少未確定的毛細胞的數(shù)量(P < 0.01)。圖6 關(guān)于奧丹西隆對雙側(cè)(腈)_誘發(fā)的前庭缺陷的作用的行為評價。㈧用來誘發(fā)雙側(cè)病灶性前庭缺陷的試驗方案。(B-E)在奧丹西隆治療或缺少奧丹西隆治療時前庭缺陷表達的時程。當動物在注射IDPN后同時(B)J4h(C)或48h(D)接受奧丹西隆時增加的前庭缺陷沒有顯著地改變。相反，當在誘發(fā)前庭缺陷后M小時和48小時注射奧丹西隆 (E)時，增加的前庭缺陷的時程發(fā)生顯著變化(p = 0. 029)。
具體實施例方式由發(fā)明人最近進行的一項臨床研究證明，血清素5-HT3受體拮抗劑(即1，2，3， 9-四氫-9-甲基-3-K2-甲基-IH-咪唑-1-基)甲基]-4H-咔唑-4-酮，也稱為奧丹西隆)對伴有前庭神經(jīng)炎的前庭損害具有適宜的康復(fù)作用。此血清素5-HT3受體拮抗劑有效地減少前庭終器的功能改變以及隨后在此內(nèi)耳病理學條件下所遭遇的前庭缺陷。此結(jié)果是杰出的，因為其首次證明了集中于保護和/或恢復(fù)前庭功能性的藥理學治療可以帶來具體的解決方案從而挽救病灶性前庭損害后的前庭功能性。其也提供了開發(fā)針對病灶性前庭缺陷的首個治愈性治療的獨一無二的機會。另外，發(fā)明人首次觀察到血清素5-HT3受體蛋白在前庭的幾個部位中表達。因此，本發(fā)明提供了用于治療病灶性前庭功能障礙的方法和組合物(例如藥物組合物)。如本文所使用如本文所使用，術(shù)語“治療(treating) ”、“治療(treatment) ”和“療法(therapy)”是指治愈性治療。因此，本發(fā)明的目的是提供前庭功能障礙的永久終結(jié)或通過恢復(fù)前庭終器的功能性或部分功能性并且因此恢復(fù)前庭功能性來改善受試者的病況。本發(fā)明沒有提供用于控制與前庭缺陷有關(guān)的不良癥狀諸如嘔吐和惡心的方法，但提供了治愈前庭缺陷的方法。本發(fā)明還著眼于預(yù)防任何病灶出現(xiàn)或預(yù)防已經(jīng)存在的病變增大。本發(fā)明提供了在用于保護/恢復(fù)患有病灶性前庭功能障礙的受試者的前庭神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)并且因此用于保護/恢復(fù)前庭功能性的方法中使用的方法和組合物(諸如藥物組合物)。如本文所使用，術(shù)語"病灶性前庭功能障礙或缺陷"是指這樣的前庭功能障礙， 其中存在內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的病變或在功能障礙時程期間將出現(xiàn)內(nèi)耳細胞和/或前庭神經(jīng)的病變。在此情況下，前庭功能性受損。病灶性前庭功能障礙包括-其中感染累及內(nèi)耳和/或前庭神經(jīng)，誘發(fā)可逆的和/或不可逆的損害的前庭功能障礙。此組病況的一個實例是前庭神經(jīng)炎。-其中內(nèi)耳液水平受影響(內(nèi)淋巴的數(shù)量、組成和/或壓力異常)的前庭功能障礙，這些功能障礙通常在疾病時程期間發(fā)展成病變。此組病況的實例是梅尼埃病和繼發(fā)性內(nèi)淋巴積液。-由前庭終器的損傷或病變誘發(fā)的前庭功能障礙。所述病況的實例是由局部缺血、 興奮性中毒、影響顳骨的創(chuàng)傷導致的眩暈。本發(fā)明考慮的病灶性前庭功能障礙的實例包括但不限于前庭神經(jīng)炎、病毒性神經(jīng)炎、迷路炎、病毒性內(nèi)淋巴迷路炎、藥物造成的耳毒性、梅尼埃病、內(nèi)淋巴積液、帶有病灶性前庭缺陷的頭部創(chuàng)傷、迷路出血、慢性或急性迷路感染、漿液性迷路炎(serous labyrinthine)、氣壓創(chuàng)傷、自身免疫性內(nèi)耳疾病、老年性前庭癥(presbyvestibulia)，、中毒性前庭損害。根據(jù)本發(fā)明，病灶性前庭功能障礙可以使用鑒別大病灶的IRM或通過評價前庭功能性損失的間接評估方法鑒定。這些方法通常在ENT診所/醫(yī)院處進行并且包括前庭眼震電圖(VNG)，使用冷熱或旋轉(zhuǎn)試驗對前庭眼動反射(VOR)的評估。前庭-眼動反射(VOR)的功能是穩(wěn)定位移過程中視網(wǎng)膜上的視覺影像。此VOR測量提供了研究前庭系統(tǒng)功能性的便利方法?；旧?，范例基于通過紅外光投影技術(shù)監(jiān)測眼球移動O^etoni等，2003，Hearing Research 2003，182 :56-64)?；颊咴诤诎抵袊@其垂直軸和縱軸正弦式擺動以便誘發(fā)水平和垂直方向的眼球反應(yīng)。前庭的任何功能性損害均與誘發(fā)的VNG的增益改變有關(guān)。除VOR 和VNG之外，姿勢描記法用來檢測也與前庭的損害有關(guān)的身體姿勢偏斜。形態(tài)功能研究諸如功能成像(IRM或CAT(計算機軸位體層攝影)和衍生技術(shù))可以用來檢測前庭終器內(nèi)的復(fù)雜病灶。專門設(shè)計的VNG、V0R和姿勢測試在前庭缺陷的動物模型中用于評價前庭中損傷或病灶的程度。也可以使用常規(guī)的光學或電子顯微鏡對固定的組織(前庭神經(jīng)節(jié)和前庭終器)進行組織學研究。這些研究大多數(shù)在嚙齒動物中進行。如本文所使用，術(shù)語“受試者”表示哺乳動物，諸如嚙齒動物、貓科動物、犬科動物和靈長類。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的受試者是人。根據(jù)一個方面，本發(fā)明涉及用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑。根據(jù)另一個方面，本發(fā)明涉及在用于恢復(fù)患有病灶性前庭功能障礙的受試者的前庭功能性的方法中使用的血清素5-HT3受體拮抗劑。所述恢復(fù)可以使用如本文上面提及的 VNG或VOR評估進行評價。如本文所使用，術(shù)語"血清素5-HT3受體"具有它在本領(lǐng)域中的普通含義，并且是指5-羥色胺(血清素)受體亞型3。該術(shù)語可以包括天然存在的血清素5-HT3受體和其變體和修飾形式。血清素5-HT3受體可以來自任何來源，但又代表性地是哺乳動物(例如， 人和非人靈長類)血清素5-HT3受體，特別是人血清素5-HT3受體。如本文所使用，術(shù)語"血清素5-HT3受體拮抗劑"包括任何化學實體，在施用于患者時其導致患者中與血清素5-HT3受體的活化相關(guān)的生物活性的抑制或下調(diào)，所述生物活性包括其它源于血清素5-HT3受體與其天然配體(即，血清素)結(jié)合引起的任何下游生物效應(yīng)。此種血清素5-HT3受體拮抗劑包括可以阻斷血清素5-HT3受體活化或血清素5-HT3 受體活化的任何下游生物效應(yīng)的任何試劑。例如，此種血清素5-HT3受體拮抗劑可以通過占用血清素5-HT3受體的配體結(jié)合位點或其部分來發(fā)揮作用，從而使所述受體不能接近其天然配體，以致于其正常生物活性被阻止或降低?；衔镝槍ρ逅?-HT3受體的拮抗活性可以通過使用本領(lǐng)域中眾所周知的多種方法確定。例如，5-HT3拮抗活性可以在放射性配體結(jié)合測定中和大鼠中5-HT-誘發(fā)的von Bezold-Jarisch反射中評價，諸如Turconi M.等.(1990)所述，該文獻通過參考并入本文通過參考并入本文。在一個實施方案中，血清素5-HT3受體拮抗劑可以是有機小分子。術(shù)語“有機小分子”是指與通常在藥物中使用的那些有機分子的大小相當?shù)姆肿印?該術(shù)語不包括生物大分子(例如蛋白質(zhì)、核酸等)。優(yōu)選的有機小分子的大小范圍為一直到約5000Da，更優(yōu)選一直到2000Da，并且最優(yōu)選一直到約lOOODa。本發(fā)明考慮的示例性血清素5-HT3拮抗劑包括但不限于美國專利號4，695，578 ； 4，906，755 ；4，886，808 ；5，677，326 ；5，202，333 ；5，225，407 ；5，360，800 ；6，770，655 ；；；；；；； UK專利申請?zhí)?100259，2125398，2153821，2160871和2202530，，，；公布的歐洲專利申請?zhí)?94724，99789，200444，242973，247266，266730，302699，306323，307172，309423，313393， 337547，339950，353983，356098，358903，381422，397364 和 397365，，，，，，，，，，，，，，，，，；以及PCT專利申請?zhí)?8/01866中所述的有機小分子，這些文獻通過參考并入本文。根據(jù)具體的實施方案，根據(jù)本發(fā)明使用的血清素5-HT3受體拮抗劑可以是式(I) 的化合物和其生理學可接受的鹽、游離酸形式、游離堿形式和溶劑化物(例如水合物)
權(quán)利要求
1.一種用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清素5-HT3受體拮抗劑，其中所述血清素5-HT3受體拮抗劑選自有機小分子、抗體和適體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血清素5-HT3受體拮抗劑，其中所述血清素5-HT3受體拮抗劑是式(I)的化合物和其生理學可接受的鹽和溶劑化物
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血清素5-HT3受體拮抗劑，其中所述血清素5-HT3受體拮抗劑選自奧丹西隆、帕洛諾司瓊、托烷司瓊、來立司瓊、阿洛司瓊、格雷西隆、多拉司瓊、貝美噻通、雷莫司瓊、阿扎西隆、伊他司瓊、扎考必利和西蘭司瓊。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的血清素5-HT3受體拮抗劑，其中所述血清素5-HT3受體拮抗劑是奧丹西隆。
6.一種用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體基因表達抑制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的血清素5-HT3受體基因表達抑制劑，其中所述血清素5-HT3 受體基因表達抑制劑選自反義RNA或DNA分子、小抑制性RNA (siRNA)和核酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的血清素5-HT3受體拮抗劑或根據(jù)權(quán)利要求6或 7所述的血清素5-HT3受體基因表達抑制劑，其中所述前庭缺陷選自前庭神經(jīng)炎、病毒性神經(jīng)炎、迷路炎、病毒性內(nèi)淋巴迷路炎、藥物造成的耳毒性、梅尼埃病、內(nèi)淋巴積液、帶有病灶性前庭缺陷的頭部創(chuàng)傷、迷路出血、慢性或急性迷路感染、漿液性迷路炎、氣壓創(chuàng)傷，自身免疫性內(nèi)耳疾病、慢性梅尼埃病、老年性前庭癥和中毒性前庭損害。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑，其中所述血清素5-HT3受體拮抗劑通過經(jīng)鼻途徑施用。
10.一種裝置，用于經(jīng)鼻施用根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療病灶性前庭功能障礙的血清素5-HT3受體拮抗劑或血清素5-HT3受體基因表達的抑制劑。
文檔編號A61K31/00GK102458400SQ201080032864
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月20日
發(fā)明者C·查博, 弗雷德里克·維奈爾 申請人:國立健康與醫(yī)學研究所