專利名稱：用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法以及執(zhí)行所述方法使用的取樣設(shè)備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于從血液制備至少一種復(fù)合物(compound)的方法，所述復(fù)合物例如為富含細(xì)胞信號(hào)的復(fù)合物。本發(fā)明還涉及一種用于執(zhí)行所述方法的設(shè)備。
背景技術(shù)：
專利US6569204公開了一種用于從血液制備富含生長(zhǎng)因子的組合物的方法，所述方法隨著時(shí)間的經(jīng)過已經(jīng)表明對(duì)于各種醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供了非常有意義的和有益的生物學(xué)特性?？梢栽谂R床上實(shí)施(不需要復(fù)雜的設(shè)施或手術(shù))的這種方法主要包括以下步驟在特定的速度和溫度下對(duì)包含血液和抗凝血?jiǎng)┑墓苓M(jìn)行離心作用一段時(shí)間，從而血液被分離成不同的級(jí)分(fraction)；提取位于紅細(xì)胞(下部級(jí)分)上方的中間級(jí)分，其中所述中間級(jí)分是富含血小板的血漿；將所述血漿傳送到第二管，可以對(duì)該第二管添加氯化鈣，所述氯化鈣作為凝血?jiǎng)┖脱獫{活化劑(一種能夠啟動(dòng)其中生長(zhǎng)因子被血小板釋放的過程的試劑)； 等待一段時(shí)間以使血漿活化和凝結(jié)直到達(dá)到應(yīng)用所要求的稠度。這種組合物在各種醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用都已獲得良好的結(jié)果，例如在骨再生(通常在移植學(xué)和創(chuàng)傷學(xué)中)、關(guān)節(jié)痛的治療、皮膚治療等領(lǐng)域。在US6569204本身以及在專利申請(qǐng)US2009035382中描述了其中一些應(yīng)用。專利US6569204中公開的方法以及許多其它已知的用于制備具有希望的生物學(xué)特性的血液復(fù)合物的方法存在患者接收到受感染的最終復(fù)合物的一定的危險(xiǎn)，這是因?yàn)樵谝恍╇A段中這些方法沒有免于細(xì)菌污染。對(duì)于所述細(xì)菌污染可能有幾個(gè)原因?qū)⑽⑸镙斔偷窖芰髦械臄⊙。陟o脈被刺入時(shí)皮膚沒有充分消毒，或者由于在實(shí)施所述方法時(shí)對(duì)血液以及隨后的復(fù)合物的處理。在處理過程中的導(dǎo)致細(xì)菌污染危險(xiǎn)的其中一個(gè)因素是專利US6569204中公開的方法以及其它方法在開放的管內(nèi)實(shí)施，S卩，所述管沒有封閉或者真空密封，其結(jié)果是在該過程中獲得的經(jīng)過離心的血漿和復(fù)合物與周圍的空氣發(fā)生接觸(這被稱為“開放回路”)。本發(fā)明旨在提供一種用于制備從血液獲得的具有有用的生物學(xué)特性的復(fù)合物的改進(jìn)的方法，除了具有已知的方法的優(yōu)點(diǎn)以外，本方法還減少了由于在方法實(shí)施期間對(duì)血液和其它隨后的物質(zhì)的處理而導(dǎo)致的對(duì)最終復(fù)合物的細(xì)菌污染的危險(xiǎn)，并且最終產(chǎn)品被儲(chǔ)存在密封的、無菌的容器中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于從血液制備至少一種具有希望的生物學(xué)特性的復(fù)合物的方法，其中所述方法使用真空密封的管(即，內(nèi)部壓力低于大氣壓的管)。對(duì)于所述方法的大部分持續(xù)期間，優(yōu)選地對(duì)于整個(gè)持續(xù)期間來說，都防止所述方法中涉及的血漿或任何其它復(fù)合物與周圍的空氣發(fā)生接觸。根據(jù)本發(fā)明的方法在更大程度上確保了最終的一種或多種復(fù)合物不被污染以及它們的最佳的醫(yī)學(xué)和生物學(xué)條件。
本發(fā)明的方法包括以下步驟將一定量的血液置于真空密封的(處于低于大氣壓的壓力下)的第一容器中，所述第一容器任選地包含抗凝血?jiǎng)?；將血液分離成一系列的級(jí)分，其中一個(gè)級(jí)分是具有血小板濃度梯度的血漿級(jí)分；將提取設(shè)備基本上一直引入到所述第一容器中包含的最高級(jí)分的頂部液位；將真空密封的(處于低于大氣壓并且低于第一容器的壓力的壓力下)第二容器連接到所述第一容器并且等待一段特定的時(shí)間直到所需數(shù)量的血漿和/或其它級(jí)分由于壓力差從所述第一容器被傳送到所述第二容器；以及移除所述第二容器。涉及連接第二容器、等待一段時(shí)間以及移除第二容器的步驟可以重復(fù)進(jìn)行，以便達(dá)到獲得一個(gè)以上的第二容器的目的(確保提取設(shè)備插入的深度被適當(dāng)調(diào)節(jié))，每個(gè)所述第二容器包含的組合物具有特別針對(duì)將使用該組合物的醫(yī)學(xué)應(yīng)用的血小板濃度和其它生物學(xué)特性。在一個(gè)實(shí)施例中，所有步驟在一個(gè)封閉的系統(tǒng)中執(zhí)行，容器不會(huì)被打開，并且不會(huì)執(zhí)行導(dǎo)致容器的內(nèi)容物與周圍空氣發(fā)生接觸的任何其它行為。在此實(shí)施例中，可以在將第二容器連接到第一容器之前在第一容器中任選地插入通風(fēng)系統(tǒng)(允許吸入少量經(jīng)過濾的空氣)。在另一個(gè)實(shí)施例中，可以在血液分離成多個(gè)級(jí)分之后并且在引入提取設(shè)備之前打開第一容器，從而簡(jiǎn)化第二容器的連接以及血漿和/或其它級(jí)分的傳送，這是因?yàn)椴恍枰獙?duì)具有隔膜/密封墊(Septum)的蓋進(jìn)行穿孔。如果例如此方法在無菌環(huán)境例如手術(shù)室內(nèi)的層流室中實(shí)施，則在向第二容器傳送之前打開第一容器時(shí)，此方法在復(fù)合物的可能的細(xì)菌污染方面是同樣安全的。此外，在許多情況下最終的復(fù)合物應(yīng)用在開放的環(huán)境下(例如在口部手術(shù)或者在處理皮膚潰瘍時(shí))，其結(jié)果是甚至不需要在無菌環(huán)境下實(shí)施所述方法。本發(fā)明的方法提供了許多有意義的方面并且相對(duì)于傳統(tǒng)的方法是有利的。首先，本發(fā)明的方法不涉及對(duì)整個(gè)血漿級(jí)分或各種整體級(jí)分的自動(dòng)或強(qiáng)制提取。 相反地，本發(fā)明的方法允許在無菌條件下根據(jù)應(yīng)用從第一容器提取需要數(shù)量的血漿和/或其它級(jí)分。換句話說，能夠根據(jù)所希望的最終產(chǎn)品的特性來提取需要數(shù)量的血漿。如前文所述，還可以從單個(gè)血液試樣(單個(gè)第一容器)獲得具有用于不同醫(yī)學(xué)應(yīng)用的不同復(fù)合物的若干第二容器。因此所述方法使得血小板的劑量能夠個(gè)性化，并伴隨所提取的一種或多種級(jí)分的任何其它要求的生物學(xué)特性。這意味著可以針對(duì)最終復(fù)合物所設(shè)計(jì)用于的醫(yī)學(xué)應(yīng)用來定制所述最終復(fù)合物。其次，留在第二容器中的產(chǎn)品被儲(chǔ)存在密封和無菌的容器中，因此隨時(shí)可以接受隨后的處理進(jìn)一步處置(例如，添加活化劑，等待一段時(shí)間，經(jīng)受一定溫度，進(jìn)一步進(jìn)行離心作用，等等)，浸潤其它物質(zhì)或產(chǎn)品，儲(chǔ)存，冷凍，等等。根據(jù)本發(fā)明的方法制造的復(fù)合物可以用于各種應(yīng)用，例如骨再生以及退行性關(guān)節(jié)病的治療。


在所附的非限制性附圖中可以看到本發(fā)明的細(xì)節(jié)-圖1和2示出根據(jù)本發(fā)明的提取設(shè)備的一個(gè)實(shí)施例的示意圖，所示出的提取設(shè)備分別為組合的和分解的形式。-圖3和4分別示出圖1的實(shí)施例中包含的殼體的完整的和局部的透視圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明限定了一種用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，所述方法包括以下步驟i)在第一容器中提供一定量的血液，所述第一容器是真空密封的，換句話說，所述第一容器處于低于大氣壓的壓力下。ii)將血液分離成至少以下級(jí)分在第一容器的底部的紅細(xì)胞級(jí)分，在所述紅細(xì)胞級(jí)分上方的包含白細(xì)胞和血小板的一個(gè)小的級(jí)分，以及在頂部的具有血小板濃度梯度的血漿級(jí)分，所述梯度朝所述第一容器的頂部下降(根據(jù)離心作用的條件，所述血漿甚至可以包括不具有血小板的頂部部分)。iii)將提取設(shè)備(導(dǎo)管、針或類似設(shè)備)基本上一直插入到包含在所述第一容器中的最高級(jí)分的頂部液位。iv)執(zhí)行以下步驟至少一次將在低于所述第一容器的壓力的壓力下真空密封的第二容器連接到所述提取設(shè)備；等待一段特定的時(shí)間直到由于壓力差而將所需數(shù)量的血漿級(jí)分、白細(xì)胞和血小板的級(jí)分和/或紅細(xì)胞級(jí)分傳送到所述第二容器；移除所述第二容器； 以及，在執(zhí)行進(jìn)一步提取的情況下，調(diào)整所述提取設(shè)備插入的程度以便它可以再次到達(dá)剩余級(jí)分的頂部液位。結(jié)果是，本發(fā)明能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)第一容器的各種級(jí)分(具有上述濃度梯度的血漿，和/ 或其它級(jí)分)的選擇性劃分。對(duì)于所述方法的第一步驟，特別是對(duì)于作為所述方法的起點(diǎn)在其中提供一定量的血液的第一容器，所述第一容器可以具有一系列特定的特性。在一個(gè)實(shí)施例中，所述第一容器被密封并且在任何時(shí)間都不打開，因此形成封閉系統(tǒng)或封閉回路，血液和其它隨后獲得的復(fù)合物不會(huì)與未經(jīng)過過濾的周圍空氣發(fā)生接觸， 因而減少了通過處理發(fā)生細(xì)菌污染的危險(xiǎn)，確保了無菌性并且保持得到的最終產(chǎn)品的生物穩(wěn)定性和生物安全性。在此實(shí)施例中，可以在第一容器中任選地引入通風(fēng)系統(tǒng)，從而允許在所述容器中吸入經(jīng)過濾的空氣。此外，提取設(shè)備優(yōu)選地設(shè)有隔膜以保持回路被密封。在另一個(gè)實(shí)施例中，在血液分離成多個(gè)級(jí)分之后并且在引入提取設(shè)備之前，打開第一容器。第一容器通常由塑料或玻璃制成，并且被密封或者蓋有帶螺紋的或加壓的蓋。所述蓋可以穿孔以實(shí)現(xiàn)與提取設(shè)備的密封連接。此外，第一容器優(yōu)選地是容量為4-50ml的圓柱形管。根據(jù)由所述方法獲得的復(fù)合物的隨后的用途，所述第一容器可以任選地包含至少一種抗凝血?jiǎng)?。檸檬酸鈉通常用作抗凝血?jiǎng)?，因?yàn)樗且环N能夠在血流中發(fā)現(xiàn)的天然成分并且作為鈣二價(jià)陽離子螯合劑(chelating agent) (Ca 2+)起作用。然而，也可以設(shè)想其它的抗凝血?jiǎng)?，例如作為人工抗凝血?jiǎng)┑腅DTA，盡管它對(duì)于鈣二價(jià)陽離子(Ca 2+)的專用性
要差一些。第一容器的示例本申請(qǐng)人市售的TE5或TE9PRGF 收集管是可以與本發(fā)明一起使用的第一容器的兩個(gè)示例。這兩種收集管都是無菌的塑料管，其包括主體和可穿孔的蓋并且分別具有5ml和9ml的容積。由特定的醫(yī)學(xué)應(yīng)用的要求來確定使用哪一種管，并且這兩種管均帶有標(biāo)簽。 所述標(biāo)簽包括指示容積并且朝著管的底部升高的刻度。這些管包含作為抗凝血?jiǎng)┑?. 8% 的檸檬酸鈉濃度，并因此具有以下特性TE5 管容量5ml真空體積(壓力)4.5ml檸檬酸鈉的體積0. 5ml尺寸13 X 75mmTE9 管容量9ml真空體積(壓力)8. Iml檸檬酸鈉的體積0. 9ml尺寸16 X IOOmm所述方法的步驟二包括將血液分離成不同的級(jí)分，這優(yōu)選地通過對(duì)第一容器進(jìn)行離心作用進(jìn)行(在特定的離心速度下并持續(xù)一段特定的時(shí)間)或者通過將管放置在架子上并等待這些級(jí)分由于沉降作用而分離。在對(duì)第一容器進(jìn)行離心作用的情況下，所述離心作用可以具有一系列特定的特性。優(yōu)選地在100-900G的速度下在3-12分鐘的時(shí)間上并且在環(huán)境溫度或者不在環(huán)境溫度下(即在任何溫度下)對(duì)第一容器進(jìn)行離心作用。在這些范圍內(nèi)，如果在300-800G的速度下在5-9分鐘的時(shí)間上執(zhí)行離心作用，則是特別有利的。這些離心作用參數(shù)范圍更清楚地分離了各種級(jí)分(具有變化的血小板濃度的血漿，具有血小板的白細(xì)胞，紅細(xì)胞以及可能有的其它級(jí)分)。在第一容器中插入通風(fēng)系統(tǒng)的步驟是任選的。如果不插入通風(fēng)系統(tǒng)，則血漿和/ 或其它級(jí)分將被傳送直到醫(yī)護(hù)人員移除第二容器或者直到第一和第二容器中的壓力水平變得相等(這取決于第二容器的壓力)。然而，如果插入通風(fēng)系統(tǒng)，該通風(fēng)系統(tǒng)允許經(jīng)過濾的空氣進(jìn)入被密封的第一容器，其結(jié)果是第一容器的壓力總是高于第二容器的壓力。結(jié)果， 只有當(dāng)提取設(shè)備被移動(dòng)到最高液位上方或者當(dāng)然地當(dāng)?shù)谝蝗萜鞯乃袃?nèi)容物已經(jīng)被傳送到第二容器時(shí)，在醫(yī)護(hù)人員移除第二容器的情況下，提取操作才結(jié)束。關(guān)于所述方法中涉及的以下步驟，即，有關(guān)提取設(shè)備的插入，第二容器的連接，血漿的一部分或者其它級(jí)分向第二容器的提取，以及所述第二容器的移除的步驟，這些步驟和第二容器可以具有一系列特定的特性。所述提取設(shè)備基本上一直插入到容納在第一容器中的最高級(jí)分的頂部液位處。如果連續(xù)地或按順序地提取不同級(jí)分到一系列的第二容器，則所述提取操作總是涉及抽吸剩余液態(tài)的頂部部分。換句話說，隨著液位在抽吸期間下降，提取設(shè)備的插入總是調(diào)節(jié)到液體的頂部。因此，如果對(duì)于特定的醫(yī)學(xué)應(yīng)用需要例如提取血漿的底部部分(具有最高血小板濃度的部分)，則首先在一個(gè)或多個(gè)步驟中提取位于所需要的部分上方的血漿(此血漿包含較低的血小板濃度，可以丟棄或者用于其它醫(yī)學(xué)應(yīng)用)。在可以提取的級(jí)分或者級(jí)分的組合方面，本發(fā)明提供了無數(shù)可能性。以下都是可以提取的僅血漿(該級(jí)分的全部或者一部分，其包含可變的血小板濃度或者如果離心作
7用在高速下進(jìn)行則甚至根本不包含血小板)；僅白細(xì)胞，其具有血小板(該級(jí)分的全部或者一部分)；僅紅細(xì)胞(該級(jí)分的全部或者一部分)；血漿(該級(jí)分的全部或者一部分)連同白細(xì)胞(該級(jí)分的全部或者一部分)；血漿(該級(jí)分的全部或者一部分)連同全部的白細(xì)胞級(jí)分以及紅細(xì)胞級(jí)分的全部或一部分；或者，白細(xì)胞級(jí)分的全部或一部分連同紅細(xì)胞級(jí)分的全部或一部分。此外，第二容器保持密封并且至少直到過程結(jié)束之前不會(huì)打開，從而形成封閉系統(tǒng)或封閉回路，在該封閉系統(tǒng)或封閉回路中血漿以及其它復(fù)合物不會(huì)與空氣發(fā)生接觸(如同第一容器一樣)。一般地，所述第二容器被密封或者蓋有帶螺紋的或加壓的蓋。所述蓋可以穿孔。第二容器優(yōu)選地是具有4-50ml容量的圓柱形管。根據(jù)最終復(fù)合物所設(shè)計(jì)用于的特定醫(yī)學(xué)應(yīng)用的要求，第二容器可以任選地包含至少一種凝血?jiǎng)?、前凝血?jiǎng)?procoagulant)或血小板活化劑。10%的氯化鈣濃度通常用作凝血?jiǎng)且部梢栽O(shè)想其它的凝血?jiǎng)?，例如牛凝血酶、人凝血酶、等等。本發(fā)明還設(shè)想在第二容器中使用促凝劑例如幫助凝結(jié)的專用惰性添加劑(硅石等)，以及第二容器由促凝材料 (玻璃)制成。本發(fā)明還設(shè)想第二容器可以包含所述第二容器中容納的復(fù)合物所設(shè)計(jì)用于的醫(yī)學(xué)應(yīng)用所需用的其它生物材料或者試劑?？梢栽趶牡谝蝗萜鬟M(jìn)行傳送之前(例如在制造第二容器期間)或者一旦完成傳送之后，將所述凝血?jiǎng)⑶澳獎(jiǎng)?、活化試劑、或者其它生物材料或試劑添加到第二容器中。所述第二容器通常由塑料或玻璃制成。塑料由于其能夠延遲凝結(jié)過程而對(duì)于某些應(yīng)用是有用的，如果使用不包含凝血?jiǎng)┑牡诙芰先萜?，則效果更明顯。第二容器的示例本申請(qǐng)人市售的TF5-EST或者TF9-EST PRGF 血漿級(jí)分管是可以與本發(fā)明一起使用的第二容器的兩種示例。這兩種示例都是無菌的塑料管，其包括主體和可穿孔的蓋并且各自具有5ml和9ml的容積。由特定的醫(yī)學(xué)應(yīng)用的要求來確定使用哪一種管，并且這兩種管都帶有標(biāo)簽。所述標(biāo)簽包括指示容積并且朝著管的頂部升高的刻度。這些管具有不同的負(fù)壓并且可以根據(jù)技術(shù)要求制造為具有不同的壓力。另外需要指出的是，本發(fā)明設(shè)想僅執(zhí)行一次提取操作以便在一第二容器中分離需要數(shù)量的至少一種級(jí)分以用于特定應(yīng)用。本發(fā)明還設(shè)想此步驟可以重復(fù)一次以上以便在不同的第二容器中分離血漿的不同部分(具有不同的血小板濃度或者甚至沒有血小板)或者其它級(jí)分以用于不同的應(yīng)用。例如，可以提取具有較低的血小板濃度或者不具有血小板的血漿的一部分(管的頂部級(jí)分的頂部部分)以用于一種應(yīng)用，并且可以在稍后的階段提取具有較高血小板濃度的血漿的一部分(位于更下方，靠近白細(xì)胞級(jí)分)以用于需要更加富含細(xì)胞信號(hào)的終端產(chǎn)品的另一種特定應(yīng)用，從而利用血漿級(jí)分的血小板濃度梯度。在下文中給出了解釋本發(fā)明的提取方法背后的概念的操作示例。操作示例1 將血液置于由塑料制成的不具有抗凝血?jiǎng)┑牡谝蝗萜髦?不使用抗凝血?jiǎng)┑氖聦?shí)意味著在后面的階段不需要使用凝血?jiǎng)┖突罨瘎?。在離心作用之后，將整個(gè)血漿級(jí)分提取到由玻璃制成的第二容器，或者提取到由塑料制成的具有促凝劑的第二容器，由此實(shí)現(xiàn)血塊凝縮。最終的復(fù)合物具有半固體的稠度，因此可以在諸如以下應(yīng)用中用作纖維素帽或膜口部或上頌面手術(shù)中的閉合式縫合之前的顆粒骨移植物的穩(wěn)定化，以用于拔取后牙槽(post-extraction alveolus)的處理，等等。操作示例2 將血液置于由塑料制成的不具有抗凝血?jiǎng)┑牡谝蝗萜髦?不使用抗凝血?jiǎng)┑氖聦?shí)意味著在后面的階段不需要使用凝血?jiǎng)┖突罨瘎?。在離心作用之后，將整個(gè)血漿級(jí)分提取到由塑料制成的不具有促凝劑的第二容器，因此血漿的凝結(jié)被延遲。因而最終的復(fù)合物具有液體的稠度，并且可以用于諸如以下應(yīng)用關(guān)節(jié)組織再生或者皮下或肌肉注射的浸潤， 或者作為生物材料添加以使所述生物材料凝結(jié)成塊，等等。操作示例3 將血液置于由塑料制成的具有抗凝血?jiǎng)┑牡谝蝗萜髦?因此延遲或阻止凝結(jié))。 在離心作用之后-首先，將血漿的一定量的頂部部分(換句話說，具有較低血小板濃度或者不具有血小板的血漿)提取到由玻璃制成的并且包含氯化鈣(凝血?jiǎng)┖突罨瘎?的第二容器。形成半固體的復(fù)合物，其可以在諸如操作示例1中提到的應(yīng)用中用作纖維素帽。-其次，將第一容器中的剩余血漿的頂部部分(換句話說，相對(duì)于此前提取的血漿具有更高的血小板濃度的血漿)提取到由塑料制成的并且包含氯化鈣(凝血?jiǎng)┖突罨瘎? 的另一個(gè)第二容器。所述氯化鈣也可以在稍后的步驟中添加。形成液體復(fù)合物，其可以用于諸如以下應(yīng)用在骨需要再生的身體部位上與來自患者(可以從該患者獲得本方法中使用的血液)的自體顆粒骨混合，以用于皮膚和關(guān)節(jié)的浸潤或任何其它用途。操作示例4 將血液置于由塑料制成的包括抗凝血?jiǎng)┑牡谝蝗萜髦?。在離心作用之后，將整個(gè)血漿級(jí)分提取到具有凝血?jiǎng)┖突罨瘎┑牡诙芰先萜髦?。該試劑也可以在稍后的階段中添加。最終的復(fù)合物具有液體的稠度，并且可以用于諸如以下應(yīng)用關(guān)節(jié)組織的浸潤、皮下或肌肉的浸潤，等等。操作示例5 將血液置于由塑料制成的不具有抗凝血?jiǎng)┑牡谝蝗萜髦?不使用抗凝血?jiǎng)┑氖聦?shí)意味著在后面的階段不需要使用凝血?jiǎng)┖突罨瘎?。在離心作用之后，打開第一容器并且將整個(gè)血漿級(jí)分提取到由玻璃制成的第二容器，或者提取到由塑料制成的包含促凝劑的第二容器，從而實(shí)現(xiàn)血塊凝縮。最終的復(fù)合物具有半固體的稠度，因此可以在諸如以下應(yīng)用中用作纖維素帽或膜口部或上頌面手術(shù)中的閉合式縫合之前的顆粒骨移植物的穩(wěn)定化，以用于拔取后牙槽的處理，等等。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種用于將材料從第一容器提取到第二容器的提取設(shè)備。圖1和2示出了本發(fā)明的提取設(shè)備的一個(gè)實(shí)施例的示意圖，所述的提取設(shè)備分別為組合的和分解的形式。所述提取設(shè)備主要包括將插入根據(jù)所述方法的第一容器的第一針2， 將插入根據(jù)所述方法的第二容器的第二針4，以及可以由用戶操作以打開和閉合材料從第一針2向第二針4的流通的機(jī)構(gòu)。一般地，在所述方法將在密封環(huán)境下實(shí)施的情況下，換句話說在第一容器被密封的情況下，第一針2具有斜切的末端(因此使得所述斜切的末端能夠在第一容器的蓋上穿孔)。但是，如果所述方法將在開放環(huán)境下實(shí)施(通過在第一容器經(jīng)受離心作用之后打開第一容器)，則第一針2不必需具有斜切的末端。優(yōu)選地，所述用于打開和閉合材料從第一針2向第二針4的流通的機(jī)構(gòu)是切換單元3，所述切換單元3如圖中所示具有按鈕3a，使得能夠容易和有效地使用所述設(shè)備。在所示的實(shí)施例中，系統(tǒng)包括用于使第二針4的凸出連接部適配于切換單元3的凸出連接部的連接器6。當(dāng)然，所述連接器6并非總是需要的。優(yōu)選地，所述設(shè)備還包括殼體1，第一針2從所述殼體1伸出。所述殼體1使得能夠操作所述用于打開和閉合材料從第一針2向第二針4的流通的機(jī)構(gòu)。例如，在所示的實(shí)施例中，切換單元3的按鈕3a從殼體1伸出并且可以由設(shè)備的用戶容易地操作。優(yōu)選地，所述殼體1還包括用于接納(全部或部分地)根據(jù)所述方法的第二容器的容納區(qū)域5。所述容納區(qū)域5也可以在圖4中看到，圖4示出圖1所示的殼體1的局部透視圖。圖3示出整個(gè)殼體1的透視圖，其中可以看到切換單元3的按鈕3a穿過的孔7和第一針2穿過的孔8。殼體1還可包括使得通風(fēng)系統(tǒng)能夠插入的孔以及用于將通風(fēng)系統(tǒng)引向第一容器的機(jī)構(gòu)。在材料的流通不能由于第一容器和第二容器之間的壓力相等而中斷的情況下，當(dāng)本發(fā)明的方法在第一容器密封的條件下實(shí)施時(shí)，允許吸入少量經(jīng)過濾空氣的所述通風(fēng)系統(tǒng)是有用的。所示的系統(tǒng)如下這樣使用將第二容器插入容納區(qū)域5，并且通過在其上施加足夠的壓力，第二針4能夠在所述第二容器的蓋上穿孔。然后將第一針2插在第一容器(打開或封閉的)中。然后按壓切換單元3的按鈕3a，從而材料(根據(jù)本發(fā)明的方法)由于壓力差從第一容器傳送到第二容器。
權(quán)利要求
1.一種用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟i)在壓力低于大氣壓的密封的第一容器中提供血液； )將血液分離成至少以下級(jí)分在第一容器的底部的紅細(xì)胞級(jí)分，在所述紅細(xì)胞級(jí)分上方的白細(xì)胞和血小板級(jí)分，以及在所述白細(xì)胞和血小板級(jí)分上方的具有血小板梯度濃度的血漿級(jí)分，所述梯度朝第一容器的頂部下降；iii)將提取設(shè)備基本上一直插入到包含在第一容器中的最高級(jí)分的頂部液位；iv)執(zhí)行以下步驟至少一次將真空密封的并且壓力低于第一容器的壓力的第二容器連接到所述提取設(shè)備；等待一段特定的時(shí)間直到由于壓力差而將所需數(shù)量的血漿、白細(xì)胞和血小板和/或紅細(xì)胞傳送到第二容器；移除所述第二容器；以及，在執(zhí)行進(jìn)一步提取的情況下，調(diào)整所述提取設(shè)備插入的程度以便所述提取設(shè)備再次到達(dá)剩余級(jí)分的頂部液位。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，在血液分離成多個(gè)級(jí)分之后并且在引入提取設(shè)備之前，打開第一容器。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，所有步驟都根據(jù)封閉的系統(tǒng)執(zhí)行。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，伴隨所述提取設(shè)備，還在第一容器中引入通風(fēng)系統(tǒng)，從而能夠在第一容器中吸入經(jīng)過濾的空氣并確保第一容器的壓力總是高于第二容器的壓力。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，所述提取設(shè)備包括隔膜以保持回路封閉。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，第一容器包含至少一種抗凝血?jiǎng)?br> 7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，第一容器不包含抗凝血?jiǎng)?br> 8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，第二容器包含在從第一容器傳送之前添加的或者在稍后的階段添加的至少一種凝血?jiǎng)?、前凝血?jiǎng)?、活化劑或者任何其它生物材料或試劑?br> 9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，第二容器包含至少一種促凝劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，通過沉降作用將血液分離成多個(gè)級(jí)分。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，通過對(duì)第一容器的離心作用將血液分離成多個(gè)級(jí)分。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，在 100-900G的離心速度下和3-12分鐘的時(shí)間內(nèi)對(duì)第一容器進(jìn)行離心作用。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的用于從血液制備至少一種復(fù)合物的方法，其特征在于，在 300-800G的離心速度下和5-9分鐘的時(shí)間內(nèi)對(duì)第一容器進(jìn)行離心作用。
14.一種用于執(zhí)行根據(jù)上述權(quán)利要求的方法的提取設(shè)備，其特征在于，所述提取設(shè)備包括將插入根據(jù)所述方法的第一容器的第一針O)，將插入根據(jù)所述方法的第二容器的第二針G)，以及能夠由用戶操作以打開和閉合材料從第一針⑵向第二針⑷的流通的機(jī)構(gòu)。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的設(shè)備，其特征在于，所述用于打開和閉合材料從第一針(2) 向第二針的流通的機(jī)構(gòu)是具有按鈕(3a)的切換單元(3)。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的設(shè)備，其特征在于，所述設(shè)備包括殼體(1)，第一針(2)從所述殼體⑴伸出，并且所述殼體⑴使得所述用于打開和閉合材料從第一針⑵向第二針的流通的機(jī)構(gòu)能夠被操作。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的設(shè)備，其特征在于，所述殼體(1)包括設(shè)計(jì)為接納根據(jù)所述方法的第二容器的容納區(qū)域(5)。
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的設(shè)備，其特征在于，所述設(shè)備包括允許插入通風(fēng)系統(tǒng)的孔和用于將所述通風(fēng)系統(tǒng)引向第一容器的機(jī)構(gòu)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于從血液制備具有生物學(xué)特性的至少一種復(fù)合物的方法。所述方法在低于大氣壓的壓力的封閉管內(nèi)實(shí)施，以便減少或防止由于處理復(fù)合物導(dǎo)致的對(duì)復(fù)合物的細(xì)菌污染。所述方法特別地包括重復(fù)以下步驟任何需要的次數(shù)將第二真空容器連接到血液取樣設(shè)備，所述設(shè)備繼而連接到包含分離成多種級(jí)分的血液的第一容器；等待直到所需的級(jí)分已經(jīng)被傳送；以及抽回第二容器?？梢垣@得包含用于不同醫(yī)學(xué)用途包括用于生物學(xué)治療的不同復(fù)合物的多個(gè)第二容器。這些步驟可以在不打開所述容器的情況下在封閉系統(tǒng)內(nèi)執(zhí)行，或者可以在血液取樣設(shè)備被引入之前打開第一容器。
文檔編號(hào)A61K35/16GK102421362SQ201080021076
公開日2012年4月18日 申請(qǐng)日期2010年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月14日
發(fā)明者E·阿尼圖亞阿爾德科亞 申請(qǐng)人:生物技術(shù)研究所I+D有限公司